导读:本文包含了细胞凋亡蛋白酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:氧化应激,Caspase3抑制剂,胶质瘤,凋亡
细胞凋亡蛋白酶论文文献综述
刘心睿[1]（2018）在《凋亡蛋白酶依赖的氧化应激在人U251胶质瘤细胞中的作用和机制研究》一文中研究指出研究背景和意义胶质瘤是临床最常见的中枢神经系统恶性肿瘤,瘤细胞的无限生长和侵袭浸润是其最大的生物学特征,也是患者预后不良的最主要原因。活性氧(Reactive oxygen species,ROS)是机体正常氧代谢的副产物。ROS和氧化应激对胶质瘤的关系极其复杂,尚未完全阐明。观察胶质瘤细胞中不同ROS及氧化应激水平下胶质瘤增殖、周期、凋亡的生物学效应,对于阐明胶质瘤的发病机制和寻找新的临床治疗策略具有重要意义。利用基因芯片技术和生物信息学分析方法,从全转录水平或全DNA层面了解胶质瘤细胞的基因表达情况,筛选与胶质瘤疾病过程有关的基因表达集,为研究胶质瘤的发病机制、开发靶向性药物等提供了思路和线索。目的我们拟观察胶质瘤细胞中不同ROS及氧化应激水平对胶质瘤增殖、周期、凋亡等生物学效应的影响及机制,探索胶质瘤氧化应激水平和线粒体Caspase途径是否能作为胶质瘤治疗的潜在靶点。其次,我们分析了不同氧化应激状态下胶质瘤细胞全转录组水平的基因表达数据,从整体观察基因表达变化,筛选Caspsae 3抑制剂影响的基因集,为寻找靶向治疗胶质瘤的方法和药物等提供新的研究方向和策略。方法首先,体外培养人胶质瘤U251细胞系,用H2O2处理后,分别采用流式细胞术检测细胞内ROS水平、细胞周期和凋亡,四唑盐比色(MTT)法检测细胞增殖、免疫印迹法(Western blot,WB)检测细胞内凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase 3、Cleaved-PARP的表达;接下来,对H2O2处理的胶质瘤U251细胞系加适当浓度的Caspase 3抑制剂干预,分别采用流式细胞术检测细胞内ROS水平、细胞周期和凋亡、MTT法检测细胞增殖、WB检测凋亡相关蛋白的表达。利用NOISeq软件包筛选Caspase 3抑制剂在氧化应激状态下引起的胶质瘤细胞差异表达基因,对差异基因进行基因本体论(Gene Ontology,GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析和药物富集分析。使用String在线工具对得到的差异表达基因进行蛋白与蛋白相互作用(Protein-protein interaction,PPI)关系预测,利用Cytoscape软件进行PPI网络图构建,使用cytoscape软件中的MCODE插件提取PPI网络中的子网络模块,对其进行功能分析;之后,利用webgestalt工具分别预测差异表达基因与微小RNA(micro RNA,mi RNA)和转录调控因子间的调控关系,并利用Cytoscape软件进行调控网络构建。结果(1)用超氧化物银离子探针(Dihydroethidium,DHE)测定终浓度100μM、300μM、500μM的H2O2处理后的胶质瘤细胞内(O2.-)水平分别为(214.33±27.14)%、(589.52±35.17)%和(643.28±31.54)%,均显着高于对照组(P<0.05);且随着H2O2浓度的增加,细胞中(O2.-)水平逐渐升高(P<0.05)。(2)用终浓度为100μM、300μM、500μM的H2O2处理后的胶质瘤U251细胞存活率为分别为(82.57±5.34)%、(23.38±6.27)%和(18.21±3.11)%,H2O2浓度越高,胶质瘤细胞存活率越低(P<0.05);(3)100μM组、300μM、500μM组胶质瘤细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率分别为(6.21±0.88)%和(10.71±0.42)%,(24.19±2.46)%和(19.59±2.33)%,(31.78±3.07)%和(37.18±4.20)%。H2O2浓度越高,细胞凋亡率越高(P<0.05)。其中100μM组胶质瘤细胞的凋亡率与对照组无显着差异(P>0.05),300μM、500μM组胶质瘤细胞的凋亡率显着高于对照组(P<0.05)。(4)100μM组G1期、G2期和S期细胞分别占(28.79±3.64)%、(28.51±3.17)%和(46.67±2.16)%;300μM组G1期、G2期和S期细胞分别占(21.35±1.37)%、(32.48±1.62)%和(50.69±3.73)%;对照组G1期、G2期和S期细胞分别占(41.54±4.78)%、(18.51±2.35)%和(43.82±2.42)%。随着H2O2浓度升高,G1期细胞较对照组显着减少(P<0.05),G2期的细胞显着增多(P<0.05),H2O2能引起胶质瘤细胞G2期阻滞。(5)H2O2处理的胶质瘤细胞内Caspase-3前体蛋白表达显着降低,Cleaved-PARP蛋白表达显着升高(P<0.05);且升高或降低程度与H2O2浓度存在剂量依赖关系。(6)H2O2+Caspase 3抑制剂组细胞的早期凋亡和晚期凋亡率分别为(4.95±0.89)%和(8.32±1.22)%,显着低于仅用300μM H2O2处理的细胞[(23.94±2.34)%和(17.55±2.78)%]和未加任何干预的对照组细胞[(6.71±0.69)%和(11.35±1.32)%](P<0.05)。H2O2组细胞凋亡率最高,其次为对照组,H2O2+Caspase 3抑制剂组细胞凋亡率最低,Caspase 3抑制剂能显着降低H2O2诱导的胶质瘤细胞凋亡。(7)H2O2+Caspase 3抑制剂组G1期、G2期和S期细胞分别占36.05%、16.91%和47.03%;H2O2组G1期、G2期和S期细胞分别占19.88%、33.64%和46.48%;对照组G1期、G2期和S期细胞分别占41.15%、14.19%和44.66%;各组S期细胞无显着差异(P>0.05),H2O2+Caspase 3抑制剂组G1期细胞较H2O2组显着升高(P<0.05),而G2期细胞较H2O2组显着降低(P<0.05),Caspase 3抑制剂解除了H2O2引起的G2期阻滞。(8)H2O2+Caspase 3抑制剂组细胞内(O2.-)水平为(488.76±25.73)%,显着低于H2O2组的(728.17±33.65)%(P<0.05),高于对照组的(100.16±8.24)%(P<0.05)。Caspase 3抑制剂能降低H2O2处理的胶质瘤细胞内ROS水平。(9)共筛选出105个在氧化应激状态下Caspase 3抑制剂引起的与胶质瘤细胞增殖相关的差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)和127个其他特异性DEGs。(10)GO分析显示与增殖相关的DEGs功能注释主要富集到细胞组分的形态发生(cellular component morphogenesis),参与的基因有FIS1、ATOH1、CCK、EZR、SSBP1和CTNNB1;受体介导的信号传导途径(Intracellular receptor-mediated signaling pathway),参与的基因有DNAJA1、CALR和CTNNB1;线粒体形态发生(Mitochondrion morphogenesis),参与的基因有FIS1和SSBP1;细胞大分子复合物亚基组织途径(Cellular macromolecular complex subunit organization),参与的基因有KIF2B、TUBB2A、SNRNP200、SNRPB、CALR和细胞器裂变(Organelle fission),参与的基因有KIF2B、FIS1、TUBB2A和DCTN3。;KEGG通路富集结果显示18个通路符合阈值要求并被显着富集,主要涉及Rho A活性调节(Regulation of Rho A activity)和Rho A信号通路(Rho A signaling pathway)、RAC1活性调节(Regulation of RAC1 activity)和RAC1信号通路(RAC1 signaling pathway)、RNA代谢(Metabolism of RNA)、蛋白质代谢(Metabolismof proteins)、雄激素受体(Androgen Receptor)、糖尿病途径(Diabetes pathways)、流感病毒感染(Influenza Infection)、细胞蛋白的凋亡裂解(Apoptotic cleavage of cellular proteins)、m RNA剪接-小通道通路(m RNA Splicing-Minor Pathway)、胰岛素合成与加工(Insulin Synthesis and Processing)、整合素(Alpha6 Beta4 Integrin)、细胞凋亡执行阶段(Apoptotic execution phase)等通路等;筛选出mi R-185、mi R-7和mi R-485-5P共3个mi RNA,与6个靶基因共同构成8个调控关系对;筛选出ETS2、NFKAPPAB、NFKB、AP1、CREL、OCT1、STAT5A、PAX3等共20个转录因子(Transcription factor,TF)与8个靶基因共同构成38个调控关系对。(11)其他127个特异性DEGs功能注释主要富集到蛋白质结合的调控(Positive regulation of protein binding),参与基因有CTHRC1、HERPUD1等;RNA聚合酶II启动子的转录调控(Transcription from RNA polymerase II promoter),参与基因有ZBTB32、NRARP等、骨骼肌细胞分化(Skeletal muscle cell differentiation),参与基因有NUPR1、LEMD2和ANKRD1;肺泡发育(Lung saccule development),参与基因有ASXL1和NKX2-1;磷脂代谢过程(Phospholipid metabolic process),参与基因有TAZ、KX2-1和LA2G4B。KEGG通路富集结果显示4个通路符合阈值要求并被显着富集,主要有糖胺聚糖的生物合成-硫酸软骨素/硫酸皮肤素途径(Glycosaminoglycan biosynthesis-chondroitin sulfate/dermatan sulfate)、糖胺聚糖的生物合成-硫酸肝素/肝素途径(Glycosaminoglycan biosynthesis-heparan sulfate/heparin)、氧化磷酸化反应(Oxidative phosphorylation)和金黄色葡萄球菌感染(Staphylococcus aureus infection)。构建的PPI网络包括82个节点和209个互作关系对;1个子网络模块包括19个节点和50个互作关系对。筛选出包括mi R-192、mi R-196、mi R-215、LET-7、mi R-299等在内共17个mi RNA,与26个靶基因构成105个调控关系对;STAT5、CEBPB、PAX6、PPAR、IRF、PPARG、CHX10、USF、CREBP1、E4BP4、HLF、PAX4共12个TF,与26个靶基因构成51个调控关系对。结论氧化应激通过线粒体-Caspase依赖性途径抑制人U251胶质瘤细胞的增殖、阻滞细胞周期进展并诱导细胞凋亡;Caspase 3抑制剂引起的氧化应激状态下胶质瘤细胞中等众多基因表达谱发生变化,特别是RPL5、PSMC5、RABGAp-TBC1D25、C1s等可能在胶质瘤的发病中起到关键作用,研究结果为未来研究胶质瘤的靶向治疗提供新的方向和策略。(本文来源于《吉林大学》期刊2018-05-01）
郭海,宋爽,才秀莲[2]（2017）在《X连锁凋亡抑制蛋白和线粒体第二激活因子在锰诱导大鼠生精细胞凋亡蛋白酶表达中的调节作用》一文中研究指出目的:研究氯化锰导致的大鼠生精细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)及凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)表达中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和线粒体第二激活因子(Smac)的调节机制,探讨锰导致的雄性不育机制。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、低剂量(15 mg/kg MnCl_2)和高剂量(30 mg/kg MnCl_2)组,腹腔注射MnCl_2 4周和6周,免疫组织化学检测生精细胞caspase-9、Apaf-1、XIAP和Smac表达。结果:与对照组相比较,各组生精细胞caspase-9、Apaf-1和Smac表达均显着升高,XIAP表达降低。同时间的高剂量组与低剂量组比较,同剂量的6周组与4周组比较,生精细胞caspase-9、Apaf-1和Smac表达均显着升高,XIAP表达降低。各组caspase-9与Apaf-1表达呈正相关,XIAP与Smac表达呈负相关。结论:锰可促进生精细胞caspase-9、Apaf-1和Smac表达,抑制XIAP表达,导致细胞凋亡,产生雄性生殖毒性效应。(本文来源于《解剖学杂志》期刊2017年05期）
郭海,宋爽,王国秀,才秀莲[3]（2017）在《染锰大鼠生精细胞凋亡中caspase-3 mRNA、凋亡蛋白酶活化因子-1及多聚ADP核糖聚合酶的表达变化》一文中研究指出目的:研究染锰诱导的大鼠生精细胞凋亡过程中,天冬氨酸特异性半胱氨酸酶-3(caspase-3)mRNA和凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)的表达及其关系,探讨它们在生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠,设立空白对照组、低剂量(15 mg/kg MnCl_2)和高剂量(30 mg/kg MnCl_2)组。实验组分别染锰4周和6周,空白对照组给予等容生理盐水,给药途径均为腹腔注射,TUNEL法检测生精细胞凋亡,原位杂交法和免疫组织化学法检测生精细胞caspase-3 mRNA、Apaf-1和PARP的表达。结果:与空白对照组比较,各染锰组生精细胞凋亡指数(AI)和caspase-3mRNA阳性细胞率均显着升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显着降低。染锰剂量相同,6周与4周组比较,以及染锰时间相同,高剂量组与低剂量组比较,生精细胞AI和caspase-3 mRNA阳性细胞率均显着升高,Apaf-1和PARP阳性细胞率均显着降低。各组大鼠生精细胞AI与caspase-3 mRNA阳性细胞率呈正相关,与Apaf-1和PARP阳性细胞率呈负相关。结论:锰可影响大鼠生精细胞caspase-3 mRNA表达,促进Apaf-1和PARP分解,导致生精细胞凋亡,产生生殖毒性效应。(本文来源于《解剖学杂志》期刊2017年03期）
黄顺德,朱浩图,李展宇[4]（2016）在《强噪声对大鼠耳蜗螺旋神经节细胞凋亡及凋亡蛋白酶的作用》一文中研究指出目的探讨强噪声是否能诱导大鼠的耳蜗螺旋神经节细胞(SGC)的凋亡,噪声对于凋亡蛋白酶的诱发作用以及SGC的凋亡与凋亡蛋白酶半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)信号转导之间的关系。方法选用健康雄性白色大鼠40只,随机分成4组,每组10只,将实验组动物暴露于120 d B SPL 4 k Hz窄带噪声中4 h后,分别测试在噪声刺激停止后1 d、4 d、14 d及对照组大鼠的听性脑干反应(ABR)。通过透射电镜下观察以及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL),检测SGC的凋亡,免疫组化法检测Caspase-3的表达水平。结果本实验的噪声条件,可以引起大鼠暂时或永久性的听阈位移,通过透射电镜的观察,发现实验组中SGC出现了凋亡细胞的特征性相关改变。实验组SGC中的TUNEL染色有明显增强,Caspase-3的表达明显增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论强噪声能够诱导发生SGC的凋亡,并且对Caspase-3有诱发作用,SGC凋亡与Caspase-3的激活有着密切的相关性。(本文来源于《广东医学》期刊2016年08期）
黄河银,刘砚星,徐鸥,王玉杏,路虹[5]（2013）在《细胞色素C、凋亡蛋白酶3和凋亡蛋白酶8在大鼠双侧耳蜗切除后听皮层的表达》一文中研究指出目的探索细胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)、凋亡蛋白酶3(cysteinyl aspartate specificproteinase 3,Caspase 3)和凋亡蛋白酶8(cysteinylaspartate specific proteinase 8,Caspase 8)在大鼠听力剥夺后听皮层的表达。方法取SD大鼠48只,将其随机分为2、4、6、8周组和4个对照组,每组各6只。实验组动物行双侧耳蜗损毁术,取每组大鼠的双侧听皮层(n=12)用于免疫组织化学方法检测Cyt-C、Caspase 3和Caspase 8的表达。结果成功开展双侧耳蜗损毁术,Cyt-C免疫组化结果随时间呈上升趋势,方差分析显示实验组各组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。Caspase 3和Caspase 8的免疫组化结果显示,虽然表达量随时间呈上升趋势,但只在2～6周组间、2～8周组间、4～6周组间、4～8周组间、6～8周组间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论听力剥夺导致听皮层神经元细胞的凋亡,凋亡速度在4周以前较慢,6周以后较快。(本文来源于《中国耳鼻咽喉头颈外科》期刊2013年08期）
李敏[6]（2013）在《斜纹夜蛾Sl-1细胞凋亡蛋白酶Caspase-1的原核表达纯化及活性分析》一文中研究指出细胞凋亡是细胞程序性死亡的过程,它是维持细胞和组织动态平衡的中心,并参与很多生理和病理性过程。虽然细胞凋亡早在40多年前就被发现,但由于其在机体生长、稳态以及防御中的作用,目前仍是研究的热门领域。目前人们对哺乳动物、线虫和果蝇等细胞凋亡途径的研究已经取得了很大的进展,但仍有很多问题有待研究。细胞凋亡事件在进化中具有高度保守性,但哺乳动物细胞凋亡途径与昆虫细胞凋亡途径之间还是存在一些差异。研究表明,Caspase在细胞凋亡的过程中发挥着重要作用。起始Caspase接受到凋亡信号后,会在自身的长的N端原域进行切割,导致下游效应Caspase的活化。活化的效应Caspase会切割细胞内的蛋白,导致细胞凋亡。昆虫与哺乳动物中caspase的活化与调控是不同的,其具体的作用机制有待进一步研究。斜纹夜蛾(Spodoptera litura) Sl-1细胞中的Caspase-1是类似于哺乳动物细胞Caspase-3的效应Caspase,其具体的作用机制尚不清楚。我们拟通过构建Sl-Caspase-1的原核表达克隆,表达并纯化出Sl-Caspase-1蛋白,并对其功能进行初步的研究,为研究鳞翅目昆虫Caspase-1的功能提供借鉴,并为进一步研究Caspase-1的作用机制打下基础。本研究成功构建了Sl-Caspase-1的原核表达克隆,表达纯化出Sl-Caspase-1融合蛋白,并对其活性进行了检测。成功的制备出Sl-Caspase-1的多克隆抗体,并对Sl-Caspase-1在S1-1细胞中的定位进行了分析。首先根据已知Sl-Caspase-1基因序列设计特异性引物,PCR扩增出Sl-Caspase-1基因的开放阅读框,并将该基因连接到PET-28a载体上,挑选阳性克隆并进行验证,成功得到了用于原核表达的重组质粒,将重组质粒转化大肠杆菌BL21, IPTG诱导表达,得到含有融合蛋白的蛋白粗提液。用His抗体进行Western-blot分析验证融合蛋白表达后,用Ni柱进行亲和层析,得到纯化后的融合蛋白。用Caspase-3的特异性底物Ac-DEVD-AMC对纯化得到的Sl-Caspase-1的活性进行检测。将获得的纯化的融合蛋白进行SDS-PAGE电泳,并切胶免疫小鼠四次后成功获得了Sl-Caspase-1的多克隆抗体。最后利用制备得到的多克隆抗体进行免疫荧光分析,成功的观察到Sl-Caspase-1在S1-1细胞中的定位。本研究成功构建了Sl-Caspase-1的原核表达克隆,并对Sl-Caspase-1蛋白的功能进行了初步的研究。这对研究与其相互作用的其他蛋白和进一步研究S1-1细胞凋亡的机制打下了基础。进而可为研究其他鳞翅目昆虫的细胞凋亡提供借鉴。另外,细胞凋亡在昆虫抵抗病毒感染过程中发挥着重要作用,因此研究S1-1细胞凋亡机制也为研究其他农业害虫的抗药性机理奠定了一定的基础。(本文来源于《华中师范大学》期刊2013-05-01）
吴川,王秀丽,王倩,刘彦涛,董蕊[7]（2011）在《糖尿病神经病理性痛大鼠脊髓背角凋亡细胞与凋亡蛋白酶caspase-3的表达变化》一文中研究指出目的探讨糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠脊髓背角凋亡细胞及与之相联系的凋亡蛋白酶caspase-3的表达变化。方法健康雄性SD大鼠60只,随机分为DNP组和正常对照组,每组30例。DNP组:腹腔注射链脲霉素(STZ)50 mg/kg制备成DNP模型;正常对照组给予等容量0.9%氯化钠溶液。分别给予注射STZ或0.9%氯化钠溶液后3、5、7周时取10只大鼠,采集静脉血样,测定空腹血糖浓度,然后测定机械缩足阈值,取2组大鼠L1-5脊髓组织,采用原位末端标记法(TUNEL)检测2组大鼠脊髓背角神经细胞凋亡的变化,采用免疫组织化学染色法观察凋亡蛋白酶caspase-3的表达变化。结果与正常对照组比较,DNP组血糖升高,机械缩足阈值降低(P<0.05),凋亡细胞与凋亡蛋白酶caspase-3的表达逐渐增加(P<0.05)。结论 DNP大鼠脊髓背角凋亡细胞与凋亡蛋白酶caspase-3的表达上调。(本文来源于《河北医药》期刊2011年22期）
安里菲热·安尼瓦尔,羽鸟麻奈美,森田明典,椎名勇,中田健也[8]（2011）在《Ridaifen-G诱导细胞死亡不依赖于细胞凋亡蛋白酶(英文)》一文中研究指出通过对Ridaifen-G(RID-G)诱导造血细胞U937、Raji、THP-1和IM-9死亡是否需要Z-VAD-fmk(一种细胞凋亡蛋白酶抑制剂)的研究,发现RID-G以细胞凋亡蛋白酶非依存性的方式诱导细胞死亡,并伴随有线粒体功能紊乱。Z-VAD-fmk对U937细胞的死亡没有影响,但抑制etoposide诱导的细胞凋亡;DNA片段化结果表明,RID-G可破坏Raji和THP-1细胞的DNA,经RID-G处理后的U937细胞的DNA条带没有经etoposide处理的清晰。此外,Z-VAD-fmk对U937、THP-1和Raji细胞DNA的片段化程度有不同的影响,抑制细胞死亡。这些结果表明,RID-G诱导的非典型细胞死亡不依赖于caspase,且伴随有线粒体功能紊乱。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2011年06期）
赵彦坡[9]（2011）在《美金刚对大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡蛋白酶3，丙二醛的影响》一文中研究指出背景：缺血性脑卒中是神经系统的常见多发病,随着溶栓、介入等诊疗技术的开展,缺血再灌注所带来继发性损伤凋亡逐渐得到重视,抑制缺血半暗区神经细胞迟发性损伤成为治疗的目标,非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate, NMDA)受体拮抗剂美金刚,已频繁用于帕金森病、老年痴呆、痉挛性疾病及病毒感染性疾病的治疗,且无严重的毒副作用。该药对于缺血的研究,集中于抑制兴奋性氨基酸及钙离子内流作用机制上,阻止缺血再灌注所继发的迟发性损伤机制仍需进一步探究。抑制细胞凋亡蛋白酶3(天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3) (cystein-containing aspartate-specific protease-3, caspase3)反应活性阻止细胞凋亡,以及抗膜脂质过氧化保护膜脂质稳定性是又一可能的作用机制。本研究通过建立大鼠脑缺血再灌注模型,观察美金刚对大鼠脑皮质神经元Caspase-3表达和丙二醛(malonaldehyde, MDA)生成含量的影响,了解NMDA受体拮抗剂的神经保护作用机制。目的：观察非竞争性NMDA受体拮抗剂对大鼠脑缺血再灌注后迟发性脑损伤的作用,探讨NMDA受体拮抗剂对缺血再灌注神经元细胞的作用机制,为临床应用提供理论和实验依据。方法：雄性Wister大鼠135只,随机分为假手术组、缺血模型组及美金刚干预组,采用线栓法(thread occlusion of the middle cerebral artery),建立大鼠大脑中动脉闭塞(Middle cerebral artery occlusion, MCAO)局灶性脑缺血再灌注模型,用美金刚溶液灌胃,HE (hematoxylin-eosin,伊红)染色观察大鼠脑神经元形态变化,免疫组化染色检测神经元Caspase-3的表达变化,分光光度计检测其Caspase-3酶活力单位、MDA含量变化。结果：假手术组、缺血模型组及美金刚干预组的caspase-3阳性区平均积分光密度,caspase-3酶活力单位,MDA生成含量差异有统计学意义。美金刚干预组Caspase-3酶活力单位表达及MDA生成含量较模型组明显降低,而高于假手术组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：非竞争性NMDA受体拮抗剂美金刚可下调大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3表达及MDA生成含量,阻止迟发性脑损伤而发挥神经保护作用。(本文来源于《郑州大学》期刊2011-05-01）
曾宪东,宋建华,梁昌镛,陈新文[10]（2010）在《昆虫细胞凋亡蛋白酶caspase-1的表达纯化及活性分析》一文中研究指出依赖于天冬氨酸的半胱氨酸蛋白酶(caspase)在细胞凋亡途径中起着不可替代的关键酶作用.本研究采用原核表达载体pET32a表达和纯化了家蚕细胞Bm-caspase-1及粉纹夜蛾细胞Tni-caspase-1蛋白酶,序列分析表明二者具有相同的内部剪切识别序列,且酶活性位点均为QACQ↓G.纯化获得大量可溶性蛋白酶,Western-blotting分析表明Bm-caspase-1在大肠杆菌中已自我剪切活化,而Tni-caspase-1没有自我剪切,无酶活性;活性Bm-caspase-1蛋白酶对caspase-3特异性底物Ac-DEVD-AMC的降解酶活性可被Z-VAD-FMK呈剂量依赖性抑制,半抑制浓度约20nmol/L.此外,活性Bm-caspase-1蛋白酶能够转活化无活性的Tni-caspase-1蛋白酶原.结果揭示了昆虫细胞caspase同样具有与哺乳动物细胞caspase相似的底物降解活性并可相互剪切激活,为进一步研究昆虫细胞凋亡的分子途径奠定了基础.(本文来源于《武汉大学学报(理学版)》期刊2010年01期）
细胞凋亡蛋白酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:研究氯化锰导致的大鼠生精细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)及凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)表达中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和线粒体第二激活因子(Smac)的调节机制,探讨锰导致的雄性不育机制。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、低剂量(15 mg/kg MnCl_2)和高剂量(30 mg/kg MnCl_2)组,腹腔注射MnCl_2 4周和6周,免疫组织化学检测生精细胞caspase-9、Apaf-1、XIAP和Smac表达。结果:与对照组相比较,各组生精细胞caspase-9、Apaf-1和Smac表达均显着升高,XIAP表达降低。同时间的高剂量组与低剂量组比较,同剂量的6周组与4周组比较,生精细胞caspase-9、Apaf-1和Smac表达均显着升高,XIAP表达降低。各组caspase-9与Apaf-1表达呈正相关,XIAP与Smac表达呈负相关。结论:锰可促进生精细胞caspase-9、Apaf-1和Smac表达,抑制XIAP表达,导致细胞凋亡,产生雄性生殖毒性效应。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞凋亡蛋白酶论文参考文献
[1].刘心睿.凋亡蛋白酶依赖的氧化应激在人U251胶质瘤细胞中的作用和机制研究[D].吉林大学.2018
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标签：氧化应激; Caspase3抑制剂; 胶质瘤; 凋亡;