导读:本文包含了神经异体移植论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:异体神经移植,周围神经保存,冷保存损伤,雷公藤甲素
神经异体移植论文文献综述
汪一[1]（2019）在《雷公藤甲素对大鼠坐骨神经冷保存后细胞活性及异体移植后神经再生的影响》一文中研究指出目的探讨雷公藤甲素(T10)对冷保存大鼠坐骨神经生物活性和异体移植后神经再生的影响。方法取对数生长期施万细胞(SCs),CCK-8检测10~-66 mol/L、10~-77 mol/L、10~-88 mol/L、10~-99 mol/L T10溶液对SCs增殖的影响。取Sprague-Dawley雌性大鼠双侧坐骨神经15 mm,分别在含0 mol/L、10~-66 mol/L、10~(-7)mol/L、10~-88 mol/L、10~-99 mol/L T10的DMEM液中,4℃或37℃培养24 h(n=6),Western blotting检测神经生长因子(NGF)、神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达。另取大鼠坐骨神经15 mm,随机分成新鲜神经组(A组,n=30)、DMEM保存组(B组,n=30)、T10保存组(C组,n=30)、T10预处理后DMEM保存组(D组,n=30)、T10预处理后T10保存组(E组,n=30),4℃保存4周,Calcein-AM/PI双染激光共聚焦显微镜观察、流式细胞术检测神经活细胞、死细胞数,Western blotting检测主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)、MHC-Ⅱ、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达。取上述冷保存4周的Sprague-Dawley雌性大鼠坐骨神经,于37℃、5%CO_2条件培养7天,于37℃、5%CO_2孵箱中培养7天,Western blotting检测NGF、GDNF、BDNF蛋白表达。用上述冷保存4周的Sprague-Dawley雌性大鼠坐骨神经修复Wistar雌性大鼠坐骨神经10 mm缺损(A′组、B′组、C′组、D′组、E′组,n=10),设立同系移植新鲜组(F′组,n=10)。移植术后16周,电生理检测肌肉复合动作电位(CMAP)和运动神经传导速度(MNCV);超薄切片,醋酸铀-柠檬酸铅双重染色,透射电镜观察神经超微结构,计算有髓神经纤维髓鞘厚度与神经纤维直径的比。结果SCs在浓度为10~(-9)~10~-77 mol/L T10溶液下,细胞增殖与对照组无显着性差异(P>0.05)。各浓度T10溶液下,大鼠坐骨神经各神经营养因子表达均37℃明显高于4℃;相同温度时,10~-88 mol/L组各神经营养因子表达均高于其他浓度组(P<0.05)。大鼠坐骨神经冷保存4周后,与B、C、D组相比,E组神经活细胞数量多,MHC-I、MHC-II、ICAM-1表达降低(P<0.05)。移植术后16周,E′组CMAP、MNCV、再生有髓神经纤维数量均优于A′、B′、C′、D′组(P<0.05),E′、F′组有髓神经纤维数量多,粗细均匀,分布广泛,髓鞘厚。结论一定浓度T10体外能诱导大鼠坐骨神经神经营养因子表达,提高冷保存神经生物活性,降低免疫原性,促进异体移植后受体神经再生;冷保存前用一定浓度T10预处理效果更好。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
汪一,黄英如,张松,李子健,曾欢欢[2]（2018）在《雷公藤甲素对大鼠坐骨神经冷保存后细胞活性及异体移植后神经再生的影响》一文中研究指出目的探讨雷公藤甲素(T10)对冷保存大鼠坐骨神经生物活性和异体移植后神经再生的影响。方法取对数生长期施万细胞(SCs),CCK-8检测1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L T10溶液对SCs增殖的影响。取Sprague-Dawley大鼠双侧坐骨神经15 mm,分别在含0 mol/L、1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L T10的DMEM液中,4℃或37℃放置24 h (n=6),Western blotting检测神经生长因子(NGF)、神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达。另取大鼠坐骨神经15 mm,随机分成新鲜神经组(A组, n=30)、DMEM保存组(B组, n=30)、T10保存组(C组, n=30)、T10预处理后DMEM保存组(D组, n=30)、T10预处理后T10保存组(E组, n=30),4℃保存4周,Calcein-AM/PI双染激光共聚焦显微镜观察、流式细胞术检测神经活细胞、死细胞数,Western blotting检测主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)、MHC-Ⅱ、细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)表达。用上述坐骨神经修复Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损(A′组、B′组、C′组、D′组、E′组, n=10),设立同系移植新鲜组(F′组, n=10)。术后16周,电生理检测肌肉复合动作电位(CMAP)和运动神经传导速度(MNCV);取移植段神经,观察神经纤维数和神经超微结构。结果 SCs在浓度为1×10-9～1×10-7mol/L T10溶液下,细胞增殖与对照组无显着性差异(P> 0.05)。各浓度T10溶液下,大鼠坐骨神经各神经营养因子表达均37℃明显高于4℃;相同温度时,1×10-8mol/L组各神经营养因子表达均高于其他浓度组(P <0.05)。大鼠坐骨神经冷保存4周后,与B、C、D组相比,E组神经活细胞数量多,MHC-I、MHC-II、ICAM-1表达降低(P <0.05)。移植术后16周,E′组CMAP、MNCV、再生有髓神经纤维数量均优于A′、B′、C′、D′组(P <0.05),E′、F′组有髓神经纤维数量多,粗细均匀,分布广泛,髓鞘厚。结论一定浓度T10体外能诱导大鼠坐骨神经神经营养因子表达,提高冷保存神经生物活性,降低免疫原性,促进异体移植后受体神经再生;冷保存前用一定浓度T10预处理效果更好。(本文来源于《中国康复理论与实践》期刊2018年11期）
李子健[3]（2018）在《冷诱导RNA结合蛋白促进冷冻保存大鼠坐骨神经异体移植后神经再生的研究》一文中研究指出目的探讨冷诱导RNA结合蛋白(cold-inducible RNA binding protein,CIRP)对冷冻保存大鼠坐骨神经活性及同种异体移植后神经再生的影响。方法176条15 mm雄性SD大鼠坐骨神经片段置于DMEM溶液中,分别在4℃、15℃、32℃预处理24 h(A组:4℃组,B组:15℃组,C组:32℃组),设置新鲜神经对照组(D组),Real-time PCR和Western blot检测CIRP基因及蛋白表达。将上述四组神经置于冷冻保存液中液氮保存4周,钙黄绿素/碘化丙啶(Calcein-AM/propidium iodide,Calcein-AM/PI)荧光染色、激光共聚焦显微镜观察保存后神经活细胞、死细胞情况,Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达。取冷冻保存4周的坐骨神经,于37℃、5%CO_2孵箱中培养7天,Western blot检测NGF、GDNF蛋白表达。用冷冻保存4周或新鲜雄性SD大鼠坐骨神经(E组:新鲜神经组),修复对应的雄性Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损(A′:同种异体移植4℃组、B′:同种异体移植15℃组、C′:同种异体移植32℃组、D′:同种异体移植对照组、E′组:新鲜神经同种异体移植组),设立同系移植新鲜组(F′组)。术后4周,免疫组化染色观察移植段神经CD4~+T淋巴细胞入侵,ELISA检测血清IL-6、IFN-γ水平;术后20周,电生理检测肌肉复合动作电位(compound muscle action potential,CMAP)和运动神经传导速度(motor nerve conduction velocity,MNCV),甲苯胺蓝染色分析再生有髓神经纤维数目和髓鞘厚度,电镜观察再生神经超微结构。结果C组神经CIRP mRNA及蛋白表达均显着高于A、B组(P<0.05)。冷冻保存4周后,与A、B、D组相比,C组神经活细胞数量较多,Bax表达降低,Bcl-2表达升高;冷冻保存神经NGF、GDNF表达,C组均显着高于A、B组(P<0.05)。同种异体移植术后4周,CD4+T淋巴细胞入侵和血清IL-6、IFN-γ水平,与E′组相比,C′组显着降低且具有统计学差异(P<0.05),但C′组与D′、F′组比较无统计学差异(P>0.05)。术后20周,C′组CMAP、MNCV、再生神经轴突密度及髓鞘厚度均显着优于A′、B′、D′组及E′组(P<0.05),与F′组相近;再生神经超微结构显示,与A′、B′、D′组及E′组相比,C′、F′组有髓神经纤维数量多,纤维粗细均匀,分布广泛、髓鞘厚。结论在32℃预处理可促进坐骨神经CIRP高表达,CIRP高表达对冷冻保存大鼠坐骨神经具有保护作用,能维持保存后神经的生物活性,促进同种异体移植后受体神经再生。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2018-05-01）
李子健,黄英如,曾欢欢,汪一,张松[4]（2018）在《冷诱导RNA结合蛋白促进冷冻保存大鼠坐骨神经异体移植后神经再生的作用》一文中研究指出目的探讨冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)对冷冻保存大鼠坐骨神经活性及同种异体移植后神经再生的影响。方法将15 mm雄性Sprague-Dawley大鼠坐骨神经片段置于DMEM溶液中,分别在4℃、15℃、32℃预处理24 h(A组、B组、C组),设置新鲜神经组(D组)。RT-PCR和Western blotting检测CIRP m RNA和蛋白表达。将上述4组神经置于冷冻保存液中液氮保存4周,Calcein-AM/PI荧光染色、激光共聚焦显微镜观察保存后神经活细胞、死细胞情况,Western blotting检测Bax、Bcl-2蛋白表达。取冷冻保存4周的坐骨神经,37℃、5%CO2培养7 d,Western blotting检测神经生长因子(NGF)、神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)蛋白表达;用冷冻保存4周或新鲜雄性Sprague-Dawley大鼠坐骨神经,修复对应的雄性Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损(A′组、B′组、C′组、D′组、E′组),设立同系移植新鲜组(F′组)。术后4周,免疫组化染色观察移植段神经CD+4T淋巴细胞入侵,ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-6、干扰素(IFN)-γ水平;术后20周,电生理检测肌肉复合动作电位(CMAP)和运动神经传导速度(MNCV),甲苯胺蓝染色分析再生有髓神经纤维数目和髓鞘厚度,电镜观察再生神经超微结构。结果 C组神经CIRP m RNA及蛋白表达均高于A组和B组(P<0.05)。冷冻保存4周后,与A组、B组、D组相比,C组神经活细胞数量较多,Bax表达降低(P<0.05),Bcl-2表达升高(P<0.05);C组冷冻保存神经分泌NGF、GDNF表达均高于A组和B组(P<0.05)。同种异体移植术后4周,与E′组相比,C′组CD+4T淋巴细胞减少,血清IL-6、IFN-γ水平降低(P<0.05),但C′组与D′组和F′组比较无显着性差异(P>0.05)。术后20周,C′组CMAP、MNCV、再生神经轴突密度及髓鞘厚度均优于A′、B′、D′组和E′组(P<0.05)。再生神经超微结构显示,与A′组、B′组、D′组和E′组相比,C′、F′组有髓神经纤维数量多,粗细均匀,分布广泛,髓鞘厚。结论 32℃预处理可促进坐骨神经CIRP高表达,CIRP高表达对冷冻保存大鼠坐骨神经具有保护作用,能维持保存后神经的生物活性,促进同种异体移植后受体神经再生。(本文来源于《中国康复理论与实践》期刊2018年04期）
李子健,黄英如,曾欢欢,邓熊,汪一[5]（2018）在《丹参酮Ⅱ_A磺酸钠促进低温保存的大鼠坐骨神经同种异体移植后神经再生》一文中研究指出探讨丹参酮Ⅱ_A磺酸钠(tanshinoneⅡ_Asulfonate)对深低温保存大鼠坐骨神经活性以及同种异体移植后神经再生、功能恢复的保护作用及其可能的作用机制。将SPF级标准雄性SD大鼠坐骨神经片段15 mm,分别在含有不同浓度丹参酮Ⅱ_A磺酸钠(A 0 mg·L~(-1),B 80 mg·L~(-1),C 160 mg·L~(-1),D 480 mg·L~(-1))中低温(-80℃)保存24周,另设有新鲜对照组,通过电镜观察保存后神经超微结构,calcein-AM/PI荧光染色激光共聚焦显微镜观察活细胞、死细胞数量,Western blot法检测Bax,Bcl-2的蛋白表达变化;冻存后神经体外培养7 d,PCR,Western blot法检测NGF,GDNF的mRNA以及蛋白表达水平。用保存24周的SD大鼠坐骨神经,修复对应的Wistar雄性大鼠坐骨神经10 mm缺损(A',B',C',D'组),术后16周,电生理检测肌肉复合动作电位潜伏期和神经传导速度,甲苯胺蓝染色分析再生有髓神经纤维数目和髓鞘厚度,电镜观察再生神经超微结构。结果显示,大鼠坐骨神经保存24周,与A,B组相比,C,D组脱髓鞘、空泡化程度较弱,活细胞数量较多,Bax表达降低,Bcl-2表达升高;与此同时,保存24周后的坐骨神经NGF,GDNF mRNA及蛋白表达,C,D组均显着高于A,B组。同种异体移植16周后,与A',B'组相比,C',D'组再生有髓神经纤维数量较多,分布广泛、髓鞘较厚,肌肉复合动作电位潜伏期缩短,神经传导速度升高。这表明丹参酮Ⅱ_A磺酸钠对-80℃长期保存的大鼠坐骨神经具有保护作用,能维持保存后神经的生物活性,促进同种异体移植后受体神经再生,其中以中、高浓度(C,D组)效果更好。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2018年09期）
李沿江[6]（2015）在《川芎嗪预处理促进大鼠坐骨神经异体移植后神经再生》一文中研究指出目的：探讨用川芎嗪(TMP)预处理的大鼠坐骨神经对修复周围神经长段缺损的可行性。解决异体神经在保存过程中的神经活性不高的问题。方法：将Wistar大鼠和SD大鼠分别为供体和受体(3月龄SPF雄性,200±20g),取供体双侧坐骨神经长15mm,随机在川芎嗪溶液(0、50、 100、200mg/L,A、B、C、D组,n=16)中4℃预处理6周,透射电镜观察坐骨神经超微结构,Calcein-AM荧光染色,激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope,LSCM)观察；受体大鼠随机分为A'、B'、C'、D'组(n=11,对应A、B、C、D组),.用预处理6周的供体神经修复对应组受体坐骨神经10mm缺损。术后1周,HE染色观察移植物炎症细胞入侵。分期行大体观察和坐骨神经功能指数检测,术后20周行电生理检测、再生神经图像分析和透射电镜。结果：大鼠坐骨神经4℃预处理6周,A组神经纤维严重脱髓鞘变化和轴索萎缩变性,而B、C、D组变化较轻；LSCM结果,B、C、D组荧光强度高于A组,B组高于C、D组,差异均有统计学意义(P<0.05),C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。动物存活至实验结束,术后1周,移植物炎性细胞入侵B'、C'、D'组明显轻于A'组；术后20周,各期坐骨神经功能指数、电生理检测、再生有髓神经纤维数目、髓鞘厚度,B'、C'、D'组与A'组比较,B'组与C'、D'组比较差异均有统计学意义(均P<0.05),C'、D'组间差异无统计学意义(P>0.05)透射电镜显示,A'组再生有髓神经纤维少、髓鞘薄,结缔组织增生明显,B'、C'、D'组有髓神经纤维数量较多、髓鞘较厚,结缔组织增生不明显。结论：一定浓度川芎嗪对预处理的大鼠坐骨神经具有保护作用(尤其以50mg/L组对神经的保护作用最强),并能促进异体移植后神经的再生。为异体神经保存后活性普遍不高的问题提供了一个新的思考路线。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2015-05-01）
李沿江,黄英如,冼华,吴珍元[7]（2015）在《川芎嗪预处理促进大鼠坐骨神经异体移植后神经再生实验研究》一文中研究指出目的探讨用川芎嗪预处理冷保存的大鼠坐骨神经修复周围神经缺损的可行性。方法 40只Wistar大鼠和40只SD大鼠分别为供体和受体,取供体双侧坐骨神经长15 mm,随机在川芎嗪溶液(0、50、100、200 mg/L,A、B、C、D组,n=20)中4℃冷保存6周,透射电镜观察坐骨神经超微结构,Calcein-AM荧光染色,激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)观察;受体大鼠随机分为A′、B′、C′、D′组(n=10,对应A、B、C、D组),用冷保存6周的供体神经修复对应组受体坐骨神经10 mm缺损。术后分期行大体观察,检测坐骨神经功能指数(SFI),术后20周行电生理检测、再生神经图像分析和透射电镜观察。结果大鼠坐骨神经冷保存6周,A组神经纤维严重脱髓鞘变化和轴索萎缩变性、蜂窝状改变,而B、C、D组变化较轻;LSCM结果显示,B、C、D组荧光强度高于A组,B组高于C、D组,差异均有统计学意义(P<0.05),C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后动物存活至实验结束,各期SFI,20周电生理检测,再生有髓神经纤维数目、髓鞘厚度,B′、C′、D′组与A′组比较,B′组与C′、D′组比较差异均有统计学意义(P<0.05),C′、D′组间差异无统计学意义(P>0.05);术后20周透射电镜观察显示,A′组再生有髓神经纤维少、髓鞘薄,结缔组织增生明显,B′、C′、D′组有髓神经纤维较多、髓鞘较厚,结缔组织增生不明显。结论一定质量浓度的川芎嗪对冷保存大鼠坐骨神经具有保护作用,并能促进异体移植后神经的再生。(本文来源于《中草药》期刊2015年08期）
柴辉辉[8]（2014）在《Treg/Th1/Th17/Th22细胞在小鼠外周神经异种异体移植急性排斥反应中作用的研究》一文中研究指出研究背景：周围神经损伤是临床上常见的疾病,常常会影响患者的感觉及运动功能。神经损伤通常会导致部分神经缺损,缺损后的神经由于张力增加不能直接端端缝合。大量动物实验中,自体移植和异体移植一直被认为是治疗周围神经缺损的有效方法,但是因为取材所限,影响了其在临床上的广泛应用。近年来,随着移植免疫学研究的不断进步,关于异体神经移植的研究越来越受到人们的关注。众所周知,影响异种神经移植效果的最关键的因素是先天性免疫反应和获得性免疫反应(B细胞介导的体液免疫和T细胞介导的细胞免疫),其中T细胞介导的细胞免疫反应对其影响更为明显。新近研究证明Thl细胞、Th17细胞可通过其分泌的细胞因子在实体器官的移植中发挥重要的作用。Thl细胞、Th17细胞为两种不同的功能性CD4+细胞亚群,Thl细胞主要分泌IFN-γ,Th17细胞特异性分泌IL-17。Th22细胞是近年来新发现的一类辅助性T细胞,可通过分泌IL-22诱导STAT信号通路的活化。有研究表明,Th22细胞在皮肤移植后引起的急性排斥反应中发挥重要作用,但Th22在异种异体神经移植中的作用尚未明确。我们推测Th22细胞可能参与外周神经异种移植急性排斥反应的过程。Treg细胞可通过分泌一些细胞因子(TGF-p等)抑制Thl细胞、Th17细胞介导免疫反应来发挥免疫抑制功能,在维持机体免疫稳态及控制自身免疫病中起着重要作用。Foxp3是特异性表达在Treg细胞上的一类转录因子,对Treg细胞发育及免疫抑制功能起着很重要的作用。另外,TGF-β可抑制Th1、Th2细胞分化,却能促进Th9、Th17、Treg细胞的分化。TGF-β1和IL-6可促进Th17细胞的分化,抑制Treg细胞的分化,而TGF-β1和IL-6正相反。另有研究表明IL-6/STAT3和IL-2/STAT5分别是1h17、Treg细胞分化的关键因子。另外,IL-2能够诱导Treg细胞分化为Thl样细胞。由此可见Treg与Th1、Th17细胞分化之间具有可塑性特征。截止目前,尚未见有关Treg、Th22细胞在异种周围神经移植免疫排斥反应的相关报道,因此,它们在异种周围神经移植急性排斥反应过程中的作用尚未明确。本实验利用异种异体神经移植模型,探索Treg、Th22细胞生物学特性,并对Treg、Th22细胞在异种周围神经移植急性排斥反应中的作用进行研究。第一部分异种异体神经移植后早期免疫反应变化目的：1.研究异种异体神经移植后局部组织内单核细胞、Foxp3+细胞、IL-17+细胞、IL-22+细胞、IFN-y+细胞浸润程度。2.研究异种异体神经移植后局部组织内Foxp3、RORyt、AHR、T-bet mRNA表达水平。3.研究异种异体神经移植后脾细胞中Treg、Th17、Th22、Th1细胞比例变化规律。4.研究异种异体神经移植后血清中IL-17、IL-22、IFN-γ含量变化规律。5.研究异种异体神经移植后Treg与Th17/Th22/Th1及其分泌的IL-17、IL-22. IFN-γ的相关性。方法：100只健康6-8周C57雄性小鼠按随机数字表法分为对照组和实验组,每组50只,对照组小鼠行坐骨神经自体移植处理,而实验组进行异种异体移植,接受由雄性SD大鼠供给的坐骨神经。我们于术后第Id、3d、7d、14d、28d利用cat walk系统检测术后坐骨神经神经功能恢复情况,然后以取眼球法采集血标本离心获取血清,于-80℃超低温冰箱保存,采用ELISA法测定各组研究对象血清中IL-17、IL-22、IFN-γ的水平；用研磨法分离脾脏细胞并将细胞密度调整为1×106/ml,采用流式细胞术和荧光标记单克隆抗体检测各组研究对象各时相脾细胞中Treg(CD4+CD25+Foxp3+)细胞、Th1(CD3+CD8-IFNy+)细胞、Th17(CD3+CD8-IL-17+)细胞、Th22(CD3+CD8-IL-22+)细胞的比例；另外取新鲜移植神经周围组织,抽提组织RNA,以RT-PCR检测移植神经周围组织内不同时相Foxp3、RORγt、AHR、T-bet表达水平；同时将获取的组织直接冷冻、切片,制成冰冻切片,应用免疫组化染色观察各组各时相移植神经周围组织内Foxp3+细胞、IL-17+细胞、IL-22+细胞、IFN-γ+细胞浸润情况,用H&E染色制成病理学标本观察移植神经周围组织内不同时相单核细胞的浸润程度；步骤按照操作指南进行。对两组之间结果进行比较,以Logistic回归分析方法分析Th17/Th1/Th22及其分泌的IL-17、IL-22、IFN-γ与Treg细胞之间的相关性。全部数据均用中位数描述,并利用Wilcoxon秩和检验进行统计学处理,应用Pearson或Spearman相关系数分析两组数据相关性,P<0.05为差异有统计学意义。结果：1.H&E染色结果显示对照组可见少量的单核细胞浸润,而且随着时间推移,单核细胞的浸润程度并无明显变化。与对照组相比,手术组术后各时间点可见大量单核细胞的浸润,明显多于对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。免疫组化染色结果显示异种异体神经移植组小鼠,在所有检测的时间点,均可观察到Foxp3+细胞、IL-17+细胞、IL-22+细胞、IFN-γ+细胞在移植神经周围组织内浸润,数量明显多于对照组,差异有统计学意义(p<0.05),呈现出时间依赖性特征。重要的是,异种异体移植神经周围组织内IL-17+细胞、IL-22+细胞、IFN-γ+细胞数量在28天内呈现出逐渐增多的趋势,而Foxp3+细胞的数量于术后第7天的时候达到高峰。另外,对照组可见少量的IL-17、IL-22、IFN-γ表达阳性细胞,而且随着时间推移,浸润程度也无明显变化。2.RT-PCR结果显示异种异体神经移植组小鼠,在所有检测的时间点,均可观察到移植神经周围组织内有Foxp3、RORγt、AHR、T-bet mRNA的表达,而且表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(p<0.05),并且呈现出时间依赖性特征。值得注意的是,异种异体移植神经周围组织内RORγt、AHR、T-bet mRNA的表达水平在28天内呈现出逐渐增高的趋势,而Foxp3于术后第7天的表达量最高。另外,对照组可见少量的Foxp3、RORγt、AHR、T-bet的表达,而且随着时间推移,表达水平也无明显变化。3.流式细胞仪检测结果显示Thl(CD3+CD8-IFNγ+)细胞、Th17(CD3+CD8-IL-17+)细胞在异种异体神经移植后第1天、3天、7天、14天明显升高,Tb22(CD3+CD8-IL-22+)细胞在异种异体神经移植后第7天、14天明显升高,而Treg(CD4+CD25+Foxp3+)细胞在异种异体神经移植后第7天、14天明显降低,与对照组相比,差异有统计学意义(p<0.05)。4.ELISA检测结果显示异种异体神经移植组小鼠血中IL-17、IL-22、IFN-y水平在移植后第3天、7天、14天显着高于对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。5.进一步分析Treg细胞与Th17/Th1/Th22细胞及其分泌的IL-17、IL-22、IFN-γ的相关性,发现异种异体神经移植后第7天比例下降的Treg细胞与Th1/Th17/Th22细胞的比例存着明显负相关(P=0.028,P=0.005,P=0.004),与血清中IFN-γ、IL-17、IL-22含量呈负相关(P=0.003,P=0.029,P=0.047)。另外,异种异体神经移植后第14天Treg细胞亦与Thl7/Th1/Th22细胞比例及其分泌的IL-17、IFN-γ、IL-22含量呈明显负相关。结论：1.Treg细胞在小鼠外周神经异种移植急性排斥反应中起着重要的作用。2.Th17/Th22/Th1细胞及效应细胞因子IL-17、IL-22、IFN-γ参与小鼠外周神经异种移植急性排斥反应的发病过程。3.小鼠外周神经异种移植急性排斥反应中Treg细胞与Th17/Th22/Th1细胞及其分泌的IL-17、IL-22、IFN-γ呈负相关性。第二部分中和抗体对异种异体神经移植后早期免疫反应的影响目的：1.研究IL-17、IL-22中和抗体中和抗体对异种异体坐骨神经移植后局部组织内单核细胞浸润程度变化的影响。2.研究IFN-y、IL-17、IL-22中和抗体对异种异体坐骨神经移植后局部组织内Foxp3+细胞、IL-17+细胞、IL-22+细胞、IFN-y+细胞浸润程度变化的影响。3.研究IFN-y、IL-17、IL-22中和抗体对异种异体坐骨神经移植后局部组织内Foxp3、RORyt、AHR、T-bet mRNA表达水平变化的影响。4.研究IFN-γ、IL-17、IL-22中和抗体对异种异体坐骨神经移植后脾细胞中Treg、Th17、Th22、Thl细胞比例变化的影响。5.研究IFN-γ、IL-17、IL-22中和抗体对小鼠异种移植后神经功能恢复情况的影响。方法：150只健康6-8周C57雄性小鼠按随机数字表法分为IL-17中和抗体组、IL-22中和抗体组、IFN-y中和抗体组；每组均为异种异体移植小鼠,并接受雄性SD大鼠供给的坐骨神经。注意的是,小鼠于移植术前1天,腹腔注射中和IFN-γ、IL-17、IL-22抗体。我们于术后第1d、3d、7d、14d、28d利用catwalk系统检测术后坐骨神经功能的改变；然后处死小鼠,用研磨法分离脾脏细胞并将细胞密度调整为l×106/ml,采用流式细胞术和荧光标记单克隆抗体检测各组研究对象各时相脾细胞中Treg(CD4+CD25+Foxp3+)细胞、Thl(CD3+CD8-IFNy+)细胞、Th17(CD3+CD8-IL-17+)细胞、Th22(CD3+CD8-IL-22+)细胞的比例；另外取新鲜移植神经周围组织,抽提组织RNA,以RT-PCR检测移植神经周围组织内不同时相Foxp3、RORyt、AHR、T-bet表达水平；同时将获取的组织直接冷冻、切片,制成冰冻切片,应用免疫组化染色观察各组各时程移植神经周围组织内Foxp3+细胞、IL-17+细胞、IL-22+细胞、IFN-γ+细胞浸润情况,用H&E染色制成病理学标本观察移植神经周围组织内不同时相单核细胞的浸润程度；步骤按照操作指南进行。对各组之间结果进行比较,全部数据均用均数±标准差或中位数描述,并利用Wilcoxon秩和检验进行统计学处理,P<0.05为差异有统计学意义。结果：1.Cat walk系统检测结果显示应用中和抗体后,异种异体神经移植的小鼠神经功能恢复明显优于单纯异种异体移植组。2.移植神经周围组织内不同时相单核细胞的浸润程度利可采用H&E染色检测,其结果显示,相对于单纯异种异体移植组,接受IL-17中和抗体、IFN-y中和抗体的异种移植小鼠在移植后第3天、7天、14天移植神经周围浸润的单核细胞数量明显下降；另外,IL-22中和抗体组中的异种异体移植小鼠在移植后第7天、14天移植神经周围单核细胞浸润程度也有显着降低,差异有统计学意义(p<0.05)。3.免疫组化染色结果显示：相对于单纯异种异体移植组,应用IFN-γ、IL-17、IL-22中和抗体后,异种异体移植神经周围浸润的IL-17+细胞、IL-22+细胞、IFN-γ+细胞的数量自移植后第6天明显降低；而Foxp3+细胞浸润程度却明显增加,并在第7天达到高峰。另外,我们发现应用IL-17中和抗体后移植神经周围Foxp3+细胞数量增加的程度明显高于其他中和抗体组。4.RT-PCR结果显示：应用IFN-y、IL-17、IL-22中和抗体之后,异种异体神经移植周围组织内RORyt、AHR、T-bet mRNA的表达水平下降,而且在移植后第7、14、28天均有所下降；另外,Foxp3的表达却增多,而且于移植后第7天表达水平最高。5.流式细胞仪检测结果显示：应用IFN-y、IL-17、IL-22中和抗体之后,异种异体神经移植小鼠脾细胞内Th1(CD3+CD8-IFNy+)细胞Th17(CD3+CD8-IL-17+)细胞、Th22(CD3+CD8-IL-22+)比例出现下降,而Treg(CD4+CD25+Foxp3+)细胞比例出现升高；而且应用IL-17中和抗体后Treg(CD4+CD25+Foxp3+)细胞比例增多更为明显。结论：1. IFN-γ、IL-17、IL-22中和抗体促进受损神经功能修复。2. IFN-γ、IL-17、IL-22中和抗体明显抑制异种异体移植神经周围炎症细胞浸润。3. IFN-γ、IL-17、IL-22中和抗体能够有效的抑制异种异体移植引起的急性排斥反应。(本文来源于《南方医科大学》期刊2014-04-01）
黄英如,蒋电明,冼华,黄剑,陈增刚[9]（2013）在《人参皂甙Rb1对玻璃化保存坐骨神经异体移植后神经再生的影响》一文中研究指出[目的]探讨人参皂甙Rb1(Ginsenoside Rb1,G-Rb1)对大鼠坐骨神经玻璃化保存及异体移植后神经再生的影响。[方法]Wistar大鼠坐骨神经在0、50、100、200μg.L-1G-Rb1玻璃化液(A、B、C、D组)中,-20℃保存4周,透射电镜观察超微结构,TUNEL法检测细胞凋亡。用玻璃化保存后的坐骨神经修复对应组SD大鼠(A’、B’、C’、D’组)坐骨神经10 mm缺损。术后4、8、14周坐骨神经功能指数观察,术后16周电生理检测、再生神经组织学观察及靶肌肉运动终板观察。[结果]坐骨神经玻璃化保存4周后,A组神经脱髓鞘严重,施万细胞质膜和基底膜破坏,B、C、D组髓鞘轻微变性,施万细胞质膜和基底膜保持完整;细胞凋亡B、C、D组轻于A组,C、D组轻于B组(P<0.05),C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后不同时间坐骨神经功能指数,16周运动神经传导速度、动作电位潜伏期及波幅,运动终板数量、面积、着色,B’、C’、D’组与A’组间,C’、D’组与B’组间,差异均有统计学意义(P<0.05),而C’、D’组间差异无统计学意义(P>0.05)。透射电镜显示,A’、B’组再生有髓神经纤维较少、髓鞘较薄,结缔组织增生明显,C’、D’组再生有髓神经纤维较多、髓鞘厚,无明显结缔组织增生。[结论]G-Rb1对玻璃化保存大鼠坐骨神经具有保护作用,并能促进异体移植后神经再生。(本文来源于《中国矫形外科杂志》期刊2013年04期）
张庭深,苏秋香[10]（2012）在《MDSCs异体移植对坐骨神经缺损后再生的影响》一文中研究指出有关研究表明,muscle derived stem cells(MDSCs)可能是一种新的骨骼肌源性成体干细胞,在组织工程和基因治疗中具有广泛的应用前景。目前,周围神经缺损的修复仍然是临床面临的难题之一。本实验拟通过异体植入MDSCs,观察其对缺损神经再生的影响,旨在为临床上修复大段周围神经缺损提供一个新的研究思路。16只成年Wistar大鼠被分为实验组与对照组,切断右后肢坐骨神经,并用生物可降解膜包裹缺损神经断端形成神经再生室。实(本文来源于《中国解剖学会2012年年会论文文摘汇编》期刊2012-10-19）
神经异体移植论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨雷公藤甲素(T10)对冷保存大鼠坐骨神经生物活性和异体移植后神经再生的影响。方法取对数生长期施万细胞(SCs),CCK-8检测1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L T10溶液对SCs增殖的影响。取Sprague-Dawley大鼠双侧坐骨神经15 mm,分别在含0 mol/L、1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L T10的DMEM液中,4℃或37℃放置24 h (n=6),Western blotting检测神经生长因子(NGF)、神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达。另取大鼠坐骨神经15 mm,随机分成新鲜神经组(A组, n=30)、DMEM保存组(B组, n=30)、T10保存组(C组, n=30)、T10预处理后DMEM保存组(D组, n=30)、T10预处理后T10保存组(E组, n=30),4℃保存4周,Calcein-AM/PI双染激光共聚焦显微镜观察、流式细胞术检测神经活细胞、死细胞数,Western blotting检测主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)、MHC-Ⅱ、细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)表达。用上述坐骨神经修复Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损(A′组、B′组、C′组、D′组、E′组, n=10),设立同系移植新鲜组(F′组, n=10)。术后16周,电生理检测肌肉复合动作电位(CMAP)和运动神经传导速度(MNCV);取移植段神经,观察神经纤维数和神经超微结构。结果 SCs在浓度为1×10-9～1×10-7mol/L T10溶液下,细胞增殖与对照组无显着性差异(P> 0.05)。各浓度T10溶液下,大鼠坐骨神经各神经营养因子表达均37℃明显高于4℃;相同温度时,1×10-8mol/L组各神经营养因子表达均高于其他浓度组(P <0.05)。大鼠坐骨神经冷保存4周后,与B、C、D组相比,E组神经活细胞数量多,MHC-I、MHC-II、ICAM-1表达降低(P <0.05)。移植术后16周,E′组CMAP、MNCV、再生有髓神经纤维数量均优于A′、B′、C′、D′组(P <0.05),E′、F′组有髓神经纤维数量多,粗细均匀,分布广泛,髓鞘厚。结论一定浓度T10体外能诱导大鼠坐骨神经神经营养因子表达,提高冷保存神经生物活性,降低免疫原性,促进异体移植后受体神经再生;冷保存前用一定浓度T10预处理效果更好。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
神经异体移植论文参考文献
[1].汪一.雷公藤甲素对大鼠坐骨神经冷保存后细胞活性及异体移植后神经再生的影响[D].重庆医科大学.2019
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