高翔(青海大学医学院810001)
【摘要】目的观察红景天苷对小鼠免疫功能的影响。方法以红景天苷低、中、高浓度给小鼠连续灌胃30d后，处死测定小鼠体重、睥脏及胸腺重量，计算脾指数与胸腺指数，观察小鼠免疫器官重量的变化；采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验测试红景天苷对小鼠非特异性免疫的影响；采用溶血空斑形成实验测试红景天苷对小鼠体液免疫的影响。结果红景天苷能够增加小鼠免疫器官重量，提高巨噬细胞吞噬功能及增加B淋巴细胞分化成浆细胞产生抗体能力。结论红景天苷具有调节免疫功能，对非特异性免疫和体液免疫均有一定的增强作用。
【关键词】红景天苷小鼠免疫巨噬细胞
红景天为景天科景天属(RhodiolaL)多年生草本或亚灌木植物，主要分布在北半球的喜马拉雅山区、亚洲西北部和北美洲，能在恶劣而多变的自然环境中生长，具有极强的环境适应能力和生命力。我国应用红景天很早，在藏医《四部医典》和《本草纲目》均有记载。目前从红景天植物中先后分离出40多种化学物质，其主要化学成分为红景天苷(salidroside)、苷元酪醇(tyroso1)及超氧化物歧化酶(SOD)等生物活性物质，此外还含有甾醇、酚性化合物、黄酮、水溶性挥发油等[1]。药用植物红景天苷具有抗缺氧、抗自由基、调节神经内分泌免疫网络的作用，临床运用在抗缺氧方面已取得满意效果。但对其影响免疫功能的研究尚待研究。本实验通过小鼠观察红景天苷对正常小鼠免疫功能的影响，旨在探讨红景天苷对机体的免疫调节作用。
1材料与方法
1.1实验动物与试剂昆明(KM)小鼠，体重(20±2g)，6～8周龄，雌雄各半(兰州大学动物中心提供)；红景天苷由南京景竹生物科技有限公司生产,物理性质为棕褐色粉末，含量为10%；溶剂为蒸馏水；瑞氏染液(弘慈医疗器械有限公司生产，批号20080324)；UV-2000分光光度计(尤尼柯仪器有限公司生产)。
1.2方法
1.2.1动物模型制备红景天苷胶囊，人体推荐剂量为2.7g/d。取40只小鼠，随机分成4组，每组l0只。实验动物适应性喂养3d后，按照体重随机分为空白对照组和3个实验组，剂量分别为0.45g/kg(低浓度组)、0.90g/kg（中浓度组）、1.35g/kg（高浓度组），即人体推荐剂量的10倍、20倍、30倍[2]。各组动物的灌胃体积均为0.1mL/10g，对照组以蒸馏水灌胃，每日1次，持续30d。第31天，进行以下实验：
1.2.2红景天苷对小鼠免疫器官的影响第31天，将小鼠处死，称重，取脾脏、胸腺称重，计算脾(胸腺)指数，脾(胸腺)指数=脾(胸腺)重量(mg)/体重(g)，将正常对照组与红景天苷组进行比较，观察各项指标。
1.2.3小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验试验前一天给小鼠腹腔注射2%糖原水溶液11.0ml，使巨噬细胞腹膜血管渗到腹腔。第31天，每组小鼠均腹腔注射鸡红细胞液1ml。轻柔腹部。45min后脱颈椎处死小鼠。死亡后立即剖开腹腔，用滴管吸出腹腔液滴加在载玻片上，每片约0.2ml。将载玻片放入37℃温箱中孵育30min，生理盐水冲去附着的细胞，用瑞氏染液染色，水冲洗晾干。显微镜下观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬情况.并计算吞噬百分率和吞噬指数。吞噬百分率=吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100％；吞噬指数=巨噬细胞吞噬鸡红细胞的总数/巨噬细胞总数。
1.2.4红景天苷致小鼠脾细胞溶血空斑形成实验小鼠处死后，解剖取出脾脏，每两个小鼠脾脏放在一起，用匀浆器匀浆，并调整脾细胞混悬液中脾细胞数为5×109/L。取脾细胞混悬液0.5m1混匀。另设不加补体的空白管，37℃孵育1h，3500r/min，离心10min，取上清液于UV-2000型分光光度计413nm比色，检测溶血空斑形成情况。
1.2.5统计学分析计量资料用(-X±S)表示，组间比较采用t检验。
2结果
2.1红景天苷对小鼠免疫器官的影响见表1红景天苷低、中浓度组脾及胸腺指数与正常对照组比均具有显著性差异(P<0.05)，高浓度组脾及胸腺指数与正常对照组比具有显著性差异(P<0.01)。
表1红景天苷对小鼠脾指数、胸腺指数的影响（-X±S,n=10）
注：*P<0.05，**P<0.01与正常对照组比较。
2.2红景天苷对小鼠巨噬细胞功能的影响见表2。红景天苷低、中浓度组吞噬百分率及吞噬指数与正常对照组比均具有显著性差异(P<0.05)，高浓度组吞噬百分率及吞噬指数与正常对照组比具有显著性差异(P<0.01)。
表2红景天苷对小鼠巨噬细胞功能的影响(-X±S,n=10)
注：*P<0.05，**P<0.01与正常对照组比较。
2.3红景天苷致小鼠脾细胞溶血空斑形成的影响见表3。红景天苷低、中浓度组吸光度值与正常对照组比具有显著性差异(P<0.05)，高浓度组吸光度值与正常对照组比均具有极显著性差异(P<0.01)。
表3红景天苷致小鼠脾细胞溶血空斑形成实验(-X±S,n=10)
注：*P<0.05，**P<0.01与正常对照组比较。
3讨论
本实验研究表明，红景天苷具有显著的免疫增强作用，可明显促进小鼠脾脏及胸腺细胞增殖，增加小鼠抗体生成器官脾脏及胸腺的重量；能显著增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能，提高巨噬细胞的吞噬百分率；能够显著提高正常小鼠SRBC免疫后脾细胞溶血空斑数量[3]。
近年来各国学者的研究发现，大多数癌症患者都存在免疫功能低下或受抑制的情况，这使进入血液循环中的肿瘤细胞能够逃避机体的免疫监视而在体内播散生长，即发生肿瘤转移[4]。另，久居高原人群有食用红景天之传统，具有一定增强机体免疫力作用[5-6]。因此提高机体的免疫功能，就加强机体免疫系统的免疫防御和免疫监视作用，及时清除机体“异己”物质和杀伤可能转移的肿瘤细胞，预防疾病的发生。根据本实验的结果，红景天苷可以增强机体的非特异性免疫功能和细胞免疫功能。因此可不同程度的增强机体的免疫功能。
参考文献
[1]宋月英，马玉珍，韩慧文，等.红景天属植物化学成分及药理作用的研究进展.中草药，2004；35(2)：235-237.
[2]李岩等.红景天胶囊对小鼠抗疲劳的效应[J].川北医学院学报，2012，27(6)：531-532.
[3]邱培勇.黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响[J].新乡医学院学报，2006，23(6)：585-586.
[4]宋月英，齐刚，李亚萍，等.红景天苷对全脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织肿瘤坏死因子表达的影响.中草药，2006；6(37)：6814科学技术与工程11卷907-908.
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[6]DarbinyanV，KteyanA，PanossianA，eta1.RhodiolaroaeainstressinducedfatiglleadoubleblindCR0SS-0verstudyofastandardizedextractSHR5witharepeatedlowdoseregimenoilthementalperformanceofhealthyphysiciansduringnightduty.Phytomedieine，2000；7(5)：365-371.