杂合病毒载体论文-杨月峰,肖凤君,王华,鲁茁壮,李泽良

杂合病毒载体论文-杨月峰,肖凤君,王华,鲁茁壮,李泽良

导读:本文包含了杂合病毒载体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:造血细胞,原代,腺病毒,甲病毒

杂合病毒载体论文文献综述

杨月峰,肖凤君,王华,鲁茁壮,李泽良[1](2011)在《一种高效感染造血细胞的第叁代腺病毒-甲病毒杂合病毒载体》一文中研究指出目的:构建高效介导造血细胞基因转移的腺病毒-甲病毒杂合载体,明确其对造血细胞的感染效率并初步探讨其机制,为杂合载体应用于造血细胞介导的基因治疗,特别是白血病自体瘤苗体外修饰,提供实验依据和基础。方法:采用第叁代重组腺病毒技术制备携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的腺病毒-甲病毒杂合载体Ad5/F11p-SFV-GFP,氯化铯密度梯度离心纯化病毒,并采用real-timePCR测定其颗粒滴度和辅助病毒含量。不同颗粒滴度(本文来源于《第13届全国实验血液学会议论文摘要》期刊2011-11-24)

徐学武,俞卫锋,王星华,李泉,董刚[2](2005)在《含人β-内啡呔融合基因的腺病毒腺相关杂合病毒载体的构建与鉴定》一文中研究指出目的:构建含人β-内啡呔融合基因的腺病毒腺相关杂合病毒。方法:构建腺病毒穿梭质粒pDC312-DTREE,与骨架质粒共转染HEK293细胞,细胞内同源重组包装出腺病毒腺相关杂合病毒。PCR法鉴定病毒及TCID50法测定病毒滴度。杂合病毒感染NIH3T3细胞观察转基因的表达,ELISA法测定表达产物浓度。结果:穿梭质粒pDC312-DTREE经限制性核酸内切酶AatII及NotI酶切结果正确。PCR鉴定结果表明病毒DNA内有人β-内啡呔DNA序列,且无野生型病毒的污染,病毒滴度为1.29×1010PFUml。病毒感染细胞后第3d,细胞培养液内有高浓度的β-内啡呔。结论:成功构建了含人β-内啡呔融合基因的腺病毒腺相关杂合病毒,为进行下游相关研究奠定了基础。(本文来源于《生物技术》期刊2005年04期)

侯军,王健民,闵碧荷[3](2001)在《含hFⅨ微小基因的杂合型逆转录病毒载体在小鼠成肌细胞中高效表达的研究》一文中研究指出目的 探讨不同载体结构在成肌细胞中表达hFⅨ蛋白的效果 ,优化载体结构 ,为血友病B基因治疗提供实验依据。方法 制备带有两拷贝肌酸激酶增强子 (Me2 )和内含子m2 的叁种逆转录病毒载体pLMe2Ⅸm2 SN (Me2正向插入 3′LTR的增强子区域 )、pLMe2Ⅸm2 SN(Me2反向插入 )及pLⅨm2 SN ,筛选高效表达hFⅨ的PA317细胞克隆 ,稳定转染成肌细胞 ,分别对单克隆及混合克隆的上清和细胞进行ELISA、PCR等检测及鉴定 ,并与pLⅨSN载体相比较。结果 不同逆转录病毒载体转染靶细胞后hFⅨ表达水平依次为LMe2Ⅸm2 SN(正向 ) >LMe2Ⅸm2 SN(反向 ) >LⅨm2 SN >LⅨSN ;增强子方向不同的两个载体表达水平差异有显着性 ,正向插入者蛋白表达量较反向插入者高 ;靶细胞中反向插入的Me2在 5′LTR中有不同程度的缺失 ,其方向未发生变化。结论 选择组织特异性增强子及优化FⅨ微小基因结构是提高表达水平的有效手段 ,正向插入增强子的载体能稳定表达外源基因(本文来源于《中华血液学杂志》期刊2001年03期)

杂合病毒载体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:构建含人β-内啡呔融合基因的腺病毒腺相关杂合病毒。方法:构建腺病毒穿梭质粒pDC312-DTREE,与骨架质粒共转染HEK293细胞,细胞内同源重组包装出腺病毒腺相关杂合病毒。PCR法鉴定病毒及TCID50法测定病毒滴度。杂合病毒感染NIH3T3细胞观察转基因的表达,ELISA法测定表达产物浓度。结果:穿梭质粒pDC312-DTREE经限制性核酸内切酶AatII及NotI酶切结果正确。PCR鉴定结果表明病毒DNA内有人β-内啡呔DNA序列,且无野生型病毒的污染,病毒滴度为1.29×1010PFUml。病毒感染细胞后第3d,细胞培养液内有高浓度的β-内啡呔。结论:成功构建了含人β-内啡呔融合基因的腺病毒腺相关杂合病毒,为进行下游相关研究奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

杂合病毒载体论文参考文献

[1].杨月峰,肖凤君,王华,鲁茁壮,李泽良.一种高效感染造血细胞的第叁代腺病毒-甲病毒杂合病毒载体[C].第13届全国实验血液学会议论文摘要.2011

[2].徐学武,俞卫锋,王星华,李泉,董刚.含人β-内啡呔融合基因的腺病毒腺相关杂合病毒载体的构建与鉴定[J].生物技术.2005

[3].侯军,王健民,闵碧荷.含hFⅨ微小基因的杂合型逆转录病毒载体在小鼠成肌细胞中高效表达的研究[J].中华血液学杂志.2001

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