导读:本文包含了人完全脱细胞羊膜论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:羊膜,细胞黏附,整合素类,成纤维细胞
人完全脱细胞羊膜论文文献综述
卢旭亚[1]（2011）在《成纤维细胞与完全脱细胞人羊膜的叁维黏附》一文中研究指出目的：桩蛋白和α5整合素在含有纤维结合蛋白的细胞外纤维中形成共聚现象,这种独特的分子结构我们称之为3D黏附(3D-matrix adhesion)。细胞在3D黏附下其细胞形态、移动方式、信号通路和生存时间都表现出和传统二维培养下完全不同的情况。TAHAM作为一种全新方法获得的自然衍生基质,本实验观察其与成纤维细胞在体外的黏附方式。方法：通过组织贴片法获得原代人包皮成纤维细胞(human foreskin fibroblast, HFF),将HFF分别种植于平片、基质胶及用胰酶悬吊法制作的TAHAM;用光学显微镜、扫描电子显微镜、免疫组织化学和免疫荧光染色观察TAHAM的光学结构、纤维结构及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ型胶原、纤维结合蛋白、层黏连蛋白、转化生长因子-β1、转化生长因子-β2、成纤维细胞生长因子的分布情况；采用双苯甲亚胺进行新鲜羊膜和TAHAM的DNA定量分析；生物力学试验机上检测TAHAM的应力、应变;用倒置相差显微镜观察HFF在平片、基质胶及TAHAM上的细胞形态并观察细胞在上述叁种基质上的移动方式和速度；激光共聚焦显微镜观察α5整合素、桩蛋白和纤维结合蛋白叁种分子的空间关系。结果：光学显微镜下新鲜羊膜包含五层结构：上皮层细胞层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层。TAHAM仅保留基底膜和致密层及部分纤维母细胞层,其内未见细胞。扫描电镜下TAHAM基质层表面为方向不一的胶原纤维,纤维粗细不均,纤维走形深浅穿梭,形成立体网状结构,未见细胞及碎屑。免疫组织化学和免疫荧光观察显示Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ型胶原、层黏连蛋白、纤维结合蛋白染色阳性。转化生长因子-β1、转化生长因子-β2、成纤维细胞生长因子染色阴性。双苯甲亚胺证实TAHAM表面无细胞及碎屑残留。新鲜羊膜和TAHAM的过渡应力、过渡应变、破坏应力、破坏应变比较P值>0.05,差异无统计学意义(过渡应力：t=-1.83,P＝0.08；过渡应变：t=-1.07,P=0.30；破坏应力：t=1.57,P=0.13；破坏应变：t=-1.81,P=0.08)。HFF在TAHAM上24h贴壁后,细胞向两极伸展为纺锤形并形成伪足,α5整合素沿细胞长轴分布,此时细胞也分泌出大量的纤维结合蛋白。此后细胞继续增殖为复层细胞团,细胞团之间由细胞组成的条索相互连接,形成海星状结构,在细胞团块底部一些细胞长入TAHAM,不经传代存活21d。HFF中的α5整合素(绿色)、桩蛋白(红色)和HFF分泌的纤维结合蛋白(蓝色),叁色共聚焦形成白色条带。在平片和基质胶上未观察到共聚焦现象。HFF种植在TAHAM上8-14 h后细胞移动速度可达12μm/h,当细胞在原位形成细胞团块时移动速度接近0μm/h。在TAHAM上细胞的移动轨迹接近直线,而在普通培养皿上的细胞移动为无序随意运动,移动速度为16～48μm/h。结论：TAHAM保留了羊膜的原有主要成分和力学特征,HFF可在TAHAM上形成3D黏附,其细胞形态及细胞移动方式符合3D黏附特征。(本文来源于《天津医科大学》期刊2011-05-01）
雪原,刘嵬,赵华健,李鹏,赵晓涛[2]（2009）在《人完全脱细胞羊膜在犬椎体诱导成骨的实验研究》一文中研究指出目的探讨人完全脱细胞羊膜(HAAM)的在犬椎体的诱导成骨的能力,为骨缺损及椎体融合提供新思路。方法使用悬吊法脱细胞专利技术制取HAAM。15只成年家犬,将每只犬L1-L4椎体制作0.3×0.3×1.2cm3的缺损,随机分为HAAM、CPC(calcium phosphate cement,CPC)、HAAM-CPC植(本文来源于《第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编》期刊2009-09-25）
刘嵬[3]（2009）在《人完全脱细胞羊膜在犬椎体诱导成骨的实验研究》一文中研究指出目的:初步探讨人完全脱细胞羊膜(human acellular amniotic membrane,HAAM)的在犬椎体的诱导成骨的能力,为羊膜作为骨组织工程自然衍发基质提供实验依据,进而为骨缺损及椎体融合术提供新的治疗思路。方法:使用本课题组研发的羊膜无酸碱脱细胞专利技术制取HAAM,约2.0cm×2.0cm大小,做成约为0.3cm×0.3cm×1.2cm大小卷团状。15只成年家犬,将每只犬L1-L4椎体随机分为羊膜组、CPC组(calcium phosphate cement,CPC)、HAAM-CPC组和空白对照组。空白对照组经犬背侧椎弓根处单纯制作直径约0.3cm×0.3cm×1.2cm的椎体缺损;HAAM组在椎体缺损处植入HAAM;CPC组则植入CPC(约0.3cm×0.3cm×1.2cm大小);HAAM-CPC组在缺损处植入HAAM与CPC混合物(体积比1:1),以填满缺损处。分别在第2、4、6、8、12周时处死动物,每次3只,截取标记的骨缺损部位。即刻行CT检查,观察缺损处密度变化;甲醛固定后脱钙,切取手术部位横断面进行大体观察;常规石蜡定向包埋,切片,分别对其行HE染色,光学显微镜组织学观察和免疫组织化学染色(VEGF与Ⅳ型胶原),对比观察各组骨缺损处的成骨能力以及鉴别胶原组织来源。结果:CT观察:术后2周至12周,空白组骨缺损处密度逐渐增高,缺损处于12周时仅见手术遗迹,基本愈合;HAAM组于术后2、4、6周叁个时间点,缺损处密度HAAM组略高于空白对照组,第8周,HAAM组缺损处密度与空白组相近,第12周HAAM组缺损处大部分已钙化,但密度较空白组低。CPC组和HAAM-CPC组于术后各时间点,缺损处影像学密度无明显变化,缺损区未变小,材料与宿主之间界限分明;大体标本观察:见HAAM组羊膜位于缺损区域,位置良好,随时间推移,羊膜与宿主之间逐渐形成致密结构,手术至缺损区逐渐缩小,羊膜逐渐被新生致密结构取代,但12周时,仍有部分羊膜未被吸收;空白组见缺损区被血凝快填充,随着时间推移,逐渐新生骨小梁结构,至12周,缺损区基本愈合,仅见手术遗迹;CPC组与HAAM-CPC组均可见植入材料填充缺损区域,但随时间推移,材料吸收不明显,与周围组织界限清晰。组织学观察:术后2周时,HAAM组中手术区域可见大量复层胶原纤维样结构填充其中,伸展良好,排列规整且致密,与宿主交界处可见促细胞生长,胶原层之间穿插大量新生血管,血管周边可见小淋巴细胞,交界处还可见残损纤细的骨小梁生长,彼此未连接呈网状,纤维胶原可见散在钙化;空白组手术缺损区中央可见大量出血,尚无肉芽组织及血管生成;周边形成肉芽组织,其内毛细血管生长较旺盛,血管周围可见嗜中性细胞,交界区可见不规则残损骨小梁生长。CPC组手术区域内部见大量泡沫样异物,异物与正常骨小梁交界处边界清晰,未见嗜中性细胞,未见新生血管结构;HAAM-CPC组见手术区域充满卷曲粗糙条索状均与粉末异物,与宿主交界处未见明显促细胞生长,交界区偶见毛细血管样结构,缺损区中央未见血管生成,局部出血,骨小梁少量生长。术后4周时,羊膜组中HAAM被进一步吸收,血管生成进一步增多,新生骨小梁趋于成熟。空白组骨缺损处小梁较前增粗,有连接成网的趋势,毛细血管丰富。CPC组与HAAM-CPC组镜下观察较前未见明显变化;术后6周时,HAAM组中羊膜进一步被吸收,血管生成旺盛,与宿主交界处可见肥大的软骨细胞,在羊膜与髓腔交界处向植入物内部延伸;空白组血肿被大量吸收,缺损边缘处亦可见大量血管生成,但较HAAM组略少,骨缺损处逐渐填充以软骨组织,并见少量破碎骨小梁;CPC组较前无明显变化;HAAM-CPC组材料与宿主交界处可见少量肥大的吞噬细胞。术后8周时,HAAM组中血管仍生成旺盛,羊膜与宿主界限可见新生骨板,羊膜钙化明显;空白组血肿被吸收,手术部位可见部分新生骨小梁,与未手术部位界限不清,缺损边缘处亦可见大量血管生成;CPC组材料与宿主间可见吞噬细胞,界限尚清,余较前无明显变化;HAAM-CPC组材料与宿主交界处可见吞噬细胞,余无明显变化。术后12周时HAAM组中羊膜进一步被吸收,血管生成旺盛,与宿主交界处可见大量新生骨板,羊膜钙化明显;空白组缺损处几乎愈合,可见大量新生骨小梁交织成网状;CPC组材料与宿主间可见大量肥大吞噬细胞,部分材料与宿主之间可见互相穿插融合;HAAM-CPC组材料与宿主交界处可见肥大的吞噬细胞,但材料与宿主之间界限较轻,融合不明显。VEGF染色观察:术后2周至12周,HAAM组在羊膜表面持续阳性表达;空白组术后2周至8周持续阳性表达,12周时几乎不表达,术后2、4、6周,HAAM组表达强于空白对照组,且结合形态学特点,可见HAAM募集大量干细胞,术后8周,两组表达情况相近;CPC组术后8周出现弱阳性表达,术后12周较8周表达增强,但仍明显较HAAM组差;HAAM-CPC组于术后2周即出现弱阳性表达,此后表达状况一直持续,至术后12周表达有较明显增强,于CPC组接近。Ⅳ型胶原染色:术后6周可见HAAM阳性表达。结论:HAAM在犬椎体具有更快的促血管生成及骨诱导能力,可以作为骨组织工程自然衍发基质候选物材料,为骨缺损和骨融合的治疗提供新的治疗思路,也为其成为基因及药物的良好载体提供试验依据。(本文来源于《天津医科大学》期刊2009-05-01）
人完全脱细胞羊膜论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨人完全脱细胞羊膜(HAAM)的在犬椎体的诱导成骨的能力,为骨缺损及椎体融合提供新思路。方法使用悬吊法脱细胞专利技术制取HAAM。15只成年家犬,将每只犬L1-L4椎体制作0.3×0.3×1.2cm3的缺损,随机分为HAAM、CPC(calcium phosphate cement,CPC)、HAAM-CPC植
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人完全脱细胞羊膜论文参考文献
[1].卢旭亚.成纤维细胞与完全脱细胞人羊膜的叁维黏附[D].天津医科大学.2011
[2].雪原,刘嵬,赵华健,李鹏,赵晓涛.人完全脱细胞羊膜在犬椎体诱导成骨的实验研究[C].第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编.2009
[3].刘嵬.人完全脱细胞羊膜在犬椎体诱导成骨的实验研究[D].天津医科大学.2009