导读:本文包含了肾小管上皮样细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤,人骨形态发生蛋白7,大鼠骨髓间充质干细胞,细胞分化
肾小管上皮样细胞论文文献综述
段修芳[1]（2009）在《体外诱导BMP7基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞向肾小管上皮样细胞分化的实验研究》一文中研究指出目的:观察体外肾小管上皮细胞(Normal Rat Kidney Epithelial Cells)缺氧复氧损伤(Hypoxia- reoxygenation,H/R)微环境下慢病毒介导的重组人骨形态发生蛋白7(human Bone Morphogenetic Protein-7,hBMP-7)转染对大鼠骨髓间充质干细胞(Rat Bone Mesenchymal Stem Cells,rBMSCs)向肾小管样上皮细胞分化的影响,初步探讨以BMSCs作为hBMP-7基因运载细胞,hBMP-7和rMSCs联合修复缺氧再灌注急性肾脏损伤的可行性。方法:1、贴壁法分离培养SD大鼠乳鼠BMSCs,经CD29、CD34、CD44、CD45鉴定BMSCs,并绘制不同代数细胞生长曲线和贴壁率曲线分析其生物学特性。选取生物活性良好的第叁代(P3)、四代(P4)BMSCs作为转染BMP7载体细胞;2、构建编码绿色荧光蛋白(GFP)的重组人骨形态发生蛋白7慢病毒载体(Lv-hBMP-7-GFP),体外转染BMSCs后,MTT、Brdu标记及流式细胞分析Lv-hBMP-7-GFP转染对BMSCs生物活性的影响;3、构建大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)的缺氧复氧(H/R)模型,经流式细胞分析检测H/R后细胞凋亡情况,并在Transwell培养体系中与rMSCs共培养,分别于共培养后第3d、5d、7d收集细胞,经RT-PCR检测诱导后细胞E-钙粘蛋白(E-cadherin)的表达,并经免疫组化染色及流式细胞仪测定第18型细胞角蛋白(Cytokeratin18,CK-18)的阳性表达率。结果:1、贴壁法可以简便提取原代BMSCs并进行体外扩增培养予以纯化;2、构建的Lv-hBMP-7-GFP可以高效转染rMSCs,转染效率约为70%,转染后的rMSCs增殖活性无明显改变(0.322±0.022,0.302±0.017,0.319±0.031, 0.311±0.029)(P<0.05)并可以持续稳定的分泌hBMP-7(5d后为0.329±0.043);3、H/R NRK-52E与各组rMSCs随共培养时间的延长E-cadherin和CK-18表达增加( 37.22±0.21,36.54±0.32,38.37±0.38,47.02±0.31 ) ,与单纯rMSCs培养组(2.43±0.18)、NRK-52E与rMSCs共培养组(8.52±0.27)、NRK-52E与转染Lv-BMP-7的rMSCs共培养组(8.65±0.22)比较存在显着性差异(P<0.01);H/R NRK-52E与转染Lv-BMP-7的rMSCs共培养组(47.02±0.31)与其他实验组(H/R NRK-52E与rMSCs共培养组、H/R NRK-52E与转染空病毒的rMSCs共培养组、H/R NRK-52E与BMP-7因子作用下的rMSCs共培养组)相比存在统计学差异(P<0.05)。结论:体外大鼠肾小管上皮细胞缺氧复氧微环境下rMSCs可以有效向肾小管上皮样细胞分化,并且hBMP-7转染可以促进rMSCs的定向分化。研究结果可能为hBMP-7和BMSCs联合改善急性缺血再灌注所致的肾脏损伤提供新的研究方法。(本文来源于《南昌大学》期刊2009-06-01）
邹臻寰[2]（2009）在《体外诱导骨髓间充质干细胞分化为肾小管上皮样细胞的研究》一文中研究指出目的:探讨体外诱导骨髓间充质干细胞(mesenchyml stem cells, MSCs)向肾小管上皮样细胞分化的可能性。并观察不同条件下骨髓间充质干细胞体外诱导分化后的差异。方法:抽取SD大鼠的骨髓,经密度梯度离心分离,联合贴壁筛选法获取纯化的骨髓间充质干细胞,以流式细胞仪鉴定间充质干细胞表面标志。取扩增3代的骨髓间充质干细胞,分别用含有胎牛血清(空白对照组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+全反式维甲酸ATRA(ATRA对照组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+表皮生长因子(EGF)(EGF组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+肝细胞生长因子(HGF)(HGF组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+骨形成蛋白(BMP-7)(BMP-7组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+促红细胞生成素(EPO)(EPO组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+上述四种因子(联合诱导组)的培养基进行培养。诱导7天后,倒置显微镜下观察细胞形态变化;化学染色检测细胞碱性磷酸酶表达,免疫细胞化学法检测cytokeratin-18蛋白的表达,免疫荧光细胞化学法检测E-cadherin蛋白的表达,RT-PCR检测E-cadherinmRNA的表达。结果:(1)流式细胞仪显示体外分离培养的第3代大鼠骨髓干细胞表面抗原表达: CD44阳性细胞表达率98.7%,CD90阳性细胞表达率98.1%, CD29阳性细胞表达率96.1%,而CD11b/c阳性细胞表达率14.7%, CD34阳性细胞表达率1.98%;(2)诱导7天后,与空白对照组相比,ATRA对照组和单因子诱导组(EGF组、HGF组、BMP-7组、EPO组)部分细胞变圆形、短梭形单层排列,联合诱导组的大部分细胞变圆形、短梭形,细胞密集处呈鹅卵石样排列;(3)碱性磷酸酶染色示:空白对照组细胞为阴性,ATRA对照组和单因子诱导组(EGF组、HGF组、BMP-7组、EPO组)有出现部分的阳性细胞,而在联合诱导组中阳性细胞数明显的增多;(4)免疫细胞化学示:空白对照组无表达,cytokeratin-18各组表达的阳性细胞率分别为:ATRA对照组27.40±2.70%;单因子EGF组29.60±4.51%;单因子HGF组26.20±3.70%;单因子BMP-7组26.80±5.00%;单因子EPO组27.80±3.03%;联合诱导组44.00±3.16%,与空白对照组相比均明显增加(P<0.01 vs空白对照组),其中联合诱导组增加更为明显;(5)免疫荧光细胞化学示:在高倍视野下,空白对照组无表达, E-cadherin各组表达的阳性细胞均数分别为:ATRA对照组16.40±2.69;单因子EGF组18.25±3.50;单因子HGF组19.24±3.41;单因子BMP-7组16.06±2.00;单因子EPO组19.33±3.57;联合诱导组30.26±5.16,与空白对照组相比均明显增加(P<0.01 vs空白对照组),其中联合诱导组增加更为明显;(6)RT-PCR方法检测到联合诱导组MSC的E-cadherin的mRNA表达明显高于ATRA对照组和单因子诱导组(P﹤0.01),而空白对照组不表达。结论:以上四中因子在体外模拟的急性肾衰微环境中可诱导骨髓间充质干细胞分化为肾小管上皮样细胞。(本文来源于《福建医科大学》期刊2009-04-01）
肾小管上皮样细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨体外诱导骨髓间充质干细胞(mesenchyml stem cells, MSCs)向肾小管上皮样细胞分化的可能性。并观察不同条件下骨髓间充质干细胞体外诱导分化后的差异。方法:抽取SD大鼠的骨髓,经密度梯度离心分离,联合贴壁筛选法获取纯化的骨髓间充质干细胞,以流式细胞仪鉴定间充质干细胞表面标志。取扩增3代的骨髓间充质干细胞,分别用含有胎牛血清(空白对照组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+全反式维甲酸ATRA(ATRA对照组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+表皮生长因子(EGF)(EGF组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+肝细胞生长因子(HGF)(HGF组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+骨形成蛋白(BMP-7)(BMP-7组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+促红细胞生成素(EPO)(EPO组);胎牛血清+缺血再灌注肾脏匀浆上清+上述四种因子(联合诱导组)的培养基进行培养。诱导7天后,倒置显微镜下观察细胞形态变化;化学染色检测细胞碱性磷酸酶表达,免疫细胞化学法检测cytokeratin-18蛋白的表达,免疫荧光细胞化学法检测E-cadherin蛋白的表达,RT-PCR检测E-cadherinmRNA的表达。结果:(1)流式细胞仪显示体外分离培养的第3代大鼠骨髓干细胞表面抗原表达: CD44阳性细胞表达率98.7%,CD90阳性细胞表达率98.1%, CD29阳性细胞表达率96.1%,而CD11b/c阳性细胞表达率14.7%, CD34阳性细胞表达率1.98%;(2)诱导7天后,与空白对照组相比,ATRA对照组和单因子诱导组(EGF组、HGF组、BMP-7组、EPO组)部分细胞变圆形、短梭形单层排列,联合诱导组的大部分细胞变圆形、短梭形,细胞密集处呈鹅卵石样排列;(3)碱性磷酸酶染色示:空白对照组细胞为阴性,ATRA对照组和单因子诱导组(EGF组、HGF组、BMP-7组、EPO组)有出现部分的阳性细胞,而在联合诱导组中阳性细胞数明显的增多;(4)免疫细胞化学示:空白对照组无表达,cytokeratin-18各组表达的阳性细胞率分别为:ATRA对照组27.40±2.70%;单因子EGF组29.60±4.51%;单因子HGF组26.20±3.70%;单因子BMP-7组26.80±5.00%;单因子EPO组27.80±3.03%;联合诱导组44.00±3.16%,与空白对照组相比均明显增加(P<0.01 vs空白对照组),其中联合诱导组增加更为明显;(5)免疫荧光细胞化学示:在高倍视野下,空白对照组无表达, E-cadherin各组表达的阳性细胞均数分别为:ATRA对照组16.40±2.69;单因子EGF组18.25±3.50;单因子HGF组19.24±3.41;单因子BMP-7组16.06±2.00;单因子EPO组19.33±3.57;联合诱导组30.26±5.16,与空白对照组相比均明显增加(P<0.01 vs空白对照组),其中联合诱导组增加更为明显;(6)RT-PCR方法检测到联合诱导组MSC的E-cadherin的mRNA表达明显高于ATRA对照组和单因子诱导组(P﹤0.01),而空白对照组不表达。结论:以上四中因子在体外模拟的急性肾衰微环境中可诱导骨髓间充质干细胞分化为肾小管上皮样细胞。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肾小管上皮样细胞论文参考文献
[1].段修芳.体外诱导BMP7基因修饰的大鼠骨髓间充质干细胞向肾小管上皮样细胞分化的实验研究[D].南昌大学.2009
[2].邹臻寰.体外诱导骨髓间充质干细胞分化为肾小管上皮样细胞的研究[D].福建医科大学.2009
标签：肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤; 人骨形态发生蛋白7; 大鼠骨髓间充质干细胞; 细胞分化;