导读:本文包含了乙二醛氧化酶基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:葡萄,遗传转化,乙二醛氧化酶基因,茎顶端分生组织
乙二醛氧化酶基因论文文献综述
关心[1]（2010）在《中国野生华东葡萄新基因乙二醛氧化酶基因遗传转化部分葡萄的研究》一文中研究指出乙二醛氧化酶(Glyoxal oxidase, VpGLOX)基因,为课题组前期通过mRNA差异显示技术及RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术,从中国野生葡萄高抗白粉病的华东葡萄‘白河-35-1’(Vitis pseudoreticulata W.T. Wang‘Baihe-35-1’)中克隆到与抗白粉病相关的新基因。本研究以中国野生华东葡萄2个后代——高感白粉病‘6-12-2’,高抗白粉病‘6-12-6’,叶片为试材,通过农杆菌介导的真空渗透法将VpGLOX进行瞬时表达,对该基因进行功能分析;同时以‘6-12-2’,‘6-12-4’,‘6-12-6’,‘商南-2’(Vitis pseudoreticulata W.T.‘Shangnan-2’),‘湖南-1’(Vitis pseudoreticulata W.T.‘Hunan-1’),‘佳利酿’(Vitis vinifera cv.‘Carignane’),‘白河-35-1’为材料,运用并比较了多种遗传转化方法,对转基因植株进行检测。取得的主要结果如下:1.以培养6 w的‘6-12-2’,‘6-12-6’葡萄试管苗叶片为材料进行转化,通过GUS (β-glucuronidase)染色检测瞬时转化效率,结果表明,GUS报告基因在顶端第3-6片叶都可以表达,不同叶片部位造成的差异不显着,而第3-4片叶离体培养生长状态最佳。对上述4种野生型及转基因型叶片分别接种白粉菌,于3,5,7,12 d记录其菌丝发生过程,其中,12 d时可以明显观察到两个转基因型叶片内菌丝生长受到抑制。应用real-time PCR技术检测VpGLOX的表达,‘6-12-2’表达量只在转基因型叶片中增加,而且很快回复到原来水平;‘6-12-6’转基因型叶片中出现了第二个表达高峰。2.以‘6-12-2’为材料,研究TDZ,NAA不同组合对叶片、叶柄不定芽再生的影响。叶片在1/2MS + 1.0 mg·L-1 TDZ + 0.15 mg·L-1 NAA培养基上再生出不定芽,再生率为1.11%;叶柄在1/2MS + 2.0 mg·L-1 TDZ + 0.15 mg·L-1 NAA培养基上再生出不定芽,再生率为1.67%。生根成苗培养基为1/2MS + 0.15 mg·L-1 IBA + 0.02 mg·L-1 NAA。3.以‘湖南-1’(♀),‘商南-2’(♂)的花蕾为材料,研究葡萄胚状体再生途径并进行遗传转化。‘商南-2’在NN69 + 1.0 mg·L-1 2,4-D + 2.0 mg·L-1 6-BA培养基上诱导愈伤量最高,为8.06%,但之后转接到不同浓度组合的6-BA,NOA,IAA诱导愈伤培养基上,均没有胚状体形成;对其进行遗传转化研究,检测其绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein, GFP)瞬时表达,结果表明,在花药单核靠边期进行原位转化,及转移到分芽繁殖培养基上1 w进行转化,‘湖南-1’,‘商南-2’转化率均可达到93.33%以上。4.以‘6-12-2’,‘6-12-6’为材料,分别对其花序、果实进行原位转化,研究该方法应用于葡萄的转基因效率。提取其种子、果皮及实生苗叶片DNA,进行PCR检测,结果表明没有得到转基因植株。5.以‘6-12-2’,‘6-12-4’,‘6-12-6’,‘商南-2’,‘佳利酿’,‘白河-35-1’为材料,研究微茎尖及带芽茎段快繁成苗途径。最适条件有,C2D4B液体培养基上80 rpm震荡,光照培养,随后转移到添加GA 0.5 mg·L-1的C2D4B固体培养基上,遗传转化前不需经过黄化培养;离体节间丛生芽生长的最适培养基为1/2MS + 2.0 mg·L-1 TDZ + 0.5 mg·L-1 NAA。6.对遗传转化体系进行优化。农杆菌浓度OD600为0.4,侵染10 min,共培养3 d有利于获得最高遗传转化效率。7.经潮霉素筛选,对抗性植株经PCR和PCR-Southern blot检测,表明目的基因已整合到植株基因组中,共获得‘6-12-2’45个转基因株系;‘6-12-4’17个转基因株系;‘6-12-6’10个转基因株系;‘白河-35-1’3个转基因株系;‘佳利酿’4个转基因株系。8.对转基因植株‘6-12-2’1株,‘白河-35-1’1株,进行炼苗、移栽。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2010-05-01）
支玉玺[2]（2009）在《中国野生葡萄乙二醛氧化酶基因转化葡萄的研究》一文中研究指出乙二醛氧化酶是参与植物抗病反应的一类酶,主要参与植物系统抗性的建立、促进植保素的合成。生产上栽培最为广泛的欧洲葡萄几乎均不抗病,而中国野生葡萄有着丰富的抗病基因资源。本研究旨在利用基因工程技术,将携带有中国野生葡萄乙二醛氧化酶基因的植物表达载体pWR306转入感病葡萄欧亚种“佳利酿”、华东葡萄“广西-2”的基因组中,为获得抗病性明显提高的转基因植株提供理论与技术依据。在以“佳利酿”、“广西-2”的花药为外植体进行体细胞胚诱导与成苗研究的基础上,初步建立了葡萄胚状体再生体系;并对次生胚的诱导、畸形苗的转化进行了初步研究。通过农杆菌介导法,将携带有中国野生葡萄乙二醛氧化酶基因的植物表达载体pWR306转入“广西-2”胚状体及胚性愈伤、合子胚胚性愈伤、“佳利酿”与“广西-2”的带芽茎段。取得的主要结果如下:1.以“佳利酿”、“广西-2”带芽茎段为材料,研究了不同培养基对外植体生长的影响,获得了适宜“佳利酿”、“广西-2”单芽茎段生长成苗的初代培养基WPM+IBA 0.15mg/L +琼脂6 g/L + AC 0.5 g/L;继代培养基1/2MS + IBA 0.15 mg/L +活性炭(AC)0.5 g/L +蔗糖30 g/L +琼脂6 g/L。2.培养基ER + 6-BA 1.0 mg/L + 2,4-D 1.0 mg/L + CH 1g/L + PVP 1 g/L +蔗糖30 g/L +琼脂6 g/L有利于“佳利酿”花药胚性愈伤组织诱导;所使用的培养基中,B5 + 6-BA 4.0 mg/L + 2,4-D 0.7 mg/L + CH 1 g/L + PVP 1 g/L +蔗糖30 g/L +琼脂6 g/L对“广西-2”花药的胚性愈伤组织诱导较为有利。3.“广西-2”的胚性愈伤为在B5 + 6-BA 4.0 mg/L + CH 1 g/L + PVP 1 g/L +蔗糖15 g/L的培养基上能形成胚状体;适宜胚状体萌发的培养基是不含生长调节剂的1/2B5 +蔗糖15 g/L液体培养基;而在液体的B5 + 6-BA 4.0 mg /L + 2,4-D 0.7 mg/L + CH 1 g/L + PVP 1 g/L +蔗糖15 g/L培养基中,胚状体能有效增殖;在MS + 6-BA 1.5 mg/L + IBA 0.2mg/L + CH 1 g/L + PVP 1 g/L +蔗糖15 g/L +琼脂6 g/L的培养基上畸形植株能被诱导形成正常苗;胚状体萌发成苗的适宜的培养基是WPM + IBA 0.15 mg/L + AC 0.5 g/L +蔗糖15 g/L +琼脂6 g/L;在对“广西-2”次生体胚诱导时,B5 + 6-BA 1.0 mg/L + 2,4-D 0.5 mg/L + CH 1 g/L + PVP 1 g/L +蔗糖30 g/L +琼脂6 g/L的培养基较为有效。4.以“广西-2”单芽茎段和胚状体为试材,潮霉素(Hyg)抗性浓度筛选结果表明,葡萄单芽茎段对Hyg致死浓度为12 mg/L,胚状体对Hyg致死浓度为9 mg/L。5.通过农杆菌介导法转化,已获得具有潮霉素抗性的“广西-2”胚性细胞团约23块,“佳利酿”抗性植株2个。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2009-05-01）
乙二醛氧化酶基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
乙二醛氧化酶是参与植物抗病反应的一类酶,主要参与植物系统抗性的建立、促进植保素的合成。生产上栽培最为广泛的欧洲葡萄几乎均不抗病,而中国野生葡萄有着丰富的抗病基因资源。本研究旨在利用基因工程技术,将携带有中国野生葡萄乙二醛氧化酶基因的植物表达载体pWR306转入感病葡萄欧亚种“佳利酿”、华东葡萄“广西-2”的基因组中,为获得抗病性明显提高的转基因植株提供理论与技术依据。在以“佳利酿”、“广西-2”的花药为外植体进行体细胞胚诱导与成苗研究的基础上,初步建立了葡萄胚状体再生体系;并对次生胚的诱导、畸形苗的转化进行了初步研究。通过农杆菌介导法,将携带有中国野生葡萄乙二醛氧化酶基因的植物表达载体pWR306转入“广西-2”胚状体及胚性愈伤、合子胚胚性愈伤、“佳利酿”与“广西-2”的带芽茎段。取得的主要结果如下:1.以“佳利酿”、“广西-2”带芽茎段为材料,研究了不同培养基对外植体生长的影响,获得了适宜“佳利酿”、“广西-2”单芽茎段生长成苗的初代培养基WPM+IBA 0.15mg/L +琼脂6 g/L + AC 0.5 g/L;继代培养基1/2MS + IBA 0.15 mg/L +活性炭(AC)0.5 g/L +蔗糖30 g/L +琼脂6 g/L。2.培养基ER + 6-BA 1.0 mg/L + 2,4-D 1.0 mg/L + CH 1g/L + PVP 1 g/L +蔗糖30 g/L +琼脂6 g/L有利于“佳利酿”花药胚性愈伤组织诱导;所使用的培养基中,B5 + 6-BA 4.0 mg/L + 2,4-D 0.7 mg/L + CH 1 g/L + PVP 1 g/L +蔗糖30 g/L +琼脂6 g/L对“广西-2”花药的胚性愈伤组织诱导较为有利。3.“广西-2”的胚性愈伤为在B5 + 6-BA 4.0 mg/L + CH 1 g/L + PVP 1 g/L +蔗糖15 g/L的培养基上能形成胚状体;适宜胚状体萌发的培养基是不含生长调节剂的1/2B5 +蔗糖15 g/L液体培养基;而在液体的B5 + 6-BA 4.0 mg /L + 2,4-D 0.7 mg/L + CH 1 g/L + PVP 1 g/L +蔗糖15 g/L培养基中,胚状体能有效增殖;在MS + 6-BA 1.5 mg/L + IBA 0.2mg/L + CH 1 g/L + PVP 1 g/L +蔗糖15 g/L +琼脂6 g/L的培养基上畸形植株能被诱导形成正常苗;胚状体萌发成苗的适宜的培养基是WPM + IBA 0.15 mg/L + AC 0.5 g/L +蔗糖15 g/L +琼脂6 g/L;在对“广西-2”次生体胚诱导时,B5 + 6-BA 1.0 mg/L + 2,4-D 0.5 mg/L + CH 1 g/L + PVP 1 g/L +蔗糖30 g/L +琼脂6 g/L的培养基较为有效。4.以“广西-2”单芽茎段和胚状体为试材,潮霉素(Hyg)抗性浓度筛选结果表明,葡萄单芽茎段对Hyg致死浓度为12 mg/L,胚状体对Hyg致死浓度为9 mg/L。5.通过农杆菌介导法转化,已获得具有潮霉素抗性的“广西-2”胚性细胞团约23块,“佳利酿”抗性植株2个。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
乙二醛氧化酶基因论文参考文献
[1].关心.中国野生华东葡萄新基因乙二醛氧化酶基因遗传转化部分葡萄的研究[D].西北农林科技大学.2010
[2].支玉玺.中国野生葡萄乙二醛氧化酶基因转化葡萄的研究[D].西北农林科技大学.2009