导读:本文包含了羊毛硫细菌素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:羊毛硫细菌素,前导肽,切割酶,切割位点
羊毛硫细菌素论文文献综述
张彤,张杰,钟瑾[1]（2019）在《前导肽切割位点对Ⅱ类羊毛硫细菌素切割酶活性的影响》一文中研究指出【背景】Ⅱ类羊毛硫细菌素大多是由革兰氏阳性菌的核糖体合成并经过翻译后修饰产生的小肽,其生物合成的最后一步是由转运蛋白LanTN端的肽酶结构域对前导肽进行切割,释放出有活性的羊毛硫细菌素,但目前关于该类羊毛硫细菌素前导肽的切割机制尚不清楚。【目的】考察前导肽切割位点对不同链球菌来源的肽酶结构域BovT150和SboT150酶切活性的影响。【方法】运用不依赖连接酶的定点突变技术构建前导肽切割位点突变的前体蛋白表达载体,在大肠杆菌(Escherichia coli)中分别表达纯化野生型前体(Bov Am和Sbo Am)、突变型前体及对应的切割酶(Bov T150和Sbo T150),构建体外酶切体系,利用HPLC、抑菌活性分析和MALDI-TOF MS检测前导肽的切除情况。【结果】BovT150不仅能够切割Bov Am的GG和GA位点,也能切割Sbo Am的GG和GA位点,并且对切割位点为Gly的前体切割活性较高;Sbo T150仅能切割Sbo Am的GG和GA位点,而对切割位点为Ala的活性较高。【结论】II类羊毛硫细菌素前导肽切割位点氨基酸残基的改变不同程度地影响切割酶的切割效率。(本文来源于《微生物学通报》期刊2019年09期）
李晓然,叶德晓,付鸣佳,钟雪晴,肖世平[2]（2019）在《枯草芽孢杆菌SX3411产羊毛硫细菌素subtilomycin的初步鉴定与理化特性分析》一文中研究指出为了确定分离得到的枯草芽孢杆菌SX3411(Bacillus subtilis SX3411)具有产羊毛硫细菌素subtilomycin的能力和subtilomycin的理化特性。利用滤纸片扩散法检测到菌株SX3411发酵液对猪链球菌(Streptococcus suis)、枯草芽孢杆菌(非本筛选菌株)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和嗜水性单胞杆菌(Aeromonas hydrophila)具有抑菌作用。通过基因簇克隆和测序,表明其中抑菌物质主要为羊毛硫细菌素subtilomycin。理化特性分析表明菌株SX3411发酵液中抑菌物质具耐热和耐酸碱特性。SDS-PAGE检测表明subtilomycin分子质量在4 k Da左右。模拟胃液对subtilomycin抑菌活性影响不大,但不耐蛋白酶K和模拟肠液的处理。该研究为进一步开发应用羊毛硫细菌素subtilomycin奠定了基础。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年12期）
叶德晓,钟雪晴,付鸣佳,杨志海[3]（2019）在《羊毛硫细菌素变体及其生物活性研究进展》一文中研究指出羊毛硫细菌素是由细菌核糖体上合成并经翻译后加工修饰而成的一类抗菌肽。已经在多种G+细菌中发现有羊毛硫细菌素,大多对G+细菌有抑菌作用。羊毛硫细菌素的基因工程无法从单一的表达羊毛硫细菌素结构基因获得高活性的成熟羊毛硫细菌素。本研究综述了羊毛硫细菌素前体分子定向位点突变后,由修饰酶重新识别和修饰可产生结构变异的可分泌的变体分子和无法分泌的变体分子,对羊毛硫细菌素分子突变位点进行了分类和归纳,并总结了羊毛硫细菌素分子突变位点与其生物活性的关系。在现有羊毛硫细菌素应用成果有限的条件下,对于工程改造羊毛硫细菌素和增强其抑菌活性具有重要意义。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2019年04期）
李聪智[4]（2016）在《羊毛硫细菌素SUBTILOMYCIN促进枯草芽胞杆菌定植于植物》一文中研究指出枯草芽胞杆菌(Bacillussubtilis)是能形成芽胞的革兰氏阳性模式细菌,其广泛分布于不同环境中。不同枯草芽胞杆菌菌株可以产生各种特异的活性物质。这些活性物质赋予枯草芽胞杆菌对植物抗病和促生能力。因此,其通常被认为是一种植物友好型细菌,并且作为生物肥料和农药使用多年。在实验室条件下,枯草芽胞杆菌依赖其产生的活性物质,具有较好的抑制病原菌的能力。但在实际田间应用中,效果往往不够稳定。枯草芽胞杆菌抗病和促生效力的发挥需要其稳定地定植(colonization)于植物。在前期,本课题组从魔芋愈伤组织中分离得到一株内生枯草芽胞杆菌,命名为BSn5。该菌株对数生长末期产生一种对革兰氏阳性菌有抑制活性的物质。通过对BSn5菌株全基因组测序和分析,发现一个潜在的羊毛硫细菌素合成基因簇和一个假定的抗生素类合成基因簇为该菌株所特有。本论文分别针对这两者开展了一些研究工作。前期通过基因敲除及活性检测,最终确定潜在羊毛硫细菌素基因簇的功能为合成subtilomycin。进一步发现subtilomycin生物合成基因簇位于枯草芽胞杆菌基因组的重组热点。调查不同环境来源的枯草芽胞杆菌产生subtilomycin的情况,发现subtilomycin产物与植物来源具有相关性。因此,推测subtilomycin与枯草芽胞杆菌在植物中定植有关。本论文第一部分的研究依据此推测开展实验。首先开展了植物根粗提液对BSn5产subtilomycin影响的实验,发现魔芋、拟南芥、大豆、番茄根提取液可以促进BSn5产subtilomycin,提高了 10%-43%。进一步以植物源多糖以及单糖和二糖进行实验,发现存在于植物细胞壁中的葡甘聚糖、阿拉伯半乳聚糖、木聚糖以及果胶能够促进BSn5产subtilomycin,而淀粉、单糖和二糖不能促进subtilomycin的产生。因此,植物源多糖可以促进BSn5产subtilomycin。其次,开展了 BSn5野生型以及subtilomycin合成基因突变体在植物中定植的实验。发现在大豆、番茄以及拟南芥中,野生型菌株在植物根表面定植能力强于突变体。因此,subtilomycin的产生有利于产生菌在植物中定植。同时发现,接种野生型菌株的植株根重与株高分别显着大于接种突变体的植株。在青枯菌存在的情况下,接种野生型菌株的植株存活率高于接种subtilomycin突变体的植株。因此,产subtilomycin的菌株在植物中有更强的定植能力,并有利于植物生长以及抗病。最后,我们检测了 subtilomycin对生物被膜(biofilm)形成的影响。发现野生型比subtilomycin突变体能形成更强健的生物被膜。同时,体外添加4μg/mL subtilomycin突变体能够恢复一定的表型。死细胞荧光染色法观察生物被膜,发现subtilomycin可能通过影响细菌特异死亡,使生物被膜形成类似“褶皱”的结构,从而形成更强的生物被膜。进一步利用subtilomycin C端包含5个硫醚环的酶解产物开展以上实验,发现该片段就足以起到和subtilomycin 一样的促进生物膜形成的效果。因此,subtilomycin促进生物膜的形成不依赖于其抑菌活性,而和硫醚环结构相关。另外,在寻找BSn5活性物质阶段,我还开展另一个潜在抗生素合成基因簇的功能验证。通过对含有抗生素合成酶保守结构域的关键基因orf1和orf8在转录水平的检测,验证了该基因簇是表达的。通过对这两个基因的中断敲除,获得了突变体菌株。利用这些菌株开展了抑菌活性和基于液相质谱的非目标代谢组差异分析,结果发现,虽然在所选指示菌中,未找到野生型和突变体之间的活性差异;但通过代谢组差异分析,找到了两个可能的分子量,分别为627.2858和829.381。对于找到的存在差异的化合物将在后续开展抑菌活性、分离纯化和异源表达等实验工作进一步加以确证。我们的研究首次提出一种特定的羊毛硫细菌素subtilomycin的产生能够受到植物源多糖的诱导,进一步发现其能影响生物被膜的形成和影响植物定植能力。本研究有助于理解枯草芽胞杆菌的定植机制和对进一步开发稳定、有效的生物农药和生物化肥具有指导意义。(本文来源于《华中农业大学》期刊2016-06-01）
马宏初,高涌,赵方圆,钟瑾[5]（2015）在《羊毛硫细菌素bovicin HJ50修饰酶BovM双功能域单独催化活性鉴定》一文中研究指出【目的】体外重建羊毛硫细菌素bovicin HJ50修饰酶Bov M双功能域(脱水酶与环化酶功能域)各自的催化活性,为深入了解Bov M催化机制奠定基础。【方法】在大肠杆菌(Escherichia coli)中分别异源表达纯化Bov M含脱水功能域的N端与含环化功能域的C端重组蛋白,构建体外反应体系,分别对其前肽底物Bov A进行修饰,通过产物抑菌活性及MALDI-TOF MS分子量检测来鉴定两者的修饰活性;并通过体内体外两种方法检测双功能域蛋白之间的协同作用。【结果】Bov M的N端脱水功能域及C端环化功能域分别具有脱水与环化活性,但双功能域重组蛋白之间没有协同作用。【结论】Bov M双功能域均可独立行使各自的催化功能,但Bov M的完整结构对其正常的催化活性非常重要。(本文来源于《微生物学报》期刊2015年01期）
滕坤玲,王剑,张杰,钟瑾[6]（2014）在《乳酸菌与羊毛硫细菌素》一文中研究指出乳酸菌发挥其益生功能的重要生理特性之一是其能产生具抑菌活性的细菌素类代谢产物。羊毛硫细菌素是(lantibiotics)是一类由革兰氏阳性菌(主要是乳酸菌等)的核糖体合成产生并经过翻译后修饰的抗菌多肽(19-38 aa),因含特殊羊毛硫氨酸(lanthionine)而被称为羊毛硫细菌素(lanthionine-containing antibiotics)。它们不仅赋予乳酸菌等产生菌在环境中的竞争优势,调节微生态平衡,也因其自身特点如抑菌活性强、抑菌谱较广,且可被消化道中的酶降解,不易引起抗药性,抗菌机制比较独特等,是人们用来改造成新抗菌药物的理想材料。羊毛硫细菌素的典型代表——乳酸乳球菌产生的乳链菌肽,就因其高效抑菌活性及安全性而被广泛应用作天然食品防腐剂。本报告主要围绕乳酸菌等产生的羊毛硫细菌素,介绍了以nisin及bovicin HJ50等为代表的羊毛硫细菌素的生物合成、代谢调控、结构功能关系、抑菌作用机制、资源挖掘及应用开发等,为最终人们更好地利用这类生物活性物质为人类健康服务奠定理论基础。(本文来源于《乳酸菌与营养健康:第九届乳酸菌与健康国际研讨会摘要汇编》期刊2014-05-21）
张杰[7]（2012）在《羊毛硫细菌素bovicin HJ50及其前导肽结构与功能关系研究》一文中研究指出羊毛硫细菌素是一类由核糖体合成，含翻译后修饰形成的特殊氨基酸（如羊毛硫氨酸）的抗菌多肽。独特的环状结构使羊毛硫细菌素具有优良的热稳定性，抗蛋白酶降解以及高效的杀菌活性。Bovicin HJ50是牛链球菌（Streptococcus bovis）HJ50产生的一种新的AII类羊毛硫细菌素，其分子包含两个硫醚环（A, B环）和一个特征性二硫键形成的环（C环）。这种特殊的分子结构与其功能之间的关系还不得而知，而其前导肽在指导合成这种结构中所起的作用也非常值得关注。为了阐明bovicin HJ50的结构特征及其与功能的关系，本研究首先利用“体内修饰，体外加工”的半体外生物合成系统（SIVB），制备了毫克级别的bovicin HJ50。将其溶于氘代醋酸缓冲液中，利用二维1H-1H COSY, TOCSY和NOESY,以及1H-13C HSQC,HSQC-TOCSY和HSQC-NOESY分别进行化学位移分配和结构计算。分析结果显示，bovicin HJ50水溶液分子较柔性，不具有整体的叁维结构，与AI类的nisin结构差异较大。其中A环结构较收敛，而B，C环结构较松散，不具有规则的二级结构。圆二色谱表征二级结构时发现，bovicin HJ50在水溶液中处于无规则卷曲状态，而在膜模拟环境下形成了较规则的类α螺旋结构。利用上述结构信息，采用定点突变和蛋白酶处理，构建得到了54个bovicin HJ50的突变体及类似物，以获得更加详细的结构特征和功能位点或区域。抗菌活性分析显示，（1）N端电荷对活性影响较小，保守的Gly4与芳香族Trp5都对活性影响较大；（2）A环是一个功能区域，且Lys11，Asp12是关键位点，通过电荷作用影响活性；（3）B环残基对活性影响较小，而Lys30正电荷较重要；（4）C环的亲水性和环状结构与活性密切相关。另外，为了探究bovicin HJ50前导肽对其特异性修饰和加工的影响，本论文将关注点集中在其前导肽二级结构上。通过构建前导肽的突变体，检测对应成熟肽的修饰和产率变化情况，说明bovicin HJ50前导肽的二级结构区在其生物合成过程中起重要作用。我们成功构建了7个bovicin HJ50前导肽二级结构区的突变体（F-16A, V-15E, E-14L,E-8P, E-8K，L-7D, L-4K），MALDI-TOF MS鉴定显示所有突变体对应成熟肽都脱去2分子水，即脱水个数不受影响。结合BovT150切割效率分析发现，F-16A, V-15E, L-4K几乎不影响修饰和加工，E-14L和E-8P的修饰则发生了变化，E-8K可能导致BovT150切割效率下降，而L-7D致使前导肽的切除加工受到强烈抑制。本研究解析了第一个AII类羊毛硫细菌素的水溶液结构，并对bovicin HJ50结构和功能关系进行了较系统的研究，为探究其作用机制打下了坚实基础，这些都对同类羊毛硫细菌素具有较强的借鉴意义。(本文来源于《江南大学》期刊2012-06-01）
韩雪[8]（2011）在《美研究人员发现一种天然防腐剂 羊毛硫细菌素可杀死食品中有害菌》一文中研究指出本报讯 美国明尼苏达大学的研究人员在研究细菌基因组时偶然发现了一种由无害菌产生的叫羊毛硫细菌素的肽，这种肽可以加入到食品中杀死一些有害菌，如沙门氏菌、大肠杆菌和李斯特菌。研究人员已经为他们的区一发现申请了专利。 羊毛硫细菌素是被发现的第一(本文来源于《中国食品报》期刊2011-08-31）
刘刚,钟瑾[9]（2008）在《新型羊毛硫细菌素bovicin HJ50生物合成基因簇的研究》一文中研究指出Bovicin HJ50是牛链球菌Streptococcus boyis HJ50产生的一种新AⅡ类羊毛硫细菌素,前期研究表明其分子中含有两个硫醚环及一个非常少见的二硫键。在前体结构基因bovA基础上,采用SSP-PCR方法克隆得到bovicin HJ50生物合成基因簇。序列分析表明该基因簇约10kb,除bovA外,还依次排列着翻译后修饰基因(bovM)、输出和激活基因(boyT)、免疫相关基因(bovEF,ORF1,ORF2)、双组分调控基因(bovKR)等。基因破(本文来源于《2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集》期刊2008-11-07）
钟瑾,刘刚,还连栋[10]（2006）在《羊毛硫细菌素生物合成基因簇的遗传分析》一文中研究指出羊毛硫细菌素是一类核糖体合成且经翻译后修饰的具有生物活性的小肽,通常含有羊毛硫氨酸及β-甲基羊毛硫氨酸等稀有氨基酸。近年来随着来源于乳酸乳球菌的nisin(乳链菌肽)被广泛地用作天然食品防腐剂和对其研究的不断深入,羊毛硫细菌素已引起研究者广泛关注。因其无耐药性,羊毛硫细菌素还极有可能替代传统抗生素应用于生物医药领域。羊毛硫细菌素的生物合成基因包括结构基因、修饰基因、加工基因、转运基因、免疫基因、调节基因,它们成簇排列于产生菌的染色体或质粒上,构成数个转录单元。本文综述了近年来羊毛硫细菌素生物合成基因簇遗传分析的研究进展。(本文来源于《中国抗生素杂志》期刊2006年09期）
羊毛硫细菌素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了确定分离得到的枯草芽孢杆菌SX3411(Bacillus subtilis SX3411)具有产羊毛硫细菌素subtilomycin的能力和subtilomycin的理化特性。利用滤纸片扩散法检测到菌株SX3411发酵液对猪链球菌(Streptococcus suis)、枯草芽孢杆菌(非本筛选菌株)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和嗜水性单胞杆菌(Aeromonas hydrophila)具有抑菌作用。通过基因簇克隆和测序,表明其中抑菌物质主要为羊毛硫细菌素subtilomycin。理化特性分析表明菌株SX3411发酵液中抑菌物质具耐热和耐酸碱特性。SDS-PAGE检测表明subtilomycin分子质量在4 k Da左右。模拟胃液对subtilomycin抑菌活性影响不大,但不耐蛋白酶K和模拟肠液的处理。该研究为进一步开发应用羊毛硫细菌素subtilomycin奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
羊毛硫细菌素论文参考文献
[1].张彤,张杰,钟瑾.前导肽切割位点对Ⅱ类羊毛硫细菌素切割酶活性的影响[J].微生物学通报.2019
[2].李晓然,叶德晓,付鸣佳,钟雪晴,肖世平.枯草芽孢杆菌SX3411产羊毛硫细菌素subtilomycin的初步鉴定与理化特性分析[J].食品与发酵工业.2019
[3].叶德晓,钟雪晴,付鸣佳,杨志海.羊毛硫细菌素变体及其生物活性研究进展[J].基因组学与应用生物学.2019
[4].李聪智.羊毛硫细菌素SUBTILOMYCIN促进枯草芽胞杆菌定植于植物[D].华中农业大学.2016
[5].马宏初,高涌,赵方圆,钟瑾.羊毛硫细菌素bovicinHJ50修饰酶BovM双功能域单独催化活性鉴定[J].微生物学报.2015
[6].滕坤玲,王剑,张杰,钟瑾.乳酸菌与羊毛硫细菌素[C].乳酸菌与营养健康:第九届乳酸菌与健康国际研讨会摘要汇编.2014
[7].张杰.羊毛硫细菌素bovicinHJ50及其前导肽结构与功能关系研究[D].江南大学.2012
[8].韩雪.美研究人员发现一种天然防腐剂羊毛硫细菌素可杀死食品中有害菌[N].中国食品报.2011
[9].刘刚,钟瑾.新型羊毛硫细菌素bovicinHJ50生物合成基因簇的研究[C].2008年中国微生物学会学术年会论文摘要集.2008
[10].钟瑾,刘刚,还连栋.羊毛硫细菌素生物合成基因簇的遗传分析[J].中国抗生素杂志.2006