（中山大学附属第三医院检验科广东广州510630）
【摘要】目的：讨论全自动毛细管电泳仪在血红蛋白分析中的临床应用价值。方法：对我院送检14745份患者标本应用法国Sebia毛细管电泳分析系统进行血红蛋白电泳检测地中海贫血，通过自动扫描系统分析，检测血红蛋白(Hb)各组分的含量并结合基因检测结果，分析检出率和基因符合率。结果：在检测的14745例血红蛋白电泳标本中，筛查出3919例疑似血红蛋白病患者，检出率26.56％，其中疑似α珠蛋白生成障碍性贫血（地贫）患者2861例，占19.4％；疑似β地贫患者931例，占6.3％；其他血红蛋白病127例，占0.86%；其中HbA2Varia条带检出64例，占0.43%,HbE条带检出23例，占0.16％，HbJ条带检出11例，占0.075％，HBD条带检出7例，占0.048%，HbK条带检出19例，占0.13%，HbQ条带检出1例，占0.007%，HbS条带检出2例，占0.014%。与α地贫基因符合率86.67%，β地贫基因符合率90.91%，异常血红蛋白病的符合率为100%。结论：全自动毛细管电泳仪可有效地分离并定量检测血红蛋白的各组分，有效的筛查出血红蛋白病，为地中海贫血及血红蛋白病筛查及诊断提供快速准确的诊断依据。
【关键词】全自动毛细管电泳;基因;地中海贫血;血红蛋白
【中图分类号】R556【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2017）21-0331-02
血红蛋白病可分为异常血红蛋白病和珠蛋白生成障碍性贫血（地中海贫血），地中海贫血是我国南方最常见和危害最大的遗传病之一，以广东、广西为主[1-2]SebiaCAPILLARYS全自动毛细管电泳仪是法国Sebia公司生产的一款最新的毛细管电泳仪,它操作简单,全自动性能强,可在短时间内利用高压进行血红蛋白、血清蛋白及尿蛋白电泳，是一款理想的电泳仪[3]，毛细管血红蛋白电泳能够定量检测血红蛋白A（HbA）、血红蛋白F(HbF)、血红蛋白A2(HbA2）含量以及其他异常血红蛋白,可用于诊断地中海贫血和其他血红蛋白病[4]，为了解全自动毛细管电泳仪在血红白分析中的临床应用的诊断价值，现将所在医院2013年9月2014年8月的14745病人标本进行电泳分析。报告如下：
1.资料与方法
2013年9月-2014年8月我院的门诊及住院患者14745例，年龄1岁～85岁,平均年龄32岁，其中女性占9596例，男性占5149例。要求检查原因主要有：（1）血常规检查发现平均红细胞容积(MCV=82fl)减少或（和）平均红细胞浓度(MCH=27pg)减少；（2）家庭中有地中海贫血携带者；（3）夫妇中有一方为地中海贫血携带者而另一方主动要求筛查；（4）产前孕妇及其丈夫地中海贫血筛查。
1.2方法
1.2.1标本采集及处理用一次性真空采血管（肝素管）采集病人静脉血2～3ml，摇匀抗凝。若不能当天检测需把标本保存在2～8℃的冰箱里面。
1.2.2血红蛋白电泳用法国Sebia全自动毛细管电泳仪及厂家提供的配套试剂及配套质控品，按说明书操作，做质控后上机检测，分离出各血红蛋白成分和比例，主要是HbA、HbA2、HbF、HbH和Bart's等
1.2.3基因检测基因诊断由产科筛查实验室提供，全血基因组提取试剂盒和α、β基因诊断试剂盒均由深圳益生堂公司提供。方法采用聚合酶链反应（polymerasechainreaction，PCR）DNA扩增技术。扩增仪为PT-200PCR仪。
1.2.4判断标准成人男女HbA95%～98.5%，HbA2为2.5%～3.5%，HF<2%，并且没有出现异常血红蛋白带。当HbA2<2.5%或出现异常血红蛋白带(HbH、HbBart’s或HbCS)，初步判断该患者为疑似α地贫患者；当2.5≤HbA2≤3.5，并且没有出现异常血红蛋白带，初步判断该患者为非α、β地贫患者；当HbA2>3.5%或（和）出现血红蛋白带HbF>2.0%，则初步判断该患者为疑似β地贫患者；出现异常血红蛋白带例如HbA2Varia、HbE、HbQ、HbJ、HBD、HbS等则判断为异常血红蛋白病。
2.结果
2.1血红蛋白的电泳检测结果
通过电泳仪筛查出3919例疑似血红蛋白病患者，检出率26.56％，其中疑似α珠蛋白生成障碍性贫血（地贫）患者2861例，占19.4％；疑似β地贫患者931例，占6.3％；其他血红蛋白病127例，占0.86%其中HbA2Varia条带检出64例，占0.43%，HbE条带检出23例，占0.16％，HbJ条带检出11例，占0.075％，HBD条带检出7例，占0.048%，HbK条带检出19例，占0.13%，HbQ条带检出1例，占0.007%，HbS条带检出2例，占0.014%。见表１。
2.2174例同时进行毛细血管电泳与地贫基因检测比较，与α地贫基因符合率86.67%，β地贫基因符合率90.91%，异常血红蛋白病的符合率为100%。
3.讨论
地中海贫血是一组遗传性溶血性贫血。根据地贫病变发生的珠蛋白肽连合成受到抑制的类型珠蛋白生成障碍性贫血可分为α地中海贫血和β地中海贫血，
严重影响人类的健康和出身质量，是危害很大的一种遗传病。发病主要集中于我国的南方地区，尤以两广地区为重。本院的地贫筛查结果中阳性率高达26.6%，也印证了这一点。
全自动血红蛋白电泳能够定量检测HbA、HbF、HbA2含量，根据Hb各组份含量计算，可将地贫进行初步分类为α地贫或β地贫或其他血红蛋白病。本研究结果中得出疑似α珠蛋白生成障碍性贫血（地贫）患者2861例，检测率19.4％；疑似β地贫患者931例，检出率6.3％，以α地贫为主，与梁廷中报道的不相符[6]这可能是因为由于缺铁性贫血和其他遗传性疾病等，故致使α地贫初筛率升高；也可能与地域差异有关，对α地中海贫血阳性率虽能提高，但缼铁性贫血能影响筛查的特异性，须对筛查出可疑α地中海贫血患者进行铁代谢检查情况同时也进行地中海贫血基因检测，降低假阳性。毛细管电泳仪，能够很好将HbH、HbE、HbS等异常的血红蛋白在确定的电泳位置上分离，本次研究发现异常血红蛋白病127例，检出率为0.86%，也说明了Sebia毛细管电泳仪系统在异常血红蛋白中达到较好的分离效果。
同时本次研究的α、β地贫与基因诊断的符合率分别为α地贫阳性符合率86.67%，β地贫表型阳性符合率90.91%，异常血红蛋白病符合率100%。以β地贫为主原因是毛细管电泳仪分析无法检出ɑ地中海贫血中的静止型和标准型，所以对血常规HB、MCV、MCH降低的患者，在排除缺铁性贫血、自身免疫性溶血等因素后，HbF、HbA2值正常且未检出异常区带着，应做分子生物学检测基因诊断来排除轻型α地中海贫血患者。
目前国内外用于明确诊断地中海贫血的方法为聚合酶链反应（PCR）技术结合其他分子生物学手段检测ɑ、β地中海贫血基因的方法，但分子生物学技术要求条件高，方法繁琐，尚不能广泛应用于各级医院特别是基层医院。符合率都高达26.6%，毛细管电泳仪初筛效果好。因此，常用简单、方便的血液学方法进行地中海贫血的筛查，包括平均血细胞参数（MCV、MCH、MCHC）、血细胞脆性试验、血红蛋白电泳等[5]，其中血红蛋白电泳在地中海贫血的筛查中起到非常重要的作用。全自动血红电白电泳能够定量检测HbA、HbA2、HbF含量，可将地中海贫血初步分类为α地中海贫血和β地中海贫血，同时还可以筛查出各种异常血红蛋白，如HbBarts、HbH、HbE、HbJ、HbQ、HbCS等，可为地中海贫血及血红蛋白病筛查及诊断提供快速准确的诊断依据。
【参考文献】
[1]李霞，杨林，杨承东地中海贫血的筛查与产前诊断[J].中国优生与遗传杂志，2008，16（2）：43、78.
[2]潘小英.重型β地中海贫血的筛查及产前诊断[J].中国小儿血液与肿瘤杂志，2011，06:244-247.
[3]刘素兰，唐中，胡帅，蒋兴亮，张均.SebiaMINICAP毛细管电泳仪的常见故障及维护[J].实验与检验医学.2010(03).
[4]YsngZH,ChaffinCH,EasleyPL,etal.PrevalenceofelevatedhemoglobinA2measuredbytheCAPILLARYSsystem[J].AmJclinpathol,2009,[3]:42-48.
[5]吴建红，许剑锋，李霞.血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用，中国优生与遗传杂志，2005，13（8）14，17.
[6]梁廷中.全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用[J].实验与检验医学，2011，04:417-418.