导读:本文包含了草甘膦氧化还原酶基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:宏基因组文库,草甘膦降解基因,基因克隆,蛋白质表达与纯化
草甘膦氧化还原酶基因论文文献综述
任红卫,路杨,代春妍,刘相国,王金刚[1]（2013）在《一种新的草甘膦氧化还原酶基因的克隆及活性蛋白表达研究》一文中研究指出本研究构建了一个草甘膦污染土壤的宏基因组文库,利用草甘膦抗性筛选方法从该文库中筛选得到一个草甘膦抗性克隆,测序结果表明,其上存在一个草甘膦氧化还原酶(glyphosate oxidoreductase,简称GOX)的编码基因,命名为goxA。该基因长为1 296 bp,编码一个由431 aa组成的蛋白质。goxA碱基序列与已报道的gox相差6个碱基,编码产物GOXA与GOX蛋白质氨基酸序列相差2个氨基酸。为了验证GOXA的功能,对其进行了原核表达与纯化,活性电泳结果表明,GOXA具有明显的草甘膦氧化还原酶活性,goxA的发现为草甘膦抗性植物的研发提供具有潜在应用价值的基因资源。(本文来源于《吉林农业科学》期刊2013年05期）
张静[2]（2009）在《草甘膦降解菌苍白杆菌G-1的分离鉴定及草甘膦氧化还原酶基因gox的克隆》一文中研究指出草甘膦及其主要代谢产物氨甲酰磷酸(AMPA)对人体具有遗传毒性,2.5-7.5mM的草甘膦会对DNA产生明显的毒害作用,而1.8mM的氨甲酰磷酸(AMPA)就会对人体淋巴细胞产生明显的诱裂作用。美国一项农业健康调查报告显示,草甘膦及其代谢产物可以诱发多发性骨髓瘤,至于一些罕见癌症是否也与此有联系还需要长期的研究与观察。自然界中存在丰富的降解草甘膦的微生物资源,从这些微生物中克隆的草甘膦降解基因在抗草甘膦转基因作物中有着广泛的应用。从长期受农药污染的环境样品中通过富集培养的方式分离到一株草甘膦高效降解菌,通过16S rRNA基因同源性比较和生理生化鉴定,初步将其鉴定为苍白杆菌属(Ochrobacterum sp.),命名为G-1。菌株G-1在LB培养基上菌落呈圆形,表面凸起,光滑,湿润,边缘规则；在电镜下观察,该菌呈短杆状,没有鞭毛,细胞周围有分泌物；接触酶阳性,脲酶阳性,柠檬酸盐阳性,酯酶阴性,亚硝酸盐还原阳性,不能水解淀粉,不能不能水解明胶；最适生长条件为：pH7.0,温度30℃。好氧性生长,对氨苄青霉素、卡那霉素、庆大霉素、壮观霉素有抗性,对四环素、氯霉素、利氟平呐定酮酸敏感。G-1能在24小时内降解浓度为300mg/L草甘膦,降解效率明显高于以往分离得到的草甘膦降解菌。初始浓度对降解效率有明显影响,初始浓度越高降解时间越长；其最适降解条件为30℃、pH7.0;Cu2+、Ni2+对草甘膦的降解有明显的抑制作用,Zn2+、Ca2+有一定的抑制作用,K+、Fe3+、Mn2+对降解无明显影响。根据已公布的草甘膦氧化还原酶结构基因序列设计特异性引物,通过PCR扩增从降解菌G-1中克隆到草甘膦氧化还原酶的gox基因,gox结构基因共有1296个碱基,编码431个氨基酸和一个终止密码子。将基因序列在NCBI上进行同源性比较,发现该基因与Chelativorans sp. BNC1(CP000389)中的gox基因同源性达99%。将克隆的gox基因连接到表达质粒载体pET-29a上,在E.coli BL21实现了基因的高效表达,并探究酶活测定方法。(本文来源于《南京农业大学》期刊2009-12-01）
苏丹[3]（2008）在《草甘膦氧化还原酶基因转化油菜的研究》一文中研究指出本研究根据草甘膦氧化还原酶GOX基因的序列设计一对引物,以转基因抗除草剂油菜的总DNA为模板进行PCR扩增,克隆出GOX基因全长编码区,长度为1296bp。将此基因插入含有启动子CaMV35S与终止子NOS序列的pPZP221中,构建植物表达载体pPZP221-GOX。以甘蓝型油菜区试00S-76,太空3-19,繁4,繁5四种材料为受体,以植物表达载体pPZP221-GOX为外源基因供体,进行了花粉管通道法转基因研究。在授粉后20h,24h,30h,采用不切柱头和切去柱头上端1/3部分的2种方法,立即在柱头上滴加质粒DNA溶液,成熟后收获转化种子。对T_0代植株进行PCR检测,结果表明授粉后20h、24h和30h导入所获得的阳性率分别为1.1%、3.2%和1.4%。不同处理方法比较结果表明,切去1/3柱头后导入所获得的阳性率较高,达到3.0%,而未切去柱头,其阳性率为1.0%。为了鉴定T_0代植株的抗性,经160mg/L庆大霉素和0.02%草甘膦筛选培养,分别得到0.7%和1.2%的抗性苗。花粉管通道法简单、易操作,是一种经济、有效、具有广泛应用价值的技术,避免了传统的农杆菌介导法和基因枪法转化所要求的组织培养技术。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2008-06-08）
陈家华,潘良文,沈禹飞,胡永强,陶军[4]（2001）在《转基因抗草甘膦油菜籽中草甘膦氧化还原酶基因的检测方法研究》一文中研究指出应用PCR技术 ,分析草甘膦氧化还原酶基因 (GOX)和修饰草甘膦氧化还原酶基因的核苷酸序列及表达蛋白质的氨基酸序列 ,建立了检测转基因抗草甘膦油菜籽中草甘膦氧化还原酶基因的技术和方法(本文来源于《中国油料作物学报》期刊2001年02期）
草甘膦氧化还原酶基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
草甘膦及其主要代谢产物氨甲酰磷酸(AMPA)对人体具有遗传毒性,2.5-7.5mM的草甘膦会对DNA产生明显的毒害作用,而1.8mM的氨甲酰磷酸(AMPA)就会对人体淋巴细胞产生明显的诱裂作用。美国一项农业健康调查报告显示,草甘膦及其代谢产物可以诱发多发性骨髓瘤,至于一些罕见癌症是否也与此有联系还需要长期的研究与观察。自然界中存在丰富的降解草甘膦的微生物资源,从这些微生物中克隆的草甘膦降解基因在抗草甘膦转基因作物中有着广泛的应用。从长期受农药污染的环境样品中通过富集培养的方式分离到一株草甘膦高效降解菌,通过16S rRNA基因同源性比较和生理生化鉴定,初步将其鉴定为苍白杆菌属(Ochrobacterum sp.),命名为G-1。菌株G-1在LB培养基上菌落呈圆形,表面凸起,光滑,湿润,边缘规则；在电镜下观察,该菌呈短杆状,没有鞭毛,细胞周围有分泌物；接触酶阳性,脲酶阳性,柠檬酸盐阳性,酯酶阴性,亚硝酸盐还原阳性,不能水解淀粉,不能不能水解明胶；最适生长条件为：pH7.0,温度30℃。好氧性生长,对氨苄青霉素、卡那霉素、庆大霉素、壮观霉素有抗性,对四环素、氯霉素、利氟平呐定酮酸敏感。G-1能在24小时内降解浓度为300mg/L草甘膦,降解效率明显高于以往分离得到的草甘膦降解菌。初始浓度对降解效率有明显影响,初始浓度越高降解时间越长；其最适降解条件为30℃、pH7.0;Cu2+、Ni2+对草甘膦的降解有明显的抑制作用,Zn2+、Ca2+有一定的抑制作用,K+、Fe3+、Mn2+对降解无明显影响。根据已公布的草甘膦氧化还原酶结构基因序列设计特异性引物,通过PCR扩增从降解菌G-1中克隆到草甘膦氧化还原酶的gox基因,gox结构基因共有1296个碱基,编码431个氨基酸和一个终止密码子。将基因序列在NCBI上进行同源性比较,发现该基因与Chelativorans sp. BNC1(CP000389)中的gox基因同源性达99%。将克隆的gox基因连接到表达质粒载体pET-29a上,在E.coli BL21实现了基因的高效表达,并探究酶活测定方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
草甘膦氧化还原酶基因论文参考文献
[1].任红卫,路杨,代春妍,刘相国,王金刚.一种新的草甘膦氧化还原酶基因的克隆及活性蛋白表达研究[J].吉林农业科学.2013
[2].张静.草甘膦降解菌苍白杆菌G-1的分离鉴定及草甘膦氧化还原酶基因gox的克隆[D].南京农业大学.2009
[3].苏丹.草甘膦氧化还原酶基因转化油菜的研究[D].内蒙古大学.2008
[4].陈家华,潘良文,沈禹飞,胡永强,陶军.转基因抗草甘膦油菜籽中草甘膦氧化还原酶基因的检测方法研究[J].中国油料作物学报.2001