导读:本文包含了转植酸酶基因乳酸杆菌论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:共表达,分泌,内切葡聚糖酶,植酸酶
转植酸酶基因乳酸杆菌论文文献综述
王磊[1]（2014）在《转植酸酶和内切葡聚糖酶基因乳酸杆菌的构建及其肉鸡饲喂效果验证》一文中研究指出β-葡聚糖和植酸（盐）是单胃动物日粮中主要的两种抗营养因子，对蛋白质、脂类、矿物质离子等营养素均具有极强的吸附和螯合能力，同时单胃动物（如猪和家禽）胃肠道缺乏或很少分泌β-葡聚糖和植酸降解酶，导致一些营养素的消化和吸收率降低，大量营养素被排泄到体外，造成对环境的污染。在实际生产中，通过添加外源性饲料酶制剂可在一定程度上消除这两种抗营养因子的不良影响，但也增加了饲料成本，且只能取得短期的效应，同时在饲料制粒过程中，酶制剂易因高温而失活；因此运用基因工程技术，构建能够表达和分泌水解酶类的乳酸杆菌重组菌，将是一种可替代的和廉价的策略。本研究的目的在于从自然界中筛选具有高植酸酶活性或内切葡聚糖酶活性的菌株，并克隆其对应的植酸酶基因和内切葡聚糖酶基因，同时从肉鸡肠道内筛选和鉴定优势益生乳酸杆菌作为宿主菌，通过基因工程技术将两个酶基因同时克隆到乳酸杆菌中，构建既具有益生特性又具有植酸酶活性和内切葡聚糖酶活性的多功能转基因乳酸杆菌，以低有效磷水平的大麦-小麦型日粮为基础日粮，验证其肉鸡饲喂效果，以此来改善肉鸡营养素利用率、提高肉鸡生产性能、降低肉鸡肠道疾病发生率、节约饲养成本，并为多功能转基因乳酸杆菌在动物生产中应用提供理论依据和技术支持。主要研究结果如下：1.从自然界中分别筛选出1株产内切葡聚糖酶的细菌和1株产植酸酶的真菌，经菌落形态、染色观察及16S和18S保守序列测序鉴定，WL001为枯草芽孢杆菌，WL002为烟曲霉。Bacillus. subtilis WL001发酵产内切葡聚糖酶的最佳碳源为麸皮，氮源为蛋白胨，初始pH为6-7，培养时间为24h；Aspergillus. fumigatus WL002发酵产植酸酶的最佳碳源为麸皮，氮源为蛋白胨，初始pH为5-6，培养时间为24h。B. subtilis WL001内切葡聚糖酶和A. fumigatus WL002植酸酶反应的最适温度均为60℃，最适pH分别为5.5和5.5-6.5。2.从B. subtilis WL001基因组DNA中成功克隆内切葡聚糖酶基因，大小1500bp，命名为celW，获得Genbank登录号（No. KJ528404）；内切葡聚糖酶基因在Ecoil BL21(DE3)中实现可溶性表达，蛋白分子量为55kD，胞内上清内切葡聚糖酶活性为1.18U/ml。从A. fumigatus WL002基因组DNA中成功克隆植酸酶基因成熟肽，大小1320bp，命名为phyAW，获得Genbank登录号（No. KJ528403）；植酸酶基因成熟肽在EcoilTransetta (DE3)中实现可溶性表达，蛋白分子量为48.2kD，胞内上清植酸酶活性为0.64U/ml。3.乳酸杆菌在肉鸡嗉囊中密度最大、分布最广，在盲肠中密度最小、分布最少，大多集中分布在肉鸡肠道前端。L. reuteri、L. johnsonii、L. acidophilus、L. crispatus、L.salivarius和L. aviarius是贯穿于整个肉鸡肠道的优势乳酸杆菌。L. reuteri是肉鸡肠道最丰富的乳酸杆菌。L. reuteri XC1具有良好的益生特性，是理想或潜在的基因工程宿主菌。4.成功构建了内切葡聚糖酶基因乳酸杆菌表达质粒、植酸酶基因乳酸杆菌表达质粒及其共表达质粒，分别命名为pLEM4157(cel)、pLEM4158(phy)、pLEM4159-cel/phy。通过电转化和平板筛选，获得相应的具有内切葡聚糖酶活性（0.96±0.08U/mL）的转基因乳酸杆菌L. reuteri pLEM4157(cel)、具有植酸酶活性（0.51±0.13U/mL）的转基因罗伊乳酸杆菌L. reuteri pLEM4158(phy)，及同时具有内切葡聚糖酶和植酸酶活性（内切葡聚糖酶活性0.68±0.17U/mL；植酸酶活性0.42±0.05U/mL）罗伊乳酸杆菌L. reuteripLEM4159-cel/phy。转基因罗伊乳酸杆菌获得与野生型罗伊乳酸杆菌相似的酸和胆盐耐受特性，当pH为2.0和3.0时，其成活率分别是13%和21%左右，当胆盐浓度为0.3%和0.5%时，其成活率分别是10%和0.3%左右。5. L. reuteri pLEM4158(phy)和L. reuteri pLEM4159-cel/phy可改善21–42日龄肉仔鸡饲料转化率；L. reuteri pLEM4157(cel)、L. reuteri pLEM4158(phy)和L. reuteripLEM4159-cel/phy可改善整个饲养期（1-42d）肉仔鸡饲料转化率，但对肉仔鸡日增重和日采食量无显着影响。6. L. reuteri pLEM4159-cel/phy可提高21日龄肉仔鸡胫骨灰分、钙和磷水平；L.reuteri pLEM4157(cel)可提高21日龄肉仔鸡胫骨钙水平；罗伊乳酸杆菌组21日龄肉仔鸡胫骨磷含量呈现增加的趋势，对21日龄肉仔鸡胫骨钙的沉积有轻微的促进作用；L.reuteri pLEM4158(phy)可提高42日龄肉仔鸡胫骨磷水平。7.饮水饲喂转基因罗伊乳酸杆菌能降低肉仔鸡21日龄和42日龄十二指肠、空肠pH，对肉仔鸡屠宰性能无显着影响，仅可轻微降低腹脂率，可显着降低胸肌滴水损失、蒸煮损失和剪切力，提高肌肉的嫩度。8. L. reuteri pLEM4159-cel/phy可显着提高21日龄和42日龄肉仔鸡十二指肠绒毛高度；L. reuteri pLEM4158(phy)、L. reuteri pLEM4159-cel/phy和L. reuteri pLEM4157(cel)可显着降低21日龄肉仔鸡十二指肠和空肠隐窝深度，增加21日龄肉仔鸡空肠肠壁厚度，降低42日龄肉仔鸡回肠隐窝深度，增加42日龄肉仔鸡十二指肠绒毛高度；L. reuteri pLEM4158(phy)和L. reuteri pLEM4159-cel/phy可显着提高42日龄肉仔鸡回肠绒毛高度和绒毛宽度。9. L. reuteri pLEM4159-cel/phy可显着降低21日龄肉仔鸡盲肠大肠杆菌的数量；L.reuteri pLEM4157(cel)可显着降低肉仔鸡盲肠韦荣球菌的数量；饲喂转基因罗伊乳酸杆菌，21日龄肉仔鸡盲肠大肠杆菌、韦荣球菌和拟杆菌的数量呈现降低的趋势，双歧杆菌和乳酸杆菌的数量呈现增加的趋势，42日龄肉仔鸡盲肠乳酸杆菌和粪肠球菌的数量呈现增加趋势。综上所述：本研究获得1株产内切葡聚糖酶的B. subtilis WL001和1株产植酸酶的A. fumigatus WL002；成功克隆目的基因，并实现大肠杆菌可溶性表达。L. reuteri是鸡肠道最丰富的乳酸杆菌。L. reuteri XC1具是理想或潜在的基因工程宿主菌。获得具有益生特性、内切葡聚糖酶和植酸酶活性的多功能转基因乳酸杆菌。重组的罗伊乳酸杆菌对肉仔鸡饲料转化率、胫骨特性、肠道pH、小肠组织形态和盲肠微生物菌群有一定的改善作用。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2014-12-01）
谷朝勇[2]（2010）在《转植酸酶基因乳酸杆菌对仔猪营养物质消化率及血清生化指标的影响》一文中研究指出本研究选择88头长白猪断奶仔猪,用于测定转植酸酶基因的乳酸杆菌对其营养物质消化率的影响。研究结果表明添加转植酸酶基因乳酸杆菌试验组粗蛋白质的消化率比未转植酸酶基因乳酸杆菌和植酸酶试验组分别提高了40.72%(P<0.01)和18.59%(P<0.05);添加转植酸酶基因乳酸杆菌试验组钙的消化率比对照组、抗生素、未转植酸酶基因乳酸杆菌、植酸酶试验组分别提高了29.77%(P<0.01)、40.77%(P<0.01)、95.31%(P<0.01)、23.32%(P<0.05);添加转植酸酶基因乳酸杆菌试验组磷的消化率比对照组、抗生素、未转植酸酶基因乳酸杆菌、植酸酶试验组分别提高了30.39%(P<0.01)、18.45%(P<0.05)、64.90%(P<0.01)、22.24%(P<0.05)。另外,选择32头长白猪断奶仔猪用于测定转植酸酶基因的乳酸杆菌对其血清生化指标的影响。结果表明,转植酸酶基因的乳酸杆菌能够显着提高血液中甘油叁酯含量(P<0.05),而对其他指标的影响并不显着(P>0.05)。由此可知,饲料中添加转植酸酶基因乳酸杆菌能提高仔猪对粗蛋白质、钙和磷等营养物质的消化率,可提高猪对饲料中脂类的吸收效率,促进断奶仔猪的生长发育。(本文来源于《上海畜牧兽医通讯》期刊2010年05期）
左瑞雨,魏向阳,冯华,常娟,尹清强[3]（2008）在《转植酸酶基因乳酸杆菌的研制及对仔猪的促生产作用》一文中研究指出为了解决微生态制剂和植酸酶应用中存在的问题,本研究通过把植酸酶基因转入到乳酸杆菌中,这种转基因乳酸杆菌在动物食入后,在胃肠道中大量繁殖的同时,可分泌大量的植酸酶。使其具有植酸酶和益生菌的双重功效,将具有广阔的市场前景。主要结果如下:(1)转植酸酶基因乳酸杆菌的制备:从无花果曲霉中提取菌体 DNA,利用 PCR 扩增植酸酶基因,把其与 pIAβ8质粒相连构建质粒载体,利用高压电击手段把载体(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集》期刊2008-10-01）
转植酸酶基因乳酸杆菌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究选择88头长白猪断奶仔猪,用于测定转植酸酶基因的乳酸杆菌对其营养物质消化率的影响。研究结果表明添加转植酸酶基因乳酸杆菌试验组粗蛋白质的消化率比未转植酸酶基因乳酸杆菌和植酸酶试验组分别提高了40.72%(P<0.01)和18.59%(P<0.05);添加转植酸酶基因乳酸杆菌试验组钙的消化率比对照组、抗生素、未转植酸酶基因乳酸杆菌、植酸酶试验组分别提高了29.77%(P<0.01)、40.77%(P<0.01)、95.31%(P<0.01)、23.32%(P<0.05);添加转植酸酶基因乳酸杆菌试验组磷的消化率比对照组、抗生素、未转植酸酶基因乳酸杆菌、植酸酶试验组分别提高了30.39%(P<0.01)、18.45%(P<0.05)、64.90%(P<0.01)、22.24%(P<0.05)。另外,选择32头长白猪断奶仔猪用于测定转植酸酶基因的乳酸杆菌对其血清生化指标的影响。结果表明,转植酸酶基因的乳酸杆菌能够显着提高血液中甘油叁酯含量(P<0.05),而对其他指标的影响并不显着(P>0.05)。由此可知,饲料中添加转植酸酶基因乳酸杆菌能提高仔猪对粗蛋白质、钙和磷等营养物质的消化率,可提高猪对饲料中脂类的吸收效率,促进断奶仔猪的生长发育。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转植酸酶基因乳酸杆菌论文参考文献
[1].王磊.转植酸酶和内切葡聚糖酶基因乳酸杆菌的构建及其肉鸡饲喂效果验证[D].西北农林科技大学.2014
[2].谷朝勇.转植酸酶基因乳酸杆菌对仔猪营养物质消化率及血清生化指标的影响[J].上海畜牧兽医通讯.2010
[3].左瑞雨,魏向阳,冯华,常娟,尹清强.转植酸酶基因乳酸杆菌的研制及对仔猪的促生产作用[C].中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十次学术研讨会论文集.2008