导读:本文包含了脑血管平滑肌论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:Wnt蛋白质类,肌细胞,平滑肌,信号通路,脑血管疾病
脑血管平滑肌论文文献综述
唐海双,闫亚洲,黄清海,刘建民[1]（2019）在《Wnt信号通路调控血管平滑肌细胞在脑血管病变中的研究进展》一文中研究指出在现代社会,脑血管疾病的高发病率和高病死率严重威胁人类的健康。作为脑血管壁的主要成分,血管平滑肌细胞广泛地参与到血管粥样硬化、脑血管狭窄、颅内动脉瘤等疾病中。Wnt蛋白是一种保守的分泌蛋白,Wnt信号通路在调节平滑肌细胞的增生、迁移、凋亡和分化的过程中发挥着重要作用,成为促进脑血管疾病发生的重要一环。该综述聚焦于Wnt信号通路与血管平滑肌细胞的关系,探讨Wnt信号通路在脑血管病变中的关键作用。(本文来源于《中国脑血管病杂志》期刊2019年01期）
姜婉,叶立,杨欣玥,沈兵,汪凯[2]（2018）在《探讨TRPP2和基质相互作用因子1在高盐诱导高血压大鼠脑血管平滑肌细胞中的变化及对血管收缩的调节作用》一文中研究指出目的研究高盐诱导高血压大鼠基底动脉血管平滑肌细胞收缩功能的改变,探讨钙库操纵的钙内流(SOCE)及其组成分子TRPP2和基质相互作用因子1(STIM1)对血管收缩的调节作用。方法应用鼠尾血压测量仪检测不同时间大鼠血压的变化;应用离体血管培养技术,分别特异性地敲低基底动脉血管中TRPP2和STIM1的蛋白表达;应用离体血管张力检测实验,利用内皮素1(ET-1)清空细胞内钙库,并用维拉帕米阻断L型钙离子通道,观察基底动脉平滑肌中SOCE的变化;应用Western蛋白印迹法和免疫组化法检测脑血管中TRPP2和STIM1的表达水平。结果高盐饮食4周后,与对照组(123.7±3.6)mmH g相比,高盐摄入组收缩压(161.5±3.2)mmHg显着升高。张力结果显示,高盐摄入增强了ET-1诱导的SOCE引起的收缩。如果TRPP2和STIM1被特异性siRNA敲低,则激动剂诱导的SOCE引起的收缩显着降低。Western蛋白印迹法和免疫组化结果显示,高血压组脑血管中TRPP2和STIM1的表达水平较对照组增高。结论高盐诱导高血压大鼠基底动脉平滑肌中SOCE所引起的收缩显着增强,可能与TRPP2和STIM1蛋白表达增加有关。(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2018年09期）
张建海[3]（2017）在《丙泊酚对人脑血管平滑肌细胞低氧再复氧损伤的保护和机制研究》一文中研究指出【研究背景】随着神经生理学、神经药理学、现代诊断学及神经外科手术技术的进步,神经外科手术越来越广泛的应用到了癫痫、脑肿瘤、脑卒中等疾病的治疗。然而,近年的研究也发现了神经外科手术会产生诸如脑血管痉挛、心功能障碍、电解质紊乱以及术后脑部缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)等并发症。因此,如何避免术后损伤和并发症,提高患者术后生存质量日益受到关注。同时也对神经外科的麻醉工作提出了更加严峻的要求:首先,根据手术类型制订更加合理的麻醉方案,最大程度地配合手术操作;其次,合理有效地将脑保护基础研究应用于临床,改善术后患者生存质量。大量研究表明,麻醉药物具有细胞保护作用。因此更好地认识其作用机制,可为临床提供更多的改善预后的策略。丙泊酚是目前临床上普遍用于麻醉诱导、麻醉维持、ICU危重患者患者镇静的一种快速、短效的静脉麻醉药。它具有麻醉诱导起效快、苏醒迅速且功能恢复完善、术后恶心呕吐发生率低等优点。近年的研究还发现丙泊酚在产生广泛中枢抑制作用的同时,还具有降低脑耗氧量、降低颅内压(intracranial pressure,ICP)和抗惊厥、抗炎症、抗氧化以及支气管舒张等特性,能够减轻神经外科手术术后脑组织和血管损伤。然而,丙泊酚对于脑血管缺氧损伤的具体保护机制尚未十分明确。平滑肌细胞广泛分布于人体消化道、呼吸道、血管和泌尿生殖等系统。在功能上通过缩短和产生张力使器官发生运动和变形,也可产生持续或紧张性收缩,使器官对抗所加负荷而保持一定的形态,前者如胃和肠道,后者如动脉血管、括约肌等。血管平滑肌细胞是血管中膜的主要成分,它不仅是维持血管壁结构完整性的物质基础,也在血管收缩、调节血管张力和血压以及血流分布等生理功能方面发挥重要作用,是血管性疾病病变的主要细胞成分之一,在疾病的发生、发展中起重要作用。血液需要依赖血管为载体输送到组织。在缺血性疾病的再灌注过程中,如何维持正常的血管功能也是面临的关键课题之一。目前大量学者着眼于研究脑缺血再灌注损伤对神经元细胞、血管内皮细胞的影响,并探讨了其可能机制,对人脑血管平滑肌细胞(human brain vascular smooth muscle cells,HBVSMC)的研究鲜有报道。目前HBVSMC细胞的离体培养是血管研究中的重要模型,为血管疾病的药理学和治疗研究提供大量信息。【研究目的】本研究以离体培养HBVSMC细胞为研究对象,建立离体HBVSMC细胞低氧再复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)模型模拟缺血再灌注,观察丙泊酚对HBVSMC细胞H/R后的细胞活性和细胞凋亡的影响,研究H/R对HBVSMC细胞的损伤及丙泊酚的保护作用。同时进一步检测相关蛋白表达,初步探讨H/R对HBVSMC细胞的损伤及丙泊酚的保护作用的可能机制。本研究有助于阐明H/R对HBVSMC细胞的损伤作用,证实丙泊酚对HBVSMC细胞H/R损伤的保护作用,为进一步防治缺血再灌注损伤提供新的理论依据。【研究方法】本研究分为以下叁部分:第一部分:建立人脑血管平滑肌细胞H/R损伤模型细胞培养:HBVSMC细胞购自中国科学院细胞库(上海,中国)。细胞培养在含10%GIBCO胎牛血清的DMEM培养液中,并添加1%青霉素和链霉素。细胞培养在37℃的湿润环境中,气体环境为5%的二氧化碳和95%的空气构成的混合气体。通过叁气培养箱和低氧/厌氧工作站控制环境氧气浓度,将细胞于低氧条件(0.5%O_2、5%CO_2和94.5%N_2)下分别暴露2h、4h、6h、8h、10h。低氧后,细胞再恢复到常氧条件(5%CO_2和95%空气)下培养16h。利用CCK-8检测细胞的生存活性,采用ELISA法测定细胞上清液SOD、LDH和MDA水平。第二部分:观察不同浓度的丙泊酚对人脑血管平滑肌细胞H/R损伤的作用H/R后HBVSMC细胞活力抑制率为40%左右的低氧再复氧条件为HBVSMC细胞最佳H/R条件。根据第一部分研究结果显示,最后确定低氧条件(0.5%O_2、5%CO_2和94.5%N_2)下暴露8h为实验所需低氧条件。将丙泊酚在低氧前加入丙泊酚组细胞培养液中,使终浓度达到25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L叁种不同浓度。将细胞于低氧条件(0.5%O_2、5%CO_2和94.5%N_2)下暴露8h。低氧后将细胞恢复到常氧条件(再氧化)再培养16h。利用CCK-8检测各组细胞的生存活性,采用ELISA法测定细胞上清液SOD、LDH和MDA水平;通过流式细胞技术检测细胞凋亡;利用Western blot方法测定细胞的Bax、Bcl-2、Caspase3、Sur2b、Kir6.1、JNK、p-JNK、mTOR和p-mTOR蛋白表达水平。第叁部分:探讨丙泊酚对人脑血管平滑肌细胞H/R损伤保护作用的机制第二部分研究发现,50μmol/L浓度的丙泊酚的细胞保护作用最佳,所以我们采用50μmol/L丙泊酚+SP600125/Everolinmus在低氧前添加入细胞培养液中。细胞在低氧条件(0.5%O_2、5%CO_2和94.5%N_2)下暴露8h。两种药物干预之后,利用CCK-8检测各组细胞的生存活性,采用ELISA法测定细胞上清液SOD、LDH和MDA水平;通过流式细胞技术检测细胞凋亡;利用Western blot方法测定细胞的Bax、Bcl-2、Caspase3、Sur2b、Kir6.1、JNK、p-JNK、mTOR和p-mTOR蛋白表达水平。【结果】第一部分:建立人脑血管平滑肌细胞H/R损伤模型与对照组相比,各低氧组细胞在H/R后细胞活性均显着降低,且随着低氧时间延长细胞活性递减。各低氧组细胞LDH、MDA含量显着升高,SOD活性显着降低。随着低氧时间的延长,各低氧组细胞LDH、MDA含量递增,相反SOD活性递减。本研究结果显示,最后确定低氧条件下暴露8h为实验所需低氧条件。第二部分:观察不同浓度的丙泊酚对人脑血管平滑肌细胞H/R损伤的作用与模型组比较,丙泊酚处理明显抑制细胞存活率的降低。丙泊酚对H/R诱导的细胞损伤的抑制作用具有一定的剂量依赖性。100μmol/L浓度的丙泊酚处理后细胞活性略有下降。因此,50μmol/L的丙泊酚细胞保护作用最佳。和模型组对比,丙泊酚的预处理显着的抑制H/R引起的LDH释放,降低MDA含量,同时显着提升SOD活性。丙泊酚显着降低H/R后细胞的凋亡率。Western blot结果显示,丙泊酚显着抑制H/R后Bax,Caspase3,Kir6.1和JNK蛋白表达的上调,同时显着抑制Bcl-2和p-mTOR蛋白表达的下调。第叁部分:探讨丙泊酚对人脑血管平滑肌细胞H/R损伤保护作用的机制在细胞低氧前分别加入丙泊酚联合JNK的抑制剂SP600125或mTOR抑制剂Everolimus进行研究。与丙泊酚预处理组对比,丙泊酚+SP600125组的细胞存活率高于丙泊酚组,进一步降低细胞凋亡率,显着提高细胞活性;Bax、Caspase3、Kir6.1和p-JNK蛋白表达相对于丙泊酚组进一步显着降低,Bcl-2和p-mTOR蛋白的表达显着增加。相反地,丙泊酚+Everolimus组抑制丙泊酚对于细胞H/R损伤后的保护作用。丙泊酚+Everolimus组细胞存活率低于丙泊酚组,使细胞凋亡率升高,显着降低细胞活性;Bax、Caspase3、Kir6.1和p-JNK蛋白表达相对于丙泊酚组显着提高,Bcl-2和p-mTOR蛋白的表达显着降低。【结论】本研究成功建立离体培养HBVSMC细胞H/R损伤模型。50μmol/L浓度的丙泊酚对该细胞H/R损伤的保护作用最佳,这种保护作用可能主要通过抑制Bax和p-JNK的表达水平,同时诱导Bcl-2和p-mTOR表达,进而抑制细胞的凋亡。(本文来源于《第二军医大学》期刊2017-05-01）
张洪荣[4]（2017）在《PPARβ/δ对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管平滑肌细胞表型转化的影响及机制研究》一文中研究指出目的:自发性蛛网膜下腔出血(SAH,subarachnoid hemorrhage)是一种高发病率、高致死致残率的神经危重症,以动脉瘤性SAH居多。以往研究认为脑血管痉挛(CVS,cerebral vasospasm)是SAH后严重并发症之一,是导致高致残致死率的首要原因,也是导致SAH后迟发性缺血性神经功能障碍(DIND,delayed ischemic neurological deficit)主要原因。目前研究则认为,SAH后脑血管自动调节功能失衡是导致DIND、脑肿胀、血管源性脑水肿等的主要原因。血管平滑肌细胞(VSMC,vascular smooth muscle cells)作为血管神经网络的基本结构和功能组成成分,在稳定脑血管紧张性、调节脑血流方面发挥着重要作用。过氧化物酶体增殖物激活受体β/δ(PPARβ/δ,peroxisome proliferator activated receptorβ/δ)被证实能调节VSMC增殖,维持血管的稳态。在本研究中,通过构建脑VSMC血红蛋白刺激和大鼠实验性SAH模型,研究PPARβ/δ对脑VSMC表型转化以及对脑血管重塑的影响,并初步探讨其潜在机制,为临床治疗迟发性脑缺血提供新的思路。方法:1.SD大鼠大脑动脉环及基底动脉原代脑VSMC,进行细胞鉴定和传代培养,6代以内的脑VSMC用于后续试验。不同浓度的血红蛋白(Hb,hemoglobin)(1μM、5μM、10μM、15μM、20μM)分别孵育生长状态良好的脑VSMC 24小时。Western Blot检测VSMC表型转化的标记蛋白α-SMA、SM-MHC、OPN、Smemb。免疫荧光双标半定量α-SMA和Smemb表达情况。2.1μM GW0742孵育脑VSMC 24小时后,或Ad-PPARβ/δ转染脑VSMC 48小时后,再以10μM Hb刺激GW0742或Ad-PPARβ/δ预处理的脑VSMC 24小时。Western Blot检测VSMC表型转化的标记蛋白α-SMA、SM-MHC、OPN、Smemb,以及PPARβ/δ表达情况。免疫荧光双标半定量α-SMA和Smemb表达情况。3.50n Msi-PPARβ/δ或NC-si RNA转染脑VSMC 48小时以后,再以10μM Hb刺激脑VSMC 24小时。Western Blot检测VSMC表型转化的标记蛋白α-SMA、Smemb,以及PPARβ/δ表达情况。4.在GW0742或Ad-PPARβ/δ分别预处理脑VSMC 30分钟之前,用1μM PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002处理细胞。再分别用10μM Hb刺激脑VSMC 24小时。Western Blot检测VSMC表型转化的标记蛋白α-SMA、SM-MHC、OPN、Smemb,以及p-Akt、Myocardin表达情况。免疫荧光双标检测SRF半定量和核转移情况。5.构建SD大鼠颈内动脉穿刺SAH模型,并通过侧脑室注射Ad-PPARβ/δ或Ad-GFP。使用改良的神经功能行为学Garcia评分和Beam Balance评分检测大鼠神经功能行为学改变。取大脑动脉环和基底动脉提取组织总蛋白,Western Blot检测VSMC表型转化的标记蛋白α-SMA、Smemb,以及PPARβ/δ表达情况。免疫荧光双标实验半定量基底动脉α-SMA、Smemb的表达情况,并测量其管壁厚度和血管内径长度。结果:1.不同浓度的Hb(1μM、5μM、10μM、15μM、20μM)分别刺激生长状态良好的脑VSMC 24小时后,Western Blot或荧光免疫双标检测VSMC表型转化的标记蛋白α-SMA、SM-MHC、OPN、Smemb。随着Hb浓度逐渐增加,α-SMA表达量逐渐下降,Smemb表达量则逐渐升高。当Hb浓度到达10μM时,α-SMA和Smemb表达量的变化达到最高峰。但进一步增加Hb浓度,α-SMA和Smemb表达量则都下降,后续试验以10μM为最佳刺激浓度。同Control组相比,Hb组α-SMA和SM-MHC表达量明显下降,相反OPN和Smemb表达量则明显升高。荧光免疫双标也证实Hb组α-SMA表达量明显下降,Smemb表达量则明显升高。2.1μM GW0742预处理脑VSMC 24h后,或Ad-PPARβ/δ预处理脑VSMC 48h后,再以10μM Hb刺激脑VSMC 24小时。Western Blot检测VSMC表型转化的标记蛋白α-SMA、SM-MHC、OPN、Smemb,以及PPARβ/δ表达情况。免疫荧光双标半定量α-SMA和Smemb表达情况。10μM Hb刺激脑VSMC 24小时,Hb组α-SMA和SM-MHC表达量明显下降,相反OPN和Smemb表达量则明显升高,同时PPARβ/δ的表达量也明显下降。但GW0742组或Ad-PPARβ/δ组α-SMA和SM-MHC表达量则明显逆转,出现升高的现象,而OPN和Smemb表达量则出现明显的下降。免疫荧光双标证实GW0742组α-SMA表达升高,Smemb表达量则下降。3.50n M si-PPARβ/δ或NC-si RNA转染脑VSMC 48小时以后,再以10μM Hb刺激脑VSMC 24小时。Western Blot检测VSMC表型转化的标记蛋白α-SMA、Smemb,以及PPARβ/δ表达情况。相比于NC-si RNA组,si-PPARβ/δ组PPARβ/δ表达明显被抑制。虽然si-PPARβ/δ进一步抑制了PPARβ/δ表达量,但α-SMA和Smemb的表达量相比于NC-si RNA组或Hb组无明显变化。4.1μM PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002预处理脑VSMC后,p-Akt表达量明显下降。同时GW0742或Ad-PPARβ/δ抑制Hb诱导的脑VSMC表型转化的作用明显被抑制,相较于无LY294002预处理组α-SMA和SM-MHC表达量明显下降,而OPN和Smemb表达量则明显上升。同时,LY294002预处理组Myocardin表达量也明显下降。免疫荧光双标实验,Ad-PPARβ/δ明显促进SRF向核内转移,而LY294002预处理后则明显抑制了SRF的核转移。5.随着SAH造模后时间逐渐增加,α-SMA表达量逐渐降低,而Smemb表达量则逐渐上升。但是第3天和第5天表达量则无明显差异,后续实验则以3天为观测时间。SAH后3天PPARβ/δ表达明显下降,同时α-SMA表达量也下降。但Ad-PPARβ/δ组,PPARβ/δ表达明显上升,同时上调α-SMA的表达,抑制Smemb的表达。基底动脉免疫荧光实验证实,同SAH组或Ad-GFP组相比,Ad-PPARβ/δ组,基底动脉管壁厚度明显降低,而血管内径则明显增加。改良的神经功能行为学Garcia评分和Beam Balance神经行为学评分证实,Ad-PPARβ/δ能明显改善SD大鼠SAH后神经功能的缺失,促进神经功能的恢复。结论:1.Hb能明显促进体外原代培养的脑VSMC由收缩型向合成分泌型转换,使收缩型标记蛋白α-SMA、SM-MHC表达量明显下降,而合成分泌型标记蛋白OPN和Smemb表达量明显上升。2.PPARβ/δ能明显抑制Hb诱导的脑VSMC表型转化,使收缩型标记蛋白α-SMA、SM-MHC表达量明显上升,同时抑制合成分泌型标记蛋白OPN和Smemb的表达。3.PPARβ/δ通过激活PI3K/AKT信号通路,促进p-Akt、Myocardin表达和SRF核转移,来发挥稳定脑VSMC表型的作用。4.PPARβ/δ明显抑制实验性SD大鼠SAH后脑VSMC表型转化,同时改善基底动脉病理性血管重塑:降低血管管壁厚度;增加血管内径长度,并促进SD大鼠神经功能学的恢复。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2017-05-01）
何蔺[5]（2016）在《外源性Slit3及其受体Robo1对人脑血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响及调控机制探讨》一文中研究指出心血管疾病是目前威胁全世界人类健康的一类重大疾病,动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是心血管疾病的主要病因。动脉粥样硬化的发病机制非常复杂,曾有多种学说从不同角度来阐述。目前有研究认为,血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)在AS形成过程中起到很重要的作用,VSMCs的异常增殖和迁移并分泌细胞外基质促使脂质条纹转变为成熟的纤维脂质斑块是动脉粥样硬化发生发展的基本特征之一。研究证实,VSMCs的增殖和迁移受多种炎症因子、生长因子的共同调控。最新研究发现,在血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)和VSMCs上检测到神经轴突导向分子Slit3的表达,Slit3作为一种新的血管活性因子,可通过与其受体Robo4结合调节内皮细胞的增殖和迁移,而Slit3是否也以类似的方式发挥调控VSMCs的功能,目前尚缺乏实验数据证实。本实验将人脑血管平滑肌细胞(human brain vascular smooth muscle cells,HBVSMCs)作为实验对象,检测HBVSMCs上Slit3及其受体Robo的表达情况,并观测外源性重组人Slit3蛋白对HBVSMCs增殖、迁移的影响,探讨Slit3结合的受体Robo及其发挥调控HBVSMCs增殖、迁移作用的可能分子机制,为进一步探索Slit3蛋白与AS发生发展关系的相关研究奠定一定的理论基础。本实验分为以下叁个部分:第一部分slit3/robo基因和蛋白在hbvsmcs上的表达目的:检测slit3、robo基因和蛋白在hbvsmcs上的表达情况。方法:在体外条件下培养生长状态良好的hbvsmcs,提取细胞总rna和总蛋白,分别采用rt-qpcr法和wb法检测slit3及其受体robo的表达情况。结果:采用rt-qpcr法和wb法分别检测到hbvsmcs上有神经轴突导向分子slit3及robo1、robo4基因和蛋白的表达。结论:hbvsmcs上有slit3及robo1、robo4基因和蛋白的表达。第二部分外源性slit3对hbvsmcs增殖、迁移的影响目的:检测外源性重组人slit3蛋白对hbvsmcs增殖和迁移的影响。方法:设置阴性对照组含bsa86ng/ml,实验组分别含外源性slit30ng/ml、30ng/ml、60ng/ml、90ng/ml、120ng/ml以及阳性对照组含pdgf10ng/ml的无血清dmem培养基刺激hbvsmcs,利用cck-8法和transwell小室检测外源性slit3对hbvsmcs增殖和迁移的影响。结果:1、细胞增殖检测:外源性slit3可促进hbvsmcs的增殖活性,在slit390ng/ml细胞增殖活性最大,与阴性对照组比较,差异具有统计学意义(p<0.05),与阳性对照组比较,差异无统计学意义(p>0.05)。2、细胞迁移检测:外源性slit3可促进hbvsmcs的迁移活性,在slit390ng/ml细胞迁移活性最大,与阴性对照组比较差异具有统计学意义(p<0.05),与阳性对照组比较差异无统计学意义(p>0.05)。结论:外源性slit3可促进hbvsmcs的增殖和迁移。第叁部分slit3与受体robo1结合及其调控hbvsmcs增殖、迁移的机制探讨目的:1、探讨slit3/robo信号分子调控hbvsmcs增殖、迁移的可能传导机制。2、探讨slit3可能结合的受体robo1或(和)robo4。方法:1、给予浓度为90ng/ml的外源性slit3刺激hbvsmcs,分别于刺激细胞后0min、5min、15min、30min和60min收集细胞,提取细胞蛋白,利用wb法检测rac1和rhoa总蛋白及其活化蛋白的表达情况。2、robo1sirna和robo4sirna的构建和转染:(1)以hbvsmcs作为靶细胞,robo1和robo4基因作为靶基因,用cy3标记靶序列。从基因库中搜索人的robo1mrna和robo4mrna全基因序列,将搜索的所有序列利用blast软件进行同源性分析。(2)将比对好的robo1mrna和robo4mrna全基因序列作为模版,根据sirna的设计原则,分别设计叁段表达robo1和robo4特异shrna的基因序列,采用化学合成的方法分别合成叁条双链sirna,分别命名为sirnarobo1-1、sirnarobo1-2、sirnarobo1-3、sirnarobo4-1、sirnarobo4-2、sirnarobo4-3,同时设立阴性对照组、nc-sirna组、sirnarobo1/4转染组。(3)采用脂质体介导方法将sirna转染hbvsmcs,并利用荧光显微镜观察转染情况,估计转染效率,筛选最佳转染浓度。(4)转染48小时后,利用rt-qpcr和wb法检测各组robo1和robo4基因的表达情况,筛选最佳干扰片段。3、设置以下分组:(1)空白对照组(2)nc-sirna组(3)robo1sirna组(4)robo4sirna组(5)robo1sirna组+robo4sirna组,各组加入含slit390ng/ml无血清dmem培养基,作用48h后按第二部分方法分别行cck-8和transwell检测,检测各组细胞增殖和迁移活性。4、设置实验分组同前,各组加入含slit390ng/ml无血清dmem培养基,作用1h后收集细胞,提取细胞总蛋白,利用wb检测rac1和rhoa蛋白及其活化蛋白的表达情况。结果:1、外源性slit3作用于hbvsmcs后,a-rac1蛋白和a-rhoa蛋白均随着slit3作用时间的延长表达逐渐增多,在作用60min时表达量达最大值。2、转染48h后利用荧光显微镜观察hbvsmcs,可见有较弱的红色荧光分散在细胞质,说明转染成功。镜下观察当cy3-sirna的浓度为50nm时荧光亮度较亮,被转染细胞数最多,转染效率最大,约为80%。3、sirnarobo1和sirnarobo4干扰片段均可分别抑制robo1和robo4基因和蛋白的表达,与阴性对照组相比差异有统计学意义(p<0.05),其中sirnarobo1-3和sirnarobo4-1片段分别对robo1和robo4基因表达的抑制程度较大。4、转染后细胞增殖、迁移检测:转染robo1sirna组及robo1sirna和robo4sirna共转染组hbvsmcs的增殖、迁移活性受到抑制,与空白对照组比较差异有统计学意义(p<0.05);转染robo4sirna片段和ncsirna片段后hbvsmcs的增殖、迁移活性无明显影响,与空白对照组比较差异无统计学意义(p>0.05)。5、robo1sirna转染组及robo1sirna和robo4sirna共转染组中a-rac1蛋白的表达受到明显抑制,与空白对照组相比差异有统计学意义(p<0.05);nc-sirna转染组和robo4sirna转染组与空白对照组相比,a-rac1蛋白的表达水平相当,差异无统计学意义(p>0.05);robo4sirna转染组及robo1sirna和robo4sirna共转染组,a-rhoa蛋白的表达受到抑制,与空白对照组相比差异有统计学意义(p<0.05);nc-sirna转染组和robo1sirna转染组与空白对照组相比,a-rhoa蛋白的表达水平相当,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1、外源性Slit3可刺激Rho GTPase家族中Rac1和RhoA活化蛋白的表达。2、CY3-siRNA的最佳转染浓度为50nM。3、siRNA Robo1和siRNA Robo4干扰片段可以下调Robo1和Robo4基因的表达。4、神经轴突导向分子Slit3通过与其受体Robo1结合促进HBVSMCs的增殖及迁移。5、Slit3通过与其受体Robo1结合后激活Rho GTPase家族中Rac1分子的表达从而发挥促进HBVSMCs增殖、迁移的效应。6、Slit3可能通过与Robo4结合刺激Rho A的表达对HBVSMCs的其他生物学活动发挥作用。(本文来源于《川北医学院》期刊2016-05-01）
石瑜,王晓玲,王敏,李传芬,曹秉振[6]（2016）在《慢病毒介导的HTRA1基因稳定过表达人脑血管平滑肌细胞株的建立》一文中研究指出目的:构建并包装针对HTRA1基因以及其1091T>C突变基因(HTRA1-Mut)的过表达慢病毒载体,以及建立稳定表达HTRA1及HTRA1-Mut基因的人脑血管平滑肌细胞(HBVSMC)株。方法:采用RT-PCR方法扩增HTRA1及HTRA1-Mut基因片段并将其连接于GV287载体质粒,采用慢病毒包装叁质粒系统(GV287/p Helper 1.0/p Helper 2.0)转染293T细胞,收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液并标定病毒滴度,慢病毒感染经培养和鉴定的HBVSMC细胞株。结果:成功构建含HTRA1及HTRA1-Mut基因的慢病毒重组载体,PCR鉴定阳性的克隆进行测序和BLAST比对分析显示与源基因序列一致,并能够有效的感染并在293T细胞中表达。表达载体包装后测定病毒滴度为:2E+8 TU/mL。过表达慢病毒感染后HBVSMC有荧光表达,并且荧光率达80%以上,细胞生长良好传后细胞几乎无死亡现象。结论:成功构建了过表达HTRA1及HTRA1-Mut基因的慢病毒表达载体,得到了较高滴度的病毒悬液,建成了稳定表达HTRA1及HTRA1-Mut基因的HBVSMC细胞株,为进一步探讨HTRA1基因及突变后细胞的功能变化提供了良好的研究工具。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2016年12期）
石瑜,王晓玲,王敏,李传芬,曹秉振[7]（2016）在《慢病毒介导的HTRA1突变基因感染对人脑血管平滑肌细胞内氧化应激反应的影响》一文中研究指出检测HTRA1及HTRA1-Mut基因慢病毒载体转染HBVSMC后,HBVSMC内氧化应激水平的变化。以HTRA1及HTRA1-Mut基因慢病毒载体转染HBVSMC后,在特定的时间点收集NC、OE-WT HTRA1及OE-MU HTRA1叁组细胞的总RNA及总蛋白,分别用RT-PCR和Western Blot的方法检测叁组细胞的NOX4 mRNA及蛋白水平的表达情况;用DCFH-DA法检测叁组细胞内的活性氧水平。从定量PCR结果可以看出,人脑血管平滑肌细胞中,OE-MU组NOX4基因表达丰度是NC组的2.015倍。从Western blot结果可以看出,在正常的人脑血管平滑肌细胞中NOX4蛋白水平表达较低,而在慢病毒LV-HRTA1及LV-HRTA1-MUT感染后NOX4蛋白表达水平增高。在正常的人脑血管平滑肌细胞中ROS水平表达较低,而在慢病毒LVHRTA1及LV-HRTA1-MUT感染后ROS蛋白表达水平增高,在突变型病毒感染细胞组表现更为明显。说明:1HTRA1突变型基因感染人脑血管平滑肌细胞后,细胞内活性氧产量增加,NOX4 mRNA水平的表达正常细胞升高,但较HTRA1野生型基因无明显差别;NOX4在蛋白水平表达较其他两组均升高;2HTRA1突变型基因感染的人脑血管平滑肌细胞出现增殖减少、迁移活力降低以及凋亡增加可能与细胞内的氧化应激有关,为进一步研究CARASIL发病机制奠定基础。(本文来源于《科学技术与工程》期刊2016年09期）
石瑜,胡怀强,王晓玲,王敏,曹秉振[8]（2015）在《HTRA1基因突变对人脑血管平滑肌细胞的增殖、迁移、凋亡的影响》一文中研究指出目的探讨HTRA1及HTRA1-Mut基因慢病毒载体转染对人脑血管平滑肌细胞(HBVSMC)增殖、迁移及凋亡的影响。方法将HBVSMC分为叁组,正常的人脑血管平滑肌细胞组(NC)、野生型病毒感染细胞组(OE-WT HTRA1)及突变型病毒感染细胞组(OE-MU HTRA1),细胞培(本文来源于《中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（上）》期刊2015-09-18）
黎小妍,张二红,利亭婷,张平[9]（2015）在《普伐他汀对大鼠脑血管平滑肌细胞增殖的影响》一文中研究指出目的探讨普伐他汀(Pravastatin)对内皮素-1(ET-1)诱导的大鼠脑血管平滑肌细胞(basilar vascular smooth muscle cells,BVSMCs)增殖的比较。方法原代培养大鼠脑基底动脉平滑肌细胞,采用CCK-8(cell counting kit-8)、Brd U(5-bromo-2'-deoxyuridine)掺入实验检测普伐他汀和辛伐他汀和对ET-1诱导平滑肌细胞增殖的作用。结果普伐他汀和辛伐他汀均可以浓度依赖性地抑制ET-1诱导的BVSMCs增殖,相对吸光度百分比分别为:102.4%±8.9%,119.3%±9.8%,和对照组(132.5%±4.5%)相比差异均有显着性意义(P<0.01),普伐他汀组和辛伐他汀组比较二者差异也有显着性意义(P<0.01)。结论普伐他汀和辛伐他汀均可以抑制大鼠脑血管平滑肌细胞增殖,辛伐他汀的作用效果强于普伐他汀。(本文来源于《今日药学》期刊2015年07期）
吕艳,杜元灏,徐彦龙,崔景军,杨丽红[10]（2015）在《电针“水沟”穴对大脑中动脉梗死大鼠脑血管平滑肌蛋白激酶C的影响》一文中研究指出目的:观察针刺"水沟"穴对大脑中动脉梗死(MCAO)大鼠蛋白激酶C(PKC)蛋白水平及活性的影响,探讨针刺"水沟"调节血管平滑肌收缩的分子机制。方法:Wistar大鼠随机分为模型组、针刺组、假手术组及空白组,每组分0.5h、1h、3h、6h和12h5个亚组。Longa线栓法复制MCAO模型。针刺组电针"水沟"穴,刺激20min。用免疫组化法检测PKC在血管平滑肌细胞表达水平,用ELISA法检测PKC活性。结果:PKC表达水平模型组较空白组增加(P<0.05),各时相点针刺组均低于模型组(P<0.05);模型组PKC相对活性值较空白组上升(P<0.05),针刺组与模型组比较,PKC活性显着降低(P<0.05)。结论:MCAO大鼠血管平滑肌PKC蛋白水平和活性增加,可能参与调节大脑中动脉平滑肌收缩。针刺MCAO大鼠"水沟"穴,下调PKC蛋白水平和活性,可能缓解大脑中动脉平滑肌痉挛。(本文来源于《针刺研究》期刊2015年03期）
脑血管平滑肌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究高盐诱导高血压大鼠基底动脉血管平滑肌细胞收缩功能的改变,探讨钙库操纵的钙内流(SOCE)及其组成分子TRPP2和基质相互作用因子1(STIM1)对血管收缩的调节作用。方法应用鼠尾血压测量仪检测不同时间大鼠血压的变化;应用离体血管培养技术,分别特异性地敲低基底动脉血管中TRPP2和STIM1的蛋白表达;应用离体血管张力检测实验,利用内皮素1(ET-1)清空细胞内钙库,并用维拉帕米阻断L型钙离子通道,观察基底动脉平滑肌中SOCE的变化;应用Western蛋白印迹法和免疫组化法检测脑血管中TRPP2和STIM1的表达水平。结果高盐饮食4周后,与对照组(123.7±3.6)mmH g相比,高盐摄入组收缩压(161.5±3.2)mmHg显着升高。张力结果显示,高盐摄入增强了ET-1诱导的SOCE引起的收缩。如果TRPP2和STIM1被特异性siRNA敲低,则激动剂诱导的SOCE引起的收缩显着降低。Western蛋白印迹法和免疫组化结果显示,高血压组脑血管中TRPP2和STIM1的表达水平较对照组增高。结论高盐诱导高血压大鼠基底动脉平滑肌中SOCE所引起的收缩显着增强,可能与TRPP2和STIM1蛋白表达增加有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
脑血管平滑肌论文参考文献
[1].唐海双,闫亚洲,黄清海,刘建民.Wnt信号通路调控血管平滑肌细胞在脑血管病变中的研究进展[J].中国脑血管病杂志.2019
[2].姜婉,叶立,杨欣玥,沈兵,汪凯.探讨TRPP2和基质相互作用因子1在高盐诱导高血压大鼠脑血管平滑肌细胞中的变化及对血管收缩的调节作用[J].中国药理学与毒理学杂志.2018
[3].张建海.丙泊酚对人脑血管平滑肌细胞低氧再复氧损伤的保护和机制研究[D].第二军医大学.2017
[4].张洪荣.PPARβ/δ对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管平滑肌细胞表型转化的影响及机制研究[D].重庆医科大学.2017
[5].何蔺.外源性Slit3及其受体Robo1对人脑血管平滑肌细胞增殖、迁移的影响及调控机制探讨[D].川北医学院.2016
[6].石瑜,王晓玲,王敏,李传芬,曹秉振.慢病毒介导的HTRA1基因稳定过表达人脑血管平滑肌细胞株的建立[J].现代生物医学进展.2016
[7].石瑜,王晓玲,王敏,李传芬,曹秉振.慢病毒介导的HTRA1突变基因感染对人脑血管平滑肌细胞内氧化应激反应的影响[J].科学技术与工程.2016
[8].石瑜,胡怀强,王晓玲,王敏,曹秉振.HTRA1基因突变对人脑血管平滑肌细胞的增殖、迁移、凋亡的影响[C].中华医学会第十八次全国神经病学学术会议论文汇编（上）.2015
[9].黎小妍,张二红,利亭婷,张平.普伐他汀对大鼠脑血管平滑肌细胞增殖的影响[J].今日药学.2015
[10].吕艳,杜元灏,徐彦龙,崔景军,杨丽红.电针“水沟”穴对大脑中动脉梗死大鼠脑血管平滑肌蛋白激酶C的影响[J].针刺研究.2015