本文主要研究内容
作者鲁子敬,熊威威,翟琨,向东山,谭志斗（2019）在《基于双重猝灭分子信标及核酸染料Hoechst 33258对单链核酸的双色定量检测》一文中研究指出：利用鸟嘌呤(G)碱基和有机猝灭基团Black Hole Quencher 1 (BHQ-1)对荧光基团6-羧基荧光素(6-Carboxyfluorescein group,FAM)的双重猝灭作用构建了一种结构简单的双重猝灭分子信标,结合核酸染料Hoechst 33258,以艾滋病毒RNA片段的反转录序列(33个碱基)为目标DNA,建立了一种高灵敏单链核酸(ssDNA)的双色荧光定量检测方法。此分子信标中,荧光基团及有机猝灭基团分别设计为FAM和BHQ-1,分子信标的茎的碱基全部设计为C-G碱基对,环的碱基序列设计为目标DNA的互补序列,与BHQ-1相连接的为3个带有G碱基的核苷酸。没有目标DNA时,分子信标呈茎-环结构,荧光基团FAM与有机猝灭基团BHQ-1及G碱基距离很近,在BHQ-1及G碱基的双重猝灭下,FAM的荧光很弱;另外,分子信标的茎的碱基全部是C-G碱基对,不能与核酸染料Hoechst 33258相结合,因此Hoechst 33258的荧光也很弱。当有目标DNA存在时,分子信标的环与目标DNA杂交形成双链,茎-环结构被破坏,FAM远离猝灭基团BHQ-1及G碱基,其荧光得到恢复;同时,核酸染料Hoechst 33258与双链DNA中的A-T碱基对相结合,其荧光显著增强。根据荧光基团FAM及核酸染料Hoechst 33258荧光增强的程度可实现对ssDNA的定量检测。在优化的条件下,目标DNA的浓度在0.05～8.0 nmol/L范围内时,FAM和Hoechst 33258的总荧光强度(ΔI_T)与目标DNA的浓度(C)具有良好的线性关系,回归方程为ΔI_T=192.2C+115.08 (R~2=0.9938),检出限为20 pmol/L (3σ,n=9)。此方法操作简单、灵敏度高、选择性好、检出限低。
Abstract
li yong diao piao ling (G)jian ji he you ji cu mie ji tuan Black Hole Quencher 1 (BHQ-1)dui ying guang ji tuan 6-suo ji ying guang su (6-Carboxyfluorescein group,FAM)de shuang chong cu mie zuo yong gou jian le yi chong jie gou jian chan de shuang chong cu mie fen zi xin biao ,jie ge he suan ran liao Hoechst 33258,yi ai zi bing du RNApian duan de fan zhuai lu xu lie (33ge jian ji )wei mu biao DNA,jian li le yi chong gao ling min chan lian he suan (ssDNA)de shuang se ying guang ding liang jian ce fang fa 。ci fen zi xin biao zhong ,ying guang ji tuan ji you ji cu mie ji tuan fen bie she ji wei FAMhe BHQ-1,fen zi xin biao de jing de jian ji quan bu she ji wei C-Gjian ji dui ,huan de jian ji xu lie she ji wei mu biao DNAde hu bu xu lie ,yu BHQ-1xiang lian jie de wei 3ge dai you Gjian ji de he gan suan 。mei you mu biao DNAshi ,fen zi xin biao cheng jing -huan jie gou ,ying guang ji tuan FAMyu you ji cu mie ji tuan BHQ-1ji Gjian ji ju li hen jin ,zai BHQ-1ji Gjian ji de shuang chong cu mie xia ,FAMde ying guang hen ruo ;ling wai ,fen zi xin biao de jing de jian ji quan bu shi C-Gjian ji dui ,bu neng yu he suan ran liao Hoechst 33258xiang jie ge ,yin ci Hoechst 33258de ying guang ye hen ruo 。dang you mu biao DNAcun zai shi ,fen zi xin biao de huan yu mu biao DNAza jiao xing cheng shuang lian ,jing -huan jie gou bei po huai ,FAMyuan li cu mie ji tuan BHQ-1ji Gjian ji ,ji ying guang de dao hui fu ;tong shi ,he suan ran liao Hoechst 33258yu shuang lian DNAzhong de A-Tjian ji dui xiang jie ge ,ji ying guang xian zhe zeng jiang 。gen ju ying guang ji tuan FAMji he suan ran liao Hoechst 33258ying guang zeng jiang de cheng du ke shi xian dui ssDNAde ding liang jian ce 。zai you hua de tiao jian xia ,mu biao DNAde nong du zai 0.05～8.0 nmol/Lfan wei nei shi ,FAMhe Hoechst 33258de zong ying guang jiang du (ΔI_T)yu mu biao DNAde nong du (C)ju you liang hao de xian xing guan ji ,hui gui fang cheng wei ΔI_T=192.2C+115.08 (R~2=0.9938),jian chu xian wei 20 pmol/L (3σ,n=9)。ci fang fa cao zuo jian chan 、ling min du gao 、shua ze xing hao 、jian chu xian di 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自分析化学的鲁子敬,熊威威,翟琨,向东山,谭志斗，发表于刊物分析化学2019年07期论文，是一篇关于双重猝灭分子信标论文,单链核酸论文,双色荧光论文,定量检测论文,分析化学2019年07期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自分析化学2019年07期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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