导读:本文包含了抗原浓缩论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:抗原,蛋白质,浓缩,纯化
抗原浓缩论文文献综述
田宇杰,李银,章丽娇,刘青涛,韩凯凯[1]（2019）在《抗原浓缩技术研究进展》一文中研究指出动物疫病是危害养殖业发展的重要因素,而疫苗免疫又是目前防控动物疫病最有效的手段之一。为了提高兽用多联疫苗的免疫效力,去除杂质,减少临床上的免疫不良反应,需要对抗原进行浓缩。疫苗的抗原浓缩技术主要是通过物理或化学方法去除杂质以提高单位体积抗原含量,同时要防止抗原的免疫原性受到破坏,对整个浓缩条件要求较高,因此如何选择合适且高效的抗原浓缩方法尤为重要。文章对近年来抗原浓缩技术的研究及现状进行总结,旨在为选择抗原浓缩技术提供参考。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年03期）
刘国英,郝鹏,陈光达,李志鹏[2]（2018）在《伪狂犬抗原纯化浓缩工艺研究》一文中研究指出伪狂犬病毒(Pesudorabies virus,PRV)属于疱疹Ⅰ型病毒,PRV病毒粒子的核衣壳成正二十面体,带囊膜的成熟病毒粒子直径约120～300nm。自2011年以来,我国多地猪场暴发伪狂犬病,给我国养猪业带来了较大影响。目前,急需生产出高质量伪狂犬疫苗来应对疫情的威胁。传统的伪狂犬疫苗单位体积内抗原含量不高,免疫效果不佳;杂蛋白含量较多,免疫副反应较严重。本实(本文来源于《兽医导刊》期刊2018年11期）
汪浩,乔绪稳,陈瑾,李图帅,张元鹏[3]（2018）在《GEM技术浓缩纯化O型口蹄疫病毒灭活抗原方法的建立》一文中研究指出[目的]验证利用革兰氏阳性增强基质颗粒(GEM)浓缩纯化口蹄疫病毒(FMDV)抗原的可行性。[方法]将含有3个自溶素基序的锚钩蛋白基因(PA)与针对O型口蹄疫病毒特异性纳米抗体基因(VHH)串联克隆入原核表达载体p ET-32a(+)中,构建原核表达载体p ET-VPA,将其转化大肠杆菌宿主菌BL21(DE3),表达获得融合重组蛋白VPA。先将GEM颗粒与重组蛋白VPA在37℃孵育30 min,离心,取沉淀用适量的FMDV抗原液重悬,再经一步低速离心,获得沉淀即为浓缩纯化的口蹄疫病毒抗原。利用SDS-PAGE、Western-blot、蛋白含量测定及146S测定等方法对浓缩纯化方法的可行性进行鉴定,并通过动物免疫试验初步验证浓缩纯化后抗原的免疫原性。[结果]VPA融合蛋白能够在大肠杆菌中部分可溶性表达。作为接头蛋白,VPA既能与GEM颗粒结合,又能与FMDV抗原结合。SDS-PAGE与Western-blot结果表明:FMDV通过GEM法得到有效纯化;146S测定结果表明FMDV的回收效率达到99%;总蛋白含量测定结果显示口蹄疫抗原杂蛋白去除率达到90%;动物免疫试验结果显示GEM技术纯化后的FMDV具有良好的免疫原性。[结论]利用GEM技术浓缩纯化口蹄疫病毒抗原是可行的。(本文来源于《南京农业大学学报》期刊2018年01期）
崔小兰[4]（2016）在《鸡新城疫活疫苗（La Sota株）浓缩法纯化抗原生产工艺的建立》一文中研究指出鸡新城疫(Newcastle Disease;ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起禽类的一种重要的急性败血性传染病,对养禽业的发展造成严重影响,属于家禽重大疫病之一。疫苗的免疫接种能有效预防和控制鸡新城疫的发生与流行,减少鸡群因疫病感染造成的损失。常用于免疫接种的鸡新城疫疫苗有活疫苗和灭活疫苗两大类,活疫苗包括Ⅰ系,Ⅱ系(B1株)、Ⅲ系(F系)、Ⅳ系(La Sota株)和克隆-30等,其中新城疫Ⅳ系活疫苗(La Sota株)是我国最常用的优良低毒力疫苗,长期的应用效果表明La Sota株的免疫效果良好,能够保护鸡免受NDV的感染。在鸡新城疫活疫苗生产过程中,传统的生产工艺是将毒种接种SPF鸡胚,收取尿囊液,按照一定比例进行混合配苗,然后利用冻干技术制成疫苗。这种疫苗在临床使用过程中,可能出现肿头、停食、停水、局部炎症、休克甚至死亡的不良反应,同时也会造成生产性能降低,免疫功能下降,易于发病,对其它疫苗应答下降。鸡只免疫接种产生不良反应是由多种因素造成,这些因素包括内毒素、外毒素、热源、异体蛋白、蛋源、血清、革兰阴性菌和环境。其中,内毒素是导致疫苗接种鸡只出现免疫不良反应的主要因素之一。因此,在鸡新城疫活疫苗(La Sota株)生产过程中,可以通过优化鸡新城疫活疫苗(La Sota株)中间产品生产工艺,减少和避免疫苗内毒素污染,达到提升疫苗的品质,提高疫苗的安全性和有效性的目的。本研究是在当前鸡新城疫活疫苗(La Sota株)成熟的生产工艺基础上,根据新城疫病毒特点来开展试验。试验设计A、B、C和D共四组,其中A、B和C组采用浓缩纯化生产工艺连续进行叁批次生产,D组仍采用目前抗原直接配苗进行生产,作为对照组。抗原生产按一定比例作适当稀释毒种,接种SPF鸡胚尿囊腔0.1mL/胚,接种后密封针孔,置36.5℃继续孵化,弃去72h内死亡的鸡胚,收获96h的鸡胚液,测定其血凝价及EID50,检验合格后一部分抗原利用颇尔超滤浓缩系统进行浓缩,浓缩后留取样品备测血凝价及毒价,分别标识为试验A组、B组和C组。另一部分抗原直接按规程规定的效价进行配苗,标识为对照D组;按规程规定的效价进行配苗,连续进行叁批次生产,对四组产品进行生产和常规检测,包括内毒素检验、无菌检验、病毒含量测定、安全检验和免疫攻毒试验,通过比较来建立鸡新城疫活疫苗浓缩纯化生产工艺。结果表明:试验A组、B组和C组鸡新城疫活疫苗(La Sota株)10/10安全检测合格,内毒素含量不超过20EU/mL,病毒含量大于106.0EID50,且批次间差异不超过0.1个滴度;对照D组鸡新城疫活疫苗(La Sota株)7/10安全检测合格,内毒素含量超过50 EU/mL,病毒含量大于106.0EID50。通过检测结果比较,表明鸡新城疫活疫苗(La Sota株)浓缩纯化生产工艺建立的必要性,控制原辅料质量,此浓缩纯化生产工艺,不但能有效富集并调控病毒液含量,增加疫苗单位有效成分,降低疫苗使用量,而且同时能除去部分生物源性杂质成分,减少中间产品病毒液内毒素污染,减少批次间的差异,有效降低免疫接种不良反应,从而提升产品质量水平。本次试验确立了鸡新城疫活疫苗(La Sota株)浓缩纯化生产工艺,并有望在未来生产中得到全面推广应用。(本文来源于《华南农业大学》期刊2016-06-01）
汪浩[5]（2016）在《GEM技术纯化浓缩口蹄疫病毒抗原研究》一文中研究指出口蹄疫(foot-and-mouth diease,FMD)是由口蹄疫病毒(foot-and-mouth diease virus,FMDV)引起的一种急性、热性、高度接触传染性的偶蹄兽动物疫病,该病的发生可对经济及对外贸易造成极大影响。因而利用灭活疫苗对口蹄疫进行预防和保护,具有重要经济价值。我国目前国产的口蹄疫疫苗多为口蹄疫病毒灭活、配油佐剂制备而成,免疫副反应大,此反应大都由病毒抗原不纯引起。因此亟需优化改良口蹄疫病毒抗原的浓缩纯化技术,提升疫苗质量。GEM-PA表面展示系统是国外近年来研究发展起来的一种新型抗原制备技术。该系统由 GEM颗粒(gram-positive bacterial enhancer matrix particles)和锚钩蛋白 PA(protein anchor)构成。此项技术能够实现外源蛋白与PA融合后在GEM颗粒表面的展示。因此设计针对病毒抗原的纳米抗体并与PA进行融合,并在GEM颗粒表面展示,能够对病毒抗原进行浓缩纯化。本研究成功建立了 O型FMD灭活病毒的GEM纯化方法。利用纯化后的病毒抗原制备试验疫苗,初步评价其免疫效力,为今后研制高效的FMD疫苗奠定重要基础。本试验主要研究内容如下:试验Ⅰ 不同个数LysM基序的锚钩蛋白与GEM结合活性比较比较叁种含不同个数基序锚钩蛋白PA的结合活性。首先应用PCR技术分别扩增得到含有1个、2个和3个自溶素基序(lysin motif,LysM)基因片段的PA、PA2与PA3;然后应用重组质粒pET-28a(+)-Nb构建原核表达载体,将其转化大肠杆菌BL-21(DE3),进行诱导表达获得目的蛋白;最后将可溶性的PA-Nb、PA2-Nb、PA3-Nb融合蛋白与GEM颗粒结合,经Western-blot、透射电镜与SDS-PAGE进行结合鉴定与结合活性比较分析。试验结果显示裂解后可溶性的融合蛋白PA-Nb、PA2-Nb、PA3-Nb都能与GEM颗粒结合,PA2-Nb与GEM颗粒的结合活性明显好于PA-Nb,PA2-Nb的表达量和可溶性明显优于PA3-Nb,PA2-Nb与GEM颗粒的结合活性与PA3-Nb相当。因此PA2-Nb可作为下一步纯化口蹄疫病毒的最优接头蛋白。本研究可为进一步完善乳球菌外壳-蛋白锚钩展示系统提供理论基础。试验Ⅱ GEM-FMDV纯化系统基础构件的制备GEM颗粒制备:乳酸乳球菌MG1363用GM17培养基30 ℃恒温摇床振荡过夜,离心收集菌体,0.1 MHC1重悬,水浴煮沸30 min,离心洗涤3次,-80 ℃保存备用。透射电镜观察结果表明,获得的GEM颗粒保持原菌的形态大小,表面光滑,核酸蛋白已被完全除去。接头融合蛋白制备:该蛋白N端为FMDV特异性纳米抗体,C端为蛋白锚钩。将本实验室保存的载体质粒pET-28a(+)与pUC57-Pb双酶切后连接,获得重组锚钩-纳米抗体原核表达质粒pET-28a(+)-Pb,转化BL21感受态细胞进行诱导表达。SDS-PAGE电泳结果显示,接头蛋白以部分可溶性蛋白形式表达,分子量32 kDa与理论值相符。GEM颗粒-接头蛋白复合物制备以及结合O型FMDV的初步鉴定:4 ml接头蛋白重悬1U GEM颗粒,室温30 min,离心收集沉淀。SDS-PAGE电泳结果显示GEM颗粒与接头蛋白结合存在于离心后的沉淀中;Western-blot结果显示GEM颗粒与接头蛋白的结合是特异性的;透射电镜观察表明,GEM颗粒与接头蛋白结合后,其表面有大量细小絮状物。将GEM-Pb复合物与O型FMDV结合,分离上清和沉淀进行初步鉴定。Western-blot鉴定发现GEM-Pb能够结合灭活的O型FMDV。试验Ⅲ GEM纯化O型FMDV方法建立及其免疫原性鉴定将GEM-Pb复合物与灭活的O型FMDV(ZK株)混匀,37 ℃孵育1.5 h,9000 rpm离心10 min,分别收集上清与沉淀。SDS-PAGE电泳和Western-blot鉴定结果表明GEM颗粒-接头蛋白复合物可特异性、高效地将FMDV固定在其表面,离心后上清中无病毒残留,沉淀中仅存在FMDV、接头蛋白和GEM颗粒,以及少量非特异性结合的杂蛋白。结合后的沉淀GEM-Pb-F与处理前的O型灭活FMDV 一样具有良好的反应原性,表明本试验成功建立O型FMDV的GEM纯化方法。纯化后获得的GEM-Pb-F复合物进行免疫小鼠试验和免疫猪试验,经液相阻断ELISA抗体检测和淋巴细胞增殖检测可以证实GEM-Pb-F复合物与处理前的FMDV相比抗体水平有显着提高,说明经GEM-Pb纯化后的灭活O型FMDV具有更好的免疫原性。(本文来源于《南京农业大学》期刊2016-04-01）
许倩,石径,黄和平,罗永康[6]（2016）在《乳酸杆菌粗酶液对浓缩乳蛋白抗原性及过敏原性的影响》一文中研究指出利用副干酪乳杆菌H9和植物乳杆菌P8菌株的粗酶液对浓缩乳蛋白在37℃下进行水解,并采用间接竞争酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)测定水解乳中α-乳白蛋白(α-LA)、β-乳球蛋白(β-LG)、α-酪蛋白(α-CN)和β-酪蛋白(β-CN)4种乳蛋白的抗原性与过敏原性,从而探讨2种乳酸杆菌粗酶液对浓缩乳蛋白的水解作用以及对乳蛋白抗原性及过敏原性的影响。结果表明:副干酪乳杆菌H9和植物乳杆菌P8菌株所产酶液在对浓缩乳蛋白进行水解的过程中,水解度逐渐增大,乳蛋白的抗原性及过敏原性在水解过程中都缓慢降低,抗原性的降低程度大于过敏原性的降低程度。其中效果最为显着的是副干酪乳杆菌H9和植物乳杆菌P8粗酶液水解后使β-LG抗原性分别降低了71.2%和63.1%;副干酪乳杆菌H9粗酶液水解后使α-LA、β-LG过敏原性分别降低了31.0%和41.2%。由此可见,不同菌种所产酶液对不同乳蛋白抗原性和过敏原性的影响有一定的差异。(本文来源于《中国科技论文》期刊2016年06期）
汪德生,曹登友,温贵兰,王开功[7]（2014）在《新城疫血凝抑制浓缩抗原的研制与应用》一文中研究指出采用甲醛对新城疫LaSota株病毒进行灭活,利用蔗糖透析法进行浓缩,抗原效价由浓缩前的log26上升至浓缩后的log210,在浓缩液中加入25%的丙叁醇制成了新城疫血凝抑制抗原。同时对加入稳定剂——丙叁醇的自制抗原进行了定质研究。结果表明:加丙叁醇自制抗原,温度越低时稳定性越好、保存期最长。将自制抗原、标准抗原与标准血清、待检血清进行血凝抑制试验对比,表明自制抗原准确性、重复性较好,可用于临床监测。(本文来源于《贵州畜牧兽医》期刊2014年04期）
马全英,祝秀梅,安芳兰,刘萍,刘学荣[8]（2014）在《比较大孔树脂与离子交换填料浓缩纯化FMDV抗原的效果》一文中研究指出[目的]确定FMDV抗原的最佳纯化方法及纯化条件,为其在我国动物用疫苗行业中的大规模应用和推广奠定基础。[方法]选用大孔树脂和离子交换填料浓缩纯化FMDV抗原,通过对样品及缓冲液的pH、流速、离子强度、上样量等方面探讨各填料的最佳工作参数,并比较2种方法浓缩纯化同种FMDV抗原的效果。[结果]大孔树脂处理样品的抗原回收率为21%,离子交换填料的抗原回收率为11.7%,均不理想。大孔树脂的杂蛋白去除率为90%,离子交换填料的杂蛋白去除率仅为52%,说明大孔树脂在去除抗原中杂蛋白的效果方面可达到所需的要求。[结论]这2种方法浓缩纯化FMDV抗原的效果均不理想,但大孔树脂效果稍好。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2014年10期）
郭太杰,于向前,刘芳萍[9]（2012）在《用切向流超滤的方法浓缩IBD琼扩抗原半成品的试验》一文中研究指出本实验用切向流超滤的方法对IBD琼扩抗原半成品进行10倍浓缩,并对浓缩前后的样品进行检验,检验的结果表明用该方法进行IBD琼扩抗原半成品的浓缩效果显着,且耗时短,无损失,是一种适用于该琼扩抗原浓缩环节的方法。(本文来源于《畜牧兽医科技信息》期刊2012年03期）
王继华,邵明,施程洪,毕峻龙,尹革芬[10]（2011）在《抗原浓缩纯化工艺对口蹄疫灭活疫苗免疫效果评价》一文中研究指出为增强牛口蹄疫O型、Asia-Ⅰ型二价灭活疫苗免疫效果,本试验应用超滤技术浓缩口蹄疫(FMD)抗原来制备浓缩疫苗,通过免疫血清学检测及本动物攻毒保护试验来评价所制疫苗效果。结果显示,浓缩抗原疫苗安全检验合格,全剂量(2 mL)、1/3剂量(0.67 mL)、1/9剂量(0.22 mL)组牛血清抗体水平均较常规疫苗有显着提升(P<0.05),阳转率高于常规灭活疫苗;本动物攻毒保护试验效果明显,Asia-Ⅰ型、O型抗原PD50值分别达到了每剂12.51和10.32。结果表明,应用超滤技术浓缩FMD抗原可提高FMDV二价灭活疫苗的免疫效果。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2011年05期）
抗原浓缩论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
伪狂犬病毒(Pesudorabies virus,PRV)属于疱疹Ⅰ型病毒,PRV病毒粒子的核衣壳成正二十面体,带囊膜的成熟病毒粒子直径约120～300nm。自2011年以来,我国多地猪场暴发伪狂犬病,给我国养猪业带来了较大影响。目前,急需生产出高质量伪狂犬疫苗来应对疫情的威胁。传统的伪狂犬疫苗单位体积内抗原含量不高,免疫效果不佳;杂蛋白含量较多,免疫副反应较严重。本实
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抗原浓缩论文参考文献
[1].田宇杰,李银,章丽娇,刘青涛,韩凯凯.抗原浓缩技术研究进展[J].黑龙江畜牧兽医.2019
[2].刘国英,郝鹏,陈光达,李志鹏.伪狂犬抗原纯化浓缩工艺研究[J].兽医导刊.2018
[3].汪浩,乔绪稳,陈瑾,李图帅,张元鹏.GEM技术浓缩纯化O型口蹄疫病毒灭活抗原方法的建立[J].南京农业大学学报.2018
[4].崔小兰.鸡新城疫活疫苗（LaSota株）浓缩法纯化抗原生产工艺的建立[D].华南农业大学.2016
[5].汪浩.GEM技术纯化浓缩口蹄疫病毒抗原研究[D].南京农业大学.2016
[6].许倩,石径,黄和平,罗永康.乳酸杆菌粗酶液对浓缩乳蛋白抗原性及过敏原性的影响[J].中国科技论文.2016
[7].汪德生,曹登友,温贵兰,王开功.新城疫血凝抑制浓缩抗原的研制与应用[J].贵州畜牧兽医.2014
[8].马全英,祝秀梅,安芳兰,刘萍,刘学荣.比较大孔树脂与离子交换填料浓缩纯化FMDV抗原的效果[J].安徽农业科学.2014
[9].郭太杰,于向前,刘芳萍.用切向流超滤的方法浓缩IBD琼扩抗原半成品的试验[J].畜牧兽医科技信息.2012
[10].王继华,邵明,施程洪,毕峻龙,尹革芬.抗原浓缩纯化工艺对口蹄疫灭活疫苗免疫效果评价[J].中国兽医学报.2011