外膜糖蛋白论文-张应玖,金宁一,王宏伟,沈家骢

外膜糖蛋白论文-张应玖,金宁一,王宏伟,沈家骢

导读:本文包含了外膜糖蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:人免疫缺陷病毒,外膜蛋白,纯化

外膜糖蛋白论文文献综述

张应玖,金宁一,王宏伟,沈家骢[1](2001)在《毕赤酵母表达的HIV-2外膜糖蛋白的纯化与活性测定》一文中研究指出Expression conditions of human immunodeficiency virus type 2 external glycoprotein gp105 in the recombinant Pichia Pastoris strain were optimized via orthogonal test of some factors such as the rate of aeration, the inductive duration, the initial pH and the concentration of methanol. The results from tests of between subjects effects showed that the most important parameter for efficient expression of gp105 in recombinant Pichia Pastoris strain is adequate aeration during methanol induction, and the optimum inductive condition for gp105 expression was: more than 80% aeration, 3 days for induction, th einitial pH of 6 0-7 0, the final methanol concentration of 1 0%-1 5%. With this condition, the expressed gp105 was secreted into fermentation broth and reached a ield of 30%, approximately 200 mg/L. Expressed gp105 was isolated and purified by sating out and Sephadex G 100 chromatography and the yield of gp105 was 40%. gp105 was purified to electrophoretic purity and its pI was about 5 0 by SDS PAGE and isoelectrofocusing. Its N terminal amino acid was arginine by Dansyl Cl and the result indicated that expressed gp105 was secreted and cleavaged correctly. The results from ELISA demonstrated that the purifiec gp105 showed good reactiongenicity and antigenic specificity.(本文来源于《高等学校化学学报》期刊2001年07期)

刘晓民,徐莹,潘尚哈[2](2001)在《猴免疫缺陷病毒外膜糖蛋白基因序列重组和突变克隆的转染研究》一文中研究指出目的 研究猴免疫缺陷病毒 (SIV)外膜糖蛋白 (envGP)基因片段与病毒复制功能的关系。方法 利用两病毒株共有的内切酶位点 ,将非致病性SIVmac142株envGP区的DNA片段与致病性SIVmac 2 39株的对应区域进行置换 ,构成多个重组体。(本文来源于《哈尔滨医科大学学报》期刊2001年02期)

张应玖,金宁一,金善荣,王宏伟,沈家骢[3](2001)在《用细菌/杆状病毒系统在昆虫细胞中表达HIV-2外膜糖蛋白gp105和跨膜糖蛋白gp36》一文中研究指出目的用细菌 /杆状病毒 (Bac to Bac)表达系统在昆虫细胞 Sf9中表达 HIV- 2外膜糖蛋白 gp10 5和跨膜糖蛋白 gp36 ,为研制艾滋病疫苗和诊断试剂奠定基础。方法分别将 HIV- 2外膜蛋白 gp10 5和跨膜蛋白 gp36全基因序列克隆到杆状病毒转座载体 p Fast Bac HTa和 p Fast Bac HTb中多角体启动子下游 ,构建成重组转座载体 p Fast Bac HTa- gp10 5和 p FastBac HTb- gp36 ,利用细菌 /杆状病毒 (Bac to Bac)表达系统筛选重组杆状病毒 ,并在昆虫细胞 Sf9中表达 HIV- 2的 gp10 5和gp36。结果 SDS- PAGE分析结果表明 ,gp10 5基因表达产物为一 6 6 0 0 0 u糖蛋白 ,gp36基因则表达一 410 0 0 u糖蛋白 ,与天然产物一致。 Western blot结果显示 :两者均具有抗原特异性。结论 gp10 5和 gp36在昆虫细胞中得到了高效表达 ,并均被糖基化 ;gp10 5接近天然产物 ,gp36与天然产物一致(本文来源于《免疫学杂志》期刊2001年01期)

金红[4](2000)在《牛流行热病毒外膜糖蛋白G基因在重组病毒中的表达研究》一文中研究指出牛流行热是由病毒引起牛和水牛的急性热性传染病。它广泛流行于非洲、亚洲和大洋洲许多国家和地区。为了解牛流行热病毒中国分离株(BEFV JB76H)主要免疫原性糖蛋白G基因的分子生物学特性,以及在重组痘苗病毒和杆状病毒中的表达情况,研究制备BEFV JB76H基因工程疫苗的可行性,进行了本研究。本研究首次以RT-PCR法扩增并克隆了BEFV JB76H主要免疫原性糖蛋白G基因,并进行了脱氧核糖核苷酸序列分析。结果表明,中国分离株G蛋白基因与澳大利亚分离株之间的同源性为91%。说明我国分离株与澳大利亚分离株之间存在较大差异,这可能是由于地域的不同造成牛流行热病毒的变异。利用重组病毒技术,构建了中国分离株G蛋白基因重组痘苗病毒和杆状病毒。结果表明,G蛋白基因中存在的T5CT序列对痘苗病毒P7.5启动子具有终止信号的功能。这一序列的存在导致G蛋白基因几乎不能在天然痘苗病毒P7.5启动子的调控下,在重组痘苗病毒中得到完全表达。动物免疫实验结果表明,使用P7.5启动子的重组痘苗病毒,不能诱导动物产生具有保护效力的中和抗体。为解决这一问题,本研究构建了人工合成强启动子P_(E/L)重组痘苗病毒转移载体,并首次在重组痘苗病毒中采用人工合成强启动子P_(E/L),成功表达了G蛋白基因。结果表明,在人工合成强启动子P_(E/L)的调控下,由重组痘苗病毒表达的G蛋白基因不仅糖基化水平与天然G蛋白相近,而且表达效率大大提高。对兔子的免疫结果表明,该重组痘苗病毒表达的G蛋白诱导兔子产生中和抗体的速率和效价均高于传统油苗免疫,证明该重组痘苗病毒具有作为牛流行热病毒重组痘苗病毒的潜能。本实验首次成功构建了G蛋白重组杆状病毒。结果表明,重组杆状病毒表达的G蛋白具有牛流行热病毒G蛋白的抗原特异性和免疫原性。另外,本研究探讨研究了牛流行热病毒、痘苗病毒和油苗免疫后对牛外周血淋巴细胞亚类分布的影响。结果显示,这些因素的作用均能导致牛外周血淋巴细胞中CD4~+细胞含量的升高。这一结果为研究牛流行热病毒免疫机制提供了一个重要的参考数据。(本文来源于《东北农业大学》期刊2000-11-01)

刘晓民,徐莹,潘尚哈,毕丽,李言[5](2000)在《猴免疫缺陷病毒外膜糖蛋白基因序列重组和突变克隆的转染研究》一文中研究指出目的 研究猴免疫缺陷病毒 (SIV)外膜糖蛋白 (envGP)基因片段与病毒复制功能的关系。方法 利用两病毒株共有的内切酶位点 ,将非致病性SIVmac 142株envGP区的DNA片段与致病性SIVmac 2 39株的对应区域进行置换 ,构成多个重组体。RFLP和部分序列测序确定后 ,用等量突变病毒 (3μg)转染CD4+ T淋巴细胞CEM× 174细胞系 ,用ELISA监测培养液中SIV核心蛋白P2 7水平的变化 ,以判定重组病毒的复制能力。结果 与SIVmac 2 39株相比 ,SIVmac 2 39envGP重组体 (SIV mac142 /2 39envGP/142 )仍保持高度的复制活性 ,SIVmac2 39gp41(SIVmac142 /2 39gp41/142 )或SIV mac2 39N gp41(SIVmac142 /2 39N gp41/142 )的复制能力明显降低 ,而SIVmac2 39C gp41(SIVmac142 /2 39C gp41/142 )重组体无复制活性。结论 envGP基因是SIVmac2 39株复制能力或毒力的重要调节因素。(本文来源于《中华微生物学和免疫学杂志》期刊2000年04期)

陈元鼎,RodolfoGarcia,FranciscoBaralle[6](1997)在《人免疫缺陷病毒Ⅰ型外膜糖蛋白gp~(120)和gp~(160)在重组痘苗病毒中的表达及其抗原性研究》一文中研究指出人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)是严重威胁人类健康的病原体,其主要抗原是病毒外膜糖蛋白gp160(gp120+gp41)。本文报道运用遗传工程技术,在噬菌体T7启动子或痘苗病毒启动子P7.5控制下,在重组痘苗病毒系统中构建和表达HIV-1gp120和gp160。进一步研究表明,在此系统中表达的重组HIV-1gp120和gp160以糖蛋白形式存在,保留着病毒在自然状况下的抗原表位构象,可同病毒特异性中和单克隆抗体反应,可作为重要的候选重组疫苗蛋白。(本文来源于《中国医学科学院学报》期刊1997年02期)

董明,谢云,项金忠,尚继军,张鹏飞[7](1997)在《HIV 外膜糖蛋白 gp120 和 gp41 在昆虫细胞中表达及其免疫学特性的评价》一文中研究指出将编码完整gp120和完整gp41的基因分别克隆到杆状病毒转移质粒中。使用重组转移质粒与野生杆状病毒(AcNPV)DNA共转染Sf9昆虫细胞,经挑选获得分别带有编码gp120和gp41基因的重组杆状病毒。重组杆状病毒感染Sf9细胞后在细胞中分别表达了HIV外膜糖蛋白gp120和gp41。其重组蛋白的分子量分别为120×103和41×103。此重组糖蛋白在免疫荧光、免疫印染和酶联免疫实验中都能被HIV阳性血清所识别。动物免疫实验表明此重组糖蛋白能诱导很强的特异性抗体产生。(本文来源于《中华微生物学和免疫学杂志》期刊1997年01期)

彭宜红,齐佩文[8](1995)在《HIV-1外膜糖蛋白gp~(120)》一文中研究指出本文对HIV-1外膜蛋白gp~(120)的某些相关问题进行了综述。(本文来源于《国外医学.病毒学分册》期刊1995年02期)

外膜糖蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的 研究猴免疫缺陷病毒 (SIV)外膜糖蛋白 (envGP)基因片段与病毒复制功能的关系。方法 利用两病毒株共有的内切酶位点 ,将非致病性SIVmac142株envGP区的DNA片段与致病性SIVmac 2 39株的对应区域进行置换 ,构成多个重组体。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

外膜糖蛋白论文参考文献

[1].张应玖,金宁一,王宏伟,沈家骢.毕赤酵母表达的HIV-2外膜糖蛋白的纯化与活性测定[J].高等学校化学学报.2001

[2].刘晓民,徐莹,潘尚哈.猴免疫缺陷病毒外膜糖蛋白基因序列重组和突变克隆的转染研究[J].哈尔滨医科大学学报.2001

[3].张应玖,金宁一,金善荣,王宏伟,沈家骢.用细菌/杆状病毒系统在昆虫细胞中表达HIV-2外膜糖蛋白gp105和跨膜糖蛋白gp36[J].免疫学杂志.2001

[4].金红.牛流行热病毒外膜糖蛋白G基因在重组病毒中的表达研究[D].东北农业大学.2000

[5].刘晓民,徐莹,潘尚哈,毕丽,李言.猴免疫缺陷病毒外膜糖蛋白基因序列重组和突变克隆的转染研究[J].中华微生物学和免疫学杂志.2000

[6].陈元鼎,RodolfoGarcia,FranciscoBaralle.人免疫缺陷病毒Ⅰ型外膜糖蛋白gp~(120)和gp~(160)在重组痘苗病毒中的表达及其抗原性研究[J].中国医学科学院学报.1997

[7].董明,谢云,项金忠,尚继军,张鹏飞.HIV外膜糖蛋白gp120和gp41在昆虫细胞中表达及其免疫学特性的评价[J].中华微生物学和免疫学杂志.1997

[8].彭宜红,齐佩文.HIV-1外膜糖蛋白gp~(120)[J].国外医学.病毒学分册.1995

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