导读:本文包含了转移酶基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:药西瓜,葫芦素,糖基转移酶,基因克隆
转移酶基因论文文献综述
陈蒙,杨铭慧,刘月,LEE,Sanghyeob,刘海峰[1](2019)在《药西瓜UDP-糖基转移酶基因的克隆与表达分析》一文中研究指出为明确药西瓜UDP-糖基转移酶催化葫芦素形成葫芦素配糖体的表达规律,以药西瓜品种"WM9"叶片为供试材料,采用RT-PCR技术克隆药西瓜UDP-糖基转移酶基因,并对编码蛋白进行分析。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR),以ACTIN为内参基因,分析获得的2个药西瓜UDP-糖基转移酶基因在不同组织器官中的表达规律。结果表明:克隆得到2个UDP-糖基转移酶基因,分别为1 546 bp和1 559 bp的cDNA全长序列,命名为UDP-E1和UDP-E2。对扩增获得的序列进行生物学信息分析,确定UDP-E1基因的完整开放阅读框(ORF)为1 314 bp,可编码氨基酸437个,理论分子量为49.02 ku,等电点为5.99,属稳定蛋白,Genbank登录号MK576125。UDP-E2基因的ORF为846 bp,可编码氨基酸281个,理论分子量为32.78 ku,等电点为5.23,属不稳定蛋白,Genbank登录号MK576126。这2个基因属于糖基转移酶超家族。UDP-E1和UDP-E2均与香瓜、黄瓜的UDP-糖基转移酶基因序列相似性最高。在各组织器官中,UDP-糖基转移酶均有表达,且在茎中表达水平最低,叶中表达水平最高。(本文来源于《中国农业大学学报》期刊2019年11期)
李长春,宁青,戴余军,王立华,李国元[2](2019)在《拟环纹豹蛛谷胱甘肽S-转移酶基因的克隆及表达分析》一文中研究指出为研究拟环纹豹蛛谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因碱基序列及其对镉胁迫的响应,本研究在转录组测序的基础上,通过RT-PCR克隆了拟环纹豹蛛的GST基因(PpGST),用生物信息学方法对其序列特征进行分析,并采用荧光定量PCR检测了镉胁迫下PpGST基因的相对表达量。结果表明,克隆获得的PpGST(GenBank登录号为KY454857)基因编码区长654 bp,可编码1个217个氨基酸的蛋白质,该蛋白质理论分子量为24 900,等电点为5.98,具有GST蛋白家族保守的N端结构域和C端结构域,与温室拟肥腹蛛(Parasteatoda tepidariorum)GST蛋白Delta型有较高的相似性(65%)。荧光定量PCR分析结果显示,镉胁迫下PpGST基因的表达量显着增加(P<0.05),暗示其在抵御镉胁迫中可能发挥了重要作用。(本文来源于《江苏农业学报》期刊2019年05期)
张慧,袁远宏,唐莲,谭艳芳,李双杰[3](2019)在《1例肉碱棕榈酰转移酶1A缺乏症的临床特点及CPT1A基因突变分析》一文中研究指出目的:分析1例肉碱棕榈酰转移酶1A(CPT1A)缺乏症患儿的临床和基因突变特点,提高对该病的认识。方法:收集该患儿的临床资料,血液串联质谱分析酰基肉碱谱。抽取患儿及其父母的外周静脉血3 m L,提取DNA,通过测序技术,对CPT1A基因所有外显子及相邻内含子(侧翼区域)序列进行直接测序,检测突变。结果:患儿临床表现为腹泻、发热、抽搐,随后出现意识障碍,发育倒退。血生化示转氨酶、心肌酶升高,低血糖,血氨增高,血液相串联质谱仪分析示游离肉碱(C0) 193. 61(参考值10. 00~90. 00),棕榈酰肉碱(C16) 0. 06(0. 20~3. 00),棕榈烯酰肉碱(C16:1) 0. 01(0. 02~0. 30),十八碳酰肉碱(C18) 0. 07(0. 10~1. 50),十八碳烯酰肉碱(C18:1) 0. 04 (0. 20~2. 80),十八碳二烯酰肉碱(C18:2) 0. 02 (0. 10~1. 10),C0/(C16+C18)为1595. 54(6. 50~100)。基因检测示CPT1A基因存在c. 281+1G>A(Intron3)剪接突变与15-18号外显子杂合缺失,患儿母亲携带CPT1A基因c. 281+1G>A(Intron3)剪接突变,患儿父亲携带CPT1A基因15-18号外显子杂合缺失。父母亲均为杂合突变,临床表型正常,为该突变的携带者。结论:CPT1A缺乏症临床表现为低酮性低血糖、肝损伤伴肝大、高血氨、凝血功能异常、惊厥、昏迷等,其临床表现多样且缺乏特异性,易误诊。血酰基肉碱谱分析、基因检查有助于早期明确诊断。(本文来源于《儿科药学杂志》期刊2019年11期)
葛文雪,陈润,白嘉诚,狄玉昌,张雪莲[4](2019)在《结核分枝杆菌硫醇乙酰基转移酶基因敲除株的构建及其生物学特性分析》一文中研究指出为探索硫醇乙酰基转移酶(mycothiol acetyltransferase,MshD)在结核分枝杆菌中的生物学特性,本实验利用噬菌体为载体的同源重组技术,构建结核分枝杆菌mshD基因敲除株、mshD基因回补株,用实时定量聚合酶链反应(real time-quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)对所构建的菌株进行验证。分别收集H37Ra野生株、mshD基因敲除株、mshD基因回补株对数生长期菌液各5 mL,离心收集菌体并培养,以观察菌落形态、生物膜形成及生长曲线测定;用5 mmol/L H_2O_2、0.05%SDS,50℃热激及低氧条件下分别处理基因敲出菌株和野生菌株,将菌液进行10倍梯度稀释,培养4~6周后检测抗胁迫能力并计算存活率。结果显示,与野生株H37Ra相比,mshD基因敲除株菌落褶皱减少且菌落偏小,生长趋势较为缓慢;生物膜形成所需时间增长且褶皱明显减少;抗逆能力下降,存活率略低于野生株和回补株。揭示了mshD基因对结核分枝杆菌的生长具有重要作用,为进一步揭示该基因的功能和作用机制奠定了基础。(本文来源于《微生物与感染》期刊2019年05期)
陈劲松,林富,朱双根,范少平,马建国[5](2019)在《谷胱甘肽S-转移酶P-1基因遗传变异对接受替莫唑胺联合放疗的脑胶质瘤患者预后的影响》一文中研究指出目的:替莫唑胺联合放疗在新诊断脑胶质瘤的辅助治疗中具有重要治疗地位,谷胱甘肽S-转移酶P-1(Glutathione S-Transferase P-1,GSTP1)在胶质瘤细胞外源性物质解毒过程中具有重要作用,可能影响替莫唑胺联合放疗对肿瘤细胞的杀伤力。本研究旨在探讨GSTP1基因遗传变异对接受替莫唑胺联合放疗的脑胶质瘤患者预后的影响。方法:本研究纳入175例手术切除后接受替莫唑胺联合放疗辅助治疗的脑胶质瘤患者。收集患者外周血进行GSTP1基因多态性位点基因分型。多态性位点的基因型和其他变量的相关性通过卡方检验或非参检验方法进行分析。收集部分患者接受放化疗前的新鲜外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)标本提取RNA定量分析GSTP1 mRNA表达。并分析基因型和预后的关联。结果:Ile105Val变异在研究人群中的突变频率为:AA型119例(68. 00%),AG型51例(29. 14%),GG型5例(2. 86%),最小等位基因频率为0. 17,该位点基因型分布频率符合Hardy-Weinberg平衡(P=0. 868)。随后以显性遗传方式将AG型和GG型患者合并进行分析。预后分析结果表明:AG/GG基因型和AA基因型患者的中位无进展生存期分别为4. 4和6. 9个月,差异有统计学意义(P=0. 005)。在总生存期(overall survival,OS)方面,AG/GG型和AA基因型患者的中位OS分别为11. 0和15. 3个月,差异有统计学意义(P <0. 001)。针对OS的多变量的Cox分析结果表明,AG/GG基因型对OS具有独立的影响意义(OR=1. 68,P=0. 011)。78例PBMC标本的GSTP1基因mRNA表达实验结果表明,Ile105Val变异AG/GG基因型患者GSTP1的mRNA表达水平显着高于AA基因型患者[(4. 01±0. 472) vs (2. 76±0. 624),P <0. 001]。结论:GSTP1基因Ile105Val变异是影响接受替莫唑胺联合放疗辅助治疗的胶质瘤患者预后的生物标志物。(本文来源于《肿瘤预防与治疗》期刊2019年10期)
陈蒙,LEE,Sanghyeob,刘海峰[6](2019)在《药西瓜UDP–糖基转移酶基因的克隆与表达分析》一文中研究指出为明确药西瓜UDP–糖基转移酶基因在葫芦素形成葫芦素配糖体过程中的表达规律,对各组织器官中该基因表达量进行分析,旨在为阐明葫芦素E(CuE)生物合成过程中参与糖苷化的相关基因表达规律提供理论依据,对葫芦素E的开发利用具有重要意义。药西瓜品种[Citrullus colocynthis(L.)Shrad]‘WM9’来自韩国世宗大学植物研究所生物工程系,种植于延边大学农学院实验基地。在药西瓜生长过程中采摘完整、翠绿和无病虫害的叶片,立即置于液氮冷冻,﹣80℃保存,作为供试材料,采用RT-PCR技术克隆药西瓜UDP–糖基转移酶基因,并对编码蛋白进行理化性质分析。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR),以ACTIN(Accession No.AB073011)为内参基因,分析获得的2个药西瓜UDP–糖基转移酶基因在不同组织器官中的表达规律。克隆得到2个UDP–糖基转移酶基因(分别为1 546和1 559 bp)的cDNA全长序列,命名为UDP-E1和UDP-E2。对扩增获得的序列进行生物信息学分析,确定UDP-E1基因的完整开放阅读框(ORF)为1 314 bp,编码437个氨基酸,蛋白质理论分子量为49.02 kD,等电点为5.99,属稳定蛋白,GenBank登录号MK576125。UDP-E2基因的ORF为846 bp,编码281个氨基酸,蛋白质理论分子量为32.78 kD,等电点为5.23,属不稳定蛋白,GenBank登录号MK576126。这2个基因属于糖基转移酶超家族。UDP-E1和UDP-E2均与甜瓜、黄瓜的UDP–糖基转移酶基因序列相似性最高。药西瓜2个催化葫芦素生物合成葫芦素糖苷的关键酶——UDP–糖基转移酶基因,均在茎中表达水平最低,叶中最高,推测药西瓜UDP-E1、UDP-E2与CuE的合成有关且起到了调控作用。幼苗中CuB、CuE和CuE-Glu这3种葫芦素均存在,但与药西瓜UDP-E1与UDP-E2的含量呈负相关,推测这2个基因在幼苗期可能对葫芦素的合成起到拮抗作用或并未参与葫芦素的合成。而在果实中,仅鉴定出CuE-Glu,这类葫芦素决定药西瓜的苦味,且UDP-E1与UDP-E2这2个基因在果实中含量均占优势,果实中CuE-Glu的含量是幼苗中的47倍,恰恰CuE-Glu是药西瓜中具有应用价值的物质,因此,药西瓜UDP-E1与UDP-E2对CuE-Glu的合成具有调控意义。(本文来源于《中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集》期刊2019-10-21)
张丹峰,杨宏伟,王曼[7](2019)在《乳腺癌组织中甲基化转移酶基因表达的临床意义》一文中研究指出目的探讨乳腺癌组织中甲基化转移酶(DNMT)表达情况在乳腺癌诊治中的意义。方法应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测53例乳腺癌组织及20例对应乳腺癌旁组织中DNMT基因(DNMT1、DNMT2、DNMT3a、DNMT3b)mRNA的表达水平,并分析其表达与乳腺癌临床病理特征之间关系。结果癌组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的相对表达水平均显着高于对应癌旁组织(P均<0.05),且DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的表达水平与淋巴转移与否存在显着相关性(P均<0.05),而与乳腺癌其他临床病理特征参数无明显关系(P均>0.05)。结论 DNMT1、DNMT3a、DNMT3在乳腺癌组织中高表达,可能表达与乳腺癌的发展有关;不同DNMT基因的检测可以为了解乳腺癌的发病机制提供参考依据。(本文来源于《现代中西医结合杂志》期刊2019年30期)
狄少康,尹青岗,夏亚迎,庞永珍[8](2019)在《大豆类黄酮糖基转移酶基因UGT73C19的功能研究》一文中研究指出【背景】类黄酮是大豆中积累的一类重要的植物次生代谢产物,参与大豆的生长、发育和抗逆等诸多生理活动。由UDP-糖基转移酶(UGT)催化的糖基化修饰是类黄酮生物合成的关键步骤。【目的】通过系统研究大豆UGT73C19编码重组酶的体外酶活特性和体内特性,完善大豆黄酮类化合物合成和积累的机制,为大豆品质的遗传改良提供基因资源和理论基础。【方法】通过高效液相色谱(HPLC)的方法检测大豆核心种质资源叶片中类黄酮的种类和含量,通过qRT-PCR的方法检测了UGT的表达水平。以大豆Williams 82叶片cDNA为模板,克隆得到UGT73C19的编码区序列。使用MEGA5和DNAMAN软件进行多重序列比对,并构建进化树。通过原核表达系统获得UGT73C19的重组蛋白,分析UGT73C19重组蛋白对各种类黄酮苷元的糖基转移活性,并通过高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)对产物进行鉴定,确定重组蛋白的糖基化位点。利用qRT-PCR技术对UGT73C19在大豆不同组织的表达水平进行分析。构建植物过量表达载体,通过花序浸染法转化拟南芥,获得UGT73C19表达量高的纯合株系,检测转基因株系叶片和种子中类黄酮的种类和含量。【结果】通过HPLC分析大豆核心种质资源叶片类黄酮成分,发现不同品种中类黄酮的成分和含量存在明显差异。根据类黄酮成分的不同,将大豆核心种质分为12种不同的类型。大豆核心种质资源叶片中总黄酮的含量与UGT73C19的表达水平呈正相关关系。克隆得到UGT73C19的编码区序列,全长1 482 bp,编码493个氨基酸,UGT73C19蛋白在C-端有一个保守的PSPG结构域。体外酶活分析表明,重组的UGT73C19蛋白对6种类黄酮苷元(山奈酚、槲皮素、杨梅素、芹黄素、大豆苷元和染料木素)都具有糖基转移活性,其中对槲皮素的催化效率最高;糖基化位点分别位于类黄酮的5位和7位羟基上,重组UGT73C19蛋白的糖基化底物和位点具有多样性。过量表达UGT73C19的拟南芥叶片和种子中的类黄酮总量明显升高,其中叶片中总黄酮含量提高49%—70%,种子中总黄酮的含量提高34%—37%;尤其是种子中槲皮素3-O鼠李糖的含量显着增加。【结论】UGT73C19蛋白是催化合成大豆中多个类黄酮糖苷的关键糖基转移酶,过量表达UGT73C19可以提高转基因植物中黄酮醇糖苷和类黄酮的含量。(本文来源于《中国农业科学》期刊2019年20期)
杨钰,孙振,薛松磊,胡序明,崔恒宓[9](2019)在《DNA甲基转移酶N6AMT1基因敲降和过表达及其功能初探》一文中研究指出6mA甲基化是DNA甲基化修饰的一种重要方式,受甲基转移酶N6AMT1基因的调控。为研究N6AMT1基因的功能,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建N6AMT1基因敲降的HEK293细胞系,同时在Hela细胞系中过表达N6AMT1基因,检测N6AMT1基因表达变化对细胞增殖和迁移能力的影响。结果表明:正常肾上皮组织细胞系HEK293中N6AMT1基因表达水平显着高于癌细胞;正常肝细胞系LO2中N6AMT1基因表达水平显着高于肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721;N6AMT1基因敲降显着增强HEK293细胞的增殖及迁移能力;而Hela细胞过表达N6AMT1基因后,细胞的增殖和迁移均显着受到抑制。这一研究提示N6AMT1基因介导的6mA甲基化可能对细胞增殖和迁移有重要影响。(本文来源于《扬州大学学报(农业与生命科学版)》期刊2019年05期)
任国鹏,葛丽萍,孙超超,刘宝玲,李润植[10](2019)在《续随子二酰甘油酰基转移酶2基因(ElDGAT2)克隆与功能分析》一文中研究指出本文从续随子发育种子中分离编码二酰甘油酰基转移酶2的cDNA克隆(ElDGAT2),采用生物信息学工具解析ElDGAT2酶蛋白的理化性质、高级结构、亚细胞定位及系统发育等特性。利用qRT-PCR研究该基因在续随子不同器官组织的表达谱。构建ElDGAT2的组成型植物表达载体(pCAMBIA1303-ElDGAT2),通过农杆菌介导烟草瞬时表达鉴定ElDGAT2基因的功能。结果显示,续随子ElDGAT2 cDNA全长1 939 bp, ORF为984 bp,编码327个氨基酸。ElDGAT2蛋白定位于内质网上,二级结构主要结构元件为α-螺旋(37.00%)和无规则卷曲(34.25%)。DGAT2蛋白系统发育树分析揭示,续随子ElDGAT2与同科植物蓖麻、油桐、麻疯树的DGAT2蛋白亲缘关系较近。基因表达分析表明, ElDGAT2基因在续随子不同器官中均有表达,而且在种子中的表达量显着高于其他器官。在种子发育中期(花后30 d)即油脂快速合成积累时期的表达量最高, ElDGAT2表达量约为叶片的12.83倍。与野生型和空载体转化烟叶相比, ElDGAT2瞬时表达的烟叶组织总油脂含量提高1.59%,饱和脂肪酸减少,油酸等不饱和脂肪酸增加。研究表明, ElDGAT2编码一个具有催化活性的DGAT2酶蛋白,异源表达可提高宿主组织总油脂和不饱和脂肪酸的合成积累,显示ElDGAT2对油酸等不饱和脂肪酸有底物偏好性。(本文来源于《植物生理学报》期刊2019年08期)
转移酶基因论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
为研究拟环纹豹蛛谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因碱基序列及其对镉胁迫的响应,本研究在转录组测序的基础上,通过RT-PCR克隆了拟环纹豹蛛的GST基因(PpGST),用生物信息学方法对其序列特征进行分析,并采用荧光定量PCR检测了镉胁迫下PpGST基因的相对表达量。结果表明,克隆获得的PpGST(GenBank登录号为KY454857)基因编码区长654 bp,可编码1个217个氨基酸的蛋白质,该蛋白质理论分子量为24 900,等电点为5.98,具有GST蛋白家族保守的N端结构域和C端结构域,与温室拟肥腹蛛(Parasteatoda tepidariorum)GST蛋白Delta型有较高的相似性(65%)。荧光定量PCR分析结果显示,镉胁迫下PpGST基因的表达量显着增加(P<0.05),暗示其在抵御镉胁迫中可能发挥了重要作用。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转移酶基因论文参考文献
[1].陈蒙,杨铭慧,刘月,LEE,Sanghyeob,刘海峰.药西瓜UDP-糖基转移酶基因的克隆与表达分析[J].中国农业大学学报.2019
[2].李长春,宁青,戴余军,王立华,李国元.拟环纹豹蛛谷胱甘肽S-转移酶基因的克隆及表达分析[J].江苏农业学报.2019
[3].张慧,袁远宏,唐莲,谭艳芳,李双杰.1例肉碱棕榈酰转移酶1A缺乏症的临床特点及CPT1A基因突变分析[J].儿科药学杂志.2019
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[6].陈蒙,LEE,Sanghyeob,刘海峰.药西瓜UDP–糖基转移酶基因的克隆与表达分析[C].中国园艺学会2019年学术年会暨成立90周年纪念大会论文摘要集.2019
[7].张丹峰,杨宏伟,王曼.乳腺癌组织中甲基化转移酶基因表达的临床意义[J].现代中西医结合杂志.2019
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[10].任国鹏,葛丽萍,孙超超,刘宝玲,李润植.续随子二酰甘油酰基转移酶2基因(ElDGAT2)克隆与功能分析[J].植物生理学报.2019