纯合体论文-马萌

纯合体论文-马萌

导读:本文包含了纯合体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:旱稻,转基因,矮杆株系,纯合体

纯合体论文文献综述

马萌[1](2019)在《转基因旱稻纯合体筛选及矮杆株系的鉴定》一文中研究指出由于干旱、盐碱等非生物胁迫因子已经成为影响当前农作物种植的重要因素,提高农作物本身的抗逆能力变得尤为重要。作为水稻的变种,旱稻在某些逆境中有着自己独特的优势,因此优化旱稻性状也越来越成为热门的研究方向。本课题是对前期获得的转小立碗藓胚胎发育晚期丰富蛋白家族LEA_3亚家族样蛋白基因(Gene ID:112289949,将该基因命名为LEA8981)的旱稻转基因株系后代进行筛选和分析,主要结果如下:将筛选得到的候选纯合转基因株系进行Southern杂交分析,以鉴定外源基因(LEA8981)拷贝数。获得了2个单拷贝株系、10个2拷贝株系和9个多拷贝株系,并将其中12个含有1-2拷贝数的株系进行了RT-PCR分析,以分析各个低拷贝株系中LEA8981基因的相对表达水平,结果显示,有7个株系中LEA8981的转录水平较高,为后续筛选具有优良抗逆性的旱稻新品系奠定了基础。研究中发现,与野生型相比,单拷贝转基因纯合株系3-28明显矮化,且能稳定遗传。对其进行Tail-PCR检测,证明LEA8981基因已经稳定整合到基因组10号染色体中,并确定了具体的插入位点。为进一步明确该株系发生矮化突变的原因,分析了LEA8981基因插入位点的基因组上、下游10KB范围内的2个基因,分别针对野生型、矮化株系3-28和正常株高株系3-38,对这2个基因进行了定量PCR分析,结果显示,LEA8981基因插入位点的下游基因ncRNA(locus tag:OSNPB_100351457),在3-28株系内的表达量明显高于野生型,推测这很可能是该突变体植株发生矮化的主要原因。此结果为后续研究3-28矮化突变的分子调控机制提供了研究方向。(本文来源于《河北科技大学》期刊2019-06-01)

王月,哈达[2](2018)在《本氏烟草rdr6和dcl2,4突变体纯合体的筛选和鉴定》一文中研究指出RNA干扰(RNA interference,RNAi)是存在于酵母、植物、动物中基因转录后沉默作用(post-transcriptional gene silencing,PTGS)的重要机制之一。一些21~23nt双链RNA(double-strand RNA,dsRNA)导入到宿主体内后,可以阻断宿主体内一些基因的表达,将靶mRNA切割成小的序列,细胞将表现新的表型,这些双链RNA既可以来自体外也可以来自体内。在RNA干扰中RNA依赖型的RNA聚合酶(RNA-directed RNA polymerase,RdRp)和核糖核酸内切酶(Dicer-like,dcl)起着重要作用。本研究采用T-DNA法对DCL2、DCL4、RDR6基因进行插入突变,这些基因与植物的抗病性相关。通过提取本氏烟草rdr6和本氏烟草dcl2,4的基因组DNA以及聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定,现已成功筛选出本氏烟草rdr6和dcl2,4突变体纯合体。通过农杆菌(Agrobacterium)GV3101介导的瞬时表达实验,采用摩擦法将烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)涂抹到野生型烟草NC89、本氏烟草rdr6及本氏烟草dcl2,4的叶片表面,发现DCL2、DCL4、RDR6基因的下调对本氏烟草抗烟草花叶病毒的能力没有影响。(本文来源于《中国植物病理学会2018年学术年会论文集》期刊2018-08-24)

李园园[3](2018)在《8981基因转化旱稻品种纯合体鉴定及分析》一文中研究指出本课题选用8981基因为目的基因,通过农杆菌转化法将目的基因转入植物基因组中,本课题主要进行后期鉴定,利用除草剂、PCR、生理筛选、Southern杂交以及Tail-PCR等技术,最终获得能够稳定遗传的转基因旱稻新品系。具体研究结果有以下几点:(1)候选纯合株系的筛选在试验田采用浓度为0.8mg/mL的草铵膦进行喷洒,筛选出97个具有抗除草剂的抗性株系进行PCR鉴定,筛选出候选纯合株系93个,杂合株系4个。(2)抗性株系鉴定及突变体筛选将筛选出的93个候选纯合株系,通过NaCl胁迫后得到8个比野生型耐盐性强的株系、PEG胁迫后得到7个比野生型抗旱性强的株系、极限实验筛选出高抗除草剂的株系93个以及目前最高的除草剂耐受浓度8mg/mL;并获得了具有特殊农艺性状的矮杆株系6个以及籽粒饱满的株系33个。(3)Southern杂交分析本实验采用地高辛试剂盒进行Southern杂交,从25个株系中筛选出了能够稳定遗传的单拷贝转基因株系2个;二拷贝转基因株系12个;多拷贝转基因株系11个。(4)TAIL-PCR分析目的基因的插入位点将得到的能够稳定遗传的2个单拷贝转基因株系2-9-5、2-19-5分别进行TAIL-PCR鉴定,确定了株系2-9-5目的基因的插入位点在10号染色体Os10g0351500基因中,此基因编码Tyrosine protein;株系2-19-5目的基因的插入位点在1号染色体Os01g0884300基因中,此基因编码NAW protein。(本文来源于《河北科技大学》期刊2018-06-01)

刘琦[4](2018)在《转DEHY基因旱稻纯合体鉴定及分析》一文中研究指出水稻是全球重要的粮食作物,在我国南北各地广泛种植。干旱、盐碱是影响水稻产量与质量的重要因素,因此水稻节水抗旱性方面的研究就显得十分重要。旱稻作为水稻的变异型,它生态适应性极强。但由于旱稻自身存在某些不足还有环境恶化都导致其产量与质量受到限制。所以,优化旱稻性状成为了重要的研究方向。本课题在前期利用农杆菌侵染法,把胚胎发生晚期丰富蛋白(Late Embryogenesis Abundant Proteins,LEA)家族基因DEHY转入鲲旱1号、旱稻2号和旱糯3号中,对获得的转化株系进行后代鉴定分析及筛选。在前期实验获得的98个转基因株系中,通过抗除草剂分析和PCR鉴定得到96个转DEHY基因的纯合候选株系和2个杂合株系;抗逆性鉴定表明,转基因材料的抗旱、耐盐性较野生型均有提高。通过除草剂极限试验对96株纯合候选株系进行鉴定,得到最高耐受浓度为8mg/mL,是常规实验的10倍。通过田间突变体筛选,成功筛选出籽粒饱满、大穗等34个转基因突变体。通过Southern杂交鉴定,从纯合候选株系中选出了1个单拷贝株系,2个双拷贝株系和1个叁拷贝株系;对单拷贝株系进行TAIL-PCR鉴定,结果表明外源目的基因DEHY成功插入到旱稻基因组4号染色体中。最终从转化植株中筛选出具有稳定遗传性状的单拷贝纯合株系。(本文来源于《河北科技大学》期刊2018-06-01)

张斌,何福林[5](2017)在《叁引物法鉴定转基因水稻U5纯合体》一文中研究指出转基因水稻纯合体性状稳定,在水稻基因组功能研究中具有重要的作用。本研究利用TAIL-PCR法获得了T-DNA旁侧序列,序列比对显示插入位点在水稻第8号染色体的7 821 534~7 821 535之间;通过扩增旁侧序列,建立了转基因水稻U5的事件特异性检测方法;以旁侧序列为基础,还建立了能快速、准确鉴定U5纯合株系的叁引物PCR检测法。这些纯合体的鉴定,缩短了获得U5转基因纯合体的时间,对加快水稻Os PUT1基因的功能研究和育种进程具有实用价值。(本文来源于《分子植物育种》期刊2017年11期)

田艳秋[6](2016)在《opaque-2基因对多隐纯合体甜玉米主要品质性状的影响及配合力研究》一文中研究指出选用3个含有opaque-2 (简称o2)基因的多隐性纯合体甜玉米自交系和3个不含opaque-2基因的多隐纯合体甜玉米自交系为亲本,按Grififing方法Ⅳ,用6个自交系组配成15个杂交组合,观测各杂交组合的主要产量性状和品质性状,并对这些性状进行配合力分析,研究opaque-2基因对多隐纯合体甜玉米主要品质性状的影响。主要研究结果如下:1.主要性状的表现从抽雄期、散粉期和吐丝期3个有关生育期的性状来看,两个亲本都导入o2基因的杂交组合生育期延长,单个亲本导入o2基因的杂交组合生育期缩短。株高方面,单个亲本导入o2基因或两个亲本都导入o2基因的杂交组合比双亲均没有导入o2基因的杂交组合的株高、穗位高降低,表明o2基因导入有降低植株高度的效应。产量性状方面,单个亲本导入o2基因可以提高鲜穗产量,双亲均导入o2基因则有降低鲜穗产量的趋势。3类杂交组合的赖氨酸含量没有显着的差异。o2基因的导入会降低必需氨基酸含量、非必需氨基酸含量和氨基酸总量。表明对于胚乳含量极少的玉米种质通过导入o2基因提高赖氨酸含量的效应并不明显。o2基因的导入有增加乳熟期可溶性总糖含量的趋势。2.配合力分析必需氨基酸含量、非必需氨基酸含量、氨基酸总量和穗行数4个性状的Gca方差显着而Sca方差不显着,表明主要受基因加性效应的影响。抽雄期、散粉期、吐丝期、株高、穗位高、行粒数、穗长、秃尖长、鲜苞重、鲜穗重和可溶性总糖的Gca和Sca方差均达到显着水平,表明受加性效应和非加性效应共同影响。性状测定值的大小与Gca和Sca效应值的大小并不完全一致,而与Tca效应值基本一致。3.遗传参数估计株高、穗位高、必需氨基酸含量、非必需氨基酸含量和氨基酸总量的加性方差大于显性方差,表明主要受加性效应的控制,这些性状狭义遗传率和广义遗传率均高于50%,可以进行早代选择。抽雄期、散粉期、吐丝期、穗长、秃尖长、鲜苞重、鲜穗重、行粒数、穗行数和可溶性总糖的加性方差小于显性方差,表明遗传受加性效应和非加性效应共同影响,非加性效应占主导地位。这些性状狭义遗传率小于50%,广义遗传率(除穗行数外)均较高,有望组配出较强杂种优势的组合。4.主要性状的相关分析鲜苞重与株高、穗长和行粒数之间呈显着的正相关,与吐丝期呈显着负相关,而与主要的品质性状之间相关均不显着。可溶性糖和氨基酸含量之间的相关未达到显着水平。(本文来源于《广西大学》期刊2016-06-01)

来益同,沈华,张奕祥,吴岷[7](2016)在《2个纯合体色品系大瓶螺的几何形态测量学研究》一文中研究指出为了探究大瓶螺(Pomacea canaliculata)体色、性别与贝壳形态之间的关系,运用几何形态测量学方法,对来自于人工繁育的F5纯合体色品系37只深褐色个体(26♀♀,11♂♂)、34只黄色个体(14♀♀,20♂♂)贝壳的正壳口观、壳口观、壳顶观进行地标标点,获得贝壳的形态信息。运用主成分分析和典型变量分析,检测出不同体色、性别个体间的差异。通过各个标点对于相对扭曲的贡献率,探究其形态变化趋势。主成分分析结果表明,不同体色个体的贝壳形态存在着明显差异,正壳口观较壳口观及壳顶观更能体现贝壳差异;而不同体色的贝壳差异均不及相同体色不同性别个体间贝壳的差异。典型变量分析结果通过普氏距离和马氏距离得以反映,所有组别间的马氏距离均有显着性差异,而普氏距离仅在壳顶观的深褐色和黄色雌螺间以及壳顶观的深褐色和黄色雄螺间无显着差异;对正壳口观各标点对相对扭曲的贡献率分析表明,贝壳形态的变化主要集中在壳口上半部,支持不同体色和性别的大瓶螺在贝壳形态上存在显着差异的结论。发掘大瓶螺中所存在的这些差异对探究不同体色个体的适应性差异提供了重要参考,也表明几何形态测量学可以作为贝壳形态研究的有效方法应用于贝类形态学和种群分析等研究中。(本文来源于《水生态学杂志》期刊2016年02期)

张丽,刘丽丽,梁晓声,王海英[8](2015)在《实时定量PCR鉴定转基因作物纯合体》一文中研究指出以水稻内标准基因磷脂酶D基因(phospholipase D,PLD)和转基因水稻TT51-1特异性旁侧序列为检测靶标,对单株转基因水稻的种子播种后长出的单株进行了荧光定量PCR,以其内标准基因和旁侧序列Ct值的差值判断了植株的纯合体,并用标准曲线计算了转基因含量,证实了此法的可靠性,说明此法用于鉴定植株的纯合体简便准确.(本文来源于《中南民族大学学报(自然科学版)》期刊2015年01期)

徐荣荣[9](2014)在《白黄侧耳深褐色纯合体创制及评价初探》一文中研究指出白黄侧耳是重要的食用菌商业品种。食用菌颜色性状是重要的商品性状,研究证明白黄侧耳颜色性状属于数量性状由多对基因控制,本实验以保藏在国家食用菌标准菌株库的白黄侧耳菌株CCMSSC00406为亲本,通过稀释分离单孢法获得单核菌株34个,单核菌株配对得到125个双核体。栽培出菇,使用分光测色计对子实体颜色进行测量。结合测量数据及观察记录从自交一代的群体中筛选出9株深褐色菌株,按照同样的方法,单核菌株配对构建自交F2代。测量F2代颜色并对测量数据做进一步统计分析。结果得到了28株颜色性状不分离的深褐色菌株。从群体中选取42株菌株进行SSR遗传多样性分析与拮抗验证,结果得出406-133与406-99、406-133-8与406-99-8、406-77-12与406-77-6、406-133-2与406-99-12之间没有拮抗现象,遗传相似性很高,在聚类分析中归为一类,可以认为互为同一个菌株。对35个菌株进行了室内黄斑病抗性分析,筛选抗性菌株。将菌丝与病原菌进行对抗培养,以拮抗程度为评价参数,评价供试菌株的抗性水平。结果35个菌株的抗性水平具有显着差异,菌株406-100-9、406-100-10、406-133、406-133-13、406-133-17抗性最强。深褐色菌株抗性大于浅褐色和蓝褐色菌株。(本文来源于《吉林农业大学》期刊2014-05-01)

张焕春,汪小福,李玥莹,陈笑芸,缪青梅[10](2012)在《转Cry1Ab水稻纯合体快速准确的PCR鉴定方法》一文中研究指出转Cry1Ab基因水稻Bt22为一种新型的转基因抗虫水稻,本研究介绍了一种筛选纯合转基因植株Bt22的PCR方法。根据外源序列在Bt22中插入位点的两侧旁邻序列设计引物,建立了转基因抗虫水稻Bt22品系特异的定性PCR检测方法,该方法灵敏度可达0.01 ng,在此基础上组合各引物建立了筛选转基因水稻Bt22纯合体的多重PCR方法,结果表明该方法简单高效,便于操作。(本文来源于《浙江农业学报》期刊2012年04期)

纯合体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是存在于酵母、植物、动物中基因转录后沉默作用(post-transcriptional gene silencing,PTGS)的重要机制之一。一些21~23nt双链RNA(double-strand RNA,dsRNA)导入到宿主体内后,可以阻断宿主体内一些基因的表达,将靶mRNA切割成小的序列,细胞将表现新的表型,这些双链RNA既可以来自体外也可以来自体内。在RNA干扰中RNA依赖型的RNA聚合酶(RNA-directed RNA polymerase,RdRp)和核糖核酸内切酶(Dicer-like,dcl)起着重要作用。本研究采用T-DNA法对DCL2、DCL4、RDR6基因进行插入突变,这些基因与植物的抗病性相关。通过提取本氏烟草rdr6和本氏烟草dcl2,4的基因组DNA以及聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定,现已成功筛选出本氏烟草rdr6和dcl2,4突变体纯合体。通过农杆菌(Agrobacterium)GV3101介导的瞬时表达实验,采用摩擦法将烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)涂抹到野生型烟草NC89、本氏烟草rdr6及本氏烟草dcl2,4的叶片表面,发现DCL2、DCL4、RDR6基因的下调对本氏烟草抗烟草花叶病毒的能力没有影响。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

纯合体论文参考文献

[1].马萌.转基因旱稻纯合体筛选及矮杆株系的鉴定[D].河北科技大学.2019

[2].王月,哈达.本氏烟草rdr6和dcl2,4突变体纯合体的筛选和鉴定[C].中国植物病理学会2018年学术年会论文集.2018

[3].李园园.8981基因转化旱稻品种纯合体鉴定及分析[D].河北科技大学.2018

[4].刘琦.转DEHY基因旱稻纯合体鉴定及分析[D].河北科技大学.2018

[5].张斌,何福林.叁引物法鉴定转基因水稻U5纯合体[J].分子植物育种.2017

[6].田艳秋.opaque-2基因对多隐纯合体甜玉米主要品质性状的影响及配合力研究[D].广西大学.2016

[7].来益同,沈华,张奕祥,吴岷.2个纯合体色品系大瓶螺的几何形态测量学研究[J].水生态学杂志.2016

[8].张丽,刘丽丽,梁晓声,王海英.实时定量PCR鉴定转基因作物纯合体[J].中南民族大学学报(自然科学版).2015

[9].徐荣荣.白黄侧耳深褐色纯合体创制及评价初探[D].吉林农业大学.2014

[10].张焕春,汪小福,李玥莹,陈笑芸,缪青梅.转Cry1Ab水稻纯合体快速准确的PCR鉴定方法[J].浙江农业学报.2012

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