引物序列会查重吗
2022-04-14阅读(590)
问:相同基因位点pcr的引物序列相同吗
- 答:你的题目我不是很理解,你是打算从不同的模板里扩出相同的基因吗?如果是的话,你的引物当然是可以通用的,pcr引物的序列完全取决于你的目标基因序列,如果你想通过PCR在目标基因外侧加不同的序列,那就要用不同的引物了
问:PCR引物序列在国外生物医学期刊投稿中要验证吗?
- 答:引物序列一般不需要验证,放在附表里就行了
NCBI中没有引物提交这个功能吧。。。
问:细菌耐药基因一样,为什么查文献看到每个文献中引物序列不一样
- 答:mecA是一个基因吗?如果是,那么不同文献里面所取的基因位置可能是不同的,扩增的位置也不同。你做这个PCR是为了看有没有这个基因存在,还是什么别的?如果只是看是否存在,那随便用里面的一对引物做PCR即可。
问:测序以后拿回来的DNA序列,怎么判断它的里面有没有引物序列?如果有的话怎么切除引物序列?谢谢!
- 答:是否有引物序列要看你是如何测序的,如果短片段700个碱基以内双向测序且测序结果很好的情况下,应该能看到两端引物序列,如果是单向测序会看到一端引物序列;长片段一般是看不到引物序列的。你说的切除引物序列是在测序结果上,还是产物上,如果测序结果切除的话,找到对应序列删除就可以了,产物上的,就看你设计引物时是否带酶切位点了。
- 答:比对呀,之前的引物序列你是知道的,从测序结果里搜索就可以了。切除引物,可以再引物里设计一对酶切位点
- 答:好吧,测序结果里是不可能有引物的序列,这是由Sanger测序原理决定的。
问:如何根据引物来反查DNA序列
- 答:1.登陆NCBI网站2.在上排找到BLAST,点击进入,我只用过Old blast,你可以点击Old blast的连接进入。3.找到Search for short, nearly exact matches,点击进入4.在serch框中输入你的引物的序列,可以先输上游引物,点击blast,然后点击format5.根据你的引物的特点以及扩增片段的种属来源等选择e value值最高的那一个,点击进入既能找到你要的dna序列
问:做PCR需要用的引物序列有,但不知道是不是对的,我想测试下,如何测试,有高手指点吗?
- 答:你如果把你的东西拿给公司做,他们就会给你设计引物。我们做qPCR,就可以找公司做引物,自己做了不对的话,他也会帮你看。
- 答:推荐NCBI的primer blast,可以测试引物的特异性
如果是想看引物的具体属性,例如Tm,GC,hairpin之类的,你可以装个单机版的 Primer Premier 6
问:测出来的序列里找不到pcr 引物序列
- 答:你拿到的测序结果,是从引物开始后面30-50个碱基以后开始的序列,引物序列是看不到的。这个和测序机器的性能有关。一般从引物开始的一小段序列出峰会很不稳定,有稳定峰图可以读出序列一般都是20-30个碱基之后了。你手头若是有峰图结果你看看最开始那段的峰图就知道了。
至于拿到的序列到底是什么,ncbi上blast一下不就什么都知道了 - 答:你看看你的测序结果是不是你连接的测序载体。
- 答:当然找不到了
测出来的是引物的互补序列
而不是引物序列
只要测序成功
是肯定能找到互补序列的 - 答:有可能是你根本没扩出来东西.还有就是在扩增的过程中你的引物导致整个扩增发生原位突变,使的你阔增出来的片段在某个位点突变.这样的话你可以在查找过程中将引物序列减少一部分在查找
问:PCR的引物的序列是怎么回事 随便的一段吗? PCR的引物有几种?
- 答:根据扩增目标、实验方案和引物设计的原则用专门的软件设计的。大部分情况下不同的扩增目标需要设计不同的引物,除此之外还有随机引物,随机扩增的时候用的,还有反转录用的oligo d(T)和随机引物也是引物。第二问不明白你想问什么
- 答:想了解PCR引物序列建议你i先看看PCR设计引物的原则