导读:本文包含了硒半胱氨酸甲基转移酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:毛薯,硒代半胱氨酸甲基转移酶,基因克隆,生物信息学
硒半胱氨酸甲基转移酶论文文献综述
杨亚飞,黎丹,黄东益,符晓,夏薇[1]（2019）在《毛薯硒代半胱氨酸甲基转移酶SMT基因的克隆与表达分析》一文中研究指出硒代半胱氨酸甲基转移酶(SMT,Selenocysteine methyltransferase)是植物硒代谢的关键酶,在植物硒积累的过程中发挥着重要作用。为了探究毛薯中SMT基因的功能,本研究以优质富硒毛薯Ds148为研究对象,利用RT-PCR技术从中克隆到了毛薯SMT基因,命名为DsSMT。DsSMT(登录号:MH046782)包含1038 bp完整开放阅读框(ORF),预测编码345个氨基酸,理论分子量(Mw)为37.24 kD,等电点(pI)为5.01,编码的蛋白与其他植物的SMT蛋白同源性较高,具有较高的保守性。系统进化树分析显示,毛薯与海枣和菠萝的SMT蛋白的亲缘关系较近,聚为同一类。利用PSORTⅡ在线软件对DsSMT蛋白进行预测,结果表明其可能定位于细胞质中。实时荧光定量PCR分析显示,DsSMT基因在毛薯生长发育的各个时期的根、茎、叶、块茎以及块茎的皮组织中均有所表达,其中在毛薯的根和成熟期表达量最高。本研究从毛薯中克隆出了硒代谢相关酶DsSMT基因的cDNA序列,并对其进行了生物信息学分析;同时又对DsSMT基因在毛薯块茎形成的不同时期、不同组织中的表达情况进行相对定量的研究和分析,为深入研究DsSMT基因的调控机理提供分子依据,同时也为毛薯硒吸收、同化的分子机理研究奠定基础。(本文来源于《植物遗传资源学报》期刊2019年04期）
白日巧,陈大清,龙永豪,姚新,杜玉萧[2]（2018）在《过表达硒代半胱氨酸甲基转移酶烟草的硒耐受特性分析》一文中研究指出以经鉴定的硒代半胱氨酸甲基转移酶(Selenocysteine methyltransferase,SMT)转基因烟草(Nicotiana tabacum L)和野生型烟草(NC89)为材料,置于添加不同质量浓度(0、20、40和60 mg/L)硒酸钠的MS培养基上进行培养,35 d后分别测定两种处理材料的过氧化物酶活性、叶绿素、鲜质量和株高等生理生化指标.结果表明:在不同质量浓度硒酸钠处理后,SMT转基因烟草和野生型烟草的叶绿素质量分数、鲜质量及株高均较各自对照明显下降,比较而言,野生型烟草的下降幅度明显大于转基因烟草;另一方面,野生型烟草过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性表现强烈的应激反应,其活性明显高于转基因烟草.生长生理与表型特性表明SMT转基因烟草具有一定的硒耐受性.(本文来源于《仲恺农业工程学院学报》期刊2018年01期）
刘培,周建平,许秀丽,郝庆钦,温新宇[3]（2014）在《S-同型半胱氨酸甲基转移酶活性检测和保存方法的建立》一文中研究指出目的建立一种简单的S-同型半胱氨酸甲基转移酶(HMT)活性测定方法,确定HMT的最佳使用条件,并初步探索HMT的保存方法。方法采用原核表达系统制备HMT,经镍亲和层析和Sephadex G15两步纯化。SDS-PAGE对目的蛋白进行理化性质鉴定。基于5,5′-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)可以特异性地与含有巯基的化合物快速发生化学反应的原理,通过检测同型半胱氨酸的减少量来计算酶活性,确定HMT最佳活性测定条件。比较添加和不添加甘油的两组HMT酶液置于不同温度下保存,定期测定活力;在HMT酶液中加入不同浓度的不同保护剂,比较冷冻干燥后的活性保留率。结果重组表达的酶纯度高达95%以上,相对分子质量为36 000,具有良好的催化活性,比活为2 000U/mg。在37℃、pH7.4的HEPES缓冲液中反应25min为酶活性测定最佳条件。加入甘油能明显延长酶的保存时间并且酶液在6个月内的活力保留一半。冷冻保护剂甘露醇和海藻糖的添加对HMT酶冻干品的酶活保留率分别为104.0%和100.0%。结论通过基因工程技术获得HMT,建立了简单的HMT活性测定方法,并确定了该酶的最佳保存方法,为临床应用奠定了基础。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2014年12期）
刘声传,鄢东海,魏杰[4]（2013）在《茶树硒代半胱氨酸甲基转移酶基因生物信息学分析》一文中研究指出为揭示茶树(Camellia sinensis)硒代半胱氨酸甲基转移酶(Selenocysteine methyltransferase,SMT)基因CsSMT的生物学功能及其分子调控机理,利用生物基因组学数据库和生物信息学分析软件,对CsSMT进行生物信息学分析,预测该基因编码产物的理化性质、结构与功能,同时构建CsSMT同源基因的系统进化树。结果表明:CsSMT基因cDNA全长1368 bp,开放阅读框位于50~1105 bp处。编码产物为稳定的亲水性蛋白,分子式为C1670H2645N459O532S15,无跨膜结构,无信号肽,定位于细胞质基质。二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,叁维建模成功。系统进化分析表明,CsSMT基因mRNA与拟南芥同型半胱氨酸S-甲基转移酶基因(Homocysteine S-methyltransferase,HMT)聚为一组。(本文来源于《西南农业学报》期刊2013年06期）
王雅楠,陈晶晶,朱林[5]（2013）在《茶树硒营养代谢关键酶硒半胱氨酸甲基转移酶基因克隆及启动子结构分析》一文中研究指出为探明茶树硒营养代谢关键酶基因硒半胱氨酸甲基转移酶(SMT,GenBank登录号:DQ480337)的表达调控规律,通过PCR和基因步移技术获得SMT的DNA全长和部分启动子序列,用PLACE、PlantCARE分析SMT内含子和启动子的序列,预测其顺式作用元件及功能。结果表明,SMT基因全长5473 bp,有7个外显子和6个内含子,内含子富含光响应元件、激素响应元件和抗逆性相关元件。通过基因步移法克隆得到的SMT启动子长375 bp,除了含核心启动子保守元件TATA-box和CAAT-box外,还有其他重要顺式作用元件,如光响应元件、低温响应元件和胚乳表达特异性元件等。植物硒营养代谢关键酶SMT启动子的克隆及结构分析为进一步揭示SMT基因的生物学功能和表达调控机制奠定了理论基础。(本文来源于《中国农学通报》期刊2013年28期）
王雅楠[6]（2013）在《茶树ATP硫化酶和硒代半胱氨酸甲基转移酶的基因克隆和启动子结构分析》一文中研究指出本研究采用PCR和Genome Walking技术从茶树嫩叶中克隆到茶树硒营养代谢关键酶ATP硫化酶(ATP:sulfate adenylyltransferase, EC2.7.7.4)和硒代半胱氨酸甲基转移酶(Selenocysteine methyltransferase,简称SMT)基因的DNA序列及部分上游启动子序列,并分别对其DNA和启动子序列进行结构分析,这些研究为深入了解茶树硒营养代谢关键酶APS和SMT的表达调控机制奠定了理论基础。本研究的主要结果如下：从祁门楮叶种茶树(Camellia sinensis Qimen-chuyezhong)嫩叶中提取DNA,根据ATP硫化酶和硒代半胱氨酸甲基转移酶的cDNA序列设计引物,扩增APS和SMT基因的DNA序列。在扩增到的APS和SMT基因组DNA序列上设计GSP1和GSP2引物与Universal Genome Walker Kit (Clontech)提供的AP1和AP2引物运行两轮PCR反应。经数次步移后得到APS和SMT基因的5'上游序列。测序结果显示,APSl基因全长3829bp(GenBank登录号：KC179759), APS2基因全长3883bp(GenBank登录号：KC179760), SMT基因全长5473bp(GenBank登录号：KC179761)。通过Genome Walking扩增的APS1启动子长622bp, APS2启动子长460bp, SMT启动子长375bp。DNAMAN分析表明,APS1和APS2有四个内含子,五个外显子,SMT有七个内含子,六个内含子。PLACE和PlantCARE分析表明,APS1,APS2和SMT的内含子和启动子中有多种顺式作用元件。APS内含子含有AC-Ⅱ, ARE, ACE, CATT-motif, CAAT-box, CGTCA-motif等；APS1启动子含有ABRE, AC-Ⅰ, AC-Ⅱ, GT1-motif, G-box, G-Box, TCA-element等；APS2启动子含有I-box, Sp1, MNF1, MRE, ARE, TC-rich repeats等；SMT内含子含有5UTR Py-rich stretch, Box-W1, CAT-box, chs-CMAla等；SMT启动子含有GAG-motif, GTl-motif, GCN4-motif, Skn-1motif等。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2013-06-01）
商艳芬[7]（2011）在《重组人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶蛋白的研制》一文中研究指出目的:建立一种制备重组人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(recombinant human betaine-homocysteine S-methyltransferase,rhBHMT)药用蛋白的生物工程技术,获得高纯度并具有稳定生物学活性的rhBHMT药用蛋白,确认其防治高同型半胱氨酸血症的药效学作用。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)技术克隆获得rhBHMT基因;采用大肠杆菌BL21作为原核表达系统对rhBHMT蛋白进行诱导表达,构建和筛选rhBHMT蛋白高效和可溶性表达的工程菌株。采用DEAE Sepharose Fast Flow层析柱和CM阳离子层析柱对原核表达的rhBHMT蛋白进行纯化,应用SDS-PAGE、HPLC、Lowry法等试验对所得蛋白进行相对分子质量、纯度、浓度、蛋白含量分析,建立硝普钠显色法对rhBHMT蛋白的活性进行检测。以束缚应激和高蛋氨酸饮食干预两种方式建立高同型半胱氨酸血症Wistar大鼠模型,给予高同型半胱氨酸血症大鼠以不同剂量的rhBHMT蛋白,观测对其血浆HCY水平的影响,研究rhBHMT治疗高同型半胱氨酸血症的生物学作用。结果:构建了rhBHMT高效、可溶性表达的工程菌株,通过上述生物工程技术系统分离纯化其表达产物,获得了纯度达95 %以上的rhBHMT蛋白。所得蛋白含量为0.01-1.0 mg/ml,相对分子质量约为43kb,在20mmol/L PH7.0的磷酸钠缓冲液中可稳定储存于-20℃条件下。建立了用于检测rhBHMT酶活性的硝普钠显色法,其操作简便、重复性及稳定性好,与氨基酸测定仪检测结果比对的一致性好。以此硝普钠显色法测定该rhBHMT蛋白样品活性约为70 U/mg。给予束缚应激和高蛋氨酸饮食所诱导的高同型半胱氨酸血症大鼠rhBHMT,可以显着降低大鼠血浆同型半胱氨酸水平,且具有明确的剂量效应。结论:应用生物工程技术,构建了rhBHMT稳定高表达的工程菌株,建立了对表达产物中rhBHMT蛋白的分离纯化工艺,制备了高度纯化蛋白rhBHMT,完成了其重要的理化性质和活性的鉴定,确认了rhBHMT降低高同型半胱氨酸血症大鼠血浆同型半胱氨酸水平的生物学作用。为rhBHMT作为治疗高同型半胱氨酸血症生物工程药物提供了科学基础。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2011-05-20）
冷雪,王剑波,杲修杰,弓景波,赵云[8]（2011）在《人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)表达及抗体制备》一文中研究指出目的重组表达及纯化人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(betaine-homocysteine methyltransferase,BHMT)蛋白,制备BHMT多克隆抗体并对其性质进行研究。方法 TRizol法提取人HepG2细胞总RNA,RT-PCR获得BHMT基因,经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切,构建重组表达载体pET-28a-BHMT,经0.5 mmol/L IPTG诱导表达,表达产物通过Ni柱亲和纯化获得重组蛋白;以重组BHMT蛋白免疫兔,获得兔多克隆抗体,并对抗体进行纯化,应用Western印迹方法分析其识别人天然BHMT蛋白的能力。结果经测序证明,RT-PCR得到的人BHMT基因与Gen-Bank中人的BHMT基因完全一致;构建的BHMT原核表达载体可稳定地表达可溶性人BHMT蛋白;重组BHMT蛋白免疫兔后,兔血清抗体纯化获得高纯度BHMT抗体,此抗体可以特异性地识别人肝癌组织中的天然BHMT蛋白。结论成功重组表达并纯化人BHMT蛋白,所获得的BHMT多克隆抗体可以应用于人BHMT蛋白的检测,为研究BHMT在高同型半胱氨酸血症中的作用机制奠定基础。(本文来源于《军事医学》期刊2011年01期）
商艳芬,杨仲璠,赵云,杲修杰,吴彦卓[9]（2010）在《重组人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶的表达纯化和鉴定》一文中研究指出目的对重组人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(recombinant human betaine-homocysteine S-methyltrans-ferase,rhBHMT)进行表达纯化和鉴定。方法采用基因重组技术在原核系统表达BHMT蛋白,镍螯合亲和层析和Sephacryl S200层析进行纯化。产物经SDS-PAGE、HPLC、N端氨基酸序列检测与活性验证。结果终产物rhBHMT纯度达97.9%。相对分子质量为45 000,N端氨基酸序列与理论序列一致。结论从工程菌中获得具有活性的高纯度rhBHMT,产物均一,工艺稳定,为中试放大提供可靠依据。(本文来源于《军事医学科学院院刊》期刊2010年06期）
黄惠彬,侯建明,陈刚,温俊平,梁继兴[10]（2009）在《卡托普利对糖尿病大鼠肾脏甜菜碱-同型半胱氨酸甲基转移酶基因表达的影响及其意义》一文中研究指出[目的]探讨卡托普利对糖尿病大鼠肾脏甜菜碱-同型半胱氨酸甲基转移酶基因表达的影响及其意义。[方法]建立糖尿病大鼠模型,分卡托普利干预组和对照组,15周后处死大鼠,从肾脏皮质抽提mRNA,逆转录,分别用Cy5和Cy3标记成两组cDNA探针。cDNA探针与基因芯片杂交,经扫描后,用软件分析。[结果]干预组甜菜碱-同型半胱氨酸甲基转移酶基因表达上调。[结论]卡托普利可能通过调节同型半胱氨酸代谢预防糖尿病肾病。(本文来源于《海峡预防医学杂志》期刊2009年06期）
硒半胱氨酸甲基转移酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以经鉴定的硒代半胱氨酸甲基转移酶(Selenocysteine methyltransferase,SMT)转基因烟草(Nicotiana tabacum L)和野生型烟草(NC89)为材料,置于添加不同质量浓度(0、20、40和60 mg/L)硒酸钠的MS培养基上进行培养,35 d后分别测定两种处理材料的过氧化物酶活性、叶绿素、鲜质量和株高等生理生化指标.结果表明:在不同质量浓度硒酸钠处理后,SMT转基因烟草和野生型烟草的叶绿素质量分数、鲜质量及株高均较各自对照明显下降,比较而言,野生型烟草的下降幅度明显大于转基因烟草;另一方面,野生型烟草过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性表现强烈的应激反应,其活性明显高于转基因烟草.生长生理与表型特性表明SMT转基因烟草具有一定的硒耐受性.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
硒半胱氨酸甲基转移酶论文参考文献
[1].杨亚飞,黎丹,黄东益,符晓,夏薇.毛薯硒代半胱氨酸甲基转移酶SMT基因的克隆与表达分析[J].植物遗传资源学报.2019
[2].白日巧,陈大清,龙永豪,姚新,杜玉萧.过表达硒代半胱氨酸甲基转移酶烟草的硒耐受特性分析[J].仲恺农业工程学院学报.2018
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[4].刘声传,鄢东海,魏杰.茶树硒代半胱氨酸甲基转移酶基因生物信息学分析[J].西南农业学报.2013
[5].王雅楠,陈晶晶,朱林.茶树硒营养代谢关键酶硒半胱氨酸甲基转移酶基因克隆及启动子结构分析[J].中国农学通报.2013
[6].王雅楠.茶树ATP硫化酶和硒代半胱氨酸甲基转移酶的基因克隆和启动子结构分析[D].安徽农业大学.2013
[7].商艳芬.重组人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶蛋白的研制[D].中国人民解放军军事医学科学院.2011
[8].冷雪,王剑波,杲修杰,弓景波,赵云.人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)表达及抗体制备[J].军事医学.2011
[9].商艳芬,杨仲璠,赵云,杲修杰,吴彦卓.重组人甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶的表达纯化和鉴定[J].军事医学科学院院刊.2010
[10].黄惠彬,侯建明,陈刚,温俊平,梁继兴.卡托普利对糖尿病大鼠肾脏甜菜碱-同型半胱氨酸甲基转移酶基因表达的影响及其意义[J].海峡预防医学杂志.2009
标签：毛薯; 硒代半胱氨酸甲基转移酶; 基因克隆; 生物信息学;