田姗姗:油菜转录因子BnaERF5/6的功能验证及5-羟色胺对幼苗干旱缓解效应的相关研究论文

田姗姗:油菜转录因子BnaERF5/6的功能验证及5-羟色胺对幼苗干旱缓解效应的相关研究论文

本文主要研究内容

作者田姗姗(2019)在《油菜转录因子BnaERF5/6的功能验证及5-羟色胺对幼苗干旱缓解效应的相关研究》一文中研究指出:一、油菜转录因子Bna ERF5/6的功能验证本研究选用耐渍型油菜品种中双9号,以淹水处理12小时的油菜芽的c DNA为模板,克隆与耐渍相关的基因Bna ERF5、Bna ERF6,并用农杆菌介导法遗传转化拟南芥。通过淹水处理,验证拟南芥的表型。主要结果如下:克隆到2个与耐渍相关的基因Bna ERF5、Bna ERF6,并且成功构建植物过表达载体PBI121-Bna ERF5、PBI121-Bna ERF6。通过农杆菌介导法遗传转化拟南芥,经过连续三代在卡那霉素培养基的筛选、阳性苗DNA检测以及纯系植株q PCR检测外源基因的表达量等一系列检测,得到Bna ERF5、Bna ERF6这2个基因的过表达拟南芥纯合株系。对转基因和野生型拟南芥株系进行淹水处理,淹水后拟南芥的叶片均变黄,恢复后拟南芥的部分叶片呈紫色,部分老叶片干枯;在淹水7天恢复10天后,转基因植株基本可以正常开花,而野生型植株矮小,发育迟缓,不能正常开花。对淹水0h、3h、6h、9h拟南芥中耐渍基因ADH1、PDC1的表达量检测发现,超表达Bna ERF5拟南芥中ADH1基因在淹水处理0h、3h的表达量均较野生型提高,在淹水6h以后,ADH1的表达量则比野生型低。超表达Bna ERF6拟南芥中ADH1基因淹水处理0h、3h的表达量均较野生型提高,而到淹水处理6h,ADH1基因的表达量与野生型相比差异不显著,到淹水9h,ADH1的表达量比野生型株系低。超表达Bna ERF5拟南芥中PDC1基因的表达量淹水0h、3h较野生型提高,在淹水6小时以后,PDC1的表达量则比野生型低。超表达Bna ERF6拟南芥的PDC1基因的表达量在淹水处理0h、3h的表达量均较野生型提高,到淹水处理6h,PDC 1基因的表达量与野生型相比差异不显著,到淹水9h,PDC 1的表达量比野生型低。拟南芥淹水7天恢复10天后,转基因拟南芥的鲜重和株高均显著高于野生型。二、5-羟色胺对幼苗干旱缓解效应的相关研究为探讨5-羟色胺对油菜耐旱性的调节作用,以油菜品种中双11号为材料,通过水培试验,采用PEG-6000(polyethylene glycol)胁迫模拟干旱,分析了干旱条件下施加外源5-羟色胺对油菜幼苗生长、活性氧代谢及渗透调节物质的影响。结果表明,在干旱胁迫下,油菜的生长受到抑制,过氧化氢(H2O2)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、脯氨酸(proline,Pro)以及可溶性糖(soluble sugar,SS)的含量明显增加,过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)的活性显著提高。在干旱条件下施加外源5-羟色胺可以缓解干旱对油菜幼苗的不良影响,促进其生长。与单纯干旱条件下的幼苗相比,添加外源5-羟色胺显著地提高了CAT、SOD、APX的活性,减少了过氧化氢和丙二醛的积累,同时渗透调节物质脯氨酸与可溶性糖含量显著增加。

Abstract

yi 、you cai zhuai lu yin zi Bna ERF5/6de gong neng yan zheng ben yan jiu shua yong nai zi xing you cai pin chong zhong shuang 9hao ,yi yan shui chu li 12xiao shi de you cai ya de c DNAwei mo ban ,ke long yu nai zi xiang guan de ji yin Bna ERF5、Bna ERF6,bing yong nong gan jun jie dao fa wei chuan zhuai hua ni na gai 。tong guo yan shui chu li ,yan zheng ni na gai de biao xing 。zhu yao jie guo ru xia :ke long dao 2ge yu nai zi xiang guan de ji yin Bna ERF5、Bna ERF6,bing ju cheng gong gou jian zhi wu guo biao da zai ti PBI121-Bna ERF5、PBI121-Bna ERF6。tong guo nong gan jun jie dao fa wei chuan zhuai hua ni na gai ,jing guo lian xu san dai zai ka na mei su pei yang ji de shai shua 、yang xing miao DNAjian ce yi ji chun ji zhi zhu q PCRjian ce wai yuan ji yin de biao da liang deng yi ji lie jian ce ,de dao Bna ERF5、Bna ERF6zhe 2ge ji yin de guo biao da ni na gai chun ge zhu ji 。dui zhuai ji yin he ye sheng xing ni na gai zhu ji jin hang yan shui chu li ,yan shui hou ni na gai de xie pian jun bian huang ,hui fu hou ni na gai de bu fen xie pian cheng zi se ,bu fen lao xie pian gan ku ;zai yan shui 7tian hui fu 10tian hou ,zhuai ji yin zhi zhu ji ben ke yi zheng chang kai hua ,er ye sheng xing zhi zhu ai xiao ,fa yo chi huan ,bu neng zheng chang kai hua 。dui yan shui 0h、3h、6h、9hni na gai zhong nai zi ji yin ADH1、PDC1de biao da liang jian ce fa xian ,chao biao da Bna ERF5ni na gai zhong ADH1ji yin zai yan shui chu li 0h、3hde biao da liang jun jiao ye sheng xing di gao ,zai yan shui 6hyi hou ,ADH1de biao da liang ze bi ye sheng xing di 。chao biao da Bna ERF6ni na gai zhong ADH1ji yin yan shui chu li 0h、3hde biao da liang jun jiao ye sheng xing di gao ,er dao yan shui chu li 6h,ADH1ji yin de biao da liang yu ye sheng xing xiang bi cha yi bu xian zhe ,dao yan shui 9h,ADH1de biao da liang bi ye sheng xing zhu ji di 。chao biao da Bna ERF5ni na gai zhong PDC1ji yin de biao da liang yan shui 0h、3hjiao ye sheng xing di gao ,zai yan shui 6xiao shi yi hou ,PDC1de biao da liang ze bi ye sheng xing di 。chao biao da Bna ERF6ni na gai de PDC1ji yin de biao da liang zai yan shui chu li 0h、3hde biao da liang jun jiao ye sheng xing di gao ,dao yan shui chu li 6h,PDC 1ji yin de biao da liang yu ye sheng xing xiang bi cha yi bu xian zhe ,dao yan shui 9h,PDC 1de biao da liang bi ye sheng xing di 。ni na gai yan shui 7tian hui fu 10tian hou ,zhuai ji yin ni na gai de xian chong he zhu gao jun xian zhe gao yu ye sheng xing 。er 、5-qiang se an dui you miao gan han huan jie xiao ying de xiang guan yan jiu wei tan tao 5-qiang se an dui you cai nai han xing de diao jie zuo yong ,yi you cai pin chong zhong shuang 11hao wei cai liao ,tong guo shui pei shi yan ,cai yong PEG-6000(polyethylene glycol)xie pai mo ni gan han ,fen xi le gan han tiao jian xia shi jia wai yuan 5-qiang se an dui you cai you miao sheng chang 、huo xing yang dai xie ji shen tou diao jie wu zhi de ying xiang 。jie guo biao ming ,zai gan han xie pai xia ,you cai de sheng chang shou dao yi zhi ,guo yang hua qing (H2O2)、bing er quan (malondialdehyde,MDA)、fu an suan (proline,Pro)yi ji ke rong xing tang (soluble sugar,SS)de han liang ming xian zeng jia ,guo yang hua qing mei (catalase,CAT)、chao yang hua wu qi hua mei (superoxide dismutase,SOD)he kang huai xie suan guo yang hua wu mei (ascorbate peroxidase,APX)de huo xing xian zhe di gao 。zai gan han tiao jian xia shi jia wai yuan 5-qiang se an ke yi huan jie gan han dui you cai you miao de bu liang ying xiang ,cu jin ji sheng chang 。yu chan chun gan han tiao jian xia de you miao xiang bi ,tian jia wai yuan 5-qiang se an xian zhe de di gao le CAT、SOD、APXde huo xing ,jian shao le guo yang hua qing he bing er quan de ji lei ,tong shi shen tou diao jie wu zhi fu an suan yu ke rong xing tang han liang xian zhe zeng jia 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国农业科学院的田姗姗,发表于刊物中国农业科学院2019-07-05论文,是一篇关于油菜论文,耐渍论文,功能验证论文,羟色胺论文,干旱论文,中国农业科学院2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国农业科学院2019-07-05论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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