优势标记位点论文-寻广谨

优势标记位点论文-寻广谨

导读:本文包含了优势标记位点论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:口蹄疫,3B非结构蛋白,表位,标记疫苗

优势标记位点论文文献综述

寻广谨[1](2017)在《口蹄疫病毒非结构蛋白3B优势表位关键位点鉴定与缺失标记病毒构建》一文中研究指出口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)引起的一种急性、热性、高度接触性动物传染病,传播迅速、发病率高,对发病地区的政治和经济有着巨大负面影响。传统灭活疫苗的免疫接种是当前预防和控制FMD最为有效的手段,但免疫后难以与自然感染动物进行区分,致使我国FMD无法得到彻底地控制和净化,因此需要发展能够区分自然感染和疫苗免疫的FMD标记疫苗。为了发展复制性能优良的FMD标记病毒疫苗候选株,本论文进行了以下叁部分的研究:1.利用丙氨酸扫描的方法成功构建了含FMDV rvOZK/93-08 3B_(123)蛋白以及其突变体的16个真核表达质粒(S1~S16),转染BHK-21细胞,24h后对转染细胞用实验室前期筛选、保存的一株抗FMDV 3B的单克隆抗体3B4B1进行间接免疫荧光和免疫印迹分析。结果显示除S12表达的3B突变蛋白消除了与单抗3B4B1的结合能力外,其余表达的3B突变蛋白均能与单抗3B4B1发生特异性结合,表明单抗3B4B1识别的FMDV 3B蛋白关键氨基酸位于3B_1和3B_2的~2PY-GP~6中。2.在已构建的FMDV疫苗株pOZK/93-08感染性克隆的基础上,针对3B_1和3B_2的~2PY-GP~6做了一系列突变修饰,构建了6株含3B蛋白不同突变的全长重组质粒,Not I线化后分别转染表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞,共拯救到3株重组病毒。将重组病毒以及亲本毒株接种BHK-21细胞后,分别用单抗3B4B1进行间接免疫荧光和免疫印迹分析,结果显示含3B_1和3B_2突变(~4AGP~6→~4TAA~6)的重组病毒rvO/TAA完全消除了与单抗3B4B1的结合能力,而其余病毒均能与该单抗发生特异性结合。进一步分析重组病毒rvO/TAA和亲本病毒的一步生长曲线,蚀斑表型以及遗传稳定性,结果表明rvO/TAA具有与亲本病毒相似的复制能力和噬斑表型,3B_(12)蛋白的突变(~4AGP~6→~4TAA~6)对病毒复制无明显影响;rvO/TAA经过20次细胞传代后,RT-PCR测序显示突变的氨基酸稳定存在。3.成功构建含FMDV 3B_1和3B_2突变(~4AGP~6→~4TAA~6)的3B蛋白原核表达质粒,在BL21细菌中诱导表达、纯化后,连同实验室保存的FMDV rvOZK/93-08 3B蛋白进行浓缩,并用单抗3B4B1进行免疫印迹分析,结果同样显示含3B_1和3B_2突变(~4AGP~6→~4TAA~6)的O/TAA-3B蛋白不能与单抗3B4B1发生特异结合,而未突变的OZK-3B蛋白能够与该单抗发生特异性结合,说明3B_1和3B_2的突变(~4AGP~6→~4TAA~6)取消了与单抗单抗3B4B1结合能力。另外经ISA201佐剂乳化后分别免疫豚鼠和小鼠制备血清,用实验室建立的3B阻断ELISA方法进行了初步检测分析,结果显示突变3B蛋白制备的多组血清阻断值偏高(PI>50%),推测其原因在于单抗识别位点的临近位置存在干扰表位,或是原核表达蛋白的免疫原性同真核存在差异,表明配套诊断方法仍待进一步完善。综上,本研究成功鉴定了抗FMDV 3B蛋白单抗3B4B1识别的关键氨基酸,并通过口蹄疫病毒的反向遗传操作技术,成功构建了一株与亲本病毒复制能力相似的重组标记病毒,该病毒的成功构建为未来FMD标记疫苗的发展提供了材料。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2017-05-01)

张涛,郑家奎,蒋开锋,杨乾华,杨莉[2](2010)在《基于水稻产量相关QTL位点标记的杂种优势预测研究》一文中研究指出利用与水稻产量性状相关的QTL位点标记分析了15个杂交水稻亲本间(4个不育系和11个恢复系)的遗传差异,结合15个亲本所配组合(44个)的F1表现,研究了基于QTL位点的分子标记遗传距离与杂种优势的相关性。结果表明分子标记遗传距离与产量性状杂种优势呈显着正相关(r=0.31*),而与其它主要产量构成因子的优势相关不显着。为分子标记预测杂交水稻杂种优势研究奠定了基础。(本文来源于《杂交水稻》期刊2010年S1期)

优势标记位点论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

利用与水稻产量性状相关的QTL位点标记分析了15个杂交水稻亲本间(4个不育系和11个恢复系)的遗传差异,结合15个亲本所配组合(44个)的F1表现,研究了基于QTL位点的分子标记遗传距离与杂种优势的相关性。结果表明分子标记遗传距离与产量性状杂种优势呈显着正相关(r=0.31*),而与其它主要产量构成因子的优势相关不显着。为分子标记预测杂交水稻杂种优势研究奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

优势标记位点论文参考文献

[1].寻广谨.口蹄疫病毒非结构蛋白3B优势表位关键位点鉴定与缺失标记病毒构建[D].中国农业科学院.2017

[2].张涛,郑家奎,蒋开锋,杨乾华,杨莉.基于水稻产量相关QTL位点标记的杂种优势预测研究[J].杂交水稻.2010

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