导读:本文包含了发育表达模型论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:组织构建,髋关节脱位,复位,软骨
发育表达模型论文文献综述
熊飞,韦宜山[1]（2019）在《复位法矫正发育性髋脱位模型兔:髋臼软骨细胞Caspase-3、Bcl-2的表达水平》一文中研究指出背景:关节软骨细胞凋亡的异常表达会引起软骨退变,最终发展为骨性关节炎。目的:观察发育性髋关节脱位模型经过髋关节复位法处理后细胞凋亡相关因子的表达情况。方法:随机选取28日龄的新西兰大白兔60只,雌雄不限,在兔右后肢屈髋伸膝位时用管型石膏固定8周制作髋关节脱位动物模型,固定的右后肢作为实验组,同只兔的左后肢不做任何处理作为对照组。8周后根据X射线片、髋臼指数、股骨头脱位程度判断造模情况。选取造模成功的48只兔,根据兔右后肢不同的处理方式,将实验组再分为A组(固定8周)、B组(固定10周)、C组(固定8周后解除固定复位2周),每组16只。实验结束后苏木精-伊红染色观察髋臼软骨软骨细胞形态;免疫组织化学法检测软骨细胞中Caspase-3、Bcl-2的表达;TUNEL法检测髋臼软骨中凋亡率的表达水平;并进行相关性分析。结果与结论:(1)A、B、C实验组髋臼指数均较其对照组明显增大(P <0.05);(2)苏木精-伊红染色后对照组软骨细胞形态规整,A、B实验组出现空泡细胞,部分结构消失,C实验组髋臼和股骨头关节软骨细胞结构较完整,空泡现象较少;(3)TUNEL结果示C实验组的凋亡率低于B实验组,但高于其对照组(P <0.05),说明经过复位法处理后凋亡率有所降低;(4)相关性分析示实验组细胞凋亡率与Caspase-3表达水平呈正相关,与Bcl-2表达水平呈负相关;(5)结果说明,复位组较固定8周、固定10周Bcl-2高表达,凋亡率较固定10周低表达,说明复位处理后软骨细胞凋亡速度放缓,同时凋亡效应蛋白Caspase-3较固定10周低表达,凋亡程度有所降低。复位法可降低髋关节脱位中髋臼软骨细胞凋亡程度的表达水平,延缓软骨进一步退变的进程,从而减缓患者的病情恶化的病程。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年31期）
郭韬,陈尧[2]（2019）在《CX43在局灶性皮质发育不良模型的表达》一文中研究指出目的建立局灶性皮质发育不良(focal cortical dysplasia,FCD)模型,并分析缝隙连接蛋白(connexin,CX) 43在FCD模型的表达。方法取孕鼠产后第1天Wistar乳鼠为实验对象,液氮冷冻Wistar乳鼠大脑皮质制作FCD模型。实验大鼠分为对照组10只与实验组60只(依据冷冻时间,再分为30 s组、60 s组和90 s组,各亚组20只)。实验动物造模满8周时,行脑组织苏木精-伊红染色及免疫组织化学染色,观察细胞形态与CX43表达。结果实验组48只大鼠FCD造模成功(30 s组18只、60 s组18只和90 s组12只)。对照组脑组织切片结构分界清晰,细胞形态正常。实验组脑组织切片可见层状结构和柱状结构紊乱,存在形态异常神经元和气球样细胞。CX43阳性细胞数:对照组19.90±3.221,30 s组45.24±3.185,60 s组46.15±3.299,90 s组46.66±3.230,各实验组阳性细胞数均较对照组明显增多,差异具有统计学意义(均P <0.05)。结论液氮冷冻方法可成功建立FCD Ⅲd动物模型。缝隙连接蛋白构成的非突触传递机制,在癫疒间放电扩散中扮演重要角色。FCD Ⅲd的异常病理改变导致CX43在FCD Ⅲd大鼠模型表达增强,CX43增多可明显促进癫疒间发生。(本文来源于《中国微侵袭神经外科杂志》期刊2019年05期）
田志鹏[3]（2018）在《Brachyury基因突变模型小鼠胚胎发育中Wnt、FGF信号通路相关基因表达研究》一文中研究指出Brachyury对调控小鼠胚胎发育,尤其是中胚层的构建发挥着关键作用,缺乏Brachyury蛋白的小鼠胚胎不能正常发育,Brachyury突变小鼠表现出短尾表型。Wnt和FGF信号通路在小鼠胚胎发育中可控制胚胎的轴向发育、EMT等重要的生理过程,Brachyury可能通过与上述两种信号通路的相互作用而导致小鼠短尾表型的产生。为了揭示Brachyury与Wnt及FGF信号通路潜在的相互作用关系。本实验首先使用一种便捷地合成RNA原位杂交探针的方法,对不同发育阶段野生型整体小鼠胚胎进行原位杂交,观察了Brachyury在小鼠胚胎各个发育阶段的位置表达情况。通过提取不同发育时期的Brachyury基因突变模型小鼠胚胎的总RNA,运用荧光定量PCR技术,检测Brachyury基因、Wnt和FGF两种信号通路相关基因的表达情况。实验结果如下:(1)Brachyury的表达在正常小鼠胚胎7.5dpc开始逐渐上调,并在9.5dpc达到峰值,随后表达量逐渐降低,而Brachyury突变小鼠胚胎的Brachyury表达趋势与野生小鼠胚胎的表达情况一致,但表达量明显低于同期野生型胚胎;(2)Ainx2在野生型胚胎的表达水平明显高于突变型;(3)Dkk1的表达趋势与Brachyury的表达相似且突变型胚胎的表达峰高于野生型胚胎;(4)Wnt3的表达从8.5 dpc开始野生型胚胎显着高于突变型;(5)野生型Wnt3a、FGF4在9.5 dpc的表达水平均显着高于突变型并形成表达峰。因此,Brachyury作为转录因子对两种信号通路组份的表达具有调节作用,而且它们形成一定的反馈回路及调控网络调控小鼠胚胎的正常发育。本实验揭示了Brachyury与Wnt、FGF信号通路相关组份的潜在关系,一定程度上为小鼠胚胎发育期间Brachyury(T)的功能研究提供了理论基础。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2018-06-01）
李怡心[4]（2017）在《自闭症模型大鼠各生长发育阶段的脑组织中m-GABA_AR的表达情况及相关机制研究》一文中研究指出背景;自闭症谱系障碍主要表现为:1、社交沟通障碍;2、刻板重复的行为和兴趣狭窄。其发病机制长期困扰着全世界的专家学者们,同时由于其发病机制尚不明确,使有效的治疗措施的发现变得难上加难。目前,‘兴奋抑制失衡’理论被广泛认可和接受,该理论认为大脑中异常的兴奋/抑制信号传导引起了自闭症患儿的一系列异常行为表现。其中抑制信号的传导与GABA_AR关系十分紧密,所以GABA_AR的异常及其偶联的离子共转运体NKCC1和KCC2的异常无疑会影响抑制性信号的传导。同时,自闭症谱系障碍作为一种发育性障碍,大多情况下在患儿3岁时才能被明确诊断,但大量证据表明其损伤性的病变在生命的早期阶段便开始了。目的;探讨自闭症模型大鼠中各个生长发育阶段GABA_AR的变化情况及行为异常。方法:使用VPA诱导的自闭症模型大鼠作为实验组,VPA溶解于生理盐水。对照组为仅暴露于生理盐水的子代大鼠。从出生后0天开始对其生长发育情况进行测评,包括平面翻正、空中翻正、负趋地性、断崖回避、听觉惊愕作为其神经发育的指标,而体重、立耳、牙齿萌出、睁眼情况则反映了其身体发育情况。出生后35天起,进行Morris水迷宫、矿场实验和叁箱实验,检测其空间记忆、焦虑状态、对陌生环境探索的兴趣及社交行为。然后运用Western blot的方法分别检测PD7、PD14、PD28、PD56大鼠4个脑区中GABA_ARβ3、m-GABA_ARβ3、p-GABA_ARβ3、KCC2、NKCC1的表达量。各个时间点的脑组织来源于按随机原则从相应时间点的两组中选取的6只大鼠(模型组和对照组各3只)。结果:(1)自闭症模型大鼠身体发育情况较对照组无名明显差异,但神经发育情况明显滞后于对照组。(2)通过Morris水迷宫实验,我们发现自闭症模型大鼠存在一定的空间记忆障碍和相对低下的运动能力;在矿场实验中,自闭症大鼠则表现出了明显的焦虑状态和减少的探索性趣;叁箱实验中模型组则有明显的社交障碍的表现。(3)自闭症模型大鼠各时间点各脑区与对照组相比,m-GABA_ARβ3、pGABA_ARβ3、KCC2的表达量均减少,但总的GABA_ARβ3和NKCC1的表达并无显着差异。结论:(1)自闭症模型大鼠除表现出核心症状社交障碍和探索兴趣下降外,还表现出明显的神经发育迟滞、焦虑状态、运动协调能力下降及空间记忆障碍。(2)自闭症模型大鼠各时间点各脑区均有GABA_AR的异常。(3)引起该异常的机制之一可能是GABA_ARβ3去磷酸化介导的GABA_AR内吞作用增加。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2017-05-01）
赵日红,白纪红,张华,刘漫君[5]（2016）在《促红细胞生成素对新型支气管肺发育不良早产鼠模型TGF-β1表达的影响》一文中研究指出目的观察重组人促红细胞生成素(rh EPO)对新型支气管肺发育不良(BPD)早产鼠模型肺组织病理变化及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法 40只定期受孕SD大鼠于孕第15天孕囊内注射脂多糖(LPS)或磷酸盐缓冲液(PBS),孕第21天剖宫娩出早产鼠,早产鼠于生后6 h内分为5组:PBS+空气组、PBS+高氧组、LPS+高氧组、PBS+高氧+rh EPO组、LPS+高氧+rh EPO组。PBS+高氧+rh EPO组、LPS+高氧+rh EPO组于高氧暴露6 h后开始第1次背部皮下注射rh EPO 1 200 IU/kg,隔天1次,共7次。分别在高氧暴露第1、7、14天处死早产鼠,观察肺组织病理变化及辐射状肺泡计数(RAC),采用ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)及肺组织TGF-β1的表达量。结果与PBS+空气组比较,经高氧干预后其病理损伤加重、RAC降低、BALF及肺组织TGF-β1表达量升高(P<0.01),并且以LPS+高氧组更显着(P<0.05,P<0.01),上述指标在高氧暴露后第14天与第7和(或)第1天差异有统计学意义(P<0.05);rh EPO干预后与相应对照组比较上述指标得到相应改善(P<0.05,P<0.01);BALF中TGF-β1水平与RAC呈高度负相关,与肺组织TGF-β1水平呈高度正相关(P<0.05或P<0.01)。结论 rh EPO可能通过参与调解TGF-β1相关通路,改善BPD模型大鼠肺组织损伤,从而对BPD起到一定的干预和治疗作用。(本文来源于《广东医学》期刊2016年18期）
王丽娟[6]（2016）在《DNA甲基化对斑马鱼gabrb2基因表达的调控：正常发育调控及在MET诱导构建的精神分裂症模型中的失调现象》一文中研究指出背景与目的精神分裂症(Schizophrenia)是一种影响思维、感觉、心境和社会性的复杂而严重的精神疾病,多在青壮年缓慢或亚急性起病,全球发病率接近1%。临床症状上由譬如幻觉、妄想、怪异行为的阳性症状,以及情感低落、快感缺乏、刻板思维、社交退缩等阴性症状构成,并可伴有认知功能损害症状。这些精神症状表现和神经系统功能往往是难以分开的,比如γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid, GABA)能系统假说就认为,精神分裂症患者存在GABA能低下,精神分裂症恶化可能是GABA递质逐步缺乏的表现,且与精神分裂症阴性症状和认知损害症状相关。GABA是脊椎动物中枢神经系统重要的抑制性神经递质,由谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase, GAD)催化谷氨酸脱羧而合成,再经囊泡释放,激活突触后神经元细胞膜上的受体发挥作用,此外释放于细胞间的递质还需要由GABA运载体(GABA Transporter, GAT)及时再摄取,这整个过程称为GABA能的传递。突触后神经元细胞膜上的GABA受体有A、B两型,A型GABA受体属于离子通道型受体,是由α1-α6、β1-β3、γ1-γ3、ρ1-ρ3、π、ε、δ和0多个亚基组成的五聚体复合物,其中α1、β2、γ2亚基是构成功能性受体的主要组分；介导GABA能快速突触反应。B型GABA受体属于G-蛋白耦合受体,是由GABBR1和GABBR2组成的二聚体复合物；介导GABA能缓慢突触反应。在此GABA能的传递通路中,我们最关注的是编码GABA (A)受体β2亚基的GABRB2基因,并已经通过病例对照研究、细胞实验,及小鼠实验发现了其DNA多态性、mRNA表达异常、蛋白受体功能受损以及表观修饰异常都可能与精神分裂症有关；该通路中的GAD1, GAD2基因同样有着充足的精神分裂症易感性证据,叁者均被收录于SZgene论坛数据库中；而GAT1基因作为编码脑内转运GABA的GAT蛋白最主要的基因,也有部分与精神分裂症相关的报道。精神分裂症致病是由遗传和环境因素共同起作用,并由表观调控介导的。上述基因中,对GAD1基因的表观调控研究相对较多,有小鼠实验发现表观药物甲硫氨酸(L-Methionine, MET)暴露可诱导产生精神分裂症类似行为,并伴随着RELN和GADl基因启动子区高甲基化改变,且通过组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠(Valproate acid, VPA)干预,在逆转异常行为的同时降低了RELN的甲基化。而我们对GABRB2基因的前期实验结果也显示,在临床精神分裂症患者中,GABRB2基因内含子8和9上的疾病相关SNP存在基因印迹现象,是精神分裂症患者中出现基因型依赖性RNA表达降低的表观调控机制；此外我们还发现精神分裂症患者GABRB2基因启动子区存在显着的高甲基化现象。斑马鱼是一种近年发展迅速的模式生物,与人类基因组高度同源,体型小、易养殖、易操作、易观察,还具有类似人类的脑组织形态划分,并存在着保守的精神行为调控机制,非常适合用于神经精神疾病的研究。具体到GABA能系统,斑马鱼作为脊椎动物,亦以GABA作为抑制性神经递质,此外,有针对小脑的研究证实斑马鱼GABA能系统,包括GAD蛋白和GABA受体的分布均与哺乳动物一致,且GABA A受体同样也可介导快速抑制性突触传递。目前利用斑马鱼研究精神疾病最成功的例子是抑郁症,已经实现了多种方法建模及相对完整的行为学检测体系,主要是新鱼缸实验,黑白箱实验加上其他实验；并可通过检查压力应激轴(HPA轴)和5-HT系统通路的改变(即检查皮质醇和5-HT含量的改变)进行生物学验证；下一步便可以应用该斑马鱼模型进行抗抑郁药物筛选工作了。而对于斑马鱼精神分裂症建模,据我们了解,现有为数不多的研究都是应用地卓西平马来酸盐(+MK-801)拮抗谷氨酸受体NMDA来进行的。综上所述,我们希望通过本研究揭示模式生物斑马鱼中gabrb2基因的发育生物学信息,尤其是甲基化调控信息；再利用表观药物MET暴露构建斑马鱼精神分裂症行为学模型,并系统检测gabrb2基因(GABRB2同源基因)和其他联系紧密的GABA能传递通路基因(gad1b, GAD1同源基因；gad2, GAD2同源基因；slc6a1b, GAT1同源基因)的甲基化及表达改变,以期对模型背后机制进行解释,并进一步为精神分裂症发生或发展的监测、治疗药物的开发提供靶点。材料与方法1.实验动物：本课题所用野生型AB系斑马鱼,全部由南方医科大学发育生物学教研室提供；其中,6-18月龄的成鱼用于普通交配产卵；6-11月龄的成鱼用于药物处理及后续试验,并使雌雄比例均衡。2.实验方法：(1)斑马鱼的饲养：斑马鱼饲养在专门的鱼房中,参照Westerfield的方法进行。重要参数如下：鱼房昼夜光照周期为日：夜=14：10,反渗透净水机制备的养鱼系统水,保持pH值7.2-7.6,水温28.5-29.5℃,电导率450-550μs/cm。(2)斑马鱼发育过程中甲基化图谱的构建：先进行限制性内切酶酶切,再结合荧光偏振的方法(FPDM)检测全基因组甲基化；结合荧光定量PCR的方法检测gabrb2基因启动子区甲基化。(3)斑马鱼发育过程中gabrb2 mRNA表达图谱的构建：先提取总RNA后逆转录为总cDNA,再应用荧光定量PCR的方法检测。(4)斑马鱼神经发育过程中gabrb2在脑组织内的定位：先需设计构建gabrb2基因的反义RNA探针,收集斑马鱼几个重要神经发育时间点的胚胎,以及6 dpf之前的幼鱼,再使用整体原位杂交技术定位基因表达。(5)斑马鱼成鱼药物处理：采用浸泡给药,所用表观药物MET参考Vuaden的实验,并增加了一个浓度,最终以低中高叁个浓度：1.5 mM,3.0 mM,6.0 mM,以及不加药物的空白对照,连续处理7天,每天换药。(6)斑马鱼行为学检测：进行了叁种行为学实验,包括检测基本精神状况及自发运动的新鱼缸实验(Novel tank test),检测社交行为检测的社交趋避实验(Social interaction test),以及检测认知行为的T迷宫实验(T-maze tank test)。叁种实验时间均需控制在当日光照后的4.5-9小时内进行(13：00-18：00),实验开始前,先将受试鱼转移至行为学检测所用场地,并给予受试鱼30 min时间来适应周围环境。叁种实验均采用先录制后分析的方式,前两种通过Etho Vision2.1软件进行分析,T迷宫实验则由培训过的研究人员通过盲法人为分析。(7)斑马鱼MET暴露后全基因组及GABA能传递相关基因的甲基化及mRNA表达分析：方法同发育过程中的相应检测,但基因除了gabrb2再加上gad1b, gad2和slc6a1b。3.统计方法：斑马鱼发育过程中全基因组甲基化、gabrb2基因启动子区甲基化和mRNA表达、新鱼缸实验、MET处理后各基因的启动子区甲基化和mRNA表达,依据方差齐性检验选用方差分析(ANOVA)或布朗分析(Brown-Forsythe analysis),并相应附以LSD或Dunnett T3的后检验；社交趋避实验、T-迷宫实验采用独立样本的t检验进行分析；甲基化和表达的相关性采用Spearman相关分析；p值小于0.05认为有统计学差异。实验结果1.斑马鱼全基因组甲基化水平随着发育而持续增加,尤其是8-16 hpf的神经系统发育早期,与0-4 hpf的神经系统发育准备期相比,甲基化提升最明显,约增加了一倍,之后甲基化水平基本稳定,提升程度有限。2.斑马鱼gabrb2基因启动子区甲基化水平随着发育而降低,检测的两个CCGG位点得到的结果均是如此,但距离转录起始点(TSS)-1336 bp位置的CCGG变化更明显。而斑马鱼gabrb2基因mRNA表达在发育初始有一短暂下调,随后持续升高,且成鱼比幼鱼要高很多,转折点在16 hpf-24 hpf间,且明显升高出现在2dpf后,即GABA能神经元出现,分泌GABA神经递质后。3.整体原位杂交结果显示gabrb2从24 hpf开始,随着大脑形态分化,出现特异信号,定位于前脑、中脑、中脑后脑边界,2 dpf开始在后脑也出现表达,且3 dpf-6 dpf斑马鱼大脑形态和gabrb2表达定位都非常稳定。4.行为学实验显示,高剂量MET暴露诱发了斑马鱼社交障碍和学习记忆障碍,这是精神分裂症的核心阴性症状和认知损害症状的表现；并降低了斑马鱼的焦虑水平,但未改变其自发运动模式。5.MET暴露广泛升高了全基因组和4个目标基因启动子区的甲基化水平,尤其是gabrb2-1336和gad1b-1397 CCGG位点。但即使是高剂量MET暴露,仍然未能引起GABA能传递系统4个目标基因mRNA表达显着下调。6.相关分析显示,斑马鱼发育过程中gabrb2 -1336 CCGG位点甲基化与其mRNA表达整体上呈负相关(尤其是经过表达转折点后),而MET暴露后相关性消失;gad1b-1397 CCGG位点甲基化受MET提升明显,与其表达同样不相关。结论1.发育过程中,斑马鱼gabrb2启动子区(尤其是-1336 CCGG位点)甲基化总体上负向调控mRNA表达,尤其是GABA能神经元出现后。2.高浓度MET暴露能在野生型AB系斑马鱼中模拟精神分裂症阴性症状和认知损害症状,以此构建精神分裂症模型。3.gabrb2及gad1b的表观失调(主要表现在gabrb2-1336 CCGG位点和gnd1b-1397 CCGG位点的甲基化失调),加上各GABA能传递相关基因启动子区的异常高甲基化,可能共同引起精神分裂症的阴性症状和认知损害症状发生。(本文来源于《南方医科大学》期刊2016-05-11）
陈芹[7]（2016）在《用过表达DNFGFR2方法构建肺发育缺陷猪模型》一文中研究指出器官移植延长了许多患者的寿命,提高了他们的生活质量,但是供体器官短缺严重制约着器官移植的发展,异种器官移植是解决这一难题的好方法。目前许多实验室致力于异种移植实验,包括肺移植,他们大多以猪肺为供体,狒狒替代人类作为受体,但在移植过程中存在免疫排斥等问题。本研究希望获得一个肺缺陷的猪模型,用病人的iPSCs注射进猪囊胚中,补偿性的填补肺发育微环境,产生一个完全的病人iPSCs来源的肺。肺发育开始时,从胚胎原肠的上皮细胞中伸出两个肺芽,两个肺芽反复分支形成各级气管,这种分支发育模式称为分支形态发生。FGFR2的一个亚型FGFR2b参与调控肺芽上皮分支形态发生。为了在肺分支形态发生过程中阻断FGFR2b功能,影响肺发育而不影响其他胚胎组织。本试验用人源SFTPC启动子在转基因猪的肺泡上皮细胞中表达显性失活FGFR2c和FGFR2b,以及表达可溶性显性失活的FGFR2b-HFc,阻断气管分支和上皮分化,获得肺发育缺陷的转基因猪。研究目的通过阻断FGFR2b下游信号构建肺缺陷猪模型。研究方法1.设计和构建叁种表达显性失活FGFR2的重组质粒,分别表达FGFR2c的胞外区和跨膜区(DNFGFR2c)和FGFR2b的胞外区和跨膜区(DNFGFR2b),以及表达FGFR2b胞外区和IgG的重链恒定区的重组蛋白(DNFGFR2b-HFc)。2.用细胞核转染法将构建好的DNFGFR2c、DNFGFR2b和)NFGFR2b-HFc重组质粒分别转染入猪原代成纤维细胞,经Puromycin筛选形成单细胞克隆,挑取细胞克隆并PCR鉴定。3.借助体细胞核移植方法,以转基因细胞作为体细胞核移植供体,以去核的卵母细胞为受体,经电融合形成囊胚,存活的囊胚移植到代孕母猪体内,怀孕母猪生出克隆猪。4.对获得的克隆小猪进行基因型和表型鉴定,用基因组PCR扩增方式进行基因型鉴定；基因芯片和RT-PCR方法检测nRNA水平表达；组织学观察肺发育情况；免疫组织化学检测肺间质和实质发育。实验结果应用体细胞核移植技术获得叁种克隆猪,基因型鉴定显示所有克隆猪均为转基因阳性,肺组织mRNA检测也为阳性。DNFGFR2c受体猪怀孕4头,其中1头受体猪E43剖出3只发育正常胎儿。另外3头受体猪足日分娩出7头胎儿,其中4头死胎,2头出生后立即死亡,还有1头出生后一个月死亡。E43和新生DNFGFR2c转基因猪的肺均未表现为明显发育滞后,新生DNFGFR2c转基因猪的围产期死亡率高(6/7)。DNFGFR2b受体猪怀孕3头,1头受体猪E43剖出3只发育正常胎儿,1头受体猪E110剖出3头发育正常胎儿,另1头受体猪足日分娩出2头死胎。E43DNFGFR2b转基因猪,肺叶以间质较多,肺气管分支较少,E110 DNFGFR2b转基因猪肺泡偏大,肺泡隔薄,肺泡隔胶原纤维较少,肺发育稍微滞后。DNFGFR2b-HFc受体猪怀孕2头,1头怀孕受体猪E43剖出6只正常胎儿；另1头受体猪E110剖出6头发育正常胎儿。E43 DNFGFR2b-HFc转基因猪,肺叶以间质为主,实质少,肺气管分支较少,肺远端间皮下间质中未见细支气管。E110DNFGFR2b转基因猪肺体积小,肺泡结构不典型,肺泡小,肺泡隔较厚,肺泡隔中胶原纤维较多,肺发育严重滞后。结论肺上皮细胞过表达DNFGFR2c、DNFGFR2b和DNFGFR2b-HFc能够部分阻断FGFs和FGFR2b信号通路,猪肺发育缺陷,导致死胎现象。DNFGFR2c转基因猪肺发育稍微滞后于野生型猪；DNFGFR2b转基因猪肺泡偏大,肺泡隔薄,肺泡隔胶原纤维较少；DNFGFR2b-HFc转基因猪肺远小于野生型猪,实质区偏小,肺泡隔较厚,肺泡小,间质异常发育,肺间质和肺泡隔中胶原纤维远多于野生型。(本文来源于《南京医科大学》期刊2016-05-01）
祁钰钰[8]（2016）在《利用可控表达转基因小鼠模型研究MSTN对肌肉生长发育的影响》一文中研究指出MSTN是肌肉生长发育的一个重要的负调控因子,是影响体型发育的经典基因之一,其表达量的增加与肌肉量的减少密切相关,抑制MSTN基因的功能,动物会呈现出双肌表型,这对畜牧生产、动物遗传育种、肌肉萎缩性疾病的诊断、治疗和预后等方面具有重要意义,但MSTN是一个在胚胎早期就能表达的基因,胚胎期沉默或敲除MSTN基因会因肌肉过度肥大而造成难产、流产、死胎。实现MSTN基因的可控表达成为发挥MSTN基因应用价值的关键。本研究通过设计MSTN shRNA并验证其基因沉默效率,构建可控表达MSTN shRNA载体,制备高效可诱导MSTN shRNA表达的转基因小鼠模型,利用可控表达转基因小鼠模型研究MSTN对肌肉生长发育的影响,为将可控表达的MSTN基因应用到基因工程育种、药物治疗肌肉萎缩病等方面奠定技术基础,提供有价值的参考。主要研究内容和结果如下：研究一：小鼠MSTN shRNA过表达载体构建及基因沉默效率检测本研究根据小鼠MSTN mRNA序列设计了4对shRNA序列,构建相应的MSTN shRNA过表达载体pGPU6/GFP/Neo-MSTN shRNA,利用QRT-PCR、Western blot技术检测shRNA干扰后细胞内MSTN mRNA及蛋白表达水平。结果表明,本研究设计并构建的4个MSTN shRNA过表达载体,在细胞水平都能有效降低MSTN mRNA及蛋白的表达水平,其中转染pGPU6/GFP/Neo-MSTN714载体细胞组基因沉默效率最高,MSTN mRNA和蛋白表达分别下降72%、74%,差异极显着(P<0.01)。研究二：小鼠MSTN shRNA可控表达载体构建及诱导效率检测选取干扰效率最好的shRNA MSTN714构建可控表达载体ptTS-MSTN shRNA,重组载体转染小鼠成肌细胞经G418筛选富集整合有外源载体的细胞,通过强力霉素诱导细胞中MSTN shRNA表达,利用细胞免疫荧光观察细胞内绿色荧光蛋白,利用QRT-PCR、 Western blot技术检测MSTN mRNA及蛋白的表达水平检测诱导效率。结果表明,tTS-MSTN shRNA组细胞和Control组细胞在不添加DOX时,仅检测到少量绿色荧光表达,添加DOX后,GFP蛋白信号显着增强；经DOX诱导后,转染含MSTN shRNA重组载体细胞组MSTN mRNA相对表达水平比未经DOX诱导组及其他对照组细胞中降低70%左右,差异极显着(P<0.01),MSTN蛋白也下降90%左右,其他各组间MSTN mRNA及蛋白表达量差异不显着(P>0.05)。研究叁：可控表达MSTN shRNA转基因小鼠的制备及对小鼠生长发育的评价将tTS-MSTN shRNA载体线性化后,利用显微注射法制备MSTN shRNA可控表达转基因小鼠。利用PCR技术对获得的FO代转基因小鼠进行整合检测,利用QRT-PCR方法检测转基因小鼠体内外源基因tTS的表达。检测结果表明,制备的159只F0代小鼠中得到8只阳性小鼠。选取tTS表达效率最好的转基因小鼠扩繁的后代进行转基因小鼠MSTN shRNA诱导活性、生长状况、繁殖性能、肌肉组织学等进行检测评价。结果表明,经DOX诱导的Tg+DOX组小鼠体重显着低于Tg、WT+DOX、WT组小鼠；所制备的转基因小鼠,DOX诱导前的产仔数(7±0.63&7.2±0.84)和窝存活仔数(6.2±0.75&6.4±0.55)均与同期饲养的正常小鼠(WT)差异不显着(P>0.05)；与未经诱导的MSTN转基因小鼠及正常小鼠相比,加DOX诱导之后的MSTN转基因小鼠肌纤维数目增多、肌纤维横截面积增大。(本文来源于《扬州大学》期刊2016-04-01）
张向鑫,陈广祥,成亮,徐人杰,邹天明[9]（2015）在《发育性髋关节发育不良兔模型Ⅱ型胶原的表达变化（英文）》一文中研究指出背景:轻度髋关节发育不良是导致成人骨性关节炎发病的主要原因,而髋臼软骨中胶原和蛋白多糖的变化可能是导致骨关节炎发生的直接原因。目的:观察早期髋关节发育不良兔模型髋臼软骨Ⅱ型胶原的表达变化。方法:将新西兰白兔左下肢作为实验侧,以膝关节伸直位、长腿管形石膏固定方法建立髋关节发育不良模型,右下肢为对照侧。结果与结论:兔实验侧髋臼软骨中可见局部软骨细胞簇集,细胞外基质甲苯胺蓝染色有失染现象,且Ⅱ型胶原阳性细胞数量与表达水平高于对照侧。提示Ⅱ型胶原表达可能与软骨退行性变有关。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2015年49期）
雷嘉颖,麦友刚,汤昔康,刘婷华[10]（2015）在《支气管肺发育不良模型新生鼠肺组织中miR15b及miR16的表达》一文中研究指出目的探讨miR15b及miR16在高氧诱导支气管肺发育不良(BDP)新生大鼠中的表达。方法 60只新生大鼠随机分为高氧组和空气组,每组30只,分别置于高氧(氧浓度≥90%)和空气中持续喂养;于生后第1、4、7天取材,HE染色光镜下观察大鼠肺组织形态结构变化,并采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学染色方法分别检测大鼠肺组织中miR15b、miR16和VEGF蛋白表达水平。结果随着高氧暴露时间延长,高氧组新生鼠逐渐表现出肺组织发育不良、肺泡结构简单化、肺泡数目减少和肺微血管发育受阻等病理改变。高氧暴露第7天,高氧组miR15b及miR16的相对表达量明显高于空气组,高氧组VEGF表达量明显低于空气组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR15b、miR16的表达量与VEGF的表达量呈负相关。结论 miR15b及miR16通过调控VEGF的表达在BPD的形成过程中发挥重要作用。(本文来源于《广东医学》期刊2015年11期）
发育表达模型论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的建立局灶性皮质发育不良(focal cortical dysplasia,FCD)模型,并分析缝隙连接蛋白(connexin,CX) 43在FCD模型的表达。方法取孕鼠产后第1天Wistar乳鼠为实验对象,液氮冷冻Wistar乳鼠大脑皮质制作FCD模型。实验大鼠分为对照组10只与实验组60只(依据冷冻时间,再分为30 s组、60 s组和90 s组,各亚组20只)。实验动物造模满8周时,行脑组织苏木精-伊红染色及免疫组织化学染色,观察细胞形态与CX43表达。结果实验组48只大鼠FCD造模成功(30 s组18只、60 s组18只和90 s组12只)。对照组脑组织切片结构分界清晰,细胞形态正常。实验组脑组织切片可见层状结构和柱状结构紊乱,存在形态异常神经元和气球样细胞。CX43阳性细胞数:对照组19.90±3.221,30 s组45.24±3.185,60 s组46.15±3.299,90 s组46.66±3.230,各实验组阳性细胞数均较对照组明显增多,差异具有统计学意义(均P <0.05)。结论液氮冷冻方法可成功建立FCD Ⅲd动物模型。缝隙连接蛋白构成的非突触传递机制,在癫疒间放电扩散中扮演重要角色。FCD Ⅲd的异常病理改变导致CX43在FCD Ⅲd大鼠模型表达增强,CX43增多可明显促进癫疒间发生。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
发育表达模型论文参考文献
[1].熊飞,韦宜山.复位法矫正发育性髋脱位模型兔:髋臼软骨细胞Caspase-3、Bcl-2的表达水平[J].中国组织工程研究.2019
[2].郭韬,陈尧.CX43在局灶性皮质发育不良模型的表达[J].中国微侵袭神经外科杂志.2019
[3].田志鹏.Brachyury基因突变模型小鼠胚胎发育中Wnt、FGF信号通路相关基因表达研究[D].内蒙古农业大学.2018
[4].李怡心.自闭症模型大鼠各生长发育阶段的脑组织中m-GABA_AR的表达情况及相关机制研究[D].重庆医科大学.2017
[5].赵日红,白纪红,张华,刘漫君.促红细胞生成素对新型支气管肺发育不良早产鼠模型TGF-β1表达的影响[J].广东医学.2016
[6].王丽娟.DNA甲基化对斑马鱼gabrb2基因表达的调控：正常发育调控及在MET诱导构建的精神分裂症模型中的失调现象[D].南方医科大学.2016
[7].陈芹.用过表达DNFGFR2方法构建肺发育缺陷猪模型[D].南京医科大学.2016
[8].祁钰钰.利用可控表达转基因小鼠模型研究MSTN对肌肉生长发育的影响[D].扬州大学.2016
[9].张向鑫,陈广祥,成亮,徐人杰,邹天明.发育性髋关节发育不良兔模型Ⅱ型胶原的表达变化（英文）[J].中国组织工程研究.2015
[10].雷嘉颖,麦友刚,汤昔康,刘婷华.支气管肺发育不良模型新生鼠肺组织中miR15b及miR16的表达[J].广东医学.2015