本文主要研究内容
作者王帅勇（2019）在《猪圆环和猪流感病毒的分离鉴定、遗传演化分析及致病性研究》一文中研究指出：猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)和猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)是猪群中常见的两种病毒,在世界范围内广泛流行并能够引起多种猪的疾病,对养猪业造成了严重的经济损失。PCV是单链环状DNA病毒,自1974年首次发现PCV1以来,目前在猪群中流行的基因型有3种,其中PCV2对猪群有较强的致病性。PCV3是2016年首次在美国的母猪流产胎儿当中发现的,同PCV2相比较二者之间Cap基因的同源性较低,由于PCV3是一种新的PCV基因型,目前关于PCV3流行病学调查数据和检测方法还不是很完善。SIV是分8个基因片段的负链RNA病毒,在猪群中主要流行的基因型为H1N1、H1N2和H3N2,由于不同来源的流感病毒能够在猪体内发生重组且流感病毒可以从猪传播到人群中,因此对于SIV的流行病学调查及致病性研究具有重要的兽医公共卫生学意义。本研究对2016至2018年间山东省、天津市和上海市及周边地区猪场中疑似猪圆环病毒相关疾病的病料进行采集处理,通过建立PCV2和PCV3双重PCR方法对采集病料进行检测,发现PCV3的阳性率为32.7%且存在PCV2和PCV3混合感染的情况(PCV2和PCV3混合感染的阳性率为15.2%)。表明PCV3目前已经在猪群中广泛流行。将阳性病料接种PK-15细胞进行病毒分离实验,只成功分离鉴定到2株PCV2毒株。对代表毒株遗传演化分析,结果显示分离到的两株PCV2属于PCV2b-1A和PCV2b-1C两个亚型,7株不同地区PCV3代表毒株属于PCV3a亚型,与GenBank中登录的PCV3序列的全长与Cap基因的同源性分别为97.6%-99.4%和97.1%-99.1%。为探究PCV3 Cap蛋白抗原性,本研究通过原核表达方式,获得了可溶性表达的去核定信号肽重组蛋白pCold TF-dPCV3-Cap,通过Western blot实验证明该重组蛋白具有良好的反应原性和特异性。为制备针对于PCV3 Cap的单克隆抗体,本研究利用构建的真核表达质粒pCAGGS-PCV3-Cap免疫小鼠,细胞融合后进行阳性杂交瘤细胞株的筛选和亚克隆纯化,经间接免疫荧光鉴定,结果显示有3株杂交瘤细胞株上清能够与PCV3 Cap蛋白发生特异性反应,其中一株3G10的反应效果最好。为了解猪流感病毒的流行情况及其致病性,本研究对2018年于山东某猪场采集到的病料进行分离鉴定,获得3株二源重组H1N1 SIV,遗传演化分析结果表明,其两个表面基因HA和NA来源属于欧洲类禽亚型,其他6个内部基因的来源属于2009年甲型流感病毒。为探究分离到的毒株对哺乳动物的致病性,本研究将代表毒株A/Swine/Shandong/L1/2018(H1N1)在小鼠模型上进行滴鼻感染攻毒实验,结果显示代表毒株对小鼠呈现较高的致病性,能够导致小鼠体重产生明显下降,小鼠死亡率为100%;代表毒株能够在小鼠肺脏中很好地复制,病毒感染对小鼠肺脏产生明显的组织病理学损伤。
Abstract
zhu yuan huan bing du (Porcine circovirus,PCV)he zhu liu gan bing du (Swine influenza virus,SIV)shi zhu qun zhong chang jian de liang chong bing du ,zai shi jie fan wei nei an fan liu hang bing neng gou yin qi duo chong zhu de ji bing ,dui yang zhu ye zao cheng le yan chong de jing ji sun shi 。PCVshi chan lian huan zhuang DNAbing du ,zi 1974nian shou ci fa xian PCV1yi lai ,mu qian zai zhu qun zhong liu hang de ji yin xing you 3chong ,ji zhong PCV2dui zhu qun you jiao jiang de zhi bing xing 。PCV3shi 2016nian shou ci zai mei guo de mu zhu liu chan tai er dang zhong fa xian de ,tong PCV2xiang bi jiao er zhe zhi jian Capji yin de tong yuan xing jiao di ,you yu PCV3shi yi chong xin de PCVji yin xing ,mu qian guan yu PCV3liu hang bing xue diao cha shu ju he jian ce fang fa hai bu shi hen wan shan 。SIVshi fen 8ge ji yin pian duan de fu lian RNAbing du ,zai zhu qun zhong zhu yao liu hang de ji yin xing wei H1N1、H1N2he H3N2,you yu bu tong lai yuan de liu gan bing du neng gou zai zhu ti nei fa sheng chong zu ju liu gan bing du ke yi cong zhu chuan bo dao ren qun zhong ,yin ci dui yu SIVde liu hang bing xue diao cha ji zhi bing xing yan jiu ju you chong yao de shou yi gong gong wei sheng xue yi yi 。ben yan jiu dui 2016zhi 2018nian jian shan dong sheng 、tian jin shi he shang hai shi ji zhou bian de ou zhu chang zhong yi shi zhu yuan huan bing du xiang guan ji bing de bing liao jin hang cai ji chu li ,tong guo jian li PCV2he PCV3shuang chong PCRfang fa dui cai ji bing liao jin hang jian ce ,fa xian PCV3de yang xing lv wei 32.7%ju cun zai PCV2he PCV3hun ge gan ran de qing kuang (PCV2he PCV3hun ge gan ran de yang xing lv wei 15.2%)。biao ming PCV3mu qian yi jing zai zhu qun zhong an fan liu hang 。jiang yang xing bing liao jie chong PK-15xi bao jin hang bing du fen li shi yan ,zhi cheng gong fen li jian ding dao 2zhu PCV2du zhu 。dui dai biao du zhu wei chuan yan hua fen xi ,jie guo xian shi fen li dao de liang zhu PCV2shu yu PCV2b-1Ahe PCV2b-1Cliang ge ya xing ,7zhu bu tong de ou PCV3dai biao du zhu shu yu PCV3aya xing ,yu GenBankzhong deng lu de PCV3xu lie de quan chang yu Capji yin de tong yuan xing fen bie wei 97.6%-99.4%he 97.1%-99.1%。wei tan jiu PCV3 Capdan bai kang yuan xing ,ben yan jiu tong guo yuan he biao da fang shi ,huo de le ke rong xing biao da de qu he ding xin hao tai chong zu dan bai pCold TF-dPCV3-Cap,tong guo Western blotshi yan zheng ming gai chong zu dan bai ju you liang hao de fan ying yuan xing he te yi xing 。wei zhi bei zhen dui yu PCV3 Capde chan ke long kang ti ,ben yan jiu li yong gou jian de zhen he biao da zhi li pCAGGS-PCV3-Capmian yi xiao shu ,xi bao rong ge hou jin hang yang xing za jiao liu xi bao zhu de shai shua he ya ke long chun hua ,jing jian jie mian yi ying guang jian ding ,jie guo xian shi you 3zhu za jiao liu xi bao zhu shang qing neng gou yu PCV3 Capdan bai fa sheng te yi xing fan ying ,ji zhong yi zhu 3G10de fan ying xiao guo zui hao 。wei le jie zhu liu gan bing du de liu hang qing kuang ji ji zhi bing xing ,ben yan jiu dui 2018nian yu shan dong mou zhu chang cai ji dao de bing liao jin hang fen li jian ding ,huo de 3zhu er yuan chong zu H1N1 SIV,wei chuan yan hua fen xi jie guo biao ming ,ji liang ge biao mian ji yin HAhe NAlai yuan shu yu ou zhou lei qin ya xing ,ji ta 6ge nei bu ji yin de lai yuan shu yu 2009nian jia xing liu gan bing du 。wei tan jiu fen li dao de du zhu dui bu ru dong wu de zhi bing xing ,ben yan jiu jiang dai biao du zhu A/Swine/Shandong/L1/2018(H1N1)zai xiao shu mo xing shang jin hang di bi gan ran gong du shi yan ,jie guo xian shi dai biao du zhu dui xiao shu cheng xian jiao gao de zhi bing xing ,neng gou dao zhi xiao shu ti chong chan sheng ming xian xia jiang ,xiao shu si wang lv wei 100%;dai biao du zhu neng gou zai xiao shu fei zang zhong hen hao de fu zhi ,bing du gan ran dui xiao shu fei zang chan sheng ming xian de zu zhi bing li xue sun shang 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国农业科学院的王帅勇，发表于刊物中国农业科学院2019-07-05论文，是一篇关于猪圆环病毒论文,猪流感病毒论文,流行病学调查论文,单克隆抗体论文,致病性论文,中国农业科学院2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国农业科学院2019-07-05论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：猪圆环病毒论文; 猪流感病毒论文; 流行病学调查论文; 单克隆抗体论文; 致病性论文; 中国农业科学院2019-07-05论文;