导读:本文包含了鸡胚模型论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:高糖,神经管畸形,肌肽,叶酸
鸡胚模型论文文献综述
谭蕊蓉[1]（2015）在《高糖诱导神经管畸形的鸡胚模型建立及肌肽的干预作用》一文中研究指出临床研究表明,糖尿病妊娠时母体持续性的高血糖会导致胚胎出现严重畸形,其中常见且最严重的情形是出现神经管畸形(neural tube defects,NTD)。然而,关于高糖致NTD的实验研究目前无十分理想的动物模型,其发生机理也尚未阐明。因此,本文通过建立一个全新的高糖致NTD模型,深入探讨其内在的分子机制。同时,基于此模型我们研究了内源性小分子活性肽—肌肽(carnosine)对高糖致NTD的干预作用,并进行了深入的机制研究。首先,我们采用鸡胚胎来建立高糖致胚胎NTD的体内模型,并从多方面验证此模型的有效性和准确性。通过向Hamburger-Hamilton(HH)stage 7的鸡胚气室注射一系列浓度的D型葡萄糖(0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/egg)模拟胚胎发育的高糖环境,孵育至第5日,取胚记录死亡率、体重等指标。体式显微镜下检查胚胎发育的外部表征,统计胚胎的NTD发生率。经固定、切片及HE染色后检查胚胎神经管的内部表征。结果显示,高糖导致胚胎死亡率上升、出现发育迟滞以及NTD率的增加,且与高糖浓度呈剂量依赖关系。胚胎神经管畸形的外部表征与临床表现一致,呈现出脑膨出、无脑、小脑等畸形;HE染色显示的内部表征,高糖诱导的神经管畸形主要表现为背侧神经管的闭合失败。为确定上述损伤是通过高糖进入胚胎体内而造成的,我们利用PET/CT-MRI联用技术对气室注射的葡萄糖进行放射性示踪,结果发现外源性添加的葡萄糖被胚胎吸收入体内代谢,且在中枢神经系统有显着分布;组织内葡萄糖浓度检测显示胚胎内的血糖及脑组织内糖含量均随高糖的浓度而增加;利用Real-time PCR检测,发现葡萄糖转运蛋白GLUT1及GLUT3的m RNA水平也在高糖下显着受到抑制。最后我们确定D-Glucose的0.4 mmol/egg为造模有效剂量。此外,考虑到高糖还有可能通过诱导代谢旁引起高渗应激而造起胚胎发育损伤,我们选用缺乏细胞转运蛋白的L-Glucose进行等渗对照实验。结果发现,L-Glucose并不能显着引起NTD的发生,且其造成的胚胎死亡、发育迟缓及组织糖含量变化远不及同剂量的D-Glucose,进一步确定了高糖是引起胚胎发育损伤的根本原因,其伴随的高渗作用只是次要的原因。基于我们建立的高糖诱导鸡胚神经管畸形模型,经过前期筛选,我们发现了内源性小分子活性肽肌肽对该模型具有干预作用。同时我们选用了孕期常用抗NTD的药物叶酸进行了对比实验。在胚胎孵育的第0 h预添加0.1、0.5、1、5、10 nmol/egg的两种药物,24h后(HH stage 7)给予高糖造模继续孵育至第5天,取胚,记录死亡率、胚重。镜检并记录胚胎NTD率;经切片、染色观察内部表征。结果显示,0.1 nnmol/egg以上剂量的肌肽对高糖诱导的胚胎发育损伤有明显恢复作用,胚胎NTD率显着性地降低。对照药物叶酸的恢复作用明显不及肌肽,仅在5 nmol/egg剂量降低了一定的NTD率。胚胎的整体形态及神经管横断切面的HE染色亦显示肌肽能完好地修复神经管闭合缺陷,而叶酸只能部分地修复。检测血糖及GLUT1及3的m RNA水平时发现肌肽能够显着性恢复血糖含量及GLUTs的异常抑制状态,提示肌肽可能通过某种途径提高了细胞的葡萄糖耐量,缓解了胞内高糖的应激状态。相比之下,叶酸对于高血糖及转运蛋白均无明显作用。Pax3蛋白是一种与神经系统发育紧密相关的转录调控因子。其在神经管的发育中参与了脊髓背腹侧模式的形成,通过调控背侧神经元的分化和凋亡而影响神经管的闭合。我们探讨了关键调控因子Pax3是否参与了高糖诱导的NTD及肌肽的修复作用。利用免疫荧光检测孵育了48 h的鸡胚Pax3蛋白的表达分布,结果显示高糖模型组胚胎在神经管闭合失败的同时,Pax3蛋白的较正常组表达明显下降。肌肽显着性地修复了NTD与Pax3蛋白的表达。而叶酸虽然部分地修复了NTD,但对Pax3蛋白无明显作用。为进一步验证叶酸代谢与高糖诱导的NTD的联系,我们还利用了叶酸的拮抗剂甲氨蝶呤(MTX)代替高糖对24 h的鸡胚造模诱导NTD,发现MTX诱导了相似的NTD表征,但其Pax3蛋白表达水平与正常组类似。以上结果进一步证实了由高糖诱导的NTD和与叶酸代谢异常相关的NTD有所不同,而Pax3蛋白的损失则有可能是此类NTD及肌肽特异性修复作用的关键靶点。利用Western blotting检测了3.5日胚龄鸡胚的Pax3蛋白水平的变化也得到了与免疫荧光类似的结果。利用Real-time PCR检测相关基因表达,发现Pax3下游基因Shh、c-MET、Sox10以及NACM等基因在高糖诱导下下调,肌肽能使之恢复,但Pax3基因在高糖诱导下无明显变化。对于Pax3基因与蛋白水平变化的不一致,我们推测可能是由于高糖及肌肽影响了Pax3转录后的某一修饰过程。我们进一步研究了与高糖应激相关的翻译后修饰—O-Glc NAc修饰对Pax3蛋白的影响,探讨此种营养感受调节机制是否参与了高糖诱导的Pax3蛋白降低,以及肌肽对胚胎Pax3蛋白的修复作用机制。我们检测了鸡胚中总蛋白的O-Glc NAc修饰水平以及O-Glc NAc修饰的两种酶OGT与OGA的基因表达,结果均显示高糖能够诱导O-Glc NAc修饰水平的增加,而肌肽对此修饰水平的异常有修复作用。我们进一步利用Co-IP纯化Pax3蛋白,再检测该转录因子的O-Glc NAc修饰水平,显示Pax3蛋白能被O-Glc NAc修饰,且在高糖下该修饰增加,肌肽作用下恢复。利用免疫荧光双标技术及激光共聚焦检测Pax3与O-Glc NAc的共定位,显示正常胚胎中Pax3蛋白与O-Glc NAc修饰共定位于核质连接部位。高糖作用下使Pax3的O-Glc NAc修饰水平增加,肌肽作用下有所恢复。以上结果证明了Pax3蛋白的O-Glc NAc异常增多可能参与了高糖诱导NTD的机制,而这也可能是肌肽修复此发育损伤的作用靶点之一。综上,我们采用鸡胚建立了一个高糖诱导NTD的新模型,深入地探讨了高糖环境下胚胎NTD的形成机制,为研究糖尿病妊娠导致胚胎畸形的分子机制提供了新的理论依据。同时,我们还证明了内源性小分子活性肽—肌肽对高糖诱导的神经管畸形的保护作用,为预防和治疗此类代谢相关的胚胎疾病提供了全新的策略与思路。(本文来源于《暨南大学》期刊2015-06-05）
张敏,亓翠玲,王丽京[2]（2013）在《鸡胚模型筛选抗血管生成药物的实验方法改进》一文中研究指出目的对传统的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)和卵黄囊膜(YSM)测定法改进,利于评价和筛选抗血管生成的药物。方法在CAM模型中,改变传统的开窗位置、加药载体和结果观察方法;针对YSM模型,改进加药载体和加药部位,优化对实验数据的统计分析;使用重组人血管内皮抑制素endostar和生理盐水对照组评价效果。结果 endostar能明显抑制CAM血管形成,并且抑制YSM的血管密度和面积增长率,与对照组相比有统计学差异(P<0.01)。结论通过本实验对CAM和YSM测定的改进,建立了一个成熟而稳定的筛选抗血管形成药物的实验方法。(本文来源于《中国医疗前沿》期刊2013年13期）
张斌,阮喜云,陈杰,张士宝,刘双庆[3]（2012）在《人肾癌鸡胚模型的建立及其肿瘤生物学特性的研究》一文中研究指出目的建立人肾癌鸡胚模型,探讨其形态及生物学特性。方法将肾癌细胞系RLC-310接种于鸡胚绒毛尿囊膜,观察影响肾癌鸡胚移植瘤成活的因素、移植瘤生长特性、形态学特征和生物学性状。结果成功建立了人肾癌鸡胚移植瘤模型;移植瘤易于生长并具有较强的血管诱导作用;光镜下移植瘤具有与人肾癌类似的组织结构。结论该模型容易建立,能动态观察肾癌诱导血管生成的全过程,可用于肾癌的实验研究。(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2012年01期）
刘薇[4]（2009）在《利用鸡胚模型进行基因功能研究的技术和方法》一文中研究指出鸡胚作为经典的胚胎生物学模型被用来研究发育学现象几十年前就有报道。随着新的技术手段的发明和鸡的基因组序列的完善,鸡胚又重新成为了研究发育过程中重要基因功能的模型。基因功能获得和缺失是研究基因功能的重要手段。本文讨论了可以在胚胎发育早期调整基因功能的转基因技术和方法。(本文来源于《中国家禽》期刊2009年12期）
徐珍珍[5]（2009）在《缺血/缺氧预处理对子宫内膜异位症鸡胚模型血管生成的影响》一文中研究指出目的建立子宫内膜异位症的鸡胚模型,分析缺血/缺氧预处理对子宫内膜异位症血管生成的影响。方法选择子宫内膜异位症病例一名进行缺血/缺氧预处理,并分别刮取处理前后子宫内膜组织作为对照组和实验组。把两组内膜种植到孵育七天的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM),孵育叁天后,查看各组子宫内膜的存活情况,并用免疫组化(SP)检测血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)。结果实验组的种植成功率较对照组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05)。免疫组化检测MVD和VEGF在实验组的表达显着增强,差异有统计学意义(P＜0.05),且VEGF的表达与MVD成正相关(P＜0.05)。结论CAM模型是研究EMs血管生成的理想模型。VEGF通过促血管生成在该病发生发展中起着重要作用。缺血/缺氧预处理可通过上调VEGF的表达和微血管生成增强子宫内膜的异位种植存活率。(本文来源于《苏州大学》期刊2009-05-01）
王恒,殷慧群,章孝荣[6]（2009）在《鸡胚模型在生物研究中的应用进展》一文中研究指出实验动物模型在预防、诊断、治疗疾病和探讨疾病的发生机制等方面起到了至关重要的作用。鸡胚发育过程清楚,利用鸡胚本身的结构特点,可作为研究与胚胎发育相关的生物学实验模型。另外,鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管丰富,是天然免疫缺陷宿主,可作为血管药理学、肿瘤学等方面研究的一个较为理想的实验模型。本文综述了鸡胚模型在生物实验研究中的应用进展。(本文来源于《生命科学》期刊2009年02期）
贾素红[7]（2009）在《缺血/氧预处理对人子宫内膜异体移植鸡胚模型影响》一文中研究指出目的:构建人子宫内膜异体移植鸡胚模型(Chicken chorioallantoic membrane CAM),通过对子宫内膜进行缺血/氧预处理,观察种植灶存活情况,观察模型中基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1 MMP-1)的水平,探测缺血缺氧在子宫内膜异位症发病中作用及意义。方法:将子宫肌瘤患者及子宫内膜异位症(Endometriosis EMs)患者在位内膜组织接种于鸡胚绒毛尿囊膜上,建立子宫内膜异体移植鸡胚模型。60只受精鸡卵根据种植的内膜来源不同随机分为正常组、内异症组、实验组;正常组种植子宫肌瘤患者的在位内膜,内异症组种植EMs患者的在位子宫内膜,实验组种植缺血预处理的同一EMs患者在位内膜。光镜下观察CAM种植灶中细胞形态及特点;免疫组织化学检测MMP-1在鸡胚模型种植灶中的表达。结果:1、成功构建了鸡胚模型,共获取标本36例,经HE染色,显微镜观察,在种植灶中检测到形态完好的子宫内膜腺体及间质细胞,说明发生侵袭的可以是腺体细胞,也可以是间质细胞;免疫组化见定位于人间质细胞胞浆中的波形蛋白,证实组织来源为人源性。2、大体标本见子宫内膜在鸡胚绒毛尿囊膜的生长情况EMs组稍强于肌瘤组,但无统计学意义;免疫组化见内异症组种植灶中MMP-1的表达与正常组无明显差别(P>0.05),这说明EMs患者与非内异症患者子宫内膜在分泌早期无差别。3、实验组MMP-1在间质细胞和腺体细胞中表达无差别(P>0.05);实验组种植灶中MMP-1的含量明显高于内异症组及正常组(P<0.05),提示缺血/缺氧预处理(IP/HP)提高了在位内膜脱落后对经历长时间缺血缺氧的耐受力,上调了MMP-1表达,能在各种因素的作用下异地种植存活,形成内异症。结论:1、鸡胚尿囊膜模型是研究内异症发病早期过程的很好模型。2、EMs患者与非内异症患者在分泌早期其种植存活力无差别。3、IP/HP提高了子宫内膜在CAM模型中种植成活率并上调了MMP-1的表达。4、缺血缺氧预处理是内异症发病的一个影响因素。(本文来源于《苏州大学》期刊2009-03-01）
王含必,冷金花,朱兰,刘珠凤,孙大为[8]（2007）在《抗血管内皮生长因子抗体对异位子宫内膜鸡胚模型干预的研究》一文中研究指出目的尝试构建子宫内膜异位种植的鸡胚模型,并利用此模型探讨抗血管内皮生长因子(VEGF)抗体在子宫内膜异位症(内异症)治疗中的作用机制。方法将人类的子宫内膜组织种植到鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上,采用分组对照研究,内异症对照组和非内异症对照组为分别种植内异症及非内异症患者的子宫内膜,以磷酸盐缓冲液作为药物对照;内异症实验组和非内异症实验组为分别种植内异症及非内异症患者的子宫内膜,使用抗 VEGF 抗体作用的鸡胚模型。末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷叁磷酸标记法(TUNEL)检测细胞凋亡、增殖细胞核抗原(PCNA)检测细胞增殖并检测微血管密度(MVD)。结果成功构建了子宫内膜异位种植的鸡胚模型。内异症实验组细胞的凋亡强度[(6.9±0.8)分]比内异症对照组[(5.4±1.1)分]明显增高,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);非内异症实验组细胞的凋亡强度[(6.7±0.9)分]也高于非内异症对照组[(5.0±0.9)分;P<0.05]。内异症实验组的 MVD[(4.9±1.2)条]比内异症对照组[(9.1±3.0)条]明显降低,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);非内异症实验组的 MVD[(4.2±1.1)条]也低于非内异症对照组[(6.9±1.6)条;P<0.05]。细胞增殖强度在各组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论异位子宫内膜鸡胚模型可作为研究异位子宫内膜血管形成及抗血管形成的动物模型;抗 VEGF 抗体可能是通过促进内膜细胞的凋亡,促进血管内皮细胞的凋亡,抑制血管形成从而达到抑制细胞种植、生长的目的,而对细胞的增殖无明显的抑制作用。(本文来源于《中华妇产科杂志》期刊2007年01期）
胥明,蒋海飚,王兴鹏[9]（2006）在《人胰腺癌鸡胚模型的建立及其肿瘤生物学观察》一文中研究指出目的建立人胰腺癌鸡胚移植模型,为临床胰腺癌研究提供一种简便实用的工具。方法将人胰腺癌细胞系SW1990细胞接种到鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上,动态观察移植瘤的形态及肿瘤生物学特性,分析影响移植瘤成活的因素,并对瘤组织行组织学检查。结果成功建立了人胰腺癌鸡胚移植模型,移植瘤组织学结构与人胰腺癌相似;接种癌细胞数量影响接种成瘤率,接种癌细胞数量越大,成瘤率越高;移植瘤可诱发血管生成并向肿瘤呈放射状集中。结论将SW1990细胞接种到鸡胚上建立鸡胚移植胰腺癌是可行的,本模型可动态观察胰腺癌生长,模拟其在体内生长情况,为胰腺癌研究提供一种简便实用的工具。(本文来源于《胰腺病学》期刊2006年02期）
王强,刘红云,沈关心[10]（2006）在《绿色荧光蛋白白血病鸡胚模型的构建》一文中研究指出目的构建含绿色荧光蛋白(GFP)的白血病鸡胚模型。方法K562细胞转染GFP质粒后,经筛选,将稳定高表达GFP的K562细胞注射到鸡胚里,孵化后观察K562细胞在鸡胚中转移的情况。结果在脑部、胸骨及心脏可看到明显的荧光,最频繁发生的部位是脑部。结论成功构建了含GFP的白血病鸡胚模型,为在体研究肿瘤的发生、发展、转移及抗肿瘤药物的筛选提供了很好的工具。(本文来源于《华中医学杂志》期刊2006年01期）
鸡胚模型论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的对传统的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)和卵黄囊膜(YSM)测定法改进,利于评价和筛选抗血管生成的药物。方法在CAM模型中,改变传统的开窗位置、加药载体和结果观察方法;针对YSM模型,改进加药载体和加药部位,优化对实验数据的统计分析;使用重组人血管内皮抑制素endostar和生理盐水对照组评价效果。结果 endostar能明显抑制CAM血管形成,并且抑制YSM的血管密度和面积增长率,与对照组相比有统计学差异(P<0.01)。结论通过本实验对CAM和YSM测定的改进,建立了一个成熟而稳定的筛选抗血管形成药物的实验方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
鸡胚模型论文参考文献
[1].谭蕊蓉.高糖诱导神经管畸形的鸡胚模型建立及肌肽的干预作用[D].暨南大学.2015
[2].张敏,亓翠玲,王丽京.鸡胚模型筛选抗血管生成药物的实验方法改进[J].中国医疗前沿.2013
[3].张斌,阮喜云,陈杰,张士宝,刘双庆.人肾癌鸡胚模型的建立及其肿瘤生物学特性的研究[J].西安交通大学学报(医学版).2012
[4].刘薇.利用鸡胚模型进行基因功能研究的技术和方法[J].中国家禽.2009
[5].徐珍珍.缺血/缺氧预处理对子宫内膜异位症鸡胚模型血管生成的影响[D].苏州大学.2009
[6].王恒,殷慧群,章孝荣.鸡胚模型在生物研究中的应用进展[J].生命科学.2009
[7].贾素红.缺血/氧预处理对人子宫内膜异体移植鸡胚模型影响[D].苏州大学.2009
[8].王含必,冷金花,朱兰,刘珠凤,孙大为.抗血管内皮生长因子抗体对异位子宫内膜鸡胚模型干预的研究[J].中华妇产科杂志.2007
[9].胥明,蒋海飚,王兴鹏.人胰腺癌鸡胚模型的建立及其肿瘤生物学观察[J].胰腺病学.2006
[10].王强,刘红云,沈关心.绿色荧光蛋白白血病鸡胚模型的构建[J].华中医学杂志.2006