导读:本文包含了及酶切检测论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:双层叁维DNA步行器,传感器,熵驱动反应,Nb.BbvCI
及酶切检测论文文献综述
袁长婧[1]（2019）在《高度整合熵驱动与酶切反应构建双层叁维DNA步行传感器用于HIV的检测》一文中研究指出背景获得性免疫缺陷综合征(Acquired Immunodeficiency Syndrome,AIDS),即艾滋病,其是由人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)感染,全身免疫系统遭到破坏而引起各系统的疾病,统称为综合征。HIV是一种逆转录病毒,是艾滋病的病原体,对其检测对艾滋病的诊断具有重要意义。目前对艾滋病的诊断主要是依据HIV抗体、抗原、核酸、CD4~+/CD8~+T细胞及HIV病毒的检测。但现有检测方法尚存在些许不足,如ELISA局限于处在感染窗口期、抗体不确定艾滋病的诊断;PCR、流式及病毒培养方法,不仅受限于实验室及人员的高要求而且还受限于昂贵的仪器设备。为了尽早发现HIV感染者和艾滋病病人,及早提供咨询、治疗,同时为适应基层艾滋病检测工作需求,在新的形势下,开发既能满足目前艾滋病检测工作的实际需求,又能体现检测技术发展的HIV检测新方法学的构建至关重要。目的为了满足目前艾滋病检测工作的实际需求,利用叁维DNA步行传感器构建HIV检测新方法学,以期达到对艾滋病的诊断。方法将带有羧基荧光基团标记的单链寡核苷酸(内层轨道)和核酸复合物(外层轨道)组装在一个微球上构建双层叁维DNA步行传感器。在目标物存在的情况下,外部和内部轨道依次被激活,释放大量的荧光信号报告分子进行信号读取从而对目标物进行定量检测。结果我们的双层叁维DNA步行传感器可以在一小时内实现从2pM到5 nM目标物的检测。此外,特异性的双层叁维DNA步行传感器甚至可以清楚地分辨出一个碱基错配的目标类似物。更重要的是,我们的双层叁维DNA步行传感器还可以检测人血清样品中浓度低至0.1 nM的目标物,这为实际样品检测和临床应用架起了桥梁。结论我们首次提出了一种新颖的高度整合熵驱动和酶驱动反应的双层叁维DNA步行传感器并且成功应用于HIV相关核酸的检测。这种巧妙的方法也可以通过适当的设计拓展应用到任何感兴趣目标物的研究。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
廉翔,吴望华,范宏亮,张勇,张涛[2]（2018）在《基于双酶切级联信号放大的核酸检测方法》一文中研究指出利用茎环结构定位探针构建了一个基于双酶切反应的级联信号放大体系,并将其用于核酸的检测.在该体系中,茎环结构定位探针首先是内切酶Tth EndonucleaseⅣ的作用底物,被剪切后又作为定位探针介导切口酶Nt.Bst NBI对分子信标实施剪切,将这2步剪切反应结合起来可有效克服切口酶对于目标核酸中特定识别序列的依赖,同时进一步提高了检测灵敏度.实验结果表明,荧光信号与目标DNA浓度的对数值呈线性相关,响应范围为1 pmol/L～1 nmol/L,并且具有良好的识别单碱基变异的能力.此外,本方法序列设计简单,通用性强,仅改变定位探针的部分序列即可实现对不同目标DNA的检测.对掺杂于血清中的目标DNA的检测结果验证了本方法在实际样品检测中的应用潜力.(本文来源于《高等学校化学学报》期刊2018年07期）
郭晶[3]（2018）在《基于循环酶切信号放大和无模板DNA延伸反应的电化学生物传感器检测microRNA-196a》一文中研究指出MicroRNA-196a是胰腺癌的生物标志物,对胰腺癌具有重要的诊断意义。电化学传感器具有反应灵敏、成本低和样品消耗少等优点,在microRNAs检测中备受关注。本文提出了一种简单灵敏的电化学生物传感器用于检测microRNA-196a。这种电化学生物传感器是基于循环酶切信号放大和无模板DNA延伸反应构建而成。当micro RNA-196a存在时,双链特异性核酸酶催化3’末端标记了PO_4的捕获探针水解,使靶mi RNA循环利用。同时暴露出捕获探针的3’-OH,通过末端脱氧核苷酸转移酶触发DNA延伸反应,产生大量的单链DNA。单链DNA结合亚甲基蓝后,输出电化学信号。基于这种双重放大机制,所构建的生物传感器可以在0.05 fM至50 pM浓度范围内实现对的microRNA-196a的高灵敏检测,检测限低至15 aM。该生物传感器特异性高,可以区分出单个碱基错配的miRNA和靶miRNA。并且显示出良好的重复性和稳定性。该方法成功应用于血浆样品中microRNA-196a的测定,因此在胰腺癌的临床诊断中具有很好的应用前景。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2018-05-01）
徐连应,王毕妮,张富新[4]（2017）在《基于复合纳米材料和酶切信号放大电化学适体传感器检测沙门氏菌》一文中研究指出【目的】沙门氏菌是食品中致病菌检测的一项重要指标。本研究拟构建一种实用性更强的用于沙门氏菌检测的新型电化学适配体传感器,以克服各种沙门氏菌传统检测方法的缺陷。【方法】通过混合还原氧化石墨烯(rGO)溶液与甲苯胺蓝(Tb)溶液制得Tb-rGO复合物,再将此复合物分散于纳米金(Au NPs)溶胶中得到Au NPs-Tb-rGO复合物。最后将Au NPs-Tb-rGO复合物与带有氨基的DNA链(S1)孵育得DNA-复合纳米材料(S1-Au NPs-Tb-rGO)。通过金硫键将沙门氏菌适配体互补链(S2)修饰在金电极表面,以己硫醇为封闭剂消除非特异性吸附后,滴涂沙门氏菌适配体(Apt)于电极表面,使Apt与S2杂交结合。将修饰好的电极浸入含有沙门氏菌与核酸外切酶I(Exo I)的混合液中,基于Exo I信号放大效应,利用适配体对沙门氏菌的特异性结合作用,循环带离适配体,再通过S1-Au NPs-Tb-rGO中的S1与S2杂交将S1-Au NPs-Tb-rGO负载到电极表面,监测电极表面的电化学信号,并对在菌液中的孵育时间、Exo I浓度和S1-Au NPs-Tb-rGO浓度进行优化,构建沙门氏菌电化学适配体传感器。使用该传感器,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏菌、单增李斯特菌和阪崎肠杆菌进行检测,以确定沙门氏菌电化学适配体的特异性;对6×10~2—6×10~6 cfu/mL的沙门氏菌进行检测,以确定沙门氏菌电化学适配体传感器的敏感性;对羊奶样品进行检测,以确定沙门氏菌电化学适配体传感器的实用性。【结果】所建立的沙门氏菌电化学适配体传感器在菌液中的最佳孵育时间为1 h,Exo I的最适浓度为0.6 U·μL~(-1),S1-Au NPs-Tb-rGO的最适浓度为200 nmol·L~(-1)。在进行沙门氏菌的检测时,沙门氏菌与Apt特异结合,S1-Au NPs-Tb-rGO复合纳米材料被结合到电极表面使其线性伏安曲线氧化峰升高。特异性试验结果表明,所建立的方法仅对沙门氏菌的检测有电信号响应,而对非目标菌无响应。敏感性试验结果表明,所构建的沙门氏菌电化学适配体传感器,具有很高的敏感性,对沙门氏菌检测的敏感性达200 cfu/mL。使用建立的沙门氏菌电化学适配体传感器对羊奶中的沙门氏菌含量进行测定,加标回收率在91.6%—106.3%,结果令人满意。【结论】所建立的沙门氏菌电化学适配体传感器具有操作简便、检测范围宽、检出限低和成本低廉等优点,有望应用于食品工业中沙门氏菌的现场快速定量检测。(本文来源于《中国农业科学》期刊2017年21期）
潘沁,陆祖宏,何农跃[5]（2017）在《一种基于酶切的电化学检测序列特异性DNA结合蛋白的方法》一文中研究指出我们提出一种新型非标记蛋白质的电化学检测转录因子NF-κB的方法,即将固定在金电极上的通用寡核苷酸通过连接酶形成单分子发夹寡核苷酸,然后进行固相酶促延伸成双链寡核苷酸,最后通过Eco R的酶切信号的变化,采用阳极溶出法和循环伏安法结合纳米金催化银沉积法检测NF-κB。结果表明本方法具有高特异性、高灵敏度和快速等优点,为单核苷酸突变、药物筛选研究提供有力工具。(本文来源于《生命科学仪器》期刊2017年04期）
李国亮[6]（2017）在《基于双酶切的染色体构象捕获新技术开发及其在基因组结构变异检测中的应用》一文中研究指出叁维基因组学是功能基因组学研究的前沿。基因组叁维构象的解析依赖于染色体构象捕获技术。但是传统染色质构象捕获技术存在着噪声高、实验繁琐、实验成本昂贵、难以直接评估随机交互等问题,阻碍了叁维基因组学的发展。为此,我们开发了一种简单易行、成本低廉、数据噪音低、可评估随机交互的叁维基因组学研究新技术。研究结果显示,我们的(本文来源于《中国生物工程学会第二届青年科技论坛暨首届青年工作委员会学术年会摘要集》期刊2017-04-08）
李国亮[7]（2017）在《基于双酶切的染色体构象捕获新技术开发及其在基因组结构变异检测中的应用》一文中研究指出叁维基因组学是功能基因组学研究的前沿。基因组叁维构象的解析依赖于染色体构象捕获技术。但是传统染色质构象捕获技术存在着噪声高、实验繁琐、实验成本昂贵、难以直接评估随机交互等问题,阻碍了叁维基因组学的发展。为此,我们开发了一种简单易行、成本低廉、数据噪音低、可评估随机交互的叁维基因组学研究新技术。研究结果显示,我们的新方法达到了我们的设计目标,可以产生高质量的叁维基因组数据。应用该新技术,我们解析了基因组的结构变异,所产生结果得到了FISH实验验证,说明我们的方法不仅可以探索基因组叁维结构,也可以发现染色质远程交互中的异常数据。(本文来源于《中国生物工程学会第二届青年科技论坛暨首届青年工作委员会学术年会论文集》期刊2017-04-08）
唐淑榕,王艺伟,佘僧,梁铭芳,李光文[8]（2016）在《基于生物条形码与酶切放大的ATP荧光检测新方法》一文中研究指出建立了基于纳米金生物条形码和酶切循环放大技术的荧光传感器用于高灵敏、高选择性检测ATP。通过ATP与核酸适体的特异性识别作用,将修饰有大量信号探针的纳米金条形码捕获到磁性微球表面。与释放的信号探针杂交后,分子信标的发卡结构被打开,荧光恢复。结合酶切技术使信号探针循环利用,显着增强荧光信号。在1~30 nmol/L范围内,ATP浓度与荧光信号呈良好的线性关系,检出限为0.5 nmol/L。用于细胞裂解液中ATP的测定,结果与HPLC方法接近。(本文来源于《分析试验室》期刊2016年08期）
刘文渊,卢文波,饶冬平[9]（2016）在《GeXP多重PCR法与新型Cervista酶切信号扩大法检测高危型HPV DNA的比较》一文中研究指出目的比较基于GenomeLab~(TM)GeXP(GenomeLab eXpress Profiling)遗传分析系统的多重PCR法与新型Cervista酶切信号扩大法(Cervista HR-HPV),检测子宫颈脱落细胞高危型HPV DNA的差异。方法收集妇科门诊449例患者宫颈脱落细胞样本,分别采用Ge XP多重PCR法和Cervista HR-HPV法检测HPV DNA,分析2种方法检测的阳性率和一致率,对其不一致的结果进行基因测序验证。结果 Cervista HR-HPV和Ge XP多重PCR法检测阳性率分别为25.84%和32.07%,差异有统计学意义(P<0.05),2种方法在不同细胞学病变分组人群中的阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05);2种方法的总一致率为87.08%,具有高度的一致性(Kappa值为0.69);2种方法不一致的病例经测序验证后,Cervista HR-HPV、Ge XP多重PCR法结果与测序结果的吻合率分别为46.15%、53.84%。结论 Ge XP多重PCR法与Cervista HR-HPV法在检测宫颈脱落细胞高危型HPV DNA的结果具有高度的一致性。(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2016年14期）
陈佳,高存继,张海娟,李湛,邱洪灯[10]（2016）在《末端保护原理结合酶切循环放大策略构建WS_2纳米传感器用于小分子-蛋白质的超灵敏检测》一文中研究指出小分子和相应受体蛋白之间的特异性识别作用在临床诊断与治疗、生物医学、药物研发等方面起着至关重要的作用。如何实时、动态、快速、灵敏的获取相关信息,已成为分析化学研究者们面临的重大挑战。为了克服这一问题,本工作发展了一种准确度好、灵敏度高,特异性好、分析成本低的分析新方法用于小分子和受体蛋白之间的作用研究。本工作以链霉亲和素-生物素为模型分析物,首次结合层状的WS_2纳米片,末端保护的小分子连接DNA以及Nt.Bst NBI酶辅助的循环放大策略构建了一个超灵敏的荧光纳米传感器,具体原理如Fig.1。采用荧光光谱验证了该方法的可行性,并对WS_2纳米片的浓度、动力学行为、酶切反应时间等条件进行了优化。在最优条件下,测得该方法的线性范围为7.6 p M~30 nM,检测限为5.3pM。该方法可成功应用于实际样品的分析,具有很好的特异性。另外,整个检测过程都是在均相溶液中进行,具有操作简单、分析成本低等优势,通过改变DNA链的末端小分子(生物素),可以将本方法成功应用于其它目标物的检测。(本文来源于《中国化学会第30届学术年会摘要集-第叁分会：纳米传感新原理新方法》期刊2016-07-01）
及酶切检测论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
利用茎环结构定位探针构建了一个基于双酶切反应的级联信号放大体系,并将其用于核酸的检测.在该体系中,茎环结构定位探针首先是内切酶Tth EndonucleaseⅣ的作用底物,被剪切后又作为定位探针介导切口酶Nt.Bst NBI对分子信标实施剪切,将这2步剪切反应结合起来可有效克服切口酶对于目标核酸中特定识别序列的依赖,同时进一步提高了检测灵敏度.实验结果表明,荧光信号与目标DNA浓度的对数值呈线性相关,响应范围为1 pmol/L～1 nmol/L,并且具有良好的识别单碱基变异的能力.此外,本方法序列设计简单,通用性强,仅改变定位探针的部分序列即可实现对不同目标DNA的检测.对掺杂于血清中的目标DNA的检测结果验证了本方法在实际样品检测中的应用潜力.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
及酶切检测论文参考文献
[1].袁长婧.高度整合熵驱动与酶切反应构建双层叁维DNA步行传感器用于HIV的检测[D].重庆医科大学.2019
[2].廉翔,吴望华,范宏亮,张勇,张涛.基于双酶切级联信号放大的核酸检测方法[J].高等学校化学学报.2018
[3].郭晶.基于循环酶切信号放大和无模板DNA延伸反应的电化学生物传感器检测microRNA-196a[D].重庆医科大学.2018
[4].徐连应,王毕妮,张富新.基于复合纳米材料和酶切信号放大电化学适体传感器检测沙门氏菌[J].中国农业科学.2017
[5].潘沁,陆祖宏,何农跃.一种基于酶切的电化学检测序列特异性DNA结合蛋白的方法[J].生命科学仪器.2017
[6].李国亮.基于双酶切的染色体构象捕获新技术开发及其在基因组结构变异检测中的应用[C].中国生物工程学会第二届青年科技论坛暨首届青年工作委员会学术年会摘要集.2017
[7].李国亮.基于双酶切的染色体构象捕获新技术开发及其在基因组结构变异检测中的应用[C].中国生物工程学会第二届青年科技论坛暨首届青年工作委员会学术年会论文集.2017
[8].唐淑榕,王艺伟,佘僧,梁铭芳,李光文.基于生物条形码与酶切放大的ATP荧光检测新方法[J].分析试验室.2016
[9].刘文渊,卢文波,饶冬平.GeXP多重PCR法与新型Cervista酶切信号扩大法检测高危型HPVDNA的比较[J].中国卫生检验杂志.2016
[10].陈佳,高存继,张海娟,李湛,邱洪灯.末端保护原理结合酶切循环放大策略构建WS_2纳米传感器用于小分子-蛋白质的超灵敏检测[C].中国化学会第30届学术年会摘要集-第叁分会：纳米传感新原理新方法.2016
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