何圳军寇诗伟（四川省南充市高坪区人民医院药剂科637100）
【摘要】目的通过对复治肺结核的药敏试验结果分析，了解结核患者耐药情况，为临床医生用药提供参考。方法对2002年～2010年1137例复治住院肺结核患者送检的痰液进行分枝杆菌属培养和药敏试验进行回顾性分析。结果培养阳性848例，获得结核分枝杆菌复合群676例，耐药367例，耐药率为52.65%。耐1药65例，17.71%；耐2药92例，25.07%；耐3药64例，17.44%；耐4药39例，10.63%；耐5药31例，8.45%；耐6药22例，5.99%；耐7药20例，5.45%，耐8种及以上34例，9.26%。耐药率较高的为异烟肼30.79%；链霉素23.71%；利福平32.97%。结论复治肺结核的治疗难度较大，加强复治患者的药敏试验，可为临床医师用药提供参考。
【关键词】肺结核药敏试验耐药
【中图分类号】R453【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）24-0198-02
近年来，复治肺结核的治疗因药物耐药率较高使得治疗较为困难，对复治肺结核进行药敏试验，可为临床医师用药提供参考，促进临床合理用药。本文对1137例复治肺结核患者送检的痰液进行分枝杆菌属培养和药敏试验，对其结果进行分析，以供临床参考，现报告如下：
1资料和方法
1.1一般资料
本地区2002年～2010年收治入院的复治肺结核患者，之前均进行过1月以上的抗结核治疗，其中男614例，女523例，年龄16-71岁。对送检痰标本进行分离培养并菌型鉴定，对获得的结核分枝杆菌，进行9种常用治疗药物的药物敏感试验。
1.2方法
按照《结核病诊断细菌学检验规程》操作[1]。分离培养用酸性罗氏培养基，在有效期内使用。结核分枝杆菌鉴定及药敏试验采用96孔U型底鉴定药敏板及药敏试剂板，药敏试验培养基选择改良罗氏培养基。
1.2.1菌型鉴别
以噻吩-2-羧酸酰肼(TCH)和对硝基苯甲酸（PNB）作为菌种鉴别培养基。以阳性生长对照孔、TCH药物孔和对PNB药物孔生长速度缓慢，TCH药物孔阳性，PNB药物孔阴性判定为结核分枝杆菌；L-J、TCH和PNB均生长者，为非结核分枝杆菌。
1.2.2药物敏感性试验
对临床常用的9种药物（均为厂家提供的药物的纯品），采用WHO耐药监测小组指定的比例法，在有效期内进行药敏试验：培养基药物浓度分别是异烟肼1和10ug/ml、利福平50和250ug/ml、乙胺丁醇5和50ug/ml、链霉素10和100ug/ml、卷曲霉素10和100ug/ml、丙硫异烟胺25和100ug/ml、对氨基水杨酸1和10ug/ml、卡那霉素1和10ug/ml、吡嗪酰胺25和200ug/ml。低浓度含药培养基中分枝杆菌未生长为敏感，生长程度1+及以上为耐药。
1.2.3药敏试剂板的使用方法
将培养后的菌株磨菌以麦氏标准比浊配成1mg/ml菌悬液。操作在无菌的生物安全柜中进行。每4排孔检测一株菌，每板做两株菌。接种后将药敏板置37℃培养箱中，3-14d内，板上覆盖随盒膜片，置反射镜上观察5-14d。
1.3.3接种方法
取痰标本1～2mL，加入2倍量4%H2SO4，振荡2～3次，室温下放置20～30min除去支杂菌后，取处理消化后痰液0.1mL，无菌操作接种于含药和不含药培养基斜面上，每份标本同时接种2支酸性罗氏培养基，37℃5%～10%CO：培养8周。观察每周1次并记录细菌生长情况。
2结果
1137例复治肺结核患者中培养阳性848例（74.58%），阴性227例（19.96%），62例污染（5.45%）。848例阳性菌株进行菌种鉴别，697例获得结果（82.19%）,其中结核分枝杆菌复合群676例（96.98%）,非结核分枝杆菌22例（复治不成功者）。耐药367例，耐药率为52.65%。其中耐1药65例，17.71%；耐2药92例，25.07%；耐3药64例，17.44%；耐4药39例，10.63%；耐5药31例，8.45%；耐6药22例，5.99%；耐7药20例，5.45%，耐8种及以上34例，9.26%。其中耐异烟肼113例，30.79%；链霉素87例，23.71%；利福平121例，32.97%；乙胺丁醇21例，5.72%；对氨基水杨酸26例，7.08%；丙硫异烟胺12例，3.27%；卡那霉素10例，2.72%；吡嗪酰胺8例，2.18%；卷曲霉素6例，1.63%。
3讨论
因临床上不重视药敏试验，凭经验用药，加上抗生素的滥用及患者不按疗程、要求服药[2]，导致细菌变异产生耐药性，加大了治疗难度。2002年～2010年本地区1137例复治肺结核耐药率52.65%，高于第四次全国结核病流行病学抽样调查的46.5%[3]，且耐多药现象严重，应引起重视。
综上，在加强结核病预防控制工作的同时，加强对结核病患者特别是复治患者的痰检和药敏试验，临床医师要根据试验结果，把握最佳治疗时机，及时调整患者的用药和用药剂量，停用对患者疗效差或无效的药物，提高治愈率，实现临床安全、合理的用药。
参考文献
[1]中国防痨协会.结核病诊断细菌学检验规程.中国防痨杂志，1996，18：28～31.
[2]陈建，李宁秀，万康林，等.四川和安徽两省结核耐药危险因素分析.四川大学学报(医学版)，2007，38(1)：135-137.
[3]全国结核病流调技术组.2000年全国结核病学抽样调查报告.中国防痨杂志，2002，24(2):98-102.