导读:本文包含了肿瘤启动细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:PEG3启动子,FTH1报告基因,磁共振成像,干细胞瘤变
肿瘤启动细胞论文文献综述
孙君[1]（2019）在《肿瘤特异性启动子PEG3驱动报告基因FTH1在干细胞瘤变时表达及MR成像》一文中研究指出背景与目的干细胞移植在中枢神经系统及心血管系统等多系统疾病治疗的研究领域中取得了显着地进展,但干细胞与肿瘤细胞关系密切,都具有自我更新和多向分化能力,不仅有相似的代谢活性,而且有很多相同的沉默基因。近年来关于干细胞成瘤的报道使干细胞移植安全性被质疑,而且移植部位常发生在脊髓、脑、眼等较敏感的部位,即使形成很小的肿瘤都会导致严重的功能障碍,移植后干细胞的示踪可尽早检测到肿瘤的发生。在干细胞活体影像学示踪领域,主要利用光学、核医学以及磁共振成像(MRI),其中,MRI因具有叁维多序列成像且高分辨率无辐射等优点而最具潜力。MRI示踪干细胞常用方法包括直接和间接两种方法,直接示踪法应用磁性纳米微粒先标记干细胞并利用MRI对磁标记细胞进行检测,但是由于细胞的分裂及再摄取等问题限制其对干细胞的长期纵向示踪;间接示踪法常采用MRI报告基因标记干细胞,并利用其在细胞内的持续表达来示踪干细胞,有效克服了直接示踪法不能对细胞进行长期示踪的缺陷。虽然MRI报告基因成像可实现对干细胞移植后的长期纵向示踪,但无法区分早期瘤变细胞和瘤变前的干细胞。解决这一问题的关键在于找到一种在干细胞瘤变前后差异化表达的基因,该基因在瘤变细胞内高表达,而在干细胞及其正常分化的组织细胞不表达或低表达,利用该基因的启动子驱动报告基因在瘤变细胞内特异性表达,理论上可以实现报告基因成像对干细胞瘤变的早期检出。PEG3(progression elevated gene-3)是一种来源于啮齿动物的肿瘤特异性基因,在肿瘤细胞中,PEG3启动子活性受到PEA3、AP-1两种转录因子的调节而高表达。该基因在人癌细胞系同样高表达,而在正常组织细胞极少表达;目前PEG3启动子已被用于肿瘤的靶向治疗和肿瘤的发生机制等研究领域。有关利用PEG3启动子驱动报告基因对干细胞瘤变进行活体成像的研究尚未见文献报道。本实验将肿瘤特异性启动子PEG3与MRI报告基因FTH1相结合,构建PEG3-FTH1-LV慢病毒载体,将PEG3-FTH1系统转入大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)内,并诱导MSCs瘤变,在诱导前后观察FTH1基因表达、聚铁效应以及MRI信号改变,探究利用PEG3启动子驱动MRI报告基因FTH1在干细胞瘤变时特异性表达及聚铁,并被MRI检测的可行性。方法1 PEG3-FTH1-LV慢病毒载体的构建及病毒包装PEG3启动子、FTH1基因(委托汉恒生物有限公司合成)与载体p HBLV-CMV-MCS-3flag-EF1-ZSgreen-puro通过酶切、扩增、连接得到pHBLV-PEG3-FTH1-3flag-EF1-ZSgreen-puro,测序鉴定构建成功后与质粒(p SPAX2、p MD2G)同时感染293T细胞,收集病毒液离心得到病毒并标记为PEG3-FTH1-LV。同时构建CMV-FTH1-LV作为阳性对照,并将未感染病毒的MSCs细胞作为阴性对照。2慢病毒感染MSCs并诱导瘤变待MSCs细胞融合度达30%-40%,分别添加含PEG3-FTH1-LV、C MV-FTH1-LV病毒培养基,感染48h后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,嘌呤霉素筛选构建稳定表达株MSCs-PEG3-FTH1、MSCs-CM V-FTH1。将MSCs、MSCs-PEG3-FTH1、MSCs-CMV-FTH1分别与大鼠胶质瘤细胞C6间接共培养2周诱导其瘤变为TMSCs、TMSCs-PEG3-FTH1、TMSCs-CMV-FTH1。3诱导前后细胞的鉴定观察共培养前后细胞形态,细胞流式检测共培养前后细胞表面抗体CD29、CD34、CD45、CD90表达情况,结晶紫染色检测诱导前后细胞迁移能力,CCK-8检测诱导前后细胞增殖速度,裸鼠皮下成瘤实验验证细胞瘤变。4诱导前后细胞FTH1表达及聚铁Western blots检测诱导前后细胞FTH1表达,诱导前后细胞分别经FAC培养基作用72h后,3.0T MRI观察细胞T2WI信号,普鲁士蓝染色、细胞透射电镜观察细胞诱导前后FTH1基因表达所引起的聚铁效应。5诱导后细胞移植物聚铁效应检测选取4-6W、20g左右健康雄性裸鼠,将诱导后细胞种植于裸鼠颈背部皮下,每天500mmol/L FAC溶液喂养,于细胞种植后第1d、3d、7d、14d、21d、28d、35d行3.0T MR观察移植物T2WI信号;细胞移植后形成的移植物取出后行普鲁士蓝染色及透射电镜观察肿块内铁颗粒情况,行苏木素-尹红染色观察其病理结构。结果1 PEG3-FTH1-LV慢病毒载体的鉴定及病毒包装经DNA测序、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳等技术测定已成功构建PEG3-FTH1-LV慢病毒载体,病毒滴度为1×108TU/ml。2稳定株的建立慢病毒感染细胞48h后绿色荧光明显表达,嘌呤霉素筛选7天再半量筛选3天后成功构建MSCs-PEG3-FTH1、MSCs-CMV-FTH1稳定株。3诱导前后细胞的鉴定显微镜下观察到MSCs细胞排列整齐,呈鱼群样生长,TMSCs细胞较MSCs细胞变小,核浆比变大,并排列紊乱;经CCK-8检测显示TMSCs细胞较MSCs细胞增殖速度加快;结晶紫染色结果显示TMSs细胞较MSCs细胞迁移能力增强;流式细胞检测结果分析得到TMSCs细胞较MSCs细胞CD34、CD45表达增加,CD90表达减少;裸鼠皮下成瘤实验显示TMSCs细胞裸鼠皮下成瘤阳性,而MSCs不形成肿瘤。4诱导前后细胞FTH1表达及聚铁效应Western blots结果显示MSCs、MSCs-PEG3-FTH1、TMSCs细胞不表达或少量表达FTH1蛋白,而MSCs-CMV-FTH1、TMSCs-PEG3-FTH1、TMSCs-CMV-FTH1细胞均大量表达FTH1蛋白,MRI显示T MSCs-PEG3-FTH1细胞T2WI信号较MSCs-PEG3-FTH1细胞明显降低。普鲁士蓝染色和细胞透射电镜观察到MSCs-CMV-FTH1、TMSCsPEG3-FTH1、TMSCs-CMV-FTH1细胞内存在铁颗粒,而在MSCs、M SCs-PEG3-FTH1、TMSCs细胞内无明显铁颗粒。5诱导后细胞移植物体内聚铁效应MRI显示TMSCs-PEG3-FTH1细胞移植物信号与TMSCs-CMV-FT H1细胞移植物信号相似且均较TMSCs细胞移植物信号降低,普鲁士蓝染色和细胞透射电镜均观察到TMSCs-PEG3-FTH1与TMSCs-CMVFTH1细胞移植物内有明显的铁颗粒而TMSCs细胞移植物内铁颗粒不明显。结论本实验成功构建PEG3启动子控制FTH1基因表达的慢病毒载体并感染MSCs细胞,证实了PEG3启动子可驱动报告基因FTH1在干细胞瘤变时特异性表达并能被MRI检测。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
杨孝燕,王春红,吉宏明[2]（2019）在《TERT启动子突变对原发性胶质母细胞瘤中小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞极化的影响》一文中研究指出目的通过检测TERT启动子突变型、TERT启动子野生型的原发性胶质母细胞瘤中小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞的M1、M2两种表型的表达,初步探讨在原发性胶质母细胞瘤中TERT启动子突变对小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞极化的影响。方法选取2015-2018年手术治疗、病理诊断为原发性胶质母细胞瘤的标本石蜡切片共79例,根据基因检测有无TERT启动子突变,将标本分为TERT启动子突变组(n=43)与野生型组(n=36);选取M1型细胞的标记物为诱导型一氧化氮合酶(i NOS),M2型细胞的标记物为精氨酸酶1(Arg-1),用免疫组化法检测两组中各标记物阳性细胞数。结果 TERT启动子突变组中M2型小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞表达较野生组多(P <0. 05); TERT启动子突变组中M1型小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞与野生组比较差异无统计学意义(P=0. 08)。结论 TERT启动子突变促使小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞向M2型极化。(本文来源于《山西医科大学学报》期刊2019年04期）
张乐[3]（2019）在《非小细胞肺癌组织中抑癌基因RUNX3启动子甲基化与肿瘤侵袭相关基因E-Cad、MMP-7和TIMP-1蛋白表达的关系》一文中研究指出目的:探讨非小细胞肺癌组织中抑癌基因RUNX3启动子甲基化与肿瘤侵袭相关基因E-Cad、MMP-7和TIMP-1蛋白表达的关系。方法:收集并分析我院2017年1月至2018年1月期间收治入院的65例非小细胞肺癌患者组织,采用巢氏甲基化特异性PCR(n MSP)法检测RUNX3启动子甲基化情况;链霉菌素-生物素过氧化物酶(S-P)染色法检测肿瘤侵袭相关基因E-Cad、MMP-7和TIMP-1蛋白表达并计数,并回顾性分析RUNX3启动子甲基化状态与临床病理特征、肿瘤侵袭相关基因表达的关系。结果:65例NSCLC组织样本中有27例出现RUNX3启动子的甲基化(41. 54%)。RUNX3启动子甲基化与病理类型有关,腺癌(81. 48%)高于鳞癌(18. 52%,P=0. 003);且与临床分期有关(P=0. 003),主要分布于Ⅲ期(55. 56%)和Ⅳ期(33. 33%)。S-P染色并计数结果显示,E-Cad、MMP-7和TIMP-1蛋白表达阳性率分别为56. 92%、46. 15%和52. 31%;且在RUNX3基因启动子甲基化组中阳性表达率与非甲基化组中阳性率相比差异均具有统计学意义(P<0. 05)。结论:RUNX3基因启动子的甲基化与NSCLC的侵袭和转移密切相关,有望为NSCLC的临床诊疗提供新的思路。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2019年03期）
郭琳[4]（2019）在《PD-1抗体抗癌新发现:杀伤性T细胞的抗肿瘤活性由树突状细胞启动》一文中研究指出传统观点认为,PD-1抗体抗癌机制为PD-1抗体与T细胞上PD-1受体结合并直接激活T细胞启动免疫反应。然而,事情并非这么简单。最近,麻省总医院的GARRIS等在《Immunity》上发表的研究成果进一步解析了PD-1抗体抗癌的机制。该研究发现,当PD-1抗体与T细胞上PD-1受体结合后,由树突状(本文来源于《海南医学》期刊2019年01期）
蔡忠林,李慧,周川,刘强照,周逢海[5]（2017）在《肿瘤特异性启动子在溶瘤腺病毒治疗肾细胞癌中的应用》一文中研究指出肾细胞癌是发达国家十大常见恶性肿瘤之一,在泌尿系恶性肿瘤中发生率仅次于膀胱癌。肿瘤基因治疗是一种新型的肿瘤治疗方法,溶瘤腺病毒是肿瘤基因治疗中的热点,带有特异性启动子的溶瘤腺病毒能提高溶瘤腺病毒的溶瘤作用和增加抗肿瘤的靶向性。本文对溶瘤腺病毒构建中肾细胞癌特异性启动子进行综述。(本文来源于《现代泌尿外科杂志》期刊2017年09期）
[6]（2017）在《Nature:研究鉴定出负责启动和促进多种肿瘤转移的细胞》一文中研究指出在一项新的研究中,西班牙研究人员通过一种特定的被称作蛋白CD36的标志物鉴定出转移起始细胞(metastasis-initiating cell)。这种在肿瘤细胞膜中发现的蛋白负责摄取脂肪酸。CD36活性和对脂质代谢的依赖性可将转移起始细胞与其他的肿瘤细胞区分开来。相关研究结果在线发表在Nature期刊上,论文标题为"Targeting metastasis-initiating cells through the fatty acid receptor CD36"。研究人员在来自具有不同侵袭性程度的口腔癌患者的样品中发现转移性CD36+细胞。在分析的口腔癌中,少(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2017年01期）
牛坚,王月,刘斌,王人颢,朱志军[7]（2016）在《survivin启动子调控肿瘤干细胞标记CD133基因siRNA增殖型溶瘤腺病毒的构建及对肝癌细胞生长的抑制作用》一文中研究指出目的构建survivin启动子调控的靶向CD133基因的siRNA增殖型溶瘤腺病毒,研究其对肝癌细胞生长的影响。方法 RT-PCR法扩增survivin启动子,测序鉴定,双酶切连接,获得p H-XC2-survivin。酶切p H-XC2-survivin、p ZD55-CD133-siRNA获得survivin启动子表达框的亚克隆和CD133-siRNA基因表达框的亚克隆,连接获得survivin启动子调控的siRNA增殖型溶瘤腺病毒表达载体质粒p T-ZD55-CD133-siRNA。增殖型溶瘤腺病毒survivin-T-ZD55-CD133-siRNA经PCR和测序鉴定。qRT-PCR法检测CD133表达,Western blot法检测E1A,CCK-8法检测细胞生长,流式细胞术检测细胞凋亡。结果成功构建增殖型溶瘤腺病毒survivin-T-ZD55-CD133-siRNA。qRT-PCR法检测CD133 mRNA明显下降,Western blot证实survivin-T-ZD55-CD133-siRNA在肿瘤细胞中表达E1A能抑制肝癌细胞CD133表达及生长。结论构建的增殖型溶瘤腺病毒可有效降低肝癌细胞CD133的表达,用于肝癌基因治疗的进一步研究。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2016年07期）
林燕真,程通,张雅丽,李瑞银,杨连威[8]（2015）在《肿瘤细胞特异启动子hTERT介导的靶向mdr1基因的RNAi用于逆转卵巢癌细胞MDR的研究》一文中研究指出目的:探索应用肿瘤细胞特异启动子hTERT介导靶向肿瘤多药耐药基因mdr1的siRNA在卵巢肿瘤细胞特异表达并逆转MDR的可行性。方法:应用携带luc报告基因的报告质粒验证了hTERT启动子在卵巢肿瘤细胞株A2780中的转录活性,构建由hTERT启动子引导的靶向mdr1基因的siRNA表达载体phTERTsiMDR1B,并与携带mdr1基因靶序列的报告质粒进行共转染抑制实验,进一步将phTERT-siMDR1B表达载体与mdr1基因表达载体共转染A2780细胞,检测细胞中mdr1基因的mRNA与P-gp蛋白的表达水平。以具有耐紫杉醇表型的A2780细胞作为靶细胞进行耐药评价实验。结果:hTERT启动子在卵巢肿瘤细胞株A2780中具有良好的转录活性,而在正常人二倍体细胞株MRC-5中无转录活性;hTERT启动子介导的siMDR1B具有良好的抑制效果与特异性;hTERT启动子介导的siMDR1B可显着抑制细胞中mdr1基因的mRNA与P-gp蛋白的表达水平;转染了hTERT启动子介导的siMDR1B表达元件的细胞对紫杉醇的耐药程度显着降低。结论:hTERT启动子介导的靶向mdr1基因的RNAi用于逆转卵巢癌细胞MDR是可行的,本研究结果可为进一步开展卵巢肿瘤MDR逆转研究提供重要基础。(本文来源于《中国医学创新》期刊2015年34期）
司少艳,刘俊丽,王晓菲,谭小青,宋淑军[9]（2014）在《hTERT启动子调控的SEA-CD80基因共表达重组腺病毒载体的构建及在不同肿瘤细胞中的表达鉴定》一文中研究指出目的:构建肿瘤靶向性葡萄球菌肠毒素A和CD80基因共表达重组腺病毒载体。方法:采用PCR技术从质粒pShuttle-AFP-CD80扩增人CD80全长cDNA片段,克隆至已构建载体pMD18-T-BIS,取代小鼠CD80 cDNA片段。重组质粒命名为pMD18-T-hBIS。经酶切,将CWV增强子修饰的人端粒酶反转录酶启动子从已构建载体pGL3-CWVE-hTP,亚克隆至穿梭质粒pShuttle2,然后经酶切将片段hCD80-IRES-SEA从pMD18-T-hBIS质粒亚克隆至CWV增强子修饰的人端粒酶反转录酶启动子下游,构建质粒pShuttle2-CE-hTP-hBIS。再与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化E.coli BJ5183,以获得的重组子(命名为Ad-CE-hTP-BIS)转染Ad293细胞制备病毒并纯化。将病毒分别感染人肝癌细胞H7721、宫颈癌细胞株Hela细胞和原代培养的人牙龈成纤维细胞,经免疫荧光染色后,激光共聚焦显微镜观察SEA和CD80在细胞膜的表达情况。结果:重组腺病毒能够使CD80和SEA在人肝癌细胞H7721、宫颈癌细胞株Hela细胞膜上共表达,而在人牙龈成纤维细胞中不表达。结论:成功地构建了多肿瘤靶向性SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体。为应用SEA和CD80基因对人多种肿瘤进行靶向基因治疗奠定了基础。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2014年08期）
龚霞,张慧慧,彭剑雄,罗建新[10]（2014）在《U6/H1双启动子siRNA表达框架构建及其对肿瘤细胞端粒酶活性的干扰作用》一文中研究指出目的:构建针对端粒酶hTERT基因的U6/H1双启动子siRNA表达框架(SEC),并观察其转录产物对HeLa细胞端粒酶活性的干扰作用。方法:利用融合PCR技术,针对人端粒酶hTERT基因开放阅读区构建3条U6/H1双启动子SEC以及针对其3'端非翻译区构建1条U6/H1双启动子SEC,对各SEC鉴定后,分别转染人宫颈癌HeLa细胞,用端粒重复序列扩增法(TRAP)检测HeLa细胞的端粒酶活性。结果:4种针对端粒酶hTERT基因的U6/H1双启动子SEC均成功构建,转染HeLa细胞后,对端粒酶活性的抑制率分别为36.8%、57.39%、80.47%、70.31%。结论:针对端粒酶hTERT基因的U6/H1双启动子SEC的成功构建,为开展肿瘤端粒酶基因干扰的实验研究提供了新的有效手段。(本文来源于《中国普通外科杂志》期刊2014年06期）
肿瘤启动细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的通过检测TERT启动子突变型、TERT启动子野生型的原发性胶质母细胞瘤中小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞的M1、M2两种表型的表达,初步探讨在原发性胶质母细胞瘤中TERT启动子突变对小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞极化的影响。方法选取2015-2018年手术治疗、病理诊断为原发性胶质母细胞瘤的标本石蜡切片共79例,根据基因检测有无TERT启动子突变,将标本分为TERT启动子突变组(n=43)与野生型组(n=36);选取M1型细胞的标记物为诱导型一氧化氮合酶(i NOS),M2型细胞的标记物为精氨酸酶1(Arg-1),用免疫组化法检测两组中各标记物阳性细胞数。结果 TERT启动子突变组中M2型小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞表达较野生组多(P <0. 05); TERT启动子突变组中M1型小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞与野生组比较差异无统计学意义(P=0. 08)。结论 TERT启动子突变促使小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞向M2型极化。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肿瘤启动细胞论文参考文献
[1].孙君.肿瘤特异性启动子PEG3驱动报告基因FTH1在干细胞瘤变时表达及MR成像[D].重庆医科大学.2019
[2].杨孝燕,王春红,吉宏明.TERT启动子突变对原发性胶质母细胞瘤中小胶质细胞/肿瘤相关巨噬细胞极化的影响[J].山西医科大学学报.2019
[3].张乐.非小细胞肺癌组织中抑癌基因RUNX3启动子甲基化与肿瘤侵袭相关基因E-Cad、MMP-7和TIMP-1蛋白表达的关系[J].中国免疫学杂志.2019
[4].郭琳.PD-1抗体抗癌新发现:杀伤性T细胞的抗肿瘤活性由树突状细胞启动[J].海南医学.2019
[5].蔡忠林,李慧,周川,刘强照,周逢海.肿瘤特异性启动子在溶瘤腺病毒治疗肾细胞癌中的应用[J].现代泌尿外科杂志.2017
[6]..Nature:研究鉴定出负责启动和促进多种肿瘤转移的细胞[J].现代生物医学进展.2017
[7].牛坚,王月,刘斌,王人颢,朱志军.survivin启动子调控肿瘤干细胞标记CD133基因siRNA增殖型溶瘤腺病毒的构建及对肝癌细胞生长的抑制作用[J].安徽医科大学学报.2016
[8].林燕真,程通,张雅丽,李瑞银,杨连威.肿瘤细胞特异启动子hTERT介导的靶向mdr1基因的RNAi用于逆转卵巢癌细胞MDR的研究[J].中国医学创新.2015
[9].司少艳,刘俊丽,王晓菲,谭小青,宋淑军.hTERT启动子调控的SEA-CD80基因共表达重组腺病毒载体的构建及在不同肿瘤细胞中的表达鉴定[J].现代肿瘤医学.2014
[10].龚霞,张慧慧,彭剑雄,罗建新.U6/H1双启动子siRNA表达框架构建及其对肿瘤细胞端粒酶活性的干扰作用[J].中国普通外科杂志.2014