导读:本文包含了核仁素论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:核仁素,多药耐药基因MDR1,胃癌,顺铂耐药
核仁素论文文献综述
柯镜,覃韦宁,张河燕,谷春明,杨方红[1]（2019）在《核仁素调控多药耐药基因MDR1参与胃癌顺铂耐药》一文中研究指出目的:探讨核仁素(Nucleolin,NCL)与胃癌顺铂耐药的关系,为胃癌的耐药机制研究和治疗提供新的基因靶点。方法:通过Western blot检测胃癌细胞SGC7901和胃癌顺铂耐药细胞SGC7901/DDP中NCL的表达量;通过转染siRNA干扰NCL的表达量,MTT实验检测敲低NCL表达对胃癌细胞耐药性的影响;通过转染GFP-NCL真核表达质粒,过表达NCL并检测多药耐药基因MDR1的表达变化。结果:Western blot结果表明NCL在耐药细胞SGC7901/DDP中表达量明显升高;MTT实验结果表明,干扰NCL的表达后,胃癌细胞对顺铂DDP的敏感性明显增高;荧光显微镜显示GFP-NCL定位在核仁区域,Western blot显示,NCL过表达能够明显促进MDR1的表达。结论:核仁素NCL通过调控多药耐药基因MDR1的表达参与胃癌细胞顺铂耐药。(本文来源于《湖北医药学院学报》期刊2019年05期）
方立,黄钦,张银妆,黄芳,苑聪[2]（2019）在《核仁素在血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞表型转化中的作用》一文中研究指出目的:探讨核仁素在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化中的作用。方法:以AngⅡ诱导大鼠VSMCs表型转化为模型,观察AngⅡ对VSMCs表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、钙调理蛋白(calponin)、平滑肌蛋白22α(SM22α)和骨桥蛋白(OPN)mRNA和蛋白表达的影响,并观察VSMCs表型转化时核仁素mRNA和蛋白的时空表达模式;进一步采用核仁素基因转染及RNA干扰技术观察核仁素对上述VSMCs表型转化标志物mRNA和蛋白表达的影响。结果:不同浓度的AngⅡ刺激VSMCs不同时间后,VSMCs收缩表型标志物α-SMA、calponin和SM22α的mRNA和蛋白表达逐渐减少,而合成表型标志物OPN的mRNA和蛋白表达逐渐增加(P<0.05);不同浓度AngⅡ刺激VSMCs不同时间后,随着时间和剂量增加,核仁素的mRNA和蛋白表达在一定程度上逐渐升高;AngⅡ可诱导核仁素从细胞核向细胞浆移位;核仁素过表达可促进Ang II诱导的VSMCs表型转化,核仁素表达下调后,其促进表型转化作用被解除。结论:核仁素具有促进Ang II诱导的VSMCs表型转化的作用,核仁素的表达上调和移位参与Ang II诱导的VSMCs表型转化。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2019年10期）
王莹威,方慧敏,魏明慧,奚玉鑫,王博[3]（2019）在《益气降浊汤对心肌缺血-再灌注损伤大鼠核仁素、caspase-3表达的影响》一文中研究指出目的观察益气降浊汤对心肌缺血-再灌注损伤大鼠核仁素及心肌细胞凋亡蛋白酶caspase-3表达水平的影响。方法 SD大鼠随机分组,即空白对照组、模型组和中药组,模型组和中药组大鼠结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min。中药组予中药治疗14 d后,运用Western blot法测定核仁素蛋白量,免疫组化法测定caspase-3表达的蛋白浓度。结果与空白对照组对比,模型组的核仁素、caspase-3表达的蛋白浓度均上升,差异有统计学意义(P <0.05);在益气降浊汤干预下,中药组核仁素蛋白表达量较模型组、空白对照组均升高,差异有统计学意义(P <0.05);中药组caspase-3蛋白表达量较模型组下降,差异有统计学意义(P <0.05)。结论益气降浊汤可以提高心肌细胞中核仁素的表达,并且降低心肌细胞凋亡蛋白酶caspase-3的表达水平,益气降浊汤可能通过调节核仁素和caspase-3的表达水平从而发挥其保护心肌的作用。(本文来源于《吉林中医药》期刊2019年06期）
朱杰[4]（2019）在《核仁素在兔出血症病毒感染与复制中的作用》一文中研究指出兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)为杯状病毒科的重要成员,对多个品种兔均具有高度致病性和致死性。长期以来,由于缺乏稳定的体外培养细胞系,RHDV生命过程中的许多分子机制尚不清楚。核仁素(Nucleolin,NCL)为宿主重要的多功能蛋白,我们前期的研究发现NCL可能参与RHDV的生命过程。鉴于此,本论文综合利用分子生物学方法和基因工程技术,系统研究了NCL在RHDV感染和复制中的作用及其分子机制。主要研究内容如下:(1)利用抑制剂及siRNA干扰技术,我们发现NCL在RHDV内化过程中发挥关键作用。然后,我们证明了NCL通过其N端结构域与RHDV衣壳蛋白(VP60)的保守区域DVN肽(~(472)Asp-Val-Asn~(474))段特异性的相互作用。随后,利用人工合成的DVN肽阻断VP60与NCL之间的结合后,病毒的内化效率明显降低。此外,本研究还发现NCL与网格蛋白轻链(Clathrin light chain A,CLTA)特异性结合,进而参与网格蛋白依赖的内吞作用。动物实验结果表明,DVN多肽可以保护大部分实验兔免受RHDV感染。上述研究结果表明NCL通过网格蛋白依赖的内吞作用介导RHDV的内化过程。(2)利用RHDV复制子系统和蛋白亲和纯化技术,我们成功分离并鉴定了RHDV复制复合物(RC)的主要成分,发现NCL与病毒蛋白(RdRp、p16和p23)参与病毒RC的形成。随后,我们证明了RdRp与病毒其他非结构蛋白不存在相互作用,而是通过NCL间接结合p16和p23病毒蛋白以及其他宿主蛋白,进而形成RC。同时,我们成功鉴定了RdRp、p16和p23与NCL相互作用的活性区域分别位于RdRp(第448-478位肽段)、p16(~(35)Cys-Ile-Arg-Ala~(38)肽段)和p23(第90-145位肽段)。此外,利用人工合成的RdRp多肽和p16多肽阻断NCL与病毒非结构蛋白的结合,我们发现RHDV的复制水平均显着降低。上述研究结果表明,NCL在RHDV RC的形成过程中发挥关键的桥梁作用。(3)我们发现RHDV感染后宿主NCL的转录水平显着提高,而蛋白水平并无明显变化。同时,我们发现NCL通过与组蛋白去乙酰化酶2(Histone deacetylase 2,HDAC2)结合,发生去乙酰化,随之被泛素化降解。我们还发现HDAC2对RHDV具有抗病毒作用,病毒的复制水平与HDAC2的活性呈负相关性。此外,本研究还发现RHDV利用p16与HDAC2特异性结合降低HDAC2的去乙酰化酶活性。以上结果表明,HDAC2通过诱使NCL去乙酰化,导致其被泛素化途径降解,进而抑制RHDV的复制,而RHDV则利用p16蛋白拮抗HDAC2的抗病毒作用。综上所述,本论文首次发现RHDV通过劫持NCL完成入侵细胞的内化过程。同时,我们还发现NCL在RHDV复制复合体的形成过程中发挥关键的桥梁作用。此外,本研究还发现宿主蛋白HDAC2对RHDV具有抗病毒作用。上述研究成果使我们进一步认识了RHDV感染和复制的分子机制,为该病毒的防控提供了重要的理论基础。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2019-05-01）
董丹丹[5]（2019）在《核仁素抑制小反刍兽疫病毒复制的分子机制》一文中研究指出小反刍兽疫(Peste des Petits Ruminants,PPR)是由小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)引起的一种急性、高度传染性、致命性疾病,主要感染偶蹄小反刍动物。该病主要表现为发热,口腔炎,肺炎,结膜炎,眼鼻粘膜脓性分泌物,严重腹泻,高发病率和死亡率。PPRV属于副黏病毒科麻疹病毒属,其基因组编码6个结构蛋白和2个非结构蛋白。虽然PPRV各蛋白的结构、功能等分子生物学的相关研究已经取得进展,但其分子致病机制和免疫机制仍然缺乏相关信息。而病原与宿主的互作是研究其分子致病机制的途径,目前PPRV该方面的研究比较少。本论文以病毒与宿主蛋白的互作为切入点,研究核仁素在小反刍兽疫病毒复制过程中的作用及其机制。PPRV N蛋白高度保守且免疫原性最高,在病毒复制和细胞趋向性中发挥重要作用。另外,PPRV N蛋白与许多宿主调节因子相互作用。因此,本研究旨在通过免疫共沉淀实验及质谱分析筛选与PPRV N蛋白互作的宿主蛋白。我们成功的筛选到了宿主分子核仁素(NCL),随后通过Co-IP、GST-pull down实验进一步证实了NCL与N蛋白的直接相互作用。激光共聚焦实验结果显示NCL与PPRV N蛋白共定位于细胞核内。通过构建PPRV N蛋白及NCL的截短真核表达质粒并分别进行Co-IP实验,我们成功鉴定了N蛋白与NCL互作的功能域。实验结果证明核仁素的CTD域介导其与N蛋白的相互作用,而N蛋白的NTD域介导其与NCL的相互作用。其次,我们利用慢病毒包装系统成功构建了NCL过表达细胞系,为研究NCL在PPRV生长过程中的作用奠定了基础。当在Vero-SLAM细胞过表达NCL时,PPRV N蛋白的表达量降低、病毒基因组拷贝数减少且病毒滴度降低;而通过siRNA下调内源性NCL后,PPRV N蛋白的表达量增加、PPRV的基因组拷贝数增加且病毒滴度上升。由此可见,NCL在PPRV复制过程中发挥负调控作用。并且,我们通过双荧光素酶实验初步发现NCL促进IFN-β的产生。综上所述,本研究首次发现NCL与PPRV N蛋白相互作用,并且NCL是PPRV复制过程中的一个负调控因子。我们的研究结果表明NCL可能通过调控PPRV的复制而影响PPRV的发病机制,这将有助于我们了解PPRV的感染机制。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2019-05-01）
袁晓玲[6]（2019）在《TLR4和核仁素协同介导呼吸道合胞病毒感染人中枢神经元的作用研究》一文中研究指出目的呼吸道合胞病毒(RSV)感染可以引起儿童急性脑病,导致神经系统症状,但尚未阐明其确切的致病机制。TLR4和核仁素两种受体都可以介导吸道合胞病毒感染中枢神经元。本课题的目的是研究这两种受体在RSV感染中枢神经元中可能的协同作用,为今后临床治疗以及疾病预防提供新的思路。方法实验用TLR4与C23过表达质粒转染293T细胞后,激光共聚焦和免疫共沉淀检测它们的共定位和相互作用情况;然后,以TLR4和C23的过表达质粒转染人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y,简称SY5Y)细胞,再行RSV感染,以未行任何处理的细胞为正常对照组,并分别设立RSV感染组、TLR4过表达组、C23过表达组、TLR4+C23过表达组。在RSV感染2h、4h、24h、48h后分别从每个组收集蛋白以及细胞的上清液。(1)免疫印迹法(Western-blot)检测各组不同时间点p-NF-κB,TLR4及C23蛋白水平的表达变化;(2)实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)在每一组不同时间点检测TLR4和C23 m RNA表达的变化;(3)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞培养液上清中IL-6、IL-8和TNF-α含量的改变情况;(4)流式细胞术检测每组细胞凋亡率。结果(1)激光共聚焦和免疫共沉淀结果显示:用TLR4和C23过表达质粒分别转染293T细胞后,激光共聚焦观察到细胞表面存在共定位;收集细胞用相应抗体孵育处理,进行免疫共沉淀反应后,免疫印迹检测相应蛋白表达的情况显示:用C23蛋白抗体孵育结合后可以下拉到TLR4,且TLR4蛋白抗体孵育结合后也下拉出C23蛋白。提示TLR4和C23存在相互作用。(2)Western Blot结果显示:在正常对照组中,p-NF-κB蛋白的表达量较低,经RSV病毒感染之后,随着感染时间增加蛋白表达量不断增加;与RSV感染组相比,TLR4过表达组、C23过表达组,TLR4+C23过表达组的p-NF-κB表达量均有所增加,其中TLR4过表达组相对于同时间点的C23过表达组增加的更明显,而且TLR4+C23过表达组的p-NF-κB表达量最高,差异从2h开始具有显着统计学意义(P<0.05)。TLR4蛋白在正常对照组中表达量较低,RSV感染后表达上升,2h开始差异有统计学意义(P<0.05);与RSV感染组相比,TLR4过表达组、C23过表达组,TLR4+C23过表达组的表达量均有所增加,同时间点TLR4+C23过表达组中的表达量显着高于单独过表达组。C23蛋白在各组细胞中的变化也检测到类似的结果。(3)Real-time PCR结果显示:正常细胞中TLR4 m RNA含量较低,RSV感染后TLR4 m RNA表达上升,2h开始差异有统计学意义(P<0.05);与RSV感染组相比,TLR4过表达组、C23过表达组中表达量都显着升高;其中,TLR4+C23过表达组的表达量最高,差异从2h开始具有显着统计学意义差异(P<0.01)。C23 m RNA的表达检测到与TLR4 m RNA类似的结果。(4)ELISA结果显示:正常对照组中IL-6、IL-8和TNF-α表达量较低,经RSV感染后,SY5Y细胞培养上清液中的IL-6、IL-8和TNF-α的含量,随着感染时间的延长不断升高,均高于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。TLR4过表达组、C23过表达组中IL-6、IL-8和TNF-α表达量显著升高(P<0.01),且TLR4过表达组升高更明显,其中,TLR4+C23过表达组的表达量最高。差异有显着性(P<0.05)。(5)流式细胞术结果显示:正常组SY5Y细胞凋亡较少;RSV作用24 h后,RSV感染组细胞凋亡增加,凋亡有统计学意义(P<0.01);TLR4过表达组、C23过表达组与RSV组相比,细胞凋亡较为明显升高,与RSV组相比凋亡有统计学意义(P<0.01);TLR4+C23过表达组与RSV组相比细胞凋亡变化更为明显,具有显着统计学意义(P<0.01)。在感染后48 h,各组细胞凋亡检测到与24h相似的表达趋势,但均比24h时增加的更加显着。结论TLR4和C23可以相互作用共同促进RSV活化NF-κB,导致相关信号通路下游细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α表达增高和细胞凋亡,表明两受体在RSV感染SY5Y细胞所致损伤中起到协同作用。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-03-01）
潘若望,李侠,林双翔,曹晓恩,李佩珍[7]（2018）在《藻蓝蛋白对肿瘤细胞增殖及核仁素表达的影响》一文中研究指出目的探讨藻蓝蛋白对肿瘤细胞增殖及核仁素表达的影响。方法体外培养人结肠癌细胞SW480、人喉癌细胞HEP-2、人卵巢癌细胞SKOV-3和人正常肺上皮细胞BEAS-2B,采用MTT法检测藻蓝蛋白对细胞增殖的影响,光学显微镜下观察细胞形态的变化,RT-PCR和Western blot分别检测核仁素的mRNA和蛋白表达。结果藻蓝蛋白对BEAS-2B细胞的增殖没有抑制作用,但呈时间和剂量依赖性地抑制SW480、HEP-2和SKOV-3细胞的增殖。与藻蓝蛋白0μg/ml比较,藻蓝蛋白80μg/ml作用后的SW480、HEP-2和SKOV-3细胞中核仁素mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05),而BEAS-2B细胞中核仁素的变化无统计学差异(P>0.05)。结论藻蓝蛋白可抑制肿瘤细胞增殖,并降低核仁素的表达,提示核仁素可能是藻蓝蛋白抗肿瘤作用的靶点。(本文来源于《江苏医药》期刊2018年06期）
黄斐斐,童中艺,李代强[8]（2017）在《核仁素在肿瘤发生发展中的作用》一文中研究指出核仁素是细胞核中一种高度保守的多功能蛋白,又称为C23,其在核仁中高度表达并参与多种生物学过程。近几年来,核仁素在肿瘤发生发展中的作用引起人们的广泛关注。核仁素通过作用多种致瘤基因(如Akt)间接或直接影响细胞周期促进细胞增殖,稳定抗凋亡因子IL-9和bcl-2等减少肿瘤细胞凋亡,激活自噬相关途径的基因诱发自噬。在肿瘤进展中,核仁素促进血管生成素的分泌活化内皮细胞(endothelial cells,EC),并且激活趋化因子信号通路提高肿瘤细胞的迁移和侵袭。近来适配子、多肽、免疫剂在核仁素治疗研究中取得了进展。核仁素作为独立预后标志物具有重要的价值。进一步探讨核仁素与肿瘤的关系以及肿瘤发生发展的分子机制,为肿瘤的治疗提供潜在的生物学作用靶点。(本文来源于《临床与病理杂志》期刊2017年09期）
吕青兰,孙丽,蒋碧梅,刘艳娟,李媛彬[9]（2017）在《核仁素对小鼠糖尿病性心肌病心肌肥大与纤维化发生的影响》一文中研究指出目的:阐明核仁素在小鼠糖尿病性心肌病中的作用。方法:前期研究中我们采用了心肌特异性过表达核仁素转基因小鼠制备了Ⅱ型糖尿病性心肌病模型;实验分为野生型对照组、转基因对照组、野生型糖尿病组及转基因糖尿病组。采用麦胚凝集素(wheat germ agglutinin,WGA)荧光染色检测小鼠心肌肥大情况;采用Masson叁色染色检测小鼠纤维化情况;采用Power Lab system检测小鼠心肌功能变化。结果:与对照组比较,转基因糖尿病组小鼠的血糖值变化不明显,心肌细胞肥大显着减轻,胶原纤维生成显着减少,血流动力学指标±dp/dtmax、左室舒张末压、左室峰压和心率均有不同程度的改善,且差异具有统计学意义。结论:核仁素可能通过减轻糖尿病性心肌病小鼠心肌细胞肥大及纤维化的发生,从而改善糖尿病性心肌病小鼠的心功能。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2017年07期）
谌崇峰,杨怀才,柳国胜[10]（2017）在《沉默核仁素可诱导大鼠神经干细胞的分化》一文中研究指出目的探讨核仁素(nucleolin)对原代神经干细胞(NSCs)分化的影响及其相关机制。方法构建核仁素siRNA腺病毒表达载体,将经鉴定正确的重组腺病毒质粒转染HEK293A细胞,包装得到具有感染能力的nucleolin-siRNA重组腺病毒。病毒体外感染原代NSCs,采用Western blot检测nucleolin蛋白的表达情况,Nucleolin-siRNA对神经干细胞Nestin、Wnt3、β-catenin蛋白表达的影响;采用免疫细胞化学检测nucleolin-siRNA对神经干细胞分化的影响。结果经酶切和测序鉴定均证实nucleolinsiRNA重组腺病毒载体构建成功,其插入序列正确无误。Western blot检测结果显示,转染nucleolin-siRNA2的细胞nucleolin表达明显受到抑制。siRNA+组NSCs分化为NSE阳性细胞和GFAP阳性细胞的分化率明显比CON组、siRNA-组增加,且差异具有统计学意义(P<0.01)。与阴性对照组相比,siRNA+组Nestin的表达明显减少,Wnt3表达明显增多,β-catenin入核明显增多,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论本研究成功地构建了针对nucleolin基因的siRNA重组腺病毒载体,沉默nucleolin可诱导神经干细胞的分化,其机制可能与Wnt信号转导通路的激活有关。(本文来源于《南方医科大学学报》期刊2017年07期）
核仁素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨核仁素在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化中的作用。方法:以AngⅡ诱导大鼠VSMCs表型转化为模型,观察AngⅡ对VSMCs表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、钙调理蛋白(calponin)、平滑肌蛋白22α(SM22α)和骨桥蛋白(OPN)mRNA和蛋白表达的影响,并观察VSMCs表型转化时核仁素mRNA和蛋白的时空表达模式;进一步采用核仁素基因转染及RNA干扰技术观察核仁素对上述VSMCs表型转化标志物mRNA和蛋白表达的影响。结果:不同浓度的AngⅡ刺激VSMCs不同时间后,VSMCs收缩表型标志物α-SMA、calponin和SM22α的mRNA和蛋白表达逐渐减少,而合成表型标志物OPN的mRNA和蛋白表达逐渐增加(P<0.05);不同浓度AngⅡ刺激VSMCs不同时间后,随着时间和剂量增加,核仁素的mRNA和蛋白表达在一定程度上逐渐升高;AngⅡ可诱导核仁素从细胞核向细胞浆移位;核仁素过表达可促进Ang II诱导的VSMCs表型转化,核仁素表达下调后,其促进表型转化作用被解除。结论:核仁素具有促进Ang II诱导的VSMCs表型转化的作用,核仁素的表达上调和移位参与Ang II诱导的VSMCs表型转化。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
核仁素论文参考文献
[1].柯镜,覃韦宁,张河燕,谷春明,杨方红.核仁素调控多药耐药基因MDR1参与胃癌顺铂耐药[J].湖北医药学院学报.2019
[2].方立,黄钦,张银妆,黄芳,苑聪.核仁素在血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞表型转化中的作用[J].中国病理生理杂志.2019
[3].王莹威,方慧敏,魏明慧,奚玉鑫,王博.益气降浊汤对心肌缺血-再灌注损伤大鼠核仁素、caspase-3表达的影响[J].吉林中医药.2019
[4].朱杰.核仁素在兔出血症病毒感染与复制中的作用[D].中国农业科学院.2019
[5].董丹丹.核仁素抑制小反刍兽疫病毒复制的分子机制[D].中国农业科学院.2019
[6].袁晓玲.TLR4和核仁素协同介导呼吸道合胞病毒感染人中枢神经元的作用研究[D].安徽医科大学.2019
[7].潘若望,李侠,林双翔,曹晓恩,李佩珍.藻蓝蛋白对肿瘤细胞增殖及核仁素表达的影响[J].江苏医药.2018
[8].黄斐斐,童中艺,李代强.核仁素在肿瘤发生发展中的作用[J].临床与病理杂志.2017
[9].吕青兰,孙丽,蒋碧梅,刘艳娟,李媛彬.核仁素对小鼠糖尿病性心肌病心肌肥大与纤维化发生的影响[J].中国病理生理杂志.2017
[10].谌崇峰,杨怀才,柳国胜.沉默核仁素可诱导大鼠神经干细胞的分化[J].南方医科大学学报.2017
标签：核仁素; 多药耐药基因MDR1; 胃癌; 顺铂耐药;