本文主要研究内容
作者陈运通,陈赫明,付佳雯,庞宇,郑君,贾洪林（2019）在《基于生长素诱导降解系统条件性敲除弓形虫ATG6蛋白的研究》一文中研究指出：为构建生长素诱导降解系统的弓形虫条件性基因缺失虫株,本研究首先利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选获得Tg Ku80基因缺失虫株,然后采用该缺失虫株,利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选,将生长素诱导降解因子(AID)插入该弓形虫Tg ATG6基因序列的5’端得到TgATG6条件性敲除虫株TgATG6-i KD。PCR扩增及测序结果显示,以TgATG6-iKD虫株为模板可扩增出AID标签,而在野生型虫株中,不能有效扩增该靶序列,经测序验证也得到相符结果,表明AID标签序列能够高效定点插入到弓形虫Tg Ku80基因缺失虫株中;通过蛋白免疫印迹试验能够在TgATG6条件性敲除虫株检测到AID标签和TgATG6蛋白的融合表达;蛋白免疫印迹试验及间接免疫荧光实验结果显示,利用生长素(NAA)能够快速诱导融合表达蛋白的降解。本研究通过蛋白N端融合AID共表达,建立了高效条件性敲除弓形虫基因的方法,为进一步研究弓形虫相关基因的功能奠定基础。
Abstract
wei gou jian sheng chang su you dao jiang jie ji tong de gong xing chong tiao jian xing ji yin que shi chong zhu ,ben yan jiu shou xian li yong CRISPR/Cas9fang fa he liu shi xi bao shu shai shua huo de Tg Ku80ji yin que shi chong zhu ,ran hou cai yong gai que shi chong zhu ,li yong CRISPR/Cas9fang fa he liu shi xi bao shu shai shua ,jiang sheng chang su you dao jiang jie yin zi (AID)cha ru gai gong xing chong Tg ATG6ji yin xu lie de 5’duan de dao TgATG6tiao jian xing qiao chu chong zhu TgATG6-i KD。PCRkuo zeng ji ce xu jie guo xian shi ,yi TgATG6-iKDchong zhu wei mo ban ke kuo zeng chu AIDbiao qian ,er zai ye sheng xing chong zhu zhong ,bu neng you xiao kuo zeng gai ba xu lie ,jing ce xu yan zheng ye de dao xiang fu jie guo ,biao ming AIDbiao qian xu lie neng gou gao xiao ding dian cha ru dao gong xing chong Tg Ku80ji yin que shi chong zhu zhong ;tong guo dan bai mian yi yin ji shi yan neng gou zai TgATG6tiao jian xing qiao chu chong zhu jian ce dao AIDbiao qian he TgATG6dan bai de rong ge biao da ;dan bai mian yi yin ji shi yan ji jian jie mian yi ying guang shi yan jie guo xian shi ,li yong sheng chang su (NAA)neng gou kuai su you dao rong ge biao da dan bai de jiang jie 。ben yan jiu tong guo dan bai Nduan rong ge AIDgong biao da ,jian li le gao xiao tiao jian xing qiao chu gong xing chong ji yin de fang fa ,wei jin yi bu yan jiu gong xing chong xiang guan ji yin de gong neng dian ding ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国预防兽医学报的陈运通,陈赫明,付佳雯,庞宇,郑君,贾洪林，发表于刊物中国预防兽医学报2019年10期论文，是一篇关于弓形虫论文,植物生长激素论文,条件性敲除论文,中国预防兽医学报2019年10期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国预防兽医学报2019年10期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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