导读:本文包含了自杀载体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:沙门菌,多拷贝
自杀载体论文文献综述
尹超,顾丹,李求春,焦新安[1]（2017）在《一种利用自杀载体pDM4消除沙门菌中多拷贝质粒方法的建立》一文中研究指出引言沙门菌是重要的人兽共患病原菌,也是世界范围内重要的食源性病原菌之一,具有重要的公共卫生意义~([1])。在沙门菌中,质粒通过许多途径参与细菌的毒力,代谢,抗生素耐药性等功能~([2])。为了研究这些质粒的作用,通常需要获得质粒消除的菌株。在此研究中,我们利用自杀载体pDM4~([3])建立了一种新的质粒消除方法,并成功消除鸡白痢沙门菌C79-13中的多拷贝质粒pSPI12~([4]),对研究pSPI12质粒在沙门菌中发挥的功能具有重要意义。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集》期刊2017-08-20）
宋帅,李春玲,杨冬霞,李淼,岳磊[2]（2013）在《副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体的构建》一文中研究指出为了构建副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体,根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌hhdB基因上、下游同源臂序列(hhdB-up、hhdB-down)设计并合成2对特异性引物,PCR扩增hhdB-up和hhdB-down序列,经重迭PCR的方法将hhdB-up和hhdB-down序列进行拼接(hhdB-up+down),此拼接序列的两端引入了NotⅠ和SalⅠ限制性酶切位点,经相应酶切后将hhdB-up+down序列定向克隆到自杀性质粒载体pEMOC2中。结果表明:成功获得可在大肠杆菌E.β2155中稳定遗传的hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体(pEMOC2ΔhhdB),从而为构建副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失菌株奠定基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会论文集》期刊2013-10-21）
崔明全,徐杰,张婷婷,王同坤,尚伟[3]（2012）在《利用自杀载体构建布鲁氏菌hfq表位标记菌株》一文中研究指出目的:建立一种利用自杀载体构建布鲁氏菌hfq表位标记菌株的方法。方法:在hfq的反向引物带上FLAG或HIS标签序列,以布鲁氏菌Brucella melitensis 16M为模板扩增出3'端带有标签的hfq标记盒。将其直接与布鲁氏菌的自杀载体pMD18-T vector连接,获得带有标签的标记载体,将载体转入布鲁氏菌感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得表位标签与目的基因C末端融合的重组子。利用RT-PCR和Western blot分析C末端融合了表位标签的目的蛋白的转录和表达的情况。结果:获得了布鲁氏菌的表位标记菌株16M-T-HfqFLAG和16M-T-HfqHIS。RT-PCR实验结果表明带有标签的hfq基因可以转录,Western blot实验结果证实利用针对FLAG或HIS标签的抗体能够检测到Hfq蛋白的表达。结论:利用自杀载体可以快速构建布鲁氏菌的表位标记菌株,这不仅为Hfq的功能研究奠定了基础,也为布鲁氏菌的基因功能研究提供了一个有价值的研究手段。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2012年11期）
贺云霞,徐慧,叶飞,孙慧玲,王宏俊[4]（2011）在《副猪嗜血杆菌aroA基因自杀载体的构建》一文中研究指出为了构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变自杀载体,试验采用自杀质粒介导的同源重组方法首先构建了自杀质粒pSD,根据副猪嗜血杆菌aroA基因设计PCR特异性引物,上游引物5'末端加BamHⅠ位点,下游引物5'末端加SalⅠ位点,PCR扩增aroA基因后连接到T载体,经酶切位点分析发现在aroA中有1个HindⅢ位点,将氯霉素表达盒通过该位点,构建T-aroA-cm载体,再通过BamHⅠ和SalⅠ将aroA-cm定向克隆到自杀质粒pSD中。结果表明:成功获得aroA基因插入突变自杀载体。说明进一步进行同源重组,从而构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变株。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2011年13期）
王玉飞,陈泽良,乔凤,汪舟佳,杜昕颖[5]（2007）在《布鲁氏菌自杀载体的改建及其在突变株构建中的应用》一文中研究指出目的:改建布鲁氏菌自杀载体.方法:用NdeⅠ将pKOBEG-SacB质粒中的反向筛选基因SacB切下来,与同样酶切处理的pUC19质粒连接,得到pUC19-SacB,经测序和蔗糖筛选实验证实.结果:成功将SacB从pKOBEG-SacB中切下来并插入到pUC19质粒中,构建得到了pUC19- SacB.测序和蔗糖筛选实验证实.插入的sacB基因具有较好的反筛功能.我们利用该质粒,成功的构建了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统的突变株,改建的载体能高效的应用于布鲁氏菌染色体的精确修饰.结论:构建了一个新的自杀质粒pUC19-SacB,该质粒能用于布鲁氏菌无痕缺失突变株的构建.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2007年27期）
王玉飞,陈泽良,赵红庆,苑锡铜,黄留玉[6]（2007）在《以克隆载体为自杀载体快速构建布鲁氏菌的无痕缺失突变株》一文中研究指出构建突变株是病原微生物致病机理研究的重要手段。以往研究中布鲁氏菌的无痕缺失突变株都采用传统的自杀载体来构建,效率低下。首先对布鲁氏菌的电击转化条件进行了优化,然后选择含有反向筛选基因sacB的pEX18Gm质粒作为自杀载体,构建了缺失Ⅳ型启动子区的布鲁氏菌无痕缺失突变株。这不仅为构建布鲁氏菌的突变株提供了一个快速有效的技术平台,也为深入研究Ⅳ型分泌系统的功能奠定了基础。(本文来源于《微生物学通报》期刊2007年04期）
柳静[7]（2006）在《龋病替代疗法中adhB基因在大肠杆菌中的表达与自杀载体的构建》一文中研究指出变形链球菌是公认的主要致龋菌,在乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase, LDH)的作用下产生乳酸,导致菌斑pH值下降,引起龋损的产生。去除乳酸脱氢酶基因,构建一种低产酸性、强定植力的效应菌株替代变形链球菌是龋病替代疗法的核心内容。研究发现乳酸脱氢酶的缺乏对变链具有致死效应,但是通过乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase, ADH)活性来代替LDH的表达可以避免因LDH缺乏所引起的代谢障碍。本实验在已成功构建出运动型发酵单胞菌乙醇脱氢酶基因(adhB)置换ldh重组质粒pMDLA的基础上,运用DNA重组的方法构建表达载体并在大肠杆菌中进行诱导表达,以验证置换的adhB基因是否可以正确表达,确认无误后进一步构建自杀载体,为下一步同源重组、最终构建LDH缺陷的替代疗法效应菌株奠定基础。(本文来源于《吉林大学》期刊2006-03-01）
自杀载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了构建副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体,根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌hhdB基因上、下游同源臂序列(hhdB-up、hhdB-down)设计并合成2对特异性引物,PCR扩增hhdB-up和hhdB-down序列,经重迭PCR的方法将hhdB-up和hhdB-down序列进行拼接(hhdB-up+down),此拼接序列的两端引入了NotⅠ和SalⅠ限制性酶切位点,经相应酶切后将hhdB-up+down序列定向克隆到自杀性质粒载体pEMOC2中。结果表明:成功获得可在大肠杆菌E.β2155中稳定遗传的hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体(pEMOC2ΔhhdB),从而为构建副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失菌株奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
自杀载体论文参考文献
[1].尹超,顾丹,李求春,焦新安.一种利用自杀载体pDM4消除沙门菌中多拷贝质粒方法的建立[C].中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集.2017
[2].宋帅,李春玲,杨冬霞,李淼,岳磊.副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体的构建[C].中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会论文集.2013
[3].崔明全,徐杰,张婷婷,王同坤,尚伟.利用自杀载体构建布鲁氏菌hfq表位标记菌株[J].中国生物工程杂志.2012
[4].贺云霞,徐慧,叶飞,孙慧玲,王宏俊.副猪嗜血杆菌aroA基因自杀载体的构建[J].黑龙江畜牧兽医.2011
[5].王玉飞,陈泽良,乔凤,汪舟佳,杜昕颖.布鲁氏菌自杀载体的改建及其在突变株构建中的应用[J].世界华人消化杂志.2007
[6].王玉飞,陈泽良,赵红庆,苑锡铜,黄留玉.以克隆载体为自杀载体快速构建布鲁氏菌的无痕缺失突变株[J].微生物学通报.2007
[7].柳静.龋病替代疗法中adhB基因在大肠杆菌中的表达与自杀载体的构建[D].吉林大学.2006