导读:本文包含了乙酰甘露糖胺论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:葡萄球菌,金黄色,药物释放系统,克隆,生物,基因表达
乙酰甘露糖胺论文文献综述
顾冰倩,龚奕,何颖芝,张玲莉,何文迪[1]（2018）在《金黄色葡萄球菌N-乙酰甘露糖胺-6-磷酸2-异构酶基因的克隆与表达》一文中研究指出目的对金黄色葡萄球菌N-乙酰甘露糖胺-6-磷酸2-异构酶基因(APE)进行克隆、鉴定与表达,为新型抗菌药物的设计提供参考依据。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增APE基因,将扩增产物酶切后与原核表达载体pET-32a(+)连接,构建表达APE的重组质粒,将重组质粒先转化大肠杆菌TG1内并提取质粒,经PCR、双酶切鉴定后再转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),对转化菌株进行诱导后进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果构建了表达载体pET-32a(+)-APE,在37℃经异丙基-β-D硫代半乳糖苷诱导时获得表达,表达的蛋白质相对分子质量为45.2×10~3。结论 APE基因成功克隆到表达质粒内并获得了表达。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2018年23期）
高丰光,王岩岩,胡纯芳,李娟,游翔[2]（2016）在《甘露糖受体及TLR4信号通路在乙酰胆碱N型受体调控树突状细胞交叉提呈中的作用》一文中研究指出目的:树突状细胞(DCs)是表达乙酰胆碱N型受体(n Ach R)的抗原提呈细胞。乙酰胆碱N型受体可调控DCs的交叉提呈。甘露糖受体(MR)是DCs重要的模式识别受体,DCs的交叉提呈不仅依赖于MR而且也依赖于TLR4通路。但到目前为止,尚不清楚MR及TAP内体转位在乙酰胆碱N型受体调控DCs交叉提呈中作用。方法:先以流式细胞术、Western Blot检测乙酰胆碱N型受体对DCs表面MR、TLR4表达影响;次以通路抑制剂阻遏激酶,发现乙酰胆碱N型受体调控MR、TLR4机制;继以激光共聚焦显微镜结合基因沉默技术观察MR、TLR4信号活化在DCs交叉提呈中的作用,为DCs临床应用提供理论基础。结果:乙酰胆碱N型受体刺激不仅明显增加DCs表面MR和TLR4分子的表达,而且也明显上调CD80和4-1BBL分子的表达;乙酰胆碱N型受体明显引起ERK1/2、PI3K激酶磷酸化。而LY294002和Wortmannin逆转乙酰胆碱N型受体对TLR4和MR分子的上调作用;乙酰胆碱N型受体增强OVA与EEA1共定位,也促进MR与EEA1共定位;乙酰胆碱N型受体刺激不仅增加SIINFEKL与EEA1、Rab7、MHC I类分子共定位,也促进MHC I类分子与EEA1、Rab7的共定位和SIINFEKL-H2Kb复合物的形成;活化TLR4信号不仅明显增强TAP与EEA1、TAP与Rab7共定位,而且也增强SIINFEKL与EEA1共定位。当以Si RNA转染沉默My D88表达时,不仅LPS诱导的TAP内体转位明显降低,而且SIINFEKL与MHC I类分子于内体的共定位、SIINFEKLH2Kb复合物的形成也明显降低。结论:乙酰胆碱N型受体调控DCs表面模式识别受体的规律,初步阐明了乙酰胆碱N型受体增强DCs交叉提呈抗原的分子机制。(本文来源于《第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2016-11-04）
王娟娟[3]（2015）在《球孢白僵菌甘露糖转移酶、组蛋白乙酰转移酶、叉头转录因子及6-磷酸海藻糖合成酶的功能解析及其同生物防治潜能的关联》一文中研究指出球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是广泛用于农林害虫生物防治的昆虫病原真菌,其侵染体是分生孢子,也是许多真菌杀虫剂的活性成分。分生孢子制剂防治田间害虫的效果往往受到温度、湿度、紫外辐射及化学农药等多种环境胁迫的影响。因此,探索生防真菌抗逆境胁迫的生理机制,对以提高其生防潜能为目标的菌株遗传改良及菌剂的合理应用具有重要意义。本研究围绕这一目标,一是解析了球孢白僵菌甘露糖转移酶PMT和Ktr家族的功能,揭示了它们对细胞生长发育、环境抗逆性及寄主侵染力的重要贡献。二是研究解析了乙酰转移酶Mst2对球孢白僵菌生长发育、胁迫应答、细胞周期和毒力的影响。叁是解析forkhead转录因子Fkh2的功能,发现Fkh2通过调节相关基因的转录而参与球孢白僵菌细胞周期、无性发育及毒力的调控。四是解析了球孢白僵菌中两个海藻糖合成酶同源蛋白TpsA和TpsB对海藻糖合成、生长发育、孢子质量、多胁迫响应及毒力的贡献,发现二者对几乎所有生防潜能相关性状的贡献都表现为加性效应。主要的研究内容和结果概述如下：球孢白僵菌PMT家族甘露糖转移酶的功能解析PMT家族是在内质网上催化第一个甘露糖转移到蛋白质丝氨酸/苏氨酸上的一类甘露糖转移酶,根据结构特征可分为PMT1、PMT2和PMT4叁个亚族。这叁个亚族都存在于球孢白僵菌中且每个亚族只有一个成员,分别为Pmtl、Pmt2和Pmt4。其中Pmt2是敲除致死的,通过构建Pmt2的RNA干扰菌株和Pmtl及Pmt4的单基因敲除/回补菌株并进行多种表型分析,叁个基因的功能得到较为详尽的解析。与野生型相比,单基因缺失或RNA干扰菌株在生长、产孢、孢子活力、多胁迫耐受力及毒力等诸方面均表现不同程度的缺陷。其中,Pmt2的叁个干扰菌株、APmtl及ΔPmt4在富营养和限制培养基上的生长减慢20～79%,分生孢子产量下降16～72%,并伴随孢子活力显着下降即萌发一半所需的时间显着延长。不仅如此,干扰及敲除菌株在菌丝生长或孢子萌发期间,对氧化、高渗、胞壁干扰、高温及UV-B辐射等环境胁迫的抵抗力都有不同程度的显着下降。在对大蜡螟(Galleria mellonella)幼虫的生物测定中,突变株经正常体壁侵染的毒力下降53～62%,但通过血腔注射的毒力未发生大的变化。值得一提的是,突变株的孢壁完整性遭受很大程度的破坏,包括孢壁变薄、孢子表面疏水性降低及重要孢壁成分发生改变。所有表型的变化都在回补株中得到恢复。因此,PMT家族在球孢白僵菌中都不是功能冗余的,而是各成员相互协调共同调节宿主菌对复杂多样环境的适应性及对昆虫寄主的侵染力,因而在球孢白僵菌生防潜能的维持中发挥着互不替代的重要作用。球孢白僵菌Ktr家族甘露糖转移酶的功能比较Ktr家族甘露糖转移酶的功能是将第二个甘露糖连接到被PMT家族成员转移的第一个甘露糖基上,因而是对糖蛋白甘露糖链进行延伸的转移酶,其调控的反应发生在高尔基体内。球孢白僵菌有叁个Ktr家族成员,分别为Ktrl、Ktr4和Kre2/Mnt1。通过单基因敲除/回补菌株的构建并进行表型分析,发现Δktr4和Δkre2的分生孢子产量大幅下降～92%,孢子活力显着降低,孢子大小和复杂度也发生显着变化；两个敲除菌株对培养基中不同碳、氮源营养的摄入利用率不如野生株,表现为菌落生长缓慢。与野生型相比,Δktr1在孢子产量及菌落生长方面并无显着变化,但细胞壁中甘露糖蛋白和几丁质等成分的变化都远大于Δktr4和Δkre2,菌丝细胞壁变薄,孢子细胞壁表面疏水性下降12%。Δktr4和Δkre2细胞壁中α-葡聚糖含量显着高于野生型和Δktrl,孢子壁厚度也比Δktr1更薄,孢子表面疏水性分别下降64%和71%。总体上,Δktr4和Δkre2比Aktrl对氧化和胞壁干扰胁迫更敏感,但叁者对高渗胁迫的反应则差异不大。高温、UV-B辐射耐受性以及毒力在Δktr4和Δkre2中都大大下降,而Δktrl只对高温敏感。结果显示,Ktr1、Ktr4和Kre2对球孢白僵菌生防潜能都有不同程度的贡献,但Ktr4和Kre2的贡献远大于Ktr1的贡献。球孢白僵菌组蛋白乙酰转移酶Mst2的功能解析组蛋白中赖氨酸的乙酰化与基因的转录活性密切相关,但由于多数乙酰转移酶和去乙酰转移酶对赖氨酸的特异性修饰作用知之有限,每个赖氨酸乙酰化与细胞功能之间的关系目前并不十分清楚。球孢白僵菌中有一个组蛋白乙酰转移酶Mst2,它与裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)乙酰转移酶SpMst2同源,并能特异性乙酰化组蛋白3(H3)的第14位赖氨酸(H3K14)。为了明确Mst2在球孢白僵菌中的作用,我们构建和分析了Mst2的敲除／回补菌株。表型实验显示,AMst2对不同碳氮源的利用能力远不如野生株和回补株,正常培养条件下的产孢能力受损较大,孢子活力下降,抵抗氧化、高渗及胞壁干扰胁迫的能力显着下降。敲除株分生孢子耐高温、抗紫外能力显着减弱,表面疏水性和对敏感昆虫的侵染力均下降。细胞流式分析显示,AMst2的芽生孢子变小,密度降低,细胞周期中S期延长,G2/M期缩短。综合所有分析结果,Mst2在DNA损伤节点上起着关键作用,因而参与调控球孢白僵菌的细胞周期、无性发育、多胁迫应答及其对昆虫寄主的侵染力。球孢白僵菌叉头转录因子Fkh2的功能解析模式丝状真菌一般拥有叉头Forkhead (FKH)转录因子Fkhl和Fkh2,主要参与细胞周期的调控而影响生物学性状。不同于模式丝状真菌,球孢白僵菌只有Fkh2,不存在Fkhl。将Fkh2编码基因从野生株中敲除,导致球孢白僵菌细胞周期发生紊乱,在不同碳氮源培养基上的菌落生长不同程度地减慢,而且敲除菌株的菌丝隔膜增多,菌丝细胞粗短。有趣的是,敲除株的产孢提前,在正常平板培养条件下分生孢子产量显着升高,在液培条件下芽生孢子的产量也显着高于野生株,但两种孢子都明显变小,且密度降低,显示孢子内含物减少。其分生孢子对氧化和高渗胁迫的敏感性升高,耐UV-B辐射和高温的能力减弱,说明Fkh2可能参与宿主菌的胁迫应答。此外,用分生孢子悬液对大蜡螟幼虫进行体壁侵染和注射侵染的生物测定,结果显示敲除菌株的毒力显着降低。敲除菌株所有这些表型变化都在若干表型相关功能基因的转录分析中获得支持,并且都在回补菌株中得到很好的恢复。结果显示,Fkh2不仅参与调控球孢白僵菌的细胞周期循环,而且还调控生长发育、多胁迫应答及毒力等多种生防潜能相关的性状。球孢白僵菌中两种6-磷酸海藻糖合成酶同源物的功能解析海藻糖的生物合成途径对于动植物病原真菌是非常重要的,因为细胞内海藻糖的积累水平关系到宿主菌的环境适应性和寄主侵染力。球孢白僵菌有两个6-磷酸海藻糖合成酶(TPS),分别为TpsA和TpsB。通过单基因、双基因敲除菌株及回补菌株的构建与分析,发现双敲菌株△tpsA△tpsB的菌丝细胞中既检测不到TPS的酶活,也检测不到任何海藻糖的积累；而单敲菌株△tpsA的TPS酶活和海藻糖积累水平在正常和同胁迫条件下分别下降71～75%和72～80%,在△tpsB中分别下降21～30%和15～45%。两个单敲株在给定条件下TPS酶活损失或海藻糖积累水平下降幅度之和,正好接近双敲菌株的酶活损失或海藻糖含量的下降幅度。正常培养条件下分生孢子产量在双敲株中下降达98%,而在△tpsA和△tpsB中分别下移33%和50%。有趣的是,表征孢子质量的海藻糖含量、孢壁结构成分、疏水性、活力、大小及密度均在双敲株中受损最严重,后依次为△tpsA和△tpsB。相同的趋势也见于叁个敲除株对氧化、高渗、胞壁干扰、高温及UV-B紫外辐射等环境胁迫抵抗力的缺陷变化以及对大蜡螟幼虫毒力的缺陷变化。这些结果证明,球孢白僵菌中TpsA对海藻糖合成、营养生长、孢子质量、多胁迫应答及寄主侵染过程的调控作用均大于TpsB,后者仅表现比前者稍强的产孢调控作用。最重要的是,TpsA和TpsB对球孢白僵菌每种表型的调控作用都表现为加性效应,不同于一些模式丝状真菌中多个TPS同源物不一定都起作用的研究报道。因此,两个TPS同源蛋白对球孢白僵菌适应不同类型昆虫寄主及其复杂多样环境的生存方式具有特别重要的意义。(本文来源于《浙江大学》期刊2015-04-01）
胡晓,巩新,唱韶红,何建勇,吴军[4]（2012）在《拟南芥甘露糖苷酶Ⅰ和人N-乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅰ的原核表达及其多克隆抗体制备》一文中研究指出目的:在大肠杆菌中分别重组表达拟南芥甘露糖苷酶Ⅰ(ATMDSI)和人N-乙酰葡萄糖胺转移酶I(HsGnTI),制备其多克隆抗体,为基因表达鉴定提供检测抗体。方法:用PCR方法克隆ATMDSI、HsGnTI基因片段,连接至pBV220表达载体后转化大肠杆菌DH5α,获得表达菌株,通过42℃升温诱导表达,制备纯化ATMDSI和HsGnTI;纯化的蛋白以80μg/kg的剂量免疫大耳白兔,经3次免疫后,采集血清制备其相应的多克隆抗体;采用Western印迹检测多克隆抗体的特异性。结果:获得ATMDSI和HsGnTI基因片段,并构建了其相应的原核表达载体pBV220-ATMDSI、pBV220-HsGnTI,在大肠杆菌中表达了重组ATMDSI和HsGnTI,SDS-PAGE分析显示其相对分子质量分别为45.3×103和46.9×103,与理论值一致;用纯化的蛋白免疫大耳白兔后制备了抗ATMDSI、HsGnTI多克隆抗体,Western印迹结果证明该抗体具有较高的特异性。结论:获得了特异性较高的抗ATMDSI、HsGnTI多克隆抗体血清,为甘露糖苷酶Ⅰ和N-乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅰ的研究提供了检测抗体。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2012年06期）
陈鹏远,朱蕾,谢锋,尚广东[5]（2008）在《PMP柱前衍生化法测定N-乙酰-D-甘露糖胺和N-乙酰-D-葡萄糖胺》一文中研究指出1引言N-乙酰-D-甘露糖胺(ManNAc)是酶法催化生产N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)的重要原料,后者再经叁步合成反应即可得到抗流感药物扎那米韦。ManNAc是由价格便宜的N-乙酰-D-葡萄糖胺(GlcNAc)经过2-异构酶催化而来。ManNAc和G(本文来源于《分析化学》期刊2008年10期）
王为,孔繁祚[6]（1999）在《用最简单的溴代乙酰糖及少保护的甘露糖为原料,高选择性地合成含甘露糖的寡糖》一文中研究指出含甘露糖的寡糖存在于很多有重要生理活性的天然产物中，我们用部分保护的甘露糖为糖基受体，以最简单的溴代酰基糖为糖基供体，通过原酸酯的中间体，能高收率地合成６及３位选择性连接的含甘露糖的寡糖。用最简单的溴代乙酰糖及少保护的甘露糖为原料,高选择性地合成含甘露糖(本文来源于《厦门大学学报(自然科学版)》期刊1999年S1期）
王为,孔繁祚[7]（1999）在《用最简单的溴代乙酰甘露糖及少保护的糖为原料,简易地合成糖蛋白的核心甘露糖叁糖》一文中研究指出３，６支化的甘露糖叁糖是一切Ｎ－连接的糖蛋白的核心叁糖，过去虽有它的合成的报道［１］，但用的步骤多，试剂复杂，我们用最简单的方法［２］，通过糖原酸脂的中间体，高选择性、高收率地合成了这个叁糖。用同样的方法，合成了３，６支化的五糖。用最简单的溴代乙酰甘露糖(本文来源于《厦门大学学报(自然科学版)》期刊1999年S1期）
李庆,李辉,蔡孟深,李中军[8]（1999）在《两种2-迭氮-2-脱氧差向异构二糖乙酸酯糖基化能力的差异─半乳糖基乙酰氨基甘露糖PEG苷及其二聚体的选择性合成》一文中研究指出糖烯的迭氮硝化反应是近年来广泛采用的一种制备２－氨基－２－脱氧糖的方法，该方法适用于许多单糖烯和二糖烯；这一反应的立体选择性随所使用的保护基不同而不同，一般当保护基为乙酰基时，有利于２－平伏迭氮差向异构体的生威，而使用苄基时，２－直立迭氮差向异构体的比例(本文来源于《厦门大学学报(自然科学版)》期刊1999年S1期）
乙酰甘露糖胺论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:树突状细胞(DCs)是表达乙酰胆碱N型受体(n Ach R)的抗原提呈细胞。乙酰胆碱N型受体可调控DCs的交叉提呈。甘露糖受体(MR)是DCs重要的模式识别受体,DCs的交叉提呈不仅依赖于MR而且也依赖于TLR4通路。但到目前为止,尚不清楚MR及TAP内体转位在乙酰胆碱N型受体调控DCs交叉提呈中作用。方法:先以流式细胞术、Western Blot检测乙酰胆碱N型受体对DCs表面MR、TLR4表达影响;次以通路抑制剂阻遏激酶,发现乙酰胆碱N型受体调控MR、TLR4机制;继以激光共聚焦显微镜结合基因沉默技术观察MR、TLR4信号活化在DCs交叉提呈中的作用,为DCs临床应用提供理论基础。结果:乙酰胆碱N型受体刺激不仅明显增加DCs表面MR和TLR4分子的表达,而且也明显上调CD80和4-1BBL分子的表达;乙酰胆碱N型受体明显引起ERK1/2、PI3K激酶磷酸化。而LY294002和Wortmannin逆转乙酰胆碱N型受体对TLR4和MR分子的上调作用;乙酰胆碱N型受体增强OVA与EEA1共定位,也促进MR与EEA1共定位;乙酰胆碱N型受体刺激不仅增加SIINFEKL与EEA1、Rab7、MHC I类分子共定位,也促进MHC I类分子与EEA1、Rab7的共定位和SIINFEKL-H2Kb复合物的形成;活化TLR4信号不仅明显增强TAP与EEA1、TAP与Rab7共定位,而且也增强SIINFEKL与EEA1共定位。当以Si RNA转染沉默My D88表达时,不仅LPS诱导的TAP内体转位明显降低,而且SIINFEKL与MHC I类分子于内体的共定位、SIINFEKLH2Kb复合物的形成也明显降低。结论:乙酰胆碱N型受体调控DCs表面模式识别受体的规律,初步阐明了乙酰胆碱N型受体增强DCs交叉提呈抗原的分子机制。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
乙酰甘露糖胺论文参考文献
[1].顾冰倩,龚奕,何颖芝,张玲莉,何文迪.金黄色葡萄球菌N-乙酰甘露糖胺-6-磷酸2-异构酶基因的克隆与表达[J].国际检验医学杂志.2018
[2].高丰光,王岩岩,胡纯芳,李娟,游翔.甘露糖受体及TLR4信号通路在乙酰胆碱N型受体调控树突状细胞交叉提呈中的作用[C].第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编.2016
[3].王娟娟.球孢白僵菌甘露糖转移酶、组蛋白乙酰转移酶、叉头转录因子及6-磷酸海藻糖合成酶的功能解析及其同生物防治潜能的关联[D].浙江大学.2015
[4].胡晓,巩新,唱韶红,何建勇,吴军.拟南芥甘露糖苷酶Ⅰ和人N-乙酰葡萄糖胺转移酶Ⅰ的原核表达及其多克隆抗体制备[J].生物技术通讯.2012
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[6].王为,孔繁祚.用最简单的溴代乙酰糖及少保护的甘露糖为原料,高选择性地合成含甘露糖的寡糖[J].厦门大学学报(自然科学版).1999
[7].王为,孔繁祚.用最简单的溴代乙酰甘露糖及少保护的糖为原料,简易地合成糖蛋白的核心甘露糖叁糖[J].厦门大学学报(自然科学版).1999
[8].李庆,李辉,蔡孟深,李中军.两种2-迭氮-2-脱氧差向异构二糖乙酸酯糖基化能力的差异─半乳糖基乙酰氨基甘露糖PEG苷及其二聚体的选择性合成[J].厦门大学学报(自然科学版).1999