导读:本文包含了非磷酸化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:肾功能不全,磷酸化,Gla,动脉僵硬度
非磷酸化论文文献综述
Puzantian,H,Akers,SR,Oldland,G,Javaid,K,Miller,R[1](2019)在《循环非磷酸化-未羧化的基质Gla蛋白与肾功能不全和动脉僵硬度相关》一文中研究指出Am J Hypertens,2018,31(9):988-994.大动脉僵硬程度在晚期慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)中加剧,但可能在早期CKD就已逐渐发展了。最新的动物模型显示,在早期CKD中已有维生素K代谢的内在异常,但人类早期CKD与血管维生素K缺乏症是否有关还是未知的。方法:招募无心力衰竭但肾功能不同的137名成人为研究对象,其中肾功能正常(本文来源于《中华高血压杂志》期刊2019年06期)
王佳[2](2018)在《改造木糖非磷酸化代谢途径及莽草酸途径生物合成高附加值产物》一文中研究指出随着石油资源的紧缺和环境的不断恶化,利用可再生资源构建微生物细胞工厂生产化学品、燃料和药品成为了研究重点。近年来,随着代谢工程与合成生物学的发展,实现了多种天然产物的生物合成。但是,由于缺乏已知的代谢途径或相关酶,且很多非天然产物没有相关的代谢途径,导致许多高附加值产物无法实现生物合成。为了解决这一问题,本研究利用酶的混杂性或改造已有酶的催化性质,从而拓宽酶的底物谱并构建人工代谢通路,实现了 6种高附加值化合物的生物合成。木糖作为木质纤维素中的第二大糖,在微生物中的代谢效率却远远低于葡萄糖。为了提高大肠杆菌的木糖利用效率,我们研究了木糖非磷酸化代谢途径中不同来源的相关酶,优化了木糖非磷酸化途径在大肠杆菌中的表达。并以此为基础,利用酶的混杂性,筛选途径中的关键酶,成功在大肠杆菌中鉴定了新的3,4-二羟基丁醛脱氢酶,从而构建了一条全新的3,4-二羟基丁酸生物合成途径,通过优化代谢网络,3,4-二羟基丁酸的摇瓶产量达到1.27 g/L,是目前已报导的最高产量。接着,我们利用蛋白质工程方法,理性设计并改造丙二醇脱水酶,通过解除底物抑制、增大催化口袋和优化金属离子催化距离将一个天然不催化1,2,4-丁叁醇的酶改造为可利用1,2,4-丁叁醇生产1,4-丁二醇的酶。在此基础上,优化了由木糖合成1,2,4-丁叁醇的途径并与改造后的丙二醇脱水酶偶联实现了 1,4-丁二醇从头合成代谢新途径的构建,摇瓶产量达到209 mg/L。由于目前木糖生产1,4-丁二醇过程中最主要的副产物是1,2,4-丁叁醇,因此,本研究不仅成功得到了一个天然不存在的新酶,同时还实现了副产物向目标产品的二次转化。在上述研究基础上,我们评估了木糖叁种代谢途径的碳利用率,首次发现了,木糖的磷酸化途径和非磷酸化途径在生产TCA循环衍生物过程中存在协同效应。以木糖生产戊二酸为例,当两条途径协同生产时,戊二酸的产量为602 mg/L,高于单独使用任意一条途径时的产量(104或209 mg/L),甚至高于单独利用葡萄糖生产戊二酸的产量(420 mg/L)。本研究不仅实现了利用酶的混杂性和蛋白质工程策略生产没有代谢途径的非天然产物,还展示了一种木糖高效利用的新策略。另外,我们还利用酶的混杂性首次实现了叁种未知天然合成途径的重要酚类化合物(焦性没食子酸、水杨醇和龙胆醇)的生物全合成。酚类化合物是一类芳香族化合物,具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗癌、防紫外和防腐等生物活性,在医药工业上具有十分重要的价值。然而,这类化合物在自然界中的含量非常低,因此限制了它们的大规模商业化应用。本研究首次探索并扩展了存在于斯氏假单胞菌中的苯酚羟化酶PH的底物谱并揭示了该菌中的小蛋白PHQ可以增强PH的催化活性;在此基础上,我们将儿茶酚的生物合成途径与PH催化的羟基化反应相偶联,构建了一条全新的焦性没食子酸生产途径,摇瓶产量达到76.7mg/L。接着,我们根据底物和产物的结构类似性,利用生物勘探法和酶的混杂性,在一系列加氧酶和羟化酶中鉴定和表征了一种十分高效的2,3-二羟基苯甲酸单加氧酶,首次实现了 2,3-二羟基苯甲酸向焦性没食子酸的转化,并构建了一条基于水杨酸单加氧酶的焦性没食子酸的生物合成新途径。通过增加莽草酸途径碳代谢流、模块优化合成途径和缓解产物的自氧化等策略进行优化,焦性没食子酸的摇瓶产量达到1.04 g/L。为了解决酚醇类物质的生物合成问题,我们通过研究水杨酸-5-羟基化酶和羧酸还原酶CAR的混杂性和底物谱,首次实现了由水杨酸合成龙胆酸并由水杨酸和龙胆酸分别合成水杨醇和龙胆醇。再在此基础上构建并优化了水杨醇和龙胆醇的从头合成途径,最终水杨醇和龙胆醇的摇瓶产量分别达到594.4 mg/L和30.1 mg/L。本研究工作不仅实现了几种酚类化合物的首次生物全合成,还展示了如何利用酶的混杂性构建非天然生物合成途径生产高附加值产物。(本文来源于《北京化工大学》期刊2018-06-01)
季泽叶[3](2015)在《宫颈阴道分泌物非磷酸化胰岛素样生长因子结合蛋白-1与残余羊水指数监测在疑似未足月胎膜早破中的价值》一文中研究指出临产前的胎膜破裂称为胎膜早破(PROM),孕龄<37孕周的PROM称为未足月胎膜早破(PPROM),可并发宫腔感染,导致早产、围生儿死亡等不良结局,是母儿患病和死亡的重要原因之一[1]。预见PPROM的危害,重视其高危因素,积极采取临床干预措施可有效降低其引发的并发症[2]。PPROM发生后处理不当可危及母儿生命,给予假阳性病例不必要的干预,可导致早产;让假(本文来源于《实用临床医药杂志》期刊2015年13期)
沈仁泽,薛延香,刘影,詹雪灵,晋冰玉[4](2014)在《乳铁蛋白对脂多糖作用后非磷酸化NF-kB的影响》一文中研究指出目的:观察乳铁蛋白(LF)对经脂多糖(LPS)刺激的人牙周膜细胞(hPDLCs)非磷酸化NF-kB的影响。方法:以改良组织块法体外获得人牙周膜细胞,取生长良好的第叁代细胞随机分为叁组:空白对照组,LPS组和LF+LPS刺激组。空白对照组不作处理;LPS组:加入LP刺激2小时;LF+LPS刺激组:加入LF刺激2小时后加入LP刺激2小时,叁组细胞进行免疫荧光染色。按照上诉方法刺激24小时后,进行qRT-PCR检测非磷酸化NF-kB表达。结果:qRT-PCR结果显示叁组非磷酸化NF-kB表达无差异;免疫荧光显示:LF明显抑制LPS诱导的NF-kB核转移。结论:LF可以抑制LPS诱导的NF-kB核转移,但非磷酸化NF-kB在脂多糖与乳铁蛋白与牙周膜细胞反应中作用甚小。(本文来源于《2014年第九次全国牙体牙髓病学学术会议论文汇编》期刊2014-09-18)
贺丹[5](2014)在《高糖诱导HK-2细胞非磷酸化β-catenin表达及虫草菌液对其作用》一文中研究指出研究背景及目的:糖尿病肾病(DN)是终末期肾病的主要原因之一,其肾间质病变与远期预后密切相关。研究表明肾小管上皮细胞转分化(EMT)参与肾间质纤维化进展。β-catenin是一种多功能蛋白质,除了与E钙粘蛋白(E-cad)连接介导细胞粘附外,还参与了多条EMT通路的信号转导,该功能与其代谢过程有关:β-catenin在胞质中与多种蛋白共同组成Axin复合物,随后被CK1、GSK3磷酸化,进而被泛素-蛋白酶系统降解。13-catenin磷酸化与否决定了其是否被降解,非磷酸化β-catenin是其活化形式,不能被泛素-蛋白酶降解系统识别,因而在胞质内累积并转移入核,与核内转录因子TCF/LEF结合,激活靶基因转录。研究表明β-catenin信号在糖尿病肾病EMT中是活化的,但既往研究多通过观察β-catenin表达部位变化或蛋白总含量及胞核含量变化反映其是否活化,而直接对非磷酸化β-catenin(活化形式)研究较少,在糖尿病肾病中也未见报道。冬虫夏草是我国名贵中药材,广泛用于肾脏疾病的治疗,对糖尿病肾病有一定疗效。近期研究表明其肾保护作用涉及抑制EMT,能改善高糖诱导的肾小管上皮细胞自身表型丢失、间质细胞表型增加,降低尿蛋白排泄、减少肾间质胶原沉积及减轻肾损伤,但具体机制尚不清楚。本实验将观察高糖环境下人近端肾小管上皮细胞(HK-2)非磷酸化β-catenin表达,探讨β-catenin活化与EMT的关系。同时采用虫草菌液进行干预,观察其对上述过程的影响,探索其肾保护作用的可能新机制。方法:应用细胞培养技术,分下列六组培养HK-2细胞:正常对照组(5.5mM葡萄糖DMEM/F12培养液),高糖组(30mM葡萄糖DMEM/F12培养液),甘露醇组(5.5mM葡萄糖DMEM/F12培养液+甘露醇24.5mM),高糖+5μg/mL虫草菌液干预组(HG+C5组,5.5mM葡萄糖DMEM/F12培养液+5μg/mL虫草菌液),高糖+10μg/mL虫草菌液干预组(HG+C10组,5.5mM葡萄糖DMEM/F12培养液+10μg/mL虫草菌液),高糖+20μg/mL虫草菌液干预组(HG+C20组,5.5mM葡萄糖DMEM/F12培养液+20μg/mL虫草菌液)。培养48h后收集各组细胞,Western Blot检测E-cad、α-SMA、非磷酸化β-catenin的蛋白表达。结果:高糖组与正常组及甘露醇组比较,E-cad表达减少(P<0.01),α-SMA表达增加(P<0.01),同时非磷酸化β-catenin表达增加(P<0.01)。虫草菌液干预后,与高糖组比较,HG+C5组E-cad表达无明显变化(P>0.05), HG+C10、HG+C20组E-cad表达上调(P<0.01),虫草菌液干预的叁组α-SMA表达均下调(P<0.01);虫草菌液干预的叁组非磷酸化β-catenin表达较高糖组均下调(P<0.01),且随虫草菌液浓度增大其下调幅度增大(P<0.01)。结论:1、高糖环境下HK-2细胞E-cad表达减少,α-SMA表达增加,同时非磷酸化β-catenin(即活化的β-catenin)表达增加,表明高糖可诱导HK-2细胞发生上皮间质转分化(EMT), β-catenin可能参与并促进此过程。2、虫草菌液能上调高糖环境下HK-2细胞E-cad表达,下调α-SMA表达,同时非磷酸化β-catenin表达下调,表明虫草菌液具有阻抑肾小管上皮细胞EMT的作用,抑带β-catenin活化可能是其机制之一。(本文来源于《中南大学》期刊2014-05-01)
宋扬,吴荣[6](2014)在《PPARγ磷酸化与非磷酸化的研究进展》一文中研究指出过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)是一种配体依赖性核转录因子,具有调控细胞分化、脂肪代谢、糖代谢及炎症等多种生物学功能。已知PPARγ有多种转录后修饰,磷酸化修饰是PPARγ第一个被鉴定的翻译后修饰方式,目前研究较多的是Ser112位点的丝裂原激活的蛋白激酶途径及Ser273位点的细胞周期素依赖的蛋白激酶5途径。PPARγ的异源二聚体结合到靶基因启动子区的特异反应元件过氧化物酶体增殖反应元件上调控靶基因的转录,PPARγ还参与炎性反应应答。PPARγ与糖尿病、肿瘤等疾病也有密切的联系。(本文来源于《医学综述》期刊2014年03期)
黄汉清,朱立新,李留洋,钱俊,王坤[7](2013)在《血清非磷酸化MGP蛋白(dpMGP)对强直性脊柱炎的诊断意义》一文中研究指出目的研究强直性脊柱炎(AS)患者血清dpMGP浓度水平及其诊断价值,探索dpMGP与AS炎症与骨化病程的关系。方法将82例AS病人及75例健康对照纳入该横断性研究。评估AS病人各项临床指标(年龄、性别、病程、疾病活动度)以及反映骨代谢或炎症的生物标记(血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(BALP))。疾病活动度依据BASDAI评分标准。利用竞争性ELISA法检测AS病人dpMGP血清浓度。将上述指标与对照组进行比较性分析。利用ROC曲线回归分析dpMGP作为AS诊断指标的价值。通过运用统计学相关分析的方法,研究dpMGP及AS炎症与骨重建病程关联。结果 AS患者dpMGP浓度(mean(SD),9.2(2)nmol/l)低于对照组(mean(SD),13.7(4.5)),P<0.01。同样结果见于20-40岁(mean(SD),9.6(2)nmol/l)及40-60岁(mean(SD),9(2.1)nmol/l)年龄组。两年龄组dpMGP浓度比较差异并不明显。ROC曲线回归分析显示dpMGP=11.5nmol/l(截断点)时诊断特异性及敏感性分别为83%、88%,youden指数为0.56,AUC为0.81,其诊断效力可为中级。炎症相关生物标记ESR、CRP,以及骨重建相关生物标志BALP、OC与dpMGP关联性并不明显。结论 AS病人血清dpMGP可作为一种新的血清诊断指标及反映骨化进展的生物标志。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2013年06期)
黄汉清[8](2013)在《非磷酸化MGP蛋白在强直性脊柱炎患者血清中的表达及其与骨重建的相关性研究》一文中研究指出背景:强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS),是一种以附着点炎及韧带骨赘形成为主要病理特征的慢性进展性炎性疾病,该疾病最终导致进展性脊柱强直及活动受限。对于许多患者,服用NSAIDS可以缓解其疼痛症状,即使是NSAIDS不敏感患者,也大部分可以通过接受抗肿瘤坏死因子疗法明显改善疼痛症状及脊柱活动度。但是TNF拮抗疗法并不能阻止强直性脊柱炎患者骨结构的破坏包括骨侵蚀及骨赘形成。目前的研究提出假说认为早期诊断和治疗可能可以避免最终的骨化进展。但是诊断强直性脊柱炎主要依据1984年修改的纽约标准,故诊断需要基于临床症状体征的观察以及X片显示的骶髂关节骨结构的改变。但是出现X片显示的骶髂关节骨结构的改变需要等待若干年时间。目前发病至确诊平均约需6~10.5年,多数患者确诊时,骶髂关节、脊柱已出现骨化、强直,失去了早期治疗的机会。生物标志具有检测的便利性,寻找一种新的强直性脊柱炎疾病的生物标志,以便于强直性脊柱炎的早期诊断,确诊,监测强直性脊柱炎病理进展,评估治疗效果已经成为目前强直性脊柱炎研究新方向。为了量化强直性脊柱炎病理进程,影像评分是一种半定量的方法。传统的X片仍然是评价骨组织改变的金标准。目前常用的X片影像评分系统有BASRI (the Bath Ankylosing Spondylitis Radiology Index)、SASSS (the Stoke Ankylosing Spondylitis Spine Score)、mSASSS (the modified SASSS), mSASSS被证明在记录强直性脊柱炎X影像进展中优于前叁种评分系统。但是mSASSS需同时评价患者的颈椎、胸椎、腰椎,而实际临床工作中很大比例患者影像资料并不够如此齐全。SASSS评分对于影像资料要求最少,较易开展。基质Gla蛋白(Matrix C-carboxyglutamic acid Protein;Matrix Gla Protein, MGP),是一种分子量为14 kD的低分子胞外基质蛋白,因含有5个可羧化γ-谷氨酸残基而得名,另外还带有多个可磷酸化的丝氨酸残基。MGP主要是由软骨细胞以及血管平滑肌细胞分泌,被证明可以抑制血管钙化及软骨成骨分化,但是仍然不知道每种组织对MGP血清MGP浓度的贡献程度。MGP的羧化或者磷酸化状态使得血液中存在多种MGP分子形式,包括磷酸化MGP[pMGP],非磷酸化MGP[dpMGP],羧化MGP[cMGP]或者非羧化MGP [ucMGP])。在局部组织中这些分子与钙的亲和力,以及对于钙化的抑制作用可能并不完全相同。同时MGP的羧化需要γ羧化酶的辅助,并需要维生素K作为辅助因子,具有维生素K依赖性。因此这些分子的在血液及局部组织中的浓度可以反映组织钙化情况以及系统或者局部维生素K的供应水平。Cranenburg E C等建立了针对ucMG以及dp-MGP、dp-ucMGP的ELISA检测方法,并发现心血管钙化越严重的人群如肾透析病人、冠脉成形、动脉瓣狭窄病人,ucMGP越低。目前尚无强直性脊柱炎病人血清或局部组织MGP蛋白水平的大样本临床研究,但有研究发现关节炎病人群体(包括5个强直性脊柱炎病人)总体表现出关节液与血液中ucMGP的分布异常。强直性脊柱炎骨赘形成主要以软骨化骨的方式进行。目前对MGP蛋白的研究已经揭示MGP蛋白对于异位钙化以及软骨化骨的负性调节作用。因为MGP蛋白的协调表达对于软骨化骨过程中软骨细胞的分化成熟以及矿物质沉积非常重要。MGP可以与羟基磷灰石的晶核结合重而阻止晶体生长。另外,Bostrom等研究发现,MGP与骨形成蛋白-2(BMP-2)结合形成复合物,抑制其生物活性,调节软骨细胞成熟及成骨分化。我们推测MGP可能参与强直性脊柱炎病理过程,尤其是骨重建病程。因此监测强直性脊柱炎病人dpMGP的血清浓度水平,并研究其与强直性脊柱炎影像学破坏,骨重建过程,炎症的关系,具有研究的必要性。目的:研究强直性脊柱炎(AS)患者人群血清dpMGP浓度水平及其诊断价值,探索dpMGP与强直性脊柱炎炎症与骨化病程的关系。方法:1.病人与对照的筛选该项研究有强直性脊柱炎患者82例,75例健康对照人群参与整个横断性对照研究过程,已淘汰部分失访以及资料欠缺的参与者。强直性脊柱炎患者及健康对照人群均为2010年1月至2013年1月南方医科大学医科大学附属珠江医院的门诊及住院的患者(具体纳入标准及排除标准见下),或健康查体者。为了减少高龄性心血管钙化以及骨骼生长发育可能对血清dpMGP蛋白浓度的影响,我们将强直性脊柱炎患者及健康对照年龄限制在20-60岁以内。强直性脊柱炎病人符合修改的纽约诊断标准(1984年),尽量避免因为强直性脊柱炎病情活动状态造成的选择偏倚。排除具有心血管疾病、慢性肾脏疾病、感染、其它风湿性疾病,以及正使用抗肿瘤坏死因子生物制剂、维生素K及其拮抗剂如华法林、维生素D等。对照组来自进行健康体检人群,无心血管疾病、无肝肾疾病,无风湿性疾病包括(AS),无炎症及感染,目前无服用维生素K及其拮抗剂、维生素D。纳入研究的AS及对照组研究对象都能提供研究所涉及的各项临床资料及血清,否则予以排除。2. 临床评估收集强直性脊柱炎病人组及健康对照组临床资料,包括一般临床资料(年龄、性别、病程、体重指数(BMI))、影像资料(脊柱X双侧侧位片)、CRP浓度(免疫比浊法测定)、ESR。参照BASDAI (Bath AS Disease Activity Index)评分标准(0-10分)设计随访问卷,获得每个病人BASDAI评分。由3个具有影像专业知识背景的人士对病人脊柱X光侧位片进行独立阅片,按照SASSS(Stoke AS SpineScore)标准进行评分,最终分值为3方评分的平均值。3.血清保存及检测血样使用真空非抗凝管收集后在半小时内迅速保存于-20℃,并在1个月内通过离心(2400xg, 10min)获取上层血清后转移到-80℃长期保存。BALP、OC的血清浓度检测使用ELISA试剂盒操作按照试剂盒(NovaTeinBio, Massachusetts, USA)说明书进行。我们利用竞争性ELISA试剂盒(Biomedica, Vienna, Austria)检钡dpMGP。单克隆抗体(mAb-dpMGP315)以MGP的非磷酸化多肽序列SHESMESYELNPF (MGP3-15)为靶点,以mAb-dpMGP3-15为包被抗体,试剂盒中的微孔板预先已包被捕捉抗体,人工合成的dpMGP3-15多肽序歹SHESMESYELNPF (MGP3-15)作为标准品,其生物素标记形式b-dpMGP3-15是竞争性抗原,人工合成多肽序列利用单克隆抗体mAb-dpMGP3-15的特异性和生物素-亲和系统的放大效应对血清中的dpMGP水平进行检测。最低检测浓度为0.14nM。检测过程如下:100ul标准品或样品加入微孔板并孵育90分钟,37℃。吸去每孔液体,不冲洗。立即加入100ul生物素标记的竞争性抗原(b-mAb-dpMGP),37℃孵育1小时。吸去液体,使用冲洗缓冲液洗板叁次,每孔再加入100ul Streptavidin-HRPO。每孔加入TMP 90ul,37℃,孵育15分钟。然后避光保存,反应时间可根据孔板的颜色决定,但是不超过30分钟。当颜色梯度出现在标准孔,则使用终止液50ul终止反应。在波长450 nm光谱下ELISA读板仪读板,获得OD值。通过对比标准曲线得到dpMGP的浓度。4.统计分析使用spss16软件统计强直性脊柱炎病人及对照组各项指标的均数及方差,组间各项计量指标差异使用Mann-Whitney U检验,计数指标使用卡方检验。通过ROC (receiver operating characteristic)分析确定dpMGP作为强直性脊柱炎诊断指标的截断点,确定在该点的特异性、敏感性、AUC、似然比(LR),诊断效力评级:AUC<0.7,低;0.7<AUC<0.9,中级;AUC>0.9,高。Spearman秩相关法检验dpMGP与各项血清及临床指标的相关性。P值小于0.01可认为具有显着性。为了分析dpMGP对于强直性脊柱炎患者骨结构破坏的诊断价值,我们界定了骨结构破坏的叁个SASSS界值,利用ROC分析的方法分析在不同SASSS界值下dpMGP对于强直性脊柱炎骨结构破坏的诊断意义。为了便于更直观详细了解dpMGP对骨结构破坏的的诊断意义,我们绘制了叁幅不同SASSS界值下以SASSS累计频率为横坐标,dpMGP为纵坐标的散点图,以分析其在不同SASSS界值下dpMGP诊断的真假阳性及阴性百分比。结果:1.强直性脊柱炎病人临床资料我们对82例AS病人的临床资料进行统计分析,并与75例健康对照比较。患者平均年龄38.8±8.9岁,平均病程12.7年。其中,男性69例,HLA-B27阳性70例。AS组年龄、性别、BMI、BALP、OC指标相比对照组差异不具有显着性:年龄(mean (SD),38.8 (8.9) VS 44.1(3.1) years;性别(male%),84% VS 80%; BMI (mean (SD)),22.7 (2.8) VS 24.3 (2.1) kg/m2。根据BASDAI评分标准以及SASSS评分分别对患者的疾病活动度以及影像破坏进行评分。得到患者BASDAI评分为3.9(2.2)(mean(SD)), SASSS评分为13.3(18.7)(mean (SD)),约有20例AS患者SASSS=0,约占样本总量的25%,中位数为4,最大值70。82例患者SASSS评分的分布特征可见其累积频率图。2.AS病人血清炎症及骨代谢相关因子浓度水平AS病人血清BALP、OC浓度水平与对照无明显差别:BALP (mean (SD)) 19.1 (5.3) VS 16.0 (6.0) IU/l; OC (mean (SD)) 12.1 (3.2) VS 8.9 (3.9) ng/mlo但是在ESR与CRP指标上,AS组比对照组明显要高,差异具有显着性:ESR (mean (SD)),33.5 (25.3) VS 9.7 (4.0) mm/h; CRP (mean (SD)) 8.7 (1.2) VS 1.7 (0.1) mg/dl(Table 1)。3.AS病人血清dpMGP浓度水平及其与年龄的关系对患者组按照年龄进行分组,标记为A组(20-40岁),B组(40-60岁)。两分组的人数相同。利用竞争性ELISA法进行检测,以重复检测的平均值为最终结果。最终我们发现AS组dpMGP浓度(mean(SD),9.2(2)nmol/l)低于对照组(mean (SD),13.7(4.5)), p<0.01。(Picture2),同样结果见于A组(mean (SD),9.6 (2) nmol/1)及B组(mean (SD),9(2.1)nmol/l)。4.AS血清dpMGP诊断价值我们进一步通过ROC曲线分析,以获得dpMGP的最佳截断点(cutoff point),作为dpMGP诊断强直性脊柱炎的界值。最终我们确定dpMGP诊断界值为11.5nmol/l,可得到最优化的特异性(68%)及敏感性(88%)组合,youden指数(YI)为0.56,而此时的AUC (ROC, area under the curve)为0.81,诊断效力可评为中级,阳性似然比及阴性似然比分别为2.75,0.18。5. 血清dpMGP浓度与影像指标SASSS显着负性相关将dpMGP浓度与血清指标ESR、CRP、BALP、OC,临床评分指标BASDAI,影像评分指标SASSS进行相关分析。我们发现SASSS与dpMGP浓度存在显着负性相关(rs=-0.715,P<0.01)。6. 血清dpMGP浓度与影像指标SASSS关联的特征分析为了分析dpMGP与SASSS相关性的特点,我们先绘制了dpMGP-SASSS散点图。由图可以粗略判断dpMGP浓度与SASSS相关性是不均匀变化,SASSS较小时相关性不强,SASSS越大,相关性越明显。为此进行分区间分析,考虑SASSS取零值较多,因此排除掉SASSS取零值的病例。以SASSS=35为界值,将患者分2组,研究这些患者SASSS与dpMGP的联系。当0<SASSS<35时,可得到rs=-0.524,P值小于0.01。当35<SASSS<70时,rs=-0.73,P=0.03。很显然随着SASSS值的增大,dpMGP越小,两者的相关性越强。7. DpMGP对于强直性脊柱炎骨结构破坏的诊断价值我们利用ROC分析所得到的dpMGP对于不同SASSS界值定义的骨结构破坏的诊断价值。对于SASSS>0,>2,>4, AUC值分别为0.778,0.824,0.873,显然SASSS界值越大,dpMGP诊断的准确性越高。比较不同界值下dpMGP的阳性似然比,我们可发现, 当以SASSS>0为界值时LR+=6.56, LR-=0.42;而SASSS>4时,LR+=5.24, LR-=0.29。显然随着SASSS增大dpMGP诊断骨结构破坏阳性患者的准确性下降了,但是对于诊断骨结构破坏阴性患者的准确性提高了。通过绘制了叁幅不同SASSS界值下以SASSS累计频率为横坐标,dpMGP为纵坐标的散点图,以分析其在不同界值下的真假阳性及阴性百分比。我们发现如果以一个更高SASSS界值(SASSS>4)用来区别骨结构破坏,真阳性的比例从52%降到37%,但是真阴性的比例却上升了(20%到43%)。假阳性的比例相差不大(6%到9%),但是假阴性的比例变得更小(22%到13%)。真阳性和真阴性之和从72%升到80%,显然SASSS界值越大dpMGP鉴别出了更多的强直性脊柱炎患者有或者没有骨结构破坏。但是即使获得更高的诊断准确性,仍然有20%患者被错误地归类到有或者没有骨结构破坏。结论:1.血清dpMGP可作为一种新的用于强直性脊柱炎诊断的生物标志。2.血清dpMGP可作为强直性脊柱炎一种新的可指示骨重建病程的生物标志,尤其是在骨重建的晚期阶段。3. DpMGP在强直性脊柱炎骨重建过程可能扮演负性调节角色,而不是在其炎症阶段。(本文来源于《南方医科大学》期刊2013-04-01)
张丹[9](2011)在《Grb7蛋白SH2结构域结合新型非磷酸化模序的研究》一文中研究指出Grb7蛋白是一种接头蛋白,该蛋白是Grb7蛋白家族的成员之一,这个蛋白家族包括Grb7, Grb10和Grb14叁个成员。现在研究发现,Grb7蛋白在一些恶性肿瘤组织中,尤其是高转移性肿瘤组织中处于高表达状态,比如乳腺癌,食管癌,胃癌等。编码Grb7蛋白的基因位于人染色体17q12-q21,该区域在临床检验中已被证实在某些肿瘤中有明显的扩增,这一基因基础,决定了Grb7蛋白有可能成为临床治疗肿瘤的一个重要靶点。在Grb7蛋白中,一共有叁个主要的功能区域,N末端富含脯氨酸,中间序列和Caenorhabditis elegans的Mig-10蛋白有很高的相似性,该结构域在细胞迁移中发挥了重要作用,C末端是一个SH2结构域。SH2结构域在Grb7蛋白参与的细胞信号传导通路中发挥了重要作用。虽然Grb7蛋白SH2结构域主要是以结合磷酸化酪氨酸模序为主,但近年来的研究发现Grb7蛋白SH2结构域也可以结合非磷酸化模序,而且由于非磷酸化肽段较磷酸化肽段在体内更加易稳定存在,所以研究Grb7蛋白SH2结构域结合非磷酸化肽段的特性更有助于研制针对Grb7蛋白高表达的肿瘤治疗的药物。在本文的研究中,我们使用酵母双杂交的方法,在随机多肽文库中筛选到了可结合Grb7蛋白SH2结构域的一系列非磷酸化肽段,这些肽段的共同之处在于,每个肽段序列中均含一个22个氨基酸序列,该序列N末端为GIPT/N/K的保守序列,C末端为G/WD/IP的保守序列,中间为15个随机排列的氨基酸,富含丝氨酸,苏氨酸和脯氨酸,突变实验表明22个氨基酸序列中,两端保守的7个氨基酸对非磷酸化肽段结合Grb7蛋白SH2结构域发挥重要作用,这种新的结合形式在体外免疫共沉淀和活细胞内的荧光能量转移实验已得到证实。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2011-04-29)
张琳,余志斌[10](2008)在《心肌肌钙蛋白Ⅰ的磷酸化与非磷酸化调节》一文中研究指出由于心肌肌钙蛋白复合体Ⅰ亚基(TroponinⅠ,TnⅠ)特殊的分子结构,使其在心肌收缩过程中起"分子开关"的重要作用。心肌TnⅠ具有6个磷酸化位点,第23/24位丝氨酸残基可被蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶D(PKD)和蛋白激酶G(PKG)磷酸化,发挥正性肌力作用;第43/45位丝氨酸残基以及第144位酪氨酸残基可被蛋白激酶C(PKC)磷酸化,可能主要起负性肌力作用;蛋白激活激酶(PAK)磷酸化第149位丝氨酸残基后的作用尚待探明。另外,经蛋白水解酶calpain降解含磷酸化位点的片段,产生去磷酸化作用;亦可通过降解一些特定片段来改变TnⅠ空间构象,引起非磷酸化调节作用。(本文来源于《生理科学进展》期刊2008年01期)
非磷酸化论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
随着石油资源的紧缺和环境的不断恶化,利用可再生资源构建微生物细胞工厂生产化学品、燃料和药品成为了研究重点。近年来,随着代谢工程与合成生物学的发展,实现了多种天然产物的生物合成。但是,由于缺乏已知的代谢途径或相关酶,且很多非天然产物没有相关的代谢途径,导致许多高附加值产物无法实现生物合成。为了解决这一问题,本研究利用酶的混杂性或改造已有酶的催化性质,从而拓宽酶的底物谱并构建人工代谢通路,实现了 6种高附加值化合物的生物合成。木糖作为木质纤维素中的第二大糖,在微生物中的代谢效率却远远低于葡萄糖。为了提高大肠杆菌的木糖利用效率,我们研究了木糖非磷酸化代谢途径中不同来源的相关酶,优化了木糖非磷酸化途径在大肠杆菌中的表达。并以此为基础,利用酶的混杂性,筛选途径中的关键酶,成功在大肠杆菌中鉴定了新的3,4-二羟基丁醛脱氢酶,从而构建了一条全新的3,4-二羟基丁酸生物合成途径,通过优化代谢网络,3,4-二羟基丁酸的摇瓶产量达到1.27 g/L,是目前已报导的最高产量。接着,我们利用蛋白质工程方法,理性设计并改造丙二醇脱水酶,通过解除底物抑制、增大催化口袋和优化金属离子催化距离将一个天然不催化1,2,4-丁叁醇的酶改造为可利用1,2,4-丁叁醇生产1,4-丁二醇的酶。在此基础上,优化了由木糖合成1,2,4-丁叁醇的途径并与改造后的丙二醇脱水酶偶联实现了 1,4-丁二醇从头合成代谢新途径的构建,摇瓶产量达到209 mg/L。由于目前木糖生产1,4-丁二醇过程中最主要的副产物是1,2,4-丁叁醇,因此,本研究不仅成功得到了一个天然不存在的新酶,同时还实现了副产物向目标产品的二次转化。在上述研究基础上,我们评估了木糖叁种代谢途径的碳利用率,首次发现了,木糖的磷酸化途径和非磷酸化途径在生产TCA循环衍生物过程中存在协同效应。以木糖生产戊二酸为例,当两条途径协同生产时,戊二酸的产量为602 mg/L,高于单独使用任意一条途径时的产量(104或209 mg/L),甚至高于单独利用葡萄糖生产戊二酸的产量(420 mg/L)。本研究不仅实现了利用酶的混杂性和蛋白质工程策略生产没有代谢途径的非天然产物,还展示了一种木糖高效利用的新策略。另外,我们还利用酶的混杂性首次实现了叁种未知天然合成途径的重要酚类化合物(焦性没食子酸、水杨醇和龙胆醇)的生物全合成。酚类化合物是一类芳香族化合物,具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗癌、防紫外和防腐等生物活性,在医药工业上具有十分重要的价值。然而,这类化合物在自然界中的含量非常低,因此限制了它们的大规模商业化应用。本研究首次探索并扩展了存在于斯氏假单胞菌中的苯酚羟化酶PH的底物谱并揭示了该菌中的小蛋白PHQ可以增强PH的催化活性;在此基础上,我们将儿茶酚的生物合成途径与PH催化的羟基化反应相偶联,构建了一条全新的焦性没食子酸生产途径,摇瓶产量达到76.7mg/L。接着,我们根据底物和产物的结构类似性,利用生物勘探法和酶的混杂性,在一系列加氧酶和羟化酶中鉴定和表征了一种十分高效的2,3-二羟基苯甲酸单加氧酶,首次实现了 2,3-二羟基苯甲酸向焦性没食子酸的转化,并构建了一条基于水杨酸单加氧酶的焦性没食子酸的生物合成新途径。通过增加莽草酸途径碳代谢流、模块优化合成途径和缓解产物的自氧化等策略进行优化,焦性没食子酸的摇瓶产量达到1.04 g/L。为了解决酚醇类物质的生物合成问题,我们通过研究水杨酸-5-羟基化酶和羧酸还原酶CAR的混杂性和底物谱,首次实现了由水杨酸合成龙胆酸并由水杨酸和龙胆酸分别合成水杨醇和龙胆醇。再在此基础上构建并优化了水杨醇和龙胆醇的从头合成途径,最终水杨醇和龙胆醇的摇瓶产量分别达到594.4 mg/L和30.1 mg/L。本研究工作不仅实现了几种酚类化合物的首次生物全合成,还展示了如何利用酶的混杂性构建非天然生物合成途径生产高附加值产物。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
非磷酸化论文参考文献
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