本文主要研究内容
作者谢志勤,谢芝勋,范晴,张民秀,罗思思,张艳芳,曾婷婷,黄娇玲,王盛,谢丽基,邓显文,刘加波,庞耀珊（2019）在《牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立》一文中研究指出：为建立基于TaqMan探针的双重荧光PCR技术检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的方法,根据IBRV gB基因序列和BVDV 5′端非编码区序列的保守区域,分别设计1对IBRV的特异性引物和1条FAM标记的TaqMan探针,1对BVDV的特异性引物和1条ROX标记的TaqMan探针,建立双重荧光定量PCR检测IBRV和BVDV的方法。对建立的检测方法进行特异性和敏感性测定,并用临床样品进行检测验证。特异性试验结果显示,该方法检测参试的IBRV毒株,在波长530μm(FAM)时收集到特异性荧光信号曲线,检测参试的BVDV毒株,在610μm(ROX)时收集到特异性荧光信号曲线,无交叉信号出现,对照的毒株无论是在530μm(FAM),还是610μm(ROX)处,均无荧光信号曲线出现,方法的特异性好;敏感性试验结果显示,该双重荧光定量PCR可检测到100个拷贝的IBRV和BVDV质粒DNA模板;临床样品检测结果表明,对保存在-70℃的127份牛病料样品核酸进行检测,IBRV阳性12份,BVDV阳性26份,IBRV和BVDV同为阳性2份,为混合感染,检测的拷贝数分别为6.24×105和6.32×104拷贝/μL。阳性样品经序列比对分析,分别与IBRV和BVDV的序列100%同源。建立的双重实时荧光定量PCR方法检测IBRV和BVDV具有特异、敏感等优点,可用于临床样品的鉴别检测。
Abstract
wei jian li ji yu TaqMantan zhen de shuang chong ying guang PCRji shu jian ce niu chuan ran xing bi qi guan yan bing du (IBRV)he niu bing du xing fu xie bing du (BVDV)de fang fa ,gen ju IBRV gBji yin xu lie he BVDV 5′duan fei bian ma ou xu lie de bao shou ou yu ,fen bie she ji 1dui IBRVde te yi xing yin wu he 1tiao FAMbiao ji de TaqMantan zhen ,1dui BVDVde te yi xing yin wu he 1tiao ROXbiao ji de TaqMantan zhen ,jian li shuang chong ying guang ding liang PCRjian ce IBRVhe BVDVde fang fa 。dui jian li de jian ce fang fa jin hang te yi xing he min gan xing ce ding ,bing yong lin chuang yang pin jin hang jian ce yan zheng 。te yi xing shi yan jie guo xian shi ,gai fang fa jian ce can shi de IBRVdu zhu ,zai bo chang 530μm(FAM)shi shou ji dao te yi xing ying guang xin hao qu xian ,jian ce can shi de BVDVdu zhu ,zai 610μm(ROX)shi shou ji dao te yi xing ying guang xin hao qu xian ,mo jiao cha xin hao chu xian ,dui zhao de du zhu mo lun shi zai 530μm(FAM),hai shi 610μm(ROX)chu ,jun mo ying guang xin hao qu xian chu xian ,fang fa de te yi xing hao ;min gan xing shi yan jie guo xian shi ,gai shuang chong ying guang ding liang PCRke jian ce dao 100ge kao bei de IBRVhe BVDVzhi li DNAmo ban ;lin chuang yang pin jian ce jie guo biao ming ,dui bao cun zai -70℃de 127fen niu bing liao yang pin he suan jin hang jian ce ,IBRVyang xing 12fen ,BVDVyang xing 26fen ,IBRVhe BVDVtong wei yang xing 2fen ,wei hun ge gan ran ,jian ce de kao bei shu fen bie wei 6.24×105he 6.32×104kao bei /μL。yang xing yang pin jing xu lie bi dui fen xi ,fen bie yu IBRVhe BVDVde xu lie 100%tong yuan 。jian li de shuang chong shi shi ying guang ding liang PCRfang fa jian ce IBRVhe BVDVju you te yi 、min gan deng you dian ,ke yong yu lin chuang yang pin de jian bie jian ce 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自动物医学进展的谢志勤,谢芝勋,范晴,张民秀,罗思思,张艳芳,曾婷婷,黄娇玲,王盛,谢丽基,邓显文,刘加波,庞耀珊，发表于刊物动物医学进展2019年03期论文，是一篇关于牛传染性鼻气管炎病毒论文,牛病毒性腹泻病毒论文,双重荧光定量论文,探针论文,检测论文,动物医学进展2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自动物医学进展2019年03期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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