导读:本文包含了犬乳腺肿瘤细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:SOX2,犬乳腺肿瘤细胞,Hippo信号通路,YAP
犬乳腺肿瘤细胞论文文献综述
王森[1]（2019）在《SOX2基因敲低对犬乳腺肿瘤细胞增殖和迁移的影响》一文中研究指出犬乳腺肿瘤是母犬最常见的肿瘤之一,犬作为伴侣动物,在生活环境等方面与人类也有很多相似之处,故犬自发性乳腺肿瘤是人乳腺肿瘤的良好模型。SOX2在多种肿瘤中有较高表达,是肿瘤的研究热点,但其在肿瘤发生发展中的机制尚未完全明确。故本试验以分别从犬乳腺肿瘤原发灶和转移灶中分离培养的CHMp和CHMm细胞系为研究对象,探究SOX2对犬乳腺肿瘤不同细胞系增殖和迁移的作用机制。本试验将SOX2基因的siRNA以脂质体作为转染试剂转染进犬乳腺肿瘤细胞CHMp和CHMm中,并检验SOX2的敲低效果。通过CCK-8和克隆形成试验检测各组细胞系的增殖率。划痕愈合试验和Transwell小室迁移试验来检测敲低SOX2后犬乳腺肿瘤细胞系CHMp、CHMm的迁移能力。Western blot检测相关蛋白表达的变化。测定他莫昔芬和顺铂对各组细胞的IC_(50),检测SOX2敲低后犬乳腺肿瘤细胞对他莫昔芬和顺铂的敏感性变化。试验结果:1、为检测转染后细胞SOX2的敲低效果,对各组细胞提取蛋白进行SOX2蛋白表达量的检测,转染3种针对SOX2基因不同位点的siRNA对SOX2的表达进行干扰后,SOX2在蛋白水平的表达量下降,与对照组相比差异极显着(P<0.001)。2、CCK-8和克隆形成试验检测细胞增殖能力,与对照组相比,SOX2敲低的CHMp、CHMm细胞的增殖率和克隆形成率均显着下降(P<0.001)。3、划痕愈合试验和Transwell小室迁移试验检测细胞迁移能力,SOX2敲低的CHMp、CHMm细胞划痕愈合率和穿过Transwell小室的细胞数量均显着降低(P<0.001)。4、SOX2敲低可以抑制Wnt/β-catenin信号通路,SOX2敲低的CHMp、CHMm细胞与对照组细胞相比β-catenin蛋白表达量明显降低,显着性差异(P<0.001)。5、SOX2可以抑制Hippo信号通路,SOX2敲低的CHMp、CHMm细胞与对照组细胞相比NF2蛋白表达量明显升高,YAP蛋白表达量明显降低,显着性差异(P<0.001)。6、SOX2敲低的CHMp、CHMm细胞EMT标志性蛋白E-cadherin表达量明显升高,N-cadherin、Vimentin表达量均明显降低(P<0.001)。7、敲低SOX2后4羟-他莫昔芬和顺铂对犬乳腺肿瘤细胞IC_(50)显着降低(P<0.05),犬乳腺肿瘤对4羟-他莫昔芬和顺铂的敏感性升高。综上所述,本试验成功构建了SOX2敲低的犬乳腺肿瘤细胞模型,敲低SOX2可通过抑制Hippo信号通路降低犬乳腺肿瘤细胞增殖和迁移能力,提高犬乳腺肿瘤细胞对他莫昔芬和顺铂的敏感性,进一步完善了SOX2调控乳腺肿瘤的机制,为以SOX2为乳腺肿瘤治疗靶点提供参考。(本文来源于《东北农业大学》期刊2019-06-01）
张佳韧,王峥,李冉,原东伟,韦人月[2]（2017）在《两例犬乳腺肿瘤细胞学与病理组织学观察》一文中研究指出为了确定细胞学检查在乳腺肿瘤诊断中具有诊断意义,试验采用细胞学检查和病理组织学检查相结合的方法对临床病例进行了研究。结果表明:细胞学检查结果与病理组织学检查结果相符。说明在犬乳腺肿瘤的诊断中,细胞学检查与病理组织学检查相符,对肿瘤的良恶性诊断具有一定价值,为临床诊断提供了一种新的辅助诊断方法。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2017年23期）
郭昕[3]（2017）在《双氢青蒿素对犬乳腺肿瘤细胞侵袭性及EMT相关因子的影响研究》一文中研究指出犬乳腺肿瘤是一种严重危害机体健康的肿瘤性疾病,通过恶性增殖、转移侵袭至其他脏器导致器官衰竭。目前针对犬乳腺肿瘤的治疗多为手术及放、化疗,但结果多易复发或副作用较大。双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)作为中药提取物,其抗疟功效已经得到了广泛的认同,随着研究的深入,其抗肿瘤的效果也逐步显现。本试验研究了双氢青蒿素对犬乳腺肿瘤细胞侵袭性及EMT相关因子是否具有影响及其影响机制。取对数增长期状态相同的犬乳腺肿瘤细胞CHMm,使用低(5μM)、中(10μM)、高(20μM)浓度DHA处理并分别培养24、48、72h。收集各组细胞使用CCK-8法检测细胞活性;细胞划痕试验检测细胞迁移性;transwell检测细胞侵袭性;ELISA检测细胞基质金属蛋白酶(MMP-9)含量及基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)含量;实时荧光定量PCR方法检测细胞E钙粘蛋白(CDH1)、锌指结合蛋白(ZEB)、锌指转录因子(SLUG)等细胞上皮间质转化(EMT)相关因子表达量变化。1.使用CCK-8检测细胞毒性发现,相同培养时间,与空白对照组相比较,低、中、高试验组对CHMm细胞抑制性影响效果极显着(p<0.01)。相同DHA作用浓度,培养48h、72h与培养24h相比较DHA对细胞抑制性影响差异极显着(p<0.01)。DHA对CHMm细胞抑制率呈明显药物时间、浓度依赖性。2.细胞划痕试验检测细胞迁移速率结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比较低、中、高试验组对CHMm细胞迁移性抑制作用效果极显着(p<0.01)。相同DHA作用浓度,培养48h、72h与培养24h相比较DHA对细胞迁移性抑制影响差异极显着(p<0.01)。DHA对CHMm细胞迁移性抑制呈明显的药物时间、浓度依赖性。3.细胞侵袭试验检测细胞侵袭性结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比较低、中、高试验组穿透基底膜着色细胞个数显着增多,说明DHA对CHMm细胞侵袭性抑制效果极显着(P<0.01)。相同DHA作用浓度,培养48h、72h与培养24h相比较DHA对细胞侵袭性抑制影响差异极显着(p<0.01)。DHA对CHMm细胞侵袭性抑制呈明显的药物时间、浓度依赖性。4.细胞基质金属蛋白酶检测结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比较各浓度试验组细胞MMP-9含量降低极显着(p<0.01)。相同作用浓度,随培养时间的增加细胞MMP-9含量变化差异不显着(p>0.05)。DHA对CHMm细胞分泌MMP-9具有显着抑制性,呈明显药物浓度依赖性。5.细胞基质金属蛋白酶抑制剂结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比各浓度DHA试验组TIMP1含量没有显着变化(p>0.05)。相同DHA作用浓度,增加培养时间,各试验组TIMP1含量也没有显着变化(p>0.05)。6.EMT相关因子mRNA表达结果表明,相同培养时间,与空白对照组相比,各浓度DHA试验组目的基因CDH1的mRNA表达量上调极显着(P<0.01),目的基因SLUG、ZEB1、ZEB2、Twist、HMGA2、MMP-9 及 VEGF 的 mRNA 表达量下调极显着(p<0.01)。双氢青蒿素对犬乳腺肿瘤细胞具有增殖抑制作用,并通过对EMT相关因子表达的调控抑制细胞的侵袭性。(本文来源于《沈阳农业大学》期刊2017-06-10）
杨超[4]（2017）在《阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞系CHMp和CHMm体内外抑制机制研究》一文中研究指出恶性肿瘤严重危害人类的健康,并已成为现阶段重大的公共医疗问题。探寻有效的治疗恶性肿瘤的方法早已成为世界各国医学研究的重点。近年来随着我国社会的发展,人们的生活方式和所处生态环境的改变导致了恶性肿瘤的发病形势极为严峻,造成社会负担日益加剧,其中乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤性疾病。近年来的流行病学调查显示,乳腺癌的发病率和致死率均有逐年上升的趋势。阿司匹林作为经典的非甾类抗炎药,具有解热、镇痛、抗风湿、防治心脑血管疾病等功效,被广泛应用于临床各领域。近年来随着对阿司匹林药理作用研究的深入,越来越多的证据表明其具有抗肿瘤效应。服用阿司匹林可降低癌症的发生风险,并有效的延长癌症患者的生存期和降低其癌症的复发。目前,大量的实验结果显示阿司匹林可以在体内外抑制多种肿瘤细胞的增殖活性。随后人们对阿司匹林发挥抗肿瘤效应的具体分子机制开展了大量的科学探索,然而从现有报道来看,阿司匹林的抗肿瘤作用机制还未得到完全揭示,这是因为其药理作用较为复杂,并可在不同的肿瘤细胞中表现出不同的作用途径,同时缺乏系统和完善的在体实验,这也限制了阿司匹林在肿瘤临床中的应用。相比较结肠癌等消化道恶性肿瘤来说,阿司匹林对于乳腺肿瘤作用效果的报道相对较少,对于其抗癌机制的研究也缺乏系统的阐述,且在一些问题上还存在明显的争议。犬乳腺肿瘤为兽医临床上常见的肿瘤性疾病,对犬的健康造成严重危害,目前临床上主要采取手术切除的方法来对其进行治疗。与人类乳腺肿瘤相同,对于恶性并伴有转移的犬乳腺肿瘤来说,单纯的手术治疗效果并不理想,手术配合系统的辅助治疗方案对于犬乳腺肿瘤显得尤为必要。由于犬和人类的生活环境息息相关,其一直作为医学研究中理想的实验动物模型。此外,犬乳腺肿瘤和人乳腺肿瘤无论是在发病病因和病程发生发展等方面,都具有高度相似性。开展犬乳腺肿瘤的研究不仅能为兽医临床探寻犬乳腺肿瘤有效的治疗方案,更可以为人医临床提供重要的数据参考。基于阿司匹林的前期研究基础和犬作为乳腺肿瘤研究模型的重要意义,且目前并未见有阿司匹林对犬乳腺肿瘤的研究报道,本课题开展阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞的抑制作用及其分子机制的研究,进一步揭示阿司匹林的抗肿瘤作用机制,为下一步在犬乳腺肿瘤模型中评价阿司匹林的抗肿瘤作用提供理论依据,并为阿司匹林能早日应用于乳腺肿瘤的临床治疗奠定一定的基础。本实验通过CCK-8和克隆形成实验的方法,检测不同浓度阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞增殖活性的影响,并建立了裸鼠犬乳腺肿瘤移植瘤模型,进一步观察阿司匹林在体内的抗肿瘤效果。采用Annexin V-FITC染色法,检测阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞的凋亡诱导作用,同时通过western blot实验检测阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞中PARP、Bcl-2和Bax蛋白表达水平的影响。流式细胞术检测了阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞周期分布的影响,通过western blot实验检测了Cyclin D1、CDK4、E2F1和p21蛋白的表达变化,以揭示阿司匹林阻滞细胞周期进程的机制。Western blot实验检测阿司匹林处理犬乳腺肿瘤细胞后,PI3K/Akt和Wnt/β-catenin信号通路中相关蛋白的表达水平变化,并提取核内蛋白,进一步检测阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞核内β-catenin蛋白水平的影响,同时通过应用细胞免疫荧光和免疫组织化学染色实验,检测阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞内p-GSK3β和β-catenin蛋白定位及表达水平的影响,探究阿司匹林抑制犬乳腺肿瘤细胞增殖的分子调节机制。采用Transwell小室实验检测阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞迁移力及侵袭力的影响,并结合western blot实验检测了阿司匹林处理后的犬乳腺肿瘤中VEGF和E-cadherin蛋白表达水平的变化,以阐述阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞转移能力的影响。评估阿司匹林与顺铂或他莫昔芬的联合应用效果,以奠定阿司匹林与其联合应用的理论基础。实验结果表明:(1)阿司匹林在体外可以抑制犬乳腺肿瘤细胞系CHMp和CHMm的增殖活性,并抑制犬乳腺肿瘤细胞系CHMp和CHMm的克隆形成,且呈剂量和时间依赖性;体内实验结果证明,阿司匹林抑制了裸鼠犬乳腺肿瘤移植瘤的生长,表明阿司匹林在体外与体内对犬乳腺肿瘤细胞均具有增殖抑制效应。(2)通过细胞凋亡检测实验证明,阿司匹林对犬乳腺肿瘤细胞CHMp没有凋亡诱导作用,且不影响CHMp细胞内PARP、Bcl-2和Bax蛋白的表达;在10m M阿司匹林作用下,犬乳腺肿瘤细胞CHMm可发生晚期凋亡和坏死,细胞内PARP蛋白被切割,且Bcl-2/Bax的比值发生显着性下降,表明高浓度阿司匹林具有诱导转移型犬乳腺肿瘤细胞CHMm发生晚期凋亡和坏死的作用。阿司匹林诱导犬乳腺肿瘤细胞阻滞在G0/G1期,并下调了Cyclin D1、CDK4、E2F1蛋白在细胞内的表达水平,上调了p21蛋白的表达水平,表明阿司匹林可通过诱导犬乳腺肿瘤细胞周期阻滞发挥抗肿瘤效果,(3)通过检测PI3K/Akt信号通路中相关蛋白实验,阿司匹林通过下调犬乳腺肿瘤细胞中PI3K、p-Akt蛋白的表达水平,抑制PI3K/Akt信号通路。(4)阿司匹林抑制Wnt/β-catenin信号通路,主要是下调p-GSK3β、β-catenin蛋白的表达水平,同时抑制β-catenin蛋白的核内表达水平,抑制其下游的调节分子c-myc、PPAR-δ的表达。阿司匹林降低VEGF和增加E-cadherin蛋白在犬乳腺肿瘤细胞中的表达水平,阻止犬乳腺肿瘤细胞的迁移及侵袭,进而抑制其转移能力。(5)阿司匹林分别与顺铂、他莫昔芬表现出药效相加的作用。(本文来源于《东北农业大学》期刊2017-06-01）
刘佳[5]（2017）在《CNTN1基因沉默对犬乳腺肿瘤细胞系转移调控的影响》一文中研究指出CNTN1基因是近年来新发现的与癌症发生发展有关的基因,早期的研究表明CNTN1基因和神经突触发生和发育有关,直到2006年Su等首次通过c DNA全基因序列分析发现,该基因与肺癌的侵袭和转移相关,至此关于CNTN1基因在肿瘤方面的作用才被研究者重视。目前为止,CNTN1基因在肿瘤方面的作用机制仍不清楚。因此,本实验使用犬乳腺肿瘤细胞CHMm作为实验材料研究CNTN1基因在犬乳腺肿瘤中转移与侵袭的作用机制。本实验委托吉玛公司设计CNTN1基因sh RNA质粒,使用脂质体2000瞬时转染方法将CNTN1 sh RNA质粒导入犬乳腺肿瘤细胞系CHMm细胞。采用CCK-8和细胞平板克隆实验检测细胞增殖情况,Annexin V-ACP/7-AAD凋亡试剂盒检测细胞凋亡能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测Akt信号通路相关蛋白水平变化,探讨CNTN1基因沉默后对犬乳腺肿瘤CHMm细胞及Akt信号通路相关蛋白影响。结果:1、荧光显微镜下可见中转染CNTN1 sh RNA质粒的CHMm细胞存在大量绿色荧光,Western blot检测结果显示,转染CNTN1 sh RNA质粒的犬乳腺肿瘤细胞CHMm的CNTN1基因的蛋白表达量显着低于对照组(p<0.05);2、细胞增殖与凋亡检测表明,沉默CNTN1的表达并不影响犬乳腺肿瘤细胞CHMm增殖和凋亡(p>0.05);3、沉默CNTN1基因表达细胞组的PI3K、Akt(Ser473)、和mTOR蛋白的表达量较对照组组显着降低(p<0.05),但mTOR/p-mTOR蛋白表达量的比值与对照组无明显差异(p>0.05);4、沉默CNTN1基因表达的细胞组抑细胞凋亡基因Bax、caspase-3、caspase-9蛋白的表达量较对照组显着升高(p<0.05),促细胞凋亡基因Bcl-2蛋白表达量较对照组显着降低(p<0.05);5、沉默CNTN1基因表达的细胞组的细胞周期相关基因Cyclin D1蛋白的表达量较对照组显着降低(p<0.05),p21和p27蛋白的表达量较对照组显着升高(p<0.05);6、沉默CNTN1基因表达的细胞组的细胞转移相关基因e NOS蛋白的表达量较对照组显着降低(p<0.05),E-Cadherin蛋白的表达量较对照组显着升高(p<0.05)。本实验成功沉默了CHMm表达的CNTN1基因,沉默效率可达到60%-70%。CNTN1基因沉默并不影响细胞的增殖,CNTN1基因沉默可下调Akt信号通路,从而调控该通路下游凋亡、周期、转移等蛋白的表达,从而调节细胞的转移能力,为乳腺肿瘤治疗提供新的靶点。(本文来源于《东北农业大学》期刊2017-06-01）
王英雪[6]（2017）在《二甲双胍对犬乳腺肿瘤细胞体外增殖抑制作用的影响》一文中研究指出犬乳腺肿瘤作为危害母犬健康的常发的肿瘤性疾病之一,其受犬的年龄、品种、绝育状态、繁殖情况以及遗传因素等多种因素的影响。随着犬作为伴侣动物的常态化,犬饲养年限越来越长,犬乳腺肿瘤的发病率在逐年升高,严重威胁犬的健康。犬乳腺肿瘤无论从临床发病特点、组织病理学分型还是乳腺超声、CT诊断上都与人类乳腺癌具有极高的相似性,可以作为人类乳腺癌研究的完美模型。因此,寻求安全而又有效的抗肿瘤药物无论对人类还是犬都是十分必要和迫切的。二甲双胍作为一种口服降糖药,主要用于Ⅱ型糖尿病的治疗,对大量临床案例的统计分析发现二甲双胍在降低糖尿病患者血糖的同时,可以显着降低2型糖尿病患者罹患肿瘤的风险和死亡率,对肿瘤起到一定的预防和治疗作用。本研究以犬转移乳腺肿瘤细胞系CHMm和原发肿瘤细胞系CHMp为模型,进行二甲双胍对犬乳腺肿瘤增殖抑制实验的研究,为二甲双胍用于犬乳腺瘤的研究和治疗提供一定的实验基础和理论依据,主要研究内容及结果如下:1.通过CCK-8法和平板克隆形成实验,检测不同浓度二甲双胍对犬乳腺肿瘤细胞增殖活性和克隆形成能力的影响。结果表明,二甲双胍可显着抑制犬乳腺肿瘤细胞CHMm和CHMp的增殖活性和克隆形成能力,并呈现一定的浓度和时间依赖性,根据对CHMm和CHMp细胞IC50的比较发现:CHMm对二甲双胍的敏感性更高。2.通过Annexin-FITC和PI染色法,检测二甲双胍诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡情况,并通过western blot法检测凋亡关键蛋白的表达。研究证实,随着二甲双胍作用浓度的升高,可诱导犬乳腺肿瘤细胞CHMm发生细胞凋亡,并伴有凋亡核心蛋白caspase-3和PARP的活化切割片段的增加。在CHMp未观察到诱导凋亡的发生,核心蛋白的活化片段量没有发生显着改变。3.通过PI染色和流式细胞仪,检测二甲双胍对犬乳腺肿瘤细胞周期的影响,并通过western blot法检测周期相关蛋白的变化情况。结果发现,二甲双胍可将CHMm和CHMp细胞周期阻滞在G0/G1期,并能上调p21、p27和下调Cyclin D1、CDK4等G0/G1期关键蛋白的表达。4.通过western blot法检测二甲双胍对犬乳腺肿瘤细胞内AMPK/m TOR和PI3K/Akt/m TOR信号通路上关键蛋白的表达,结果发现二甲双胍可显着激活CHMm细胞中的AMPK蛋白,并抑制PI3K、Akt及mTOR的表达。而在CHMp,经二甲双胍处理后,未观察到AMPK的显着性激活,但观察到了PI3K、Akt及m TOR等相关蛋白的抑制现象。结论:本实验验证了二甲双胍对犬乳腺肿瘤的增殖抑制作用,并且此抑制作用可能以激活AMPK和抑制PI3K/Akt/m TOR信号分子为作用靶点通过诱导细胞凋亡和G0/G1期细胞阻滞来实现。这些发现表明二甲双胍有望成为犬乳腺肿瘤的潜在治疗药物,进而为人类乳腺癌的攻克提供一个完美的实验模型和扎实的基础。(本文来源于《东北农业大学》期刊2017-06-01）
周彬[7]（2017）在《耐5-FU犬乳腺肿瘤细胞系的建立及其生物学特性的研究》一文中研究指出研究目的:乳腺肿瘤是母犬易发的肿瘤之一,且多数肿瘤是恶性的,仅通过外科手术切除的方法不能完全治愈此类疾病。为了提高患病动物的生存时间和生活质量,需要在手术切除后进行辅助化疗。不幸的是,随着化疗进程的深入,肿瘤细胞会对化疗药物产生耐药性。为了研究犬乳腺肿瘤化疗抵抗的机制,我们利用体外培养的方法获得耐5-FU犬乳腺肿瘤细胞系,并通过研究该细胞系的生长特性,耐药性与肿瘤干细胞之间的联系,Notch1通路在肿瘤耐药性中发挥的作用等对耐药细胞进行研究。研究方法:1、利用浓度梯度法建立体外耐5-FU犬乳腺肿瘤细胞系。从细胞形态、交叉耐药性、生长特性、耐药蛋白表达、体内试验等多方面分析耐药肿瘤细胞的特性。2、利用原代培养的方法,从实验动物体获得化疗后的原代乳腺肿瘤细胞。利用差速贴壁法和有限稀释克隆法对分离的原代肿瘤细胞进行分离鉴定,并对纯化后的细胞进行耐药性评估。3、通过对耐药犬乳腺肿瘤细胞干细胞特性和转移特性的分析,探究耐药性与肿瘤干细胞性之间的联系。4、分析Notch1通路在耐药细胞中的激活状况,及特异性抑制剂能否反转细胞耐药性及其反转机制。研究结果:1、通过8个月的体外培养,我们成功获得了耐5-FU犬乳腺肿瘤细胞系,并将其命名为CMT7364/5-FU。与亲代敏感细胞相比,耐药细胞更倾向于成簇生长,并出现多核现象;细胞的群体倍增时间更长;细胞对除5-FU外的四种化疗药物产生交叉耐药性;ABCB1和ABCG2蛋白表达上调;荷瘤小鼠同样对5-FU产生抗性。2、原代细胞经纯化后,利用染色体核型分析,确认纯化的细胞来源于犬。该细胞群体倍增时间类似于耐药细胞,且对5-FU的耐药性比CMT7364/5-FU更强。3、通过流式细胞分析,耐药细胞中CD24/CD44+细胞亚群比例大于亲代敏感细胞;耐药细胞通过悬浮培养形成的微球体数量也多于亲代敏感细胞;耐药细胞贴壁培养克隆形成能力也更强;干细胞通路相关蛋白均出现表达上调;104个耐药细胞即可在小鼠皮肤成瘤。通过划痕修复试验及transwell小室分析,耐药细胞的迁移和侵袭能力更强;同时与转移相关的蛋白MMP-2及vimentin均出现过表达现象;动物实验表明耐药细胞具有更强的向远端肺脏转移的能力。4、Notch1通路在耐药细胞出现上调;特异性抑制剂DAPT可以一定程度干扰细胞的自我更新和转移,从而反转耐药性。结论:浓度梯度递增法可以成功用于体外建立耐药犬乳腺肿瘤细胞系,与亲代细胞相比其生物学特性差异明显;具备更强的干细胞特性;出现Notch1通路的过度激活。靶向抑制Notch1通路可以一定程度逆转细胞的耐药性,从而为临床治疗提供新的依据。(本文来源于《中国农业大学》期刊2017-05-01）
孙思超,孙东东,王英雪,常宏建,刘云[8]（2016）在《顺铂诱导体外犬乳腺肿瘤细胞凋亡影响》一文中研究指出为研究顺铂诱导体外犬乳腺肿瘤细胞CHMp凋亡影响,本试验采用不同浓度的顺铂以不同作用时间处理细胞,用MTT法检测细胞活性,通过透射电镜观察CHMp细胞形态学变化,用流式细胞仪研究CHMp细胞凋亡和周期。结果显示,CHMp细胞生长受浓度和时间双重依赖,浓度越高,时间越长,抑制越明显,在电镜下观察细胞出现明显的凋亡形态,同时5μmol/L顺铂作用24 h后细胞阻滞于G1/S期,比例高达75.12%。结果表明,顺铂能抑制CHMp增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞G1/S期。(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2016年09期）
孙冬冬,李彦庆,孙思超,梁伟峰,刘佳[9]（2016）在《PTEN基因过表达对犬乳腺肿瘤细胞系CHMm增殖及Bcl-2、Bax基因调控的影响》一文中研究指出为探讨过表达的第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)对犬乳腺肿瘤细胞系(CHMm)增殖及Bcl-2、Bax基因的影响,本研究构建了PTEN表达质粒pc DNA-PTEN,采用脂质体转染法将其导入CHMm细胞系,采用western blot检测PTEN蛋白表达情况,CCK-8法检测CHMm细胞增殖情况,荧光定量PCR检测Bcl-2和Bax的基因表达情况。结果显示,转染PTEN的CHMm细胞组的PTEN蛋白表达水平显着高于空载体组和未转染组;转染PTEN细胞组的细胞增殖显着低于空载体组和未转染组(p<0.05);转染PTEN的CHMm细胞组Bcl-2的m RNA表达水平显着低于空载体组和未转染组(p<0.05);转染PTEN的CHMm细胞组Bax的m RNA表达水平显着高于空载体组和未转染组(p<0.05)。本实验将PTEN基因导入犬乳腺肿瘤细胞系(CHMm),抑制犬乳腺肿瘤细胞增殖,为寻找乳腺肿瘤基因治疗新方法提供依据。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2016年07期）
孙思超[10]（2016）在《顺铂诱导体外犬乳腺肿瘤细胞凋亡及相关凋亡因子研究》一文中研究指出犬乳腺肿瘤是目前兽医临床上常见的疾病之一,对该疾病的防治一直是宠物医生密切关注的问题。由于犬乳腺肿瘤的发生发展与人类乳腺肿瘤具有很多相似之处,又可将其作为人乳腺肿瘤的优良模型,来研究抗癌药物的开发。顺铂是治疗多种肿瘤的一线化疗药物,它的广谱抗癌作用一直受到人们的好评,临床上用于卵巢癌、前列腺癌、肺癌及成骨肉瘤等多种实力肿瘤均有很好的疗效。而顺铂在犬乳腺肿瘤方面的研究国内外文献较少,且顺铂诱导犬乳腺肿瘤的抗癌机制也未见报道。本实验探究顺铂诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡及其对相关凋亡因子影响,对今后犬乳腺肿瘤的临床治疗与方案制定有着重要意义,也为人乳腺肿瘤的研究提供理论依据。实验采用体外培养犬乳腺肿瘤细胞系CHMp(原发灶细胞)和CHMm(转移灶细胞)作为模型,经不同浓度顺铂2.5μmol/L,5.0μmol/L和10μmol/L处理后培养12h,24h和48h,用倒置显微镜观察和记录细胞增殖与生长形态,通过MTT法检测顺铂对CHMm/CHMp的IC50值与细胞毒性实验,同时用流式细胞仪检测分析CHMm/CHMp的凋亡变化与周期阻滞影响,最后采用荧光定量PCR和Western Blot分别检测CHMm/CHMp中凋亡相关因子AKT,,Bcl-2,NFκB的基因表达和蛋白表达。将实验数据导入SPSS19.0软件中统计分析得到实验结果。结果表明:(1)MTT法检测CHMm与CHMp的IC50值分别为4.86μmol/L和5.58μmol/L。且同一时间点对照组和药物处理组比较差异极显着(p<0.01),而同一浓度下各实验组组间差异也极显着(p<0.01),随着顺铂浓度的增加,作用时间的延长,两细胞系的抑制率逐渐上升,存在浓度-时间双重依赖性。(2)显微镜下观察CHMm与CHMp对照组细胞贴壁生长,轮廓清晰,界限明显;顺铂作用剂量为5μmol/L,肿瘤细胞状态实验组与对照组相比胞体偏大,胞质较透明,贴壁能力强;顺铂作用剂量为10μmol/L时,实验组细胞明显变圆,胞质浑浊,折光性差,在高倍镜下观察可看到黑色颗粒物增多。(3)流式细胞仪检测细胞凋亡显示,各实验组差异显着(p<0.05),随顺铂浓度增加,CHMm/CHMp细胞团均上移,凋亡细胞逐渐增加,细胞的抑制率随之增加。检测细胞周期显示,CHMm/CHMp随着顺铂浓度的增加,G1期比率差异不显着(p>0.05),S期比率显着上升(P<0.01),G2期比率逐渐下降(p<0.05)。表明顺铂同样能够抑制肿瘤细胞进行有丝分裂,阻滞细胞于S期。(4)荧光定量PCR检测凋亡因子基因表达显示,CHMm/CHMp对照组与各实验组差异极显着(p<0.01),同一浓度顺铂作用下,各时间组组间差异显着(p<0.05)。随着作用时间延长,对照组AKT、Nfκb和bcl-2基因表达均呈上升趋势,而实验组中随顺铂浓度增加,Bcl-2和AKT基因表达明显逐渐下降,Nfκb基因表达却显着增高。且CHMm与CHMp中AKT、NFκb和Bcl-2基因表达含量存在差异。(5)Western Blot检测凋亡因子蛋白表达证明,同一作用时间点24h时,Akt和bcl-2的蛋白表达含量随着顺铂浓度的增加而逐渐减少,Nfκb的蛋白含量随之逐渐增加。相同顺铂浓度为5μmol/L时,Akt和bcl-2的蛋白表达量随作用时间的延长而逐渐减少,Nfκb的蛋白含量随之逐渐增加。通过实验得出以下结论:顺铂对犬乳腺肿瘤细胞CHMm/CHMp均有抑制作用,且存在时间-浓度依赖性。CHMm的IC50为4.86μmol/L,CHMp的IC50为5.58μmol/L;显微镜下观察顺铂能够诱导犬乳腺肿瘤细胞CHMm/CHMp细胞凋亡;顺铂对CHMm/CHMp的S期有阻滞作用;CHMm和CHMp细胞内AKT、BCL-2和NFκB基因和蛋白表达都不同,顺铂能下调AKT、Bcl-2基因和蛋白表达,上调NFκB基因和蛋白表达。(本文来源于《东北农业大学》期刊2016-06-01）
犬乳腺肿瘤细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了确定细胞学检查在乳腺肿瘤诊断中具有诊断意义,试验采用细胞学检查和病理组织学检查相结合的方法对临床病例进行了研究。结果表明:细胞学检查结果与病理组织学检查结果相符。说明在犬乳腺肿瘤的诊断中,细胞学检查与病理组织学检查相符,对肿瘤的良恶性诊断具有一定价值,为临床诊断提供了一种新的辅助诊断方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
犬乳腺肿瘤细胞论文参考文献
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