饲细胞论文-李莲军,苗永旺,程美玲,李卫真,卢克焕

饲细胞论文-李莲军,苗永旺,程美玲,李卫真,卢克焕

导读:本文包含了饲细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:精原干细胞,BRL饲养层,温度,体外培养

饲细胞论文文献综述

李莲军,苗永旺,程美玲,李卫真,卢克焕[1](2004)在《温度及BRL饲细胞对体外小鼠精原干细胞的影响》一文中研究指出将6日龄小鼠生精上皮单细胞分别接种于BRL和STO饲养层上,于32℃或37℃培养,研究其对精原干细胞的影响。结果:在培养的第1周内,2个及4个相连的精原细胞合胞体明显增多。培养1周后,多数精原细胞经短暂的存活及分裂活动后退化消失,培养体系中仅保留下少量单个及由细胞间桥相连的双个及4个成串或成团的A型精原细胞。这些细胞在随后的培养过程中,不表现明显的分裂活动,呈碱性磷酸酶阳性反应。根据精原干细胞生物学特性,它们极有可能就是精原干细胞及其子代细胞。不同条件培养体系中的精原干细胞的生物学行为无明显不同,培养60d时均仅有少量精原干细胞存活。结论:BRL细胞能用作饲养层促进精原干细胞存活,但对其更新性增殖没有明显作用;32~37℃对精原干细胞的生物学行为无明显影响,均可用于培养精原干细胞。(本文来源于《云南农业大学学报》期刊2004年05期)

李莲军,卢晟盛,黎宗强,杨小淦,韦英明[2](2004)在《BRL饲细胞及血清浓度对体外小鼠精原干细胞的影响》一文中研究指出分别以大鼠肝细胞(BRL)或小鼠胚胎成纤维细胞(STO)为饲养层,采用含5%、10%及20%胎牛血清的培养液,培养6日龄小鼠生精上皮细胞,研究饲养层和血清浓度对精原干细胞生物学行为的影响。结果表明:在培养的第1周内,2个及4个连成串的精原细胞合胞体数量明显增加,同时大多数精原细胞逐渐退化。培养1周后,大多数精原细胞经短暂的存活及分裂活动后退化消失,培养体系中仅保留下少量单个及由细胞间桥相连的双个及4个成串或成团的A型精原细胞。这些细胞在随后的培养过程中,不表现明显的分裂活动,呈圆球形,表达碱性磷酸酶。不同条件培养体系中的精原细胞及精原干细胞的生物学行为无明显不同,培养20~30d时均有少量精原干细胞存活。这说明BRL细胞能用作饲养层促进精原干细胞存活,但对其更新性增殖没有明显作用;培养液中高浓度胎牛血清对精原干细胞存活和增殖无明显影响,但能促进睾丸体细胞增殖。(本文来源于《广西农业生物科学》期刊2004年03期)

蒋自培[3](2004)在《体外兔胚成纤维饲细胞克隆兔角膜缘干细胞及自体移植的实验研究》一文中研究指出本研究以无增殖能力的兔胚成纤维细胞为饲细胞,研究兔角膜缘干细胞在体外的增殖能力及其生物学鉴定;并以羊膜为载体将培养的自体角膜缘干细胞移植到角膜缘干细胞严重缺损的兔眼角膜上,并观察其效果。为干细胞移植这一具有发展前景的临床治疗方法提供实验依据。本研究分为两部分。 一 体外兔胚成纤维饲细胞克隆免角膜缘干细胞的实验研究 目的 了解经丝裂霉素C处理不同时间后的兔胚成纤维细胞的增殖能力,确定兔胚成纤维细胞为饲细胞的条件;了解兔角膜缘干细胞在经丝裂霉素C处理后的兔胚成纤维细胞作为饲细胞的培养条件下,干细胞克隆团的增殖情况,并探讨饲细胞的作用;对兔胚成纤维饲细胞层上形成克隆的兔角膜缘干细胞进行形态学和生物学活性鉴定。方法 采用常规方法培养兔胚成纤维细胞,同时用10μg/ml丝裂霉素C处理不同时间后,观察不同条件下细胞形态学特征及数量;将兔角膜缘干细胞消化下来,分别接种于经丝裂霉素C处理后的兔胚成纤维细胞,观察各组干细胞克隆形成率(CFE),同时对比有饲细胞层的兔角膜缘干细胞和无饲细胞层的兔角膜缘干细胞克隆形成率(CFE)在原代培养和传一、二、叁代培养中各组的差别;观察兔角膜缘干细胞克隆团光镜特征、电镜超微结构,间接免疫细胞化学染色观察AE1、AE5、PCNA单克隆抗体免疫反应等对克隆的干细胞进行形态学和生物学活性鉴定。结果 兔胚成纤维细胞能长期传代,细胞形态均一,呈梭形,易于分辨。而经10μg/ml丝裂霉素C处理2.5h的兔胚成纤维细胞,形态虽然仍均一,呈梭形,但培养期间细胞数量没有变化;接种于经丝裂霉素C处理的兔胚成纤维的兔角膜缘干细胞3~4天后开始形成单个克隆,克隆团中细胞数为4个以上,5~6天克隆团中细胞数明显增加,10~12天克隆团不断向周围扩张并形成单层。有饲细胞层的兔角膜缘干细胞的平均克安徽医科大学硕士学位论文隆形成率(cFE)在原代培养和传一、二、叁代培养中分别为11.51士l,27%、10.50士1.27%、10.31士103%、9.33士0.%%;而无饲细胞层的兔角膜缘干细胞的平均克隆形成率(CFE)分别为1 0.16士0.68%、6.73士0,69%、2.67士0.95%、0.90士0.19;克隆的细胞呈典型的上皮细胞形态,电镜下可见微绒毛、桥粒、张力丝等典型上皮细胞结构,单克隆抗体AEI、PCNA染色后细胞大多数呈阳性,单克隆抗体AES染色后细胞染色偶见阳性。结论兔胚成纤维细胞经10件g/m1丝裂霉素C处理2.5h后仍能存活,但无增殖能力,适合作为兔角膜缘干细胞的培养的饲细胞;以丝裂霉素C处理的兔胚成纤维细胞为饲细胞有助于维持兔角膜缘干细胞的高增殖性;体外兔胚成纤维细胞为饲养层成功地克隆出兔角膜缘干细胞,克隆的细胞既保持角膜上皮细胞特性,又具有强的增殖潜力。二兔角膜缘干细胞自体移植的实验研究 目的观察以羊膜为载体的兔角膜缘干细胞膜片移植治疗兔角膜缘干细胞缺 损的效果。方法制造兔角膜缘干细胞缺损的动物模型,以右眼为实验眼,从 兔左眼取角膜缘组织,将兔角膜缘干细胞消化下来,接种于含有经丝裂霉素C 处理后的兔胚成纤维细胞上,当细胞层密度达80%一90%汇合时进行消化传代, 按1 xl以个细胞/mmZ面积接种于铺有羊膜的无菌六孔培养板中,待细胞形成多 层角膜上皮细胞后,对日本大耳白兔角膜缘干细胞缺损动物模型行角膜缘干细 胞羊膜移植术,并对治疗后的角膜进行裂隙灯及病理学检查。结果体外培养 的兔角膜缘干细胞可在羊膜上继续增殖、分化为多层角膜上皮细胞;角膜缘干 细胞移植术后兔角膜缘轻度充血、角膜上皮完整、基质细胞浸润减轻、新生血 管减少或消失。临床和组织病理学染色证实:角膜缘及其周边上皮细胞为多层 结构,角膜新生血管消失及基质中炎性细胞浸润减轻。结论角膜缘干细胞羊 膜移植术治疗角膜可恢复其角膜上皮结构的完整性,减少角膜新生血管的形 成,维持角膜缘的细胞屏障功能。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2004-05-25)

翟弘峰,刘红,解邦杰,李森恺[4](2002)在《以L929细胞为饲细胞的口腔粘膜上皮细胞体外培养》一文中研究指出目的 :探索口腔粘膜上皮细胞体外培养的技术和方法 ,为进一步采用组织工程技术构建口腔粘膜组织奠定基础。方法 :取刚离乳的新西兰幼兔口腔粘膜组织小块 ,酶消化成单细胞悬液 ,接种后以L92 9细胞为饲细胞培养 ,定期换液、传代。以相差显微镜每天动态观察细胞形态变化及生长增殖情况 ,细胞进行常规HE染色、免疫组化染色及流式细胞仪检查 ,并以扫描电镜、透射电镜观察其超微结构。结果 :整个上皮细胞生长期内无成纤维细胞混杂生长 ,均为单一的上皮细胞 ,并证实为二倍体细胞。细胞可传 11~ 13代 ,成活 5 0~ 6 0d。结论 :新西兰幼兔口腔粘膜上皮细胞可在体外进行培养 ,在一定时间内保持增殖能力。这不仅为组织工程化口腔粘膜构建奠定了基础 ,而且为口腔粘膜的体外研究提供了实验模型(本文来源于《华西口腔医学杂志》期刊2002年05期)

饲细胞论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

分别以大鼠肝细胞(BRL)或小鼠胚胎成纤维细胞(STO)为饲养层,采用含5%、10%及20%胎牛血清的培养液,培养6日龄小鼠生精上皮细胞,研究饲养层和血清浓度对精原干细胞生物学行为的影响。结果表明:在培养的第1周内,2个及4个连成串的精原细胞合胞体数量明显增加,同时大多数精原细胞逐渐退化。培养1周后,大多数精原细胞经短暂的存活及分裂活动后退化消失,培养体系中仅保留下少量单个及由细胞间桥相连的双个及4个成串或成团的A型精原细胞。这些细胞在随后的培养过程中,不表现明显的分裂活动,呈圆球形,表达碱性磷酸酶。不同条件培养体系中的精原细胞及精原干细胞的生物学行为无明显不同,培养20~30d时均有少量精原干细胞存活。这说明BRL细胞能用作饲养层促进精原干细胞存活,但对其更新性增殖没有明显作用;培养液中高浓度胎牛血清对精原干细胞存活和增殖无明显影响,但能促进睾丸体细胞增殖。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

饲细胞论文参考文献

[1].李莲军,苗永旺,程美玲,李卫真,卢克焕.温度及BRL饲细胞对体外小鼠精原干细胞的影响[J].云南农业大学学报.2004

[2].李莲军,卢晟盛,黎宗强,杨小淦,韦英明.BRL饲细胞及血清浓度对体外小鼠精原干细胞的影响[J].广西农业生物科学.2004

[3].蒋自培.体外兔胚成纤维饲细胞克隆兔角膜缘干细胞及自体移植的实验研究[D].安徽医科大学.2004

[4].翟弘峰,刘红,解邦杰,李森恺.以L929细胞为饲细胞的口腔粘膜上皮细胞体外培养[J].华西口腔医学杂志.2002

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