(合江县人民医院检验科四川泸州646200)
艾滋病全称:获得性免疫缺陷综合征,英文简写:HIV,是一种危害性极严重的传染病,是因为受到HIV病毒感染所导致的疾病,HIV病毒是一种以攻击人体免疫系统的病毒。目前我国的艾滋病患病率一直呈现出上升的趋势,面对这种情况就需要采取相应的措施以控制艾滋病患病率上升的趋势,此刻便对我国现目前的几种HIV抗体免疫检测技术方法进行科普,通过几种HIV抗体免疫检测技术使得医院能够尽早的发现HIV病感染者,对其进行相应的治疗和健康教育,避免HIV病毒的传染传播。
一、ELISA和WB检测技术
ELISA:此种检测技术,主要是以病毒抗原包被反应板,运用间接法原理检测HIV抗体,其中这种检测技术拥有四代试剂:
第一代ELISA试剂:抗原是HIV全病毒裂解物,特点是能够有效地检测出HIV,存在一定的假阳性率。
第二代ELISA试剂:抗原在细菌或者是真菌当中表达的人工重组HIV抗原或化学合成的HIV抗原多肽,特点是单一性的抗原取代了多样性的混合抗原,其特异性要比第一代ELISA试剂好。
第三代ELISA试剂:合成的HIV抗原多肽(有些用了重组抗原),特点是应用了双抗原夹心法原理来检测HIV抗体,能够同时检测HIV-1IgG、IgM、IgA抗体,并且其敏感性与特异性都要比第一代ELISA试剂和第二代ELISA试剂还好。
第四代ELISA试剂:第四代ELISA试剂主要是在第三代的基础上针对P24抗原和HIV-1抗原一起包被固相载体,特点是能够同时检测HIV-1IgG、IgM、IgA抗体和P24抗原。
WB检测技术:WB检测技术是属于体外检测和鉴定HIV抗体的方法,主要是用于确证ELISA检测阳性的个体。其原理是以病毒抗原、重组抗原或合成肽,在SDA-PAGE电泳后转至硝酸纤维素膜上,随后再与血清或血浆中的HIV的抗体结合,最后通过显色反应来确定条带的存在。
二、HIV抗体快速检测技术
关于HIV抗体快速检测技术是建立在ELISA和WB的检测基础上发展的,其主要的特点是能够在较短的时间内通过相对简单的操作就能够及时并且较准确地得到检测结果。并且HIV抗体快速检测技术的操作较为简单,还不需要特殊的设备与专业人员,对于发展中的国家来说是最为合适的。
HIV抗体快速检测技术的原理:HIV抗体快速检测技术的原理是将将HIV-1和或HIV-2的不同抗原组合后偶联至不同固相介质,与样品中的相应抗体结合,再通过肉眼可见的变化来判断结果。一般在半小时后就会出现检测结果。并且按照检测的固相介质将其划分为:固相捕获免疫检测、免疫斑点检测、颗粒凝集检测、以及芯片检测方法,不过目前一般使用的都是颗粒凝集检测与固相捕获免疫检测。
三、非入侵性HIV抗体检测
通关有关人员进行研究,发现出血浆与血清外,人体的其他体液例如唾液、尿液等,也可以检测出HIV抗体,而这些体液对于个体来说是无创的,所以更容易接受,对于老人、小孩以及静脉吸毒者等采血困难者来说非常合适安全,还能在一定的程度下避免感染者对采样者在采样过程中造成的意外感染风险。另外还能降低样品采集与检测的成本,剩余的样品也不用按照生物危害品处理。
四、在家中采集样品的抗体检测方法
此种检测方法主要是通过必备的样品采集与保存设备使得个体能够自行采样:将指尖刺破,然后滴一滴血至经过特殊处理的滤膜上,然后将其晾干成“干血点”样品,然后邮寄到实验室,实验室对“干血点”样品进行常规的HIV检测,受测者再通过拨打实验室的电话来获取自己的HIV检测结果,获得咨询与帮助,另外唾液检测也可以运用这种方法进行检测。
五、降低灵敏度的抗体亲和力检测技术与降低成本样品混合抗体检测技术
降低灵敏度的抗体亲和力检测技术:是根据新近感染病例抗体的滴度、亲和力都比已发病例的低,故而将ELISA与快速检测方法进行适当的改善,降低检测的灵敏度,再对两种样品进行检测,从而达到辨别新近感染和既往传染的目的。这种检测技术对于流行病学来说具有很大的研究意义。
降低成本样品混合抗体检测技术:此种检测技术是将若干份的检测样品进行混合,然后进行一次标准的HIV抗体检测,如果检测出来的结果是阴性,那么每一个样品都是阴性,如果检测结果是阳性,那么就在所检测的样品里进行随机分组,再次进行此种混合检测方法,以这种方法来缩小阳性样品的范围,直到将阳性样品与阴性样品完全区分出来。这种检测方法能够降低血液筛查与群体研究的成本,并且拥有准确性,不过混合样品的数量需要根据不同地区的HIV流行状况作出相应的调整。