导读:本文包含了体细胞组织培养论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:乳腺癌细胞,原代培养技术,原代细胞纯化,鉴定
体细胞组织培养论文文献综述
王敏,陆祥,曾峰,檀军,侯泽宇[1]（2019）在《人乳腺癌原代细胞组织块培养方法的改良及其鉴定》一文中研究指出目的通过对人乳腺癌原代细胞组织块培养方法进行改良,建立一种快速高效可获得高纯度的人乳腺癌细胞原代培养方法,为乳腺癌深入研究提供实验基础。方法取经临床病理诊断确诊为乳腺导管原位癌患者的癌组织标本,所有样本随机分为改良组(全程正置培养瓶进行培养,原代细胞铺满瓶底50%左右,用延长酶消化时间差法一次性纯化原代细胞)和传统组(翻转培养瓶倒置孵箱1～2 h后,再正置培养瓶培养,原代细胞铺满瓶底80%～100%时,用反复酶消化时间差法纯化原代细胞)。在倒置显微镜下观察,比较两组原代细胞爬出时间、爬出数量和贴壁生长情况;细胞计数比较两组组织块培养7 d后获得贴壁细胞总数;免疫组化和流式细胞术鉴定、比较两组纯化后原代细胞的纯度;MTT法检测两组纯化培养48 h后贴壁细胞的活性。结果经改良组织块培养法2 d后,见大量细胞从组织块四周爬出,培养3 d后见爬出原代细胞贴壁生长,胞质展开,培养5 d后见细胞融合贴壁生长,铺满瓶底50%左右;而传统组织块培养法培养2 d后见少量细胞爬出,培养5 d才见少量细胞贴壁生长,培养10d后原代细胞方可铺满瓶底50%左右;人乳腺癌原代细胞培养7 d贴壁细胞总量,改良组为(9.88±0.20)×10~5个,传统组为(4.88±0.21)×10~5个;纯化后改良组细胞纯度为(99.13±0.06)%,传统组为(75.72±4.96)%;纯化培养48 h后贴壁原代细胞活性改良组为(0.86±0.03),传统组为(0.47±0.01),以上观察指标均明显高于传统组织块培养方法,有统计学意义(P<0.05)。获得的贴壁人乳腺癌原代细胞胞质展开,多呈扁平多边形,细胞体积较大,细胞核多位于细胞中央,相互衔接后呈典型的"铺路石"状,细胞结合紧密,生长分裂旺盛。结论本实验成功建立了一种高效快速获得高纯度的人原代乳腺癌细胞原代培养的方法,为进一步的实验研究奠定基础。(本文来源于《遵义医学院学报》期刊2019年04期）
姜清彬,仲崇禄,陈羽,刘芬,张勇[2]（2015）在《细枝木麻黄离体培养过程中愈伤组织和再生芽的细胞组织学观察》一文中研究指出为探讨细枝木麻黄(Casuarina cunninghamiana Miq.)愈伤组织分化过程的细胞组织学,对离体培养条件下的愈伤组织进行扫描电子显微镜和石蜡切片观察,分析愈伤组织的细胞分裂、分化以及芽再生的发生过程。结果表明,新鲜外植体培养于愈伤组织诱导培养基上,伤口处的薄壁细胞开始脱分化,培养1周后形成明显的愈伤组织;继续培养2周后,胚性愈伤组织形成,且表层细胞启动分化形成芽原基;培养4周,可肉眼观察到胚性芽原基,数量增多并逐渐分化形成不定芽;培养至第6周,生成不定芽,并大量增殖和分化。因此,细枝木麻黄是通过愈伤组织分化形成胚状体的途径进行植株再生的,为建立细枝木麻黄组织培养高效再生体系提供了理论依据。(本文来源于《热带亚热带植物学报》期刊2015年01期）
申红远,白静,汤喆,刘秀华,王禹[3]（2014）在《SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞组织贴块法培养及鉴定》一文中研究指出目的建立SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)组织贴块培养法并进行鉴定。方法无菌条件下取大鼠胸主动脉,4~6h后加入含20%胎牛血清的DMEM培养液,原代培养2周并用免疫荧光染色对培养的VSMC进行鉴定。结果组织贴块法成功培养了大鼠胸主动脉VSMC,5~7d细胞迁出,10~14d细胞融合至80%进行传代。体外培养的VSMC可传至20代,培养的细胞呈典型的"峰谷"样生长,免疫荧光染色鉴定细胞纯度达95%。结论组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMC培养体系稳定,操作简单、方便,纯度较高,免疫荧光是鉴定VSMC的较佳方法。(本文来源于《中华老年心脑血管病杂志》期刊2014年08期）
张云风,徐睿智,樊娜,马琳[4]（2014）在《辽东楤木体细胞组织培养研究》一文中研究指出通过查阅和整理国内外相关文献资料,简述了辽东楤木体细胞组织培养研究的现状与进展。目前辽东楤木可以通过两种途径获得再生苗,一条途径是胚状体成苗,另一条途径是分割丛生芽诱导生根成苗。而在辽东楤木体细胞胚和丛芽的诱导过程中,外植体、培养基、生长调节物质、培养条件(接种量、pH值、糖浓度、光照等)均为其关键因素。(本文来源于《天津中医药大学学报》期刊2014年01期）
何禹璇,郭东全,钱雪艳,杨向东,李闯[5]（2013）在《大豆体细胞胚胎组织培养及遗传转化研究进展》一文中研究指出大豆体细胞胚胎遗传转化体系是提高外源基因遗传稳定性,克服嵌合体的有效途径,因此建立高效稳定的大豆体细胞胚胎组织培养体系并广泛应用于大豆的遗传转化是完善大豆遗传转化研究的重要研究内容。本研究对目前大豆体细胞胚胎再生体系的组织学和遗传转化的研究进展进行了总结,分析了大豆体细胞胚胎组织培养和遗传转化的影响因素。应在现有的组织学研究的基础上,充分考虑影响大豆体细胞胚胎诱导的因素,对遗传转化方法进行改良,以期为大豆体细胞胚胎遗传转化体系提供新的研究思路。(本文来源于《中国农学通报》期刊2013年36期）
谭美华,陈建苏[6]（2012）在《体外细胞组织重建中共培养技术的应用》一文中研究指出细胞共培养体系在维持细胞基本结构和性状的基础上,通过两种或多种细胞组织的相互作用,使体内外环境尽可能相吻合,弥补了单层细胞培养的缺陷,有利于构建更加接近生理状态的重建体外细胞组织,被广泛应用于现代细胞研究,成为角膜、牙周、软骨、心血管以及神经细胞组织等体外构建的重要技术应用。在干细胞研究中,多孔膜两侧直接接触共培养日益受到重视,叁维细胞共培养将是未来发展的方向。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2012年09期）
金密[7]（2012）在《圆山药离体培养及嫩茎再生芽细胞组织学观察》一文中研究指出圆山药(Dioscorea rotundata),即几内亚薯蓣(Guinea yam)的一种,是薯蓣科(Dioscoreaceae)的大型藤本植物,茎四方形,边缘具膜质翅,地下为团块状块根。原产非洲,为当地居民的主要食物之一。块茎中不仅含有大量淀粉,还有丰富的蛋白质等其他成分,也广泛用于保健品和壮阳药物生产和研究。本文以圆山药块根为供试材料,在离体培养及其嫩茎再生芽发生的细胞组织学观察等方面进行了较系统的研究。试验结果为圆山药快速繁殖奠定了坚实的基础。其主要研究结果如下：1.愈伤组织诱导途径：分别以圆山药的叶片、茎段、带腋芽的茎段、块根为外植体,接种在愈伤组织诱导培养基上,结果显示块根的褐化明显且无诱导率,带腋芽的茎段为合适的外植体,出愈率可达85.7%；适宜的愈伤组织诱导培养基组成为MS+2,4-D4.0mg/L+BA1.0mg/L;圆山药愈伤组织上丛生芽的分化所适用BA的浓度为4.Omg/L。2.腋芽增殖途径：以带腋芽的茎段为外植体时,接种在MS+BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L最有利于腋芽增殖,增殖系数达到3.1,且外植体的创面的褐化现象不太明显。3.当离体诱导茎段外植体时,调整以下培养条件均能降低褐化程度：如适当增加6-BA浓度为6.Omg/L、添加的0.3%活性炭、琼脂浓度降低至0.45%等。4.试管苗在苗床上的移栽成活率与培养容器内试管苗炼苗及栽培基质的选用关系极为密切。5.通过调整培养基中生长调节剂的成分和配比,圆山药嫩茎离体培养过程中,产生器官发生型和器官型两种芽再生途径。经过显微观察和对比分析,提出了两者外植体的薄壁细胞在附加有2,4-D和6-BA的培养基上培养都同样经历了启动期、分裂期并往回复变化为胚性细胞的方向变化。但是附加2,4-D培养基上培养的细胞从分裂期直接进入愈伤组织形成期,在愈伤组织形成过程中伴随着脱分化与再分化的深层次变化,认识愈伤组织的本质和变化是利用好愈伤组织的关键。在附加6-BA培养基上培养的茎外植体薄壁细胞启动、分裂后,由胚性细胞形成胚性细胞团,并进一步发育成芽的原始体,成为单极性器官雏形。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2012-03-01）
李海菊[8]（2011）在《简述玉米体细胞组织培养中影响愈伤组织诱导的因素》一文中研究指出本文对玉米体细胞组织培养中影响愈伤组织诱导率的重要因素进行了简要概述:基因型是最关键的限制因素;胚长在1.2-1.5mm之间的幼胚作为外植体,愈伤组织的诱导率最高;培养基中添加适宜浓度的2,4-D、细胞分裂素类似物、L-Pro、AgNO3等附加物对促进胚性愈伤组织的形成非常有效。(本文来源于《吕梁教育学院学报》期刊2011年03期）
潘兵兵[9]（2011）在《5个现代月季品种愈伤组织再生体系的建立与体细胞培养的研究》一文中研究指出现代月季是世界上最重要的观赏植物之一,其四季常开、香味浓郁、花色丰富,一直为众人所青睐,具有广泛的应用价值,是现代城市绿化中不可替代的材料。我国北方由于气候原因,缺乏可以广泛栽培并能露地越冬的现代月季品种。当前在月季育种中存在的突出问题是现代月季遗传背景狭窄,传统育种方法周期过长,而且染色体数目及倍性差异造成远缘杂交不亲和与杂种的高度不育。生物工程则为生物品种的改造开辟了新途径。愈伤组织和体细胞是无性系变异和遗传转化的良好的受体材料,通过愈伤组织再生和体细胞培养可以获得无性系变异植株,而且体细胞融合为解决远缘杂交不育提供了一个很有潜力的新途径。但是现代月季再生途径的建立还存在很大的困难,而且体细胞培养难度很大,体细胞培养获得再生植株的报道还很有限,因此本研究对促进月季的抗寒育种及其他性状的改良都具有重要的意义。本研究通过探究影响现代月季快速繁殖和愈伤组织诱导再生的因素,并利用获得的愈伤组织建立细胞悬浮系,探讨了影响现代月季体细胞培养的各种因子,旨在建立起现代月季高效的快速繁殖体系、愈伤组织再生和体细胞培养技术体系,为以后导入抗寒等目的基因、体细胞无性系变异的筛选及原生质体培养和融合等遗传操作打下良好的基础。本研究的主要结果如下:1.建立了5个现代月季品种快速繁殖体系:1号月季品种不定芽萌发和增殖的最佳培养基为:MS+6-BA2.5mg·L~(-1) +NAA0.05mg·L~(-1),增殖率能达到4.2;2号、6号和8号月季品种最佳培养基为:MS+6-BA2.0mg·L~(-1) +NAA0.05mg·L~(-1),增殖率分别能达到3.68、4.07和4.2;9号月季品种最佳培养基为:MS+6-BA2.0mg·L~(-1) +NAA0.1mg·L~(-1) ,增殖率可达到3.99;5个月季品种无菌苗的最适生根培养基为:1/2MS+ NAA0.05 mg·L~(-1)和1/2MS+ NAA 0.1mg·L~(-1),生根率都可达80%以上;各品种无菌苗通过驯化炼苗,露地栽植成活率都可达88%以上。2.筛选出5个现代月季品种愈伤组织诱导最佳培养基。1号、8号月季品种叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D3.0 mg·L~(-1),诱导率均可达到100.00%;2号、6号、9号月季品种叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D2.0 mg·L~(-1) +6-BA0.5 mg·L~(-1),诱导率分别可达到97.67%、98.67%、100.00%。1号、6号月季品种幼茎诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D3.0 mg·L~(-1),诱导率分别可达到78.67%,84.33%;2号月季品种幼茎诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D2.0 mg·L~(-1),诱导率可达到73.67%;8号、9号月季品种幼茎诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D2.0mg·L~(-1)+6-BA0.5mg·L~(-1),诱导率分别为82.33%、80.33%。3.筛选出4个现代月季品种愈伤组织分化最佳培养基。1号品种叶片愈伤组织分化的最佳培养基为MS+2,4-D0.2 mg·L~(-1) +TDZ9.0 mg·L~(-1) +GA30.1 mg·L~(-1),分化途径为不定芽发生途径,分化率可达18.00%;6号品种叶片愈伤组织分化的培养基为MS+6-BA0.1 mg·L~(-1) +2,4-D1.0 mg·L~(-1) +TDZ8.0 mg·L~(-1) +GA30.1 mg·L~(-1),分化途径为不定芽发生途径,分化率可达22.00%;适合8号品种叶片愈伤组织分化的培养基为1/2MS+6-BA0.5 mg·L~(-1)+TDZ10.0mg·L~(-1)+GA30.1 mg·L~(-1)、MS+2,4-D0.2 mg·L~(-1) +TDZ9.0 mg·L~(-1) +GA30.1 mg·L~(-1),前者愈伤组织分化途径为胚状体途径,胚状体通过继代培养可形成再生植株,后者分化途径为不定芽途径,分化率分别为18.67%、21.33%,幼茎愈伤组织分化的最佳培养基为MS+TDZ8.0 mg·L~(-1),分化途径为不定芽发生途径,分化率可达46.67%;9号品种叶片愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA0.1 mg·L~(-1) +TDZ9.0 mg·L~(-1) +GA30.5 mg·L~(-1),分化途径为不定芽途径,分化率达到16.67%,幼茎愈伤组织分化的培养基为MS+2,4-D0.2 mg·L~(-1) +TDZ9.0 mg·L~(-1) +GA30.1 mg·L~(-1),分化途径为胚状体途径,分化率可达35.33%。4.以5个月季品种的愈伤组织诱导培养基成分相同的液体培养基可建立起稳定的悬浮细胞系,悬浮系最佳的继代时间间隔为8~(-1)0d,悬浮系培养后4-8天内的细胞生长旺盛,活性强,适宜用来进行细胞系的再生培养;不同基因型间月季悬浮系生长特性差异不显着。5.以1号、8号和9号叁个品种的悬浮细胞可诱导出愈伤组织。1号品种悬浮细胞在固体培养基MS+6-BA0.1 mg·L~(-1) +2,4-D1.0 mg·L~(-1) +KT0.1 mg·L~(-1),愈伤组织诱导率为22.00%;8号品种悬浮细胞在固体培养基MS+2,4-D1.0 mg·L~(-1) +NAA1.0 mg·L~(-1) +KT0.5 mg·L~(-1)愈伤组织诱导率为27.33%;9号品种悬浮细胞在固体培养基MS+2,4-D1.0 mg·L~(-1) +NAA1.0 mg·L~(-1) +KT0.5 mg·L~(-1)愈伤组织诱导率为26.67%,悬浮细胞在液体培养基MS+6-BA0.5 mg·L~(-1) +2,4-D1.0 mg·L~(-1) +NAA0.2 mg·L~(-1)愈伤组织诱导率仅为2.67%。6. 1号品种悬浮细胞愈伤组织在培养基MS+2,4-D0.2 mg·L~(-1) +TDZ9.0 mg·L~(-1) +GA30.1 mg·L~(-1)上可直接分化出不定芽,分化率可达32.33%;8号品种悬浮细胞愈伤组织在培养基MS+2,4-D0.2 mg·L~(-1) +TDZ9.0 mg·L~(-1) +GA30.1 mg·L~(-1)上可分化出胚状体,分化率可达26.67%;9号品种悬浮细胞愈伤组织在培养基MS + 6-BA0.1mg·L~(-1) + TDZ 9.0mg·L~(-1) + GA3 0.5mg·L~(-1)上可分化出胚状体,分化率为38.67%。(本文来源于《东北农业大学》期刊2011-04-08）
刘爱华,周平,曹云霞,章志国,魏兆莲[10]（2011）在《冻融人卵巢组织与体细胞共培养对卵泡生长发育和卵巢组织内分泌影响》一文中研究指出目的评价冻融人卵巢组织与人早孕蜕膜细胞共培养对卵巢组织内分泌和卵泡生长发育的影响。方法 2008年3月至8月将冻融的人卵巢组织与人早孕蜕膜单层细胞共培养。实验分四组:A组:经玻璃化冻融卵巢组织与人早孕蜕膜单层细胞共培养;B组:经程序化冻融卵巢组织与人早孕蜕膜单层细胞共培养;C组:经玻璃化冻融卵巢组织单独培养;D组:经程序化冻融卵巢组织单独培养。冻融卵巢组织在共培养体系中培养14d,培养期间隔天吸取1次培养液,测定培养液中雌二醇、孕酮含量,并比较培养前后冻融卵巢组织中总体卵泡存活率(TFSR)、卵泡生长率(GFR)。结果 A组和B组,TFSR培养前后比较差异无统计学意义(P>0.05),GFR培养前后比较差异有统计学意义(P<0.01);C组和D组,培养前后TFSR、GFR比较差异有统计学意义(P<0.01)。TFSR、GFR培养后A组和B组比较,差异无统计学意义,C组和D组比较差异亦无统计学意义。A组与C组、D组、B组与C组、D组分别比较TFSR、GFR均差异有统计学意义(P<0.01)。四组间雌二醇、孕酮水平差异有统计学意义(P<0.01)。结论两种冷冻方法冻融的卵巢组织经体外培养仍具有内分泌功能,原始卵泡在体外培养体系中有不同程度生长;冻融卵巢组织与人早孕蜕膜细胞共培养优于其单独培养。(本文来源于《中国实用妇科与产科杂志》期刊2011年03期）
体细胞组织培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为探讨细枝木麻黄(Casuarina cunninghamiana Miq.)愈伤组织分化过程的细胞组织学,对离体培养条件下的愈伤组织进行扫描电子显微镜和石蜡切片观察,分析愈伤组织的细胞分裂、分化以及芽再生的发生过程。结果表明,新鲜外植体培养于愈伤组织诱导培养基上,伤口处的薄壁细胞开始脱分化,培养1周后形成明显的愈伤组织;继续培养2周后,胚性愈伤组织形成,且表层细胞启动分化形成芽原基;培养4周,可肉眼观察到胚性芽原基,数量增多并逐渐分化形成不定芽;培养至第6周,生成不定芽,并大量增殖和分化。因此,细枝木麻黄是通过愈伤组织分化形成胚状体的途径进行植株再生的,为建立细枝木麻黄组织培养高效再生体系提供了理论依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体细胞组织培养论文参考文献
[1].王敏,陆祥,曾峰,檀军,侯泽宇.人乳腺癌原代细胞组织块培养方法的改良及其鉴定[J].遵义医学院学报.2019
[2].姜清彬,仲崇禄,陈羽,刘芬,张勇.细枝木麻黄离体培养过程中愈伤组织和再生芽的细胞组织学观察[J].热带亚热带植物学报.2015
[3].申红远,白静,汤喆,刘秀华,王禹.SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞组织贴块法培养及鉴定[J].中华老年心脑血管病杂志.2014
[4].张云风,徐睿智,樊娜,马琳.辽东楤木体细胞组织培养研究[J].天津中医药大学学报.2014
[5].何禹璇,郭东全,钱雪艳,杨向东,李闯.大豆体细胞胚胎组织培养及遗传转化研究进展[J].中国农学通报.2013
[6].谭美华,陈建苏.体外细胞组织重建中共培养技术的应用[J].基础医学与临床.2012
[7].金密.圆山药离体培养及嫩茎再生芽细胞组织学观察[D].湖南农业大学.2012
[8].李海菊.简述玉米体细胞组织培养中影响愈伤组织诱导的因素[J].吕梁教育学院学报.2011
[9].潘兵兵.5个现代月季品种愈伤组织再生体系的建立与体细胞培养的研究[D].东北农业大学.2011
[10].刘爱华,周平,曹云霞,章志国,魏兆莲.冻融人卵巢组织与体细胞共培养对卵泡生长发育和卵巢组织内分泌影响[J].中国实用妇科与产科杂志.2011