导读:本文包含了金属螯合亲和反胶团论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:增强型绿色荧光蛋白,萃取,反萃,金属螯合亲和反胶团
金属螯合亲和反胶团论文文献综述
冯旭东[1]（2009）在《新型金属螯合亲和反胶团对EGFP萃取特性的研究》一文中研究指出反胶团萃取技术广泛应用在蛋白质等生物活性物质的分离过程中,但是传统的离子型反胶团在萃取过程中往往对蛋白质选择性低以及使蛋白质失活。基于此,本研究室前人开发出了新型的金属螯合亲和反胶团(MCARM),为了验证此反胶团对实际表达蛋白的萃取分离能力,本文利用MCARM对基因工程表达产物6×his标记的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的萃取特性进行了系统的分析。首先,本文研究了MCARM对纯化好的EGFP的萃取以及反萃特性。研究内容包括EGFP的萃取及反萃动力学;金属离子浓度、pH、盐浓度对EGFP萃取率的影响;咪唑浓度、pH和盐浓度对EGFP反萃率的影响。结果表明,MCARM萃取EGFP的平衡时间为6 min,反萃平衡时间为120 min。当镍离子浓度为2 mmol/L,萃取的操作pH为7~9,盐浓度为0.1 mol/L时,可将浓度为0.5 mg/mL的EGFP的萃取率达到90%以上。当反萃液中咪唑浓度为500 mmol/L,pH在8~10之间,盐浓度为0.1 mol/L时,EGFP的反萃率达到90%以上,所得产物具有荧光活性。验证了MCARM对EGFP具有高萃取率和高反萃率。在上述工作基础上,本文进一步利用该反胶团直接从表达菌的破菌上清液中纯化可溶表达的EGFP。从上样蛋白质浓度、反胶团中镍离子浓度以及萃取次数等方面对EGFP的纯化条件进行了优化,并最终与金属螯合色谱进行了比较。结果表明,料液蛋白浓度为0.6 mg/mL,上样量为4 mL,反胶团中镍离子浓度为3 mmol/L时,破菌上清液的一次总萃取率为70.6%,二次萃取后的总萃取率可提高至87.1%,得到的产品纯度为86.9%,纯化因子4.03,实现了直接从表达菌产物中高度分离纯化EGFP的目标,与金属螯合色谱相比,MCARM的处理量较大、萃取分离所用的时间较少,体现出新型MCARM的实际应用前景。(本文来源于《天津大学》期刊2009-05-01）
邱炜[2]（2007）在《金属螯合亲和反胶团的制备与应用初探》一文中研究指出反胶团萃取技术在生物活性物质如蛋白质的分离领域被广泛的应用与研究。但传统的离子型反胶团在萃取过程中往往对蛋白质选择性低,并且与蛋白质之间作用力过强而使蛋白质失活。带有色素亲和配基(辛巴蓝,CB)的非离子型反胶团解决了蛋白质与反胶团作用力过强而变性的问题,但是对离子强度和高浓度的变性剂耐受力差。因此本文研制出新型金属螯合亲和非离子反胶团系统,并对影响此反胶团系统的条件如pH,离子强度等进行了分析研究。最后,利用此反胶团对蛋白质萃取进行了初步的探索。通过双液相合成的方法将非离子型表面活性剂(Span85)分子结合螯合剂TED(叁羧甲基乙二胺),通过螯合作用连接金属配基(Cu~(2+)),并以正己烷为溶剂制备出Span85-TED-Cu金属螯合亲和反胶团。利用水份测定仪和粒径测定仪对亲和反胶团的性质进行了研究。结果表明,随着金属配基Cu~(2+)的引入,Span85-TED-Cu反胶团的含水率(W_0),反胶团粒径(Z-average size)均比Span85反胶团有显着的提高。Span85-TED-Cu反胶团能够在较宽的pH范围(5～9),较大的离子强度(0.5mol/L)以及高浓度的变性剂(8mol/L Urea)条件下保持含水率不变。对Span85-TED-Cu反胶团萃取蛋白质进行初探。研究表明,反胶团萃取蛋白质受到表面活性剂浓度、金属配基浓度以及助剂(醇)的影响,但可耐受宽pH范围、较高离子强度以及高浓度的变性剂。萃取牛血红蛋白(BH)时,萃取率E达到70%。助剂的加入可以增加反胶团对蛋白质的萃取率,但会影响蛋白质在反胶团相的稳定存在,使蛋白质沉积于相界面,不利于蛋白质的复性。(本文来源于《天津大学》期刊2007-08-01）
金属螯合亲和反胶团论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
反胶团萃取技术在生物活性物质如蛋白质的分离领域被广泛的应用与研究。但传统的离子型反胶团在萃取过程中往往对蛋白质选择性低,并且与蛋白质之间作用力过强而使蛋白质失活。带有色素亲和配基(辛巴蓝,CB)的非离子型反胶团解决了蛋白质与反胶团作用力过强而变性的问题,但是对离子强度和高浓度的变性剂耐受力差。因此本文研制出新型金属螯合亲和非离子反胶团系统,并对影响此反胶团系统的条件如pH,离子强度等进行了分析研究。最后,利用此反胶团对蛋白质萃取进行了初步的探索。通过双液相合成的方法将非离子型表面活性剂(Span85)分子结合螯合剂TED(叁羧甲基乙二胺),通过螯合作用连接金属配基(Cu~(2+)),并以正己烷为溶剂制备出Span85-TED-Cu金属螯合亲和反胶团。利用水份测定仪和粒径测定仪对亲和反胶团的性质进行了研究。结果表明,随着金属配基Cu~(2+)的引入,Span85-TED-Cu反胶团的含水率(W_0),反胶团粒径(Z-average size)均比Span85反胶团有显着的提高。Span85-TED-Cu反胶团能够在较宽的pH范围(5～9),较大的离子强度(0.5mol/L)以及高浓度的变性剂(8mol/L Urea)条件下保持含水率不变。对Span85-TED-Cu反胶团萃取蛋白质进行初探。研究表明,反胶团萃取蛋白质受到表面活性剂浓度、金属配基浓度以及助剂(醇)的影响,但可耐受宽pH范围、较高离子强度以及高浓度的变性剂。萃取牛血红蛋白(BH)时,萃取率E达到70%。助剂的加入可以增加反胶团对蛋白质的萃取率,但会影响蛋白质在反胶团相的稳定存在,使蛋白质沉积于相界面,不利于蛋白质的复性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
金属螯合亲和反胶团论文参考文献
[1].冯旭东.新型金属螯合亲和反胶团对EGFP萃取特性的研究[D].天津大学.2009
[2].邱炜.金属螯合亲和反胶团的制备与应用初探[D].天津大学.2007