导读:本文包含了感觉神经束论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:组织工程骨,感觉神经,血管化,降钙素基因相关肽
感觉神经束论文文献综述
陈思圆[1]（2011）在《血管束、感觉神经束分别植入组织工程骨修复兔股骨大段骨缺损对神经肽受体的表达研究》一文中研究指出研究目的由于创伤、感染、肿瘤等因素所致的骨缺损、畸形愈合、延期愈合或骨不连等一直是威胁人类身体健康的医学问题,所以大段节段性骨缺损的修复仍是一个重要的临床问题。当前临床治疗方法主要包括骨材料移植(自体移植,同种异体移植或异种移植)、各种生物材料的植入,骨传输生长方法,但是这些技术均存在一定的缺陷和不足。而骨组织工程技术的发明应用则为人类治愈骨不连带来了希望,但如何构建一个近似生理条件的组织工程骨是组织工程领域的研究重点。带有血供和神经支配的骨移植物对大段骨缺损有明确的修复效果,因为充足的血液供应是保证组织工程骨存活的先决条件；而完善的神经支配起到调节与反馈作用,因而也是构建理想组织工程骨的要素之一。本课题组前期的大量实验研究显示在组织工程骨中植入血管束可以有效促进新生骨形成,另有实验研究证实植入感觉神经束也能促进新生骨形成。一方面,植入的血管束和感觉神经可以为支架材料上的种子细胞提供氧气和营养,另一方面,血管束和感觉神经束可以释放多种神经肽,这些神经肽可能通过作用在种子细胞细胞膜上的神经肽受体调节种子细胞的增值和分化。本研究通过检测血管束、感觉神经束分别植入组织工程骨内神经肽受体的表达情况,为今后研究骨形成与血管、神经再生相互关系提供一定的实验依据。实验方法第一部分兔来源的骨髓间充质干细胞和向成骨分化的骨髓间充质干细胞中神经肽受体的表达研究1.抽取健康新西兰大白兔双侧髂骨处抽取红骨髓,用全骨髓培养法原代培养骨髓间充质干细胞(Marrow mesenchymal cells, BMSCs),培养至第3代时,取一部分BMSCs向成骨方向诱导培养21天。并检测碱性磷酸酶和钙结节鉴定分化方向。2.分别取培养至第3代的BMSCs和成骨诱导培养的BMSCs,按照试剂盒说明进行免疫荧光染色(FITC)检测降钙素基因相关肽Ⅰ型受体(Calcitonin gene related peptide type I receptor, CGRP1R), P物质Ⅰ型受体(Neurokinin-1 receptor, NK1R),神经肽Yl型受体(Neuropeptide Y type I receptor, NPY1R)和VIP1型受体(Vasoactive intestinal peptide type I receptor, VIPR1)在细胞中的表达情况。3.分别取培养至第3代的BMSCs和成骨诱导培养的BMSCs,随后行常规总RNA的提取,并取总RNA样本进行电泳检测。另取各组总RNA逆转录合成cDNA。在荧光定量PCR仪上进行扩增,以β-actin作为内参物,计算CGRP1R、NK1R、NPY1R、VIPR1的相对表达强度。第二部分血管束、感觉神经束分别植入组织工程骨修复兔股骨大段骨缺损对神经肽受体的短期表达研究1.健康新西兰大白兔54只,5个月龄,雌雄不限,体重2～3kg,购自南方医院实验动物中心。按随机数字表法分为感觉神经束植入组(Ⅰ组)、血管束植入组(Ⅱ组)、单纯组织工程骨对照组(Ⅲ组),每组各18只。每只兔于双侧髂骨处抽取红骨髓5ml(内含骨髓间充质干细胞),将骨髓间充质干细胞(BMWCs)经过原代培养(全骨髓培养法)、传代培养,取第3代骨髓间充质干细胞向成骨方向诱导7天后,按4×106～6×106个/ml的密度,采用负压吸引接种法将细胞接种到多孔β-磷酸叁钙支架上(每个支架细胞数约1×106个),体外构建组织工程骨。2.于所有动物左侧股骨前外侧做一纵形切口,逐层分离显露股骨。于股骨前外侧放置已塑形好的6孔普通钢板,于钢板第2、3孔之间用线锯截取1.5cm长股骨,在骨缺损处植入组织工程骨(自体BMSCs构建)后逐层缝合伤口。再于股骨内侧中央做一小的纵切口,逐层显露,在股叁角内显露和分离出隐神经和股血管束,将隐神经游离适当长度后远端锐性切断并植入组织工程骨的侧槽内,为Ⅰ组；将股血管束游离适当距离后无须切断,顺行植入组织工程骨侧槽内并用普理灵线固定,为Ⅱ组；同时游离出大隐神经和股血管束,但不植入侧槽内,为Ⅲ组(空白对照组)。3.于术后第4、8、12w将动物(每组每个时间点6只)术区摄X光片(投照距离lm,投照条件46KV,50mA,曝光时间0.14s),观察骨缺损愈合情况与材料降解情况,并根据修复骨缺损的情况的进行评分。4.于术后第4、8、12w处死每组2只动物,完整截取组织工程骨段股骨,行大体标本观察。以40g/L多聚甲醛固定,150g/L乙二胺四乙酸脱钙后石蜡包埋,行5μm连续横行及纵行切片,切片标上序号,分别进行HE染色和Masson染色,对比观察成骨和血管生成情况。此外,按SABC试剂盒说明书行免疫组织化学染色检测CGRP1R、NK1R、NPY1R、VIPR1的表达情况,用已知CGRP1R, NK1R, NPY1R, VIPR1阳性表达的切片作阳性对照,PBS液代替抗液作阴性对照。每只动物随机取4张相同序数的CGRP1R、NK1R、NPY1R, VIPR1免疫组化染色切片,光镜下观察阳性表达部位与表达强弱并拍照。5.于术后第4、8、12w处死每组4只动物,迅速剔除组织工程骨周围软组织,在组织工程骨两端与正常骨交界处、组织工程骨中点共3个位置钳取新鲜骨组织约40mg,加入1ml Trizol液研磨,用枪吹打几次,尽量让细胞全部裂解,室温放置5分钟,随后按照试剂盒说明书进行常规总RNA的提取,并取总RNA样本进行电泳检测。另取各组总RNA 3μL,按逆转录kit操作步骤合成cDNA。在荧光定量PCR仪上进行扩增,反应条件如第一部分所述。采用2一△△Ct法,以β-actin作为内参物,计算CGRP1R、NK1R、NPY1R、VIPR1的相对表达强度。引物序列如第一部分所述。6.数据处理及统计学分析靶基因的表达量F=2—△△ct,△△ct=(待测样品的目的基因的ct的平均—待测样本的看家基因的ct的平均)—(对照样品的目的基因的ct的平均一对照样本的看家基因的ct的平均)。7.利用统计软件SPSS13.0对数据进行统计学处理,用3×3析因设计方差分析对处理因素和时间的主效应和交互效应做统计,若有显着性差异则用单向方差分析(One-way ANOVA)对同一时间点各组间的mRNA表达量值和同一组间不同时间点的mRNA表达量值进行比较,并用LSD法行多重比较分析。P<0.05为具有显着性差异。第叁部分血管束、感觉神经束分别植入组织工程骨修复兔股骨大段骨缺损对神经肽受体的中长期表达研究1.健康新西兰大白兔36只,5个月龄,雌雄不限,体重2-3kg,购自南方医院实验动物中心。按随机数字表法分为感觉神经束植入组(Ⅰ组)、血管束植入组(Ⅱ组)、单纯组织工程骨对照组(Ⅲ组),每组各12只。每只兔于双侧髂骨处抽取红骨髓5ml(内含骨髓间充质干细胞),如第二部分所述进行原代培养,成骨诱导培养,采用负压吸引接种法将细胞接种到多孔p-磷酸叁钙支架上(每个支架细胞数约1×106个),体外构建组织工程骨。2.动物模型的制备和分组详见第二部分。3.于术后第24,48w将动物(每组每个时间点6只)术区摄X光片(投照距离lm,投照条件46KV,50mA,曝光时间0.14s),观察骨缺损愈合情况与材料降解情况,并根据修复骨缺损的情况的进行评分,并联系第二部分的评分,得出一个连续的评分走形趋势。4.于术后第24,48w每组处死2只动物,完整截取组织工程骨段股骨,行大体标本观察。HE和Masson染色检测成骨情况,免疫组织化学染色检测CGRP1R、NK1R、NPY1R、VIPR1的表达情况,方法同前。5.于术后第24,48w每组处死4只动物,迅速剔除组织工程骨周围软组织,在组织工程骨两端与正常骨交界处、组织工程骨中点共3个位置钳取新鲜骨组织约40mg,加入1ml Trizol液研磨,用枪吹打几次,尽量让细胞全部裂解,室温放置5分钟,随后按照试剂盒说明书进行常规总RNA的提取,用荧光定量PCR法检测各组CGRP1R、NK1R、NPY1R、VIPR1 mRNA的表达情况,并可联系第二部分的对应的结果,得出一个短期到长期的表达水平的趋势。6.数据处理及统计学分析靶基因的表达量F=2—△△ct,△△ct=(待测样品的目的基因的ct的平均—待测样本的看家基因的ct的平均)—(对照样品的目的基因的ct的平均一对照样本的看家基因的ct的平均)。7.利用统计软件SPSS13.0对数据进行统计学处理,用3×2析因设计方差分析对处理因素和时间的主效应和交互效应做统计,若有显着性差异则用单向方差分析(One-way ANOVA)对同一时间点各组间的mRNA表达量值和同一组间不同时间点的mRNA表达量值进行比较,并用LSD法行多重比较分析。P<0.05为具有显着性差异。结果第一部分兔来源的骨髓间充质干细胞和向成骨分化的骨髓间充质干细胞中神经肽受体的表达研究1.原代培养后第5天,在倒置显微镜下可见细胞成集落样生长,细胞形状成长梭形,培养第7天细胞长满培养瓶,并行传代培养,传代后细胞增值增快。成骨诱导分化第3代细胞后,细胞的增值明显减慢,细胞形状变为多角形,碱性磷酸酶染色呈阳性,阳性部位位于胞浆内；茜素红染色示钙结节染色阳性。2.免疫荧光染色检测神经肽受体在BMSCs和成骨诱导培养21天的BMSCs上表达的观察结果：荧光倒置显微镜下可见绿色的各神经肽受体荧光染色阳性表达位于细胞核周围的胞膜上,呈点片状分布。3.荧光定量PCR检测神经肽受体mRNA在BMSCs和成骨诱导培养21天的BMSCs上表达的结果：BMSCs和成骨诱导培养21天的BMSCs均能检测出各神经肽受体mRNA的表达。第二部分血管束、感觉神经束分别植入组织工程骨修复兔股骨大段骨缺损对神经肽受体的短期表达研究1.X线观察：术后4周后,各组骨缺损处的材料影密度降低,材料周围均有模糊的骨痂影,而工Ⅲ组(空白对照组)的骨痂量少于各实验组；术后8周后,各组的骨痂量进一步增加,但Ⅲ组(空白对照组)的骨痂量仍少于各实验组,Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)骨缺损处的材料开始被吸收降解；术后12周后,Ⅱ组(血管束植入组)的骨痂量开始减少,开始进入塑形期,而Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅲ组(空白对照组)的骨痂量仍有增多的迹象,各组骨缺损处的生物材料有明显的被吸收和降解的痕迹。X线评分示：不同时间之间X线评分值有显着性差异(F=100.854,p=0.000)在叁组均如此,F值分别为44.148,29.757,32.801,均为p<0.05；从各时间点看,每一时间点各组的X线阻射值均有显着性差异(F=29.377为p=0.000),在叁个时间点内均如此,F值分别为4.876、21.628、9.656,均为p<0.05,不同时间点和分组之间存在着交互效应(F=3.986,p=0.007)。各组随着时间的延长X线评分值逐步升高；对每一时间点用LSD法进行多重比较可见,在4周时,Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅲ组(空白对照组)间无统计学差异(p>0.05),而Ⅱ组(血管束植入组)的评分明显高于Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅲ组(空白对照组)的评分(p<0.05),在8周和12周时,Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)的评分值之间无统计学差异(p>0.05),而高于Ⅲ组(空白对照组)的评分(p<0.05)。2.组织学检测成骨情况(HE和Masson染色)：HE染色中粉红色的区域为新生骨组织,内可见骨陷窝和成骨细胞；而在Masson染色中,绿染的区域为新生胶原组织。显示随着时间的延长,各组成骨的面积也进一步增加,在个时间点,Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)的成骨面积均要多于Ⅲ组(空白对照组)。3.免疫组织化学检测CGRP1R, NK1R, NPY1R, VIPR1在组织工程骨中的表达情况：4周时,Ⅰ、Ⅱ两组(感觉神经植入组和血管束植入组)神经肽受体表达的位置相同,多在血管和骨髓处,新生骨边缘,成骨细胞周围和骨膜处也有少量阳性表达,Ⅲ组(空白对照组)在新生骨边缘发现有少量表达。随着时间推移(8周,12周),叁组在新生骨成骨细胞边缘、血管周围、骨髓内的表达量也增加,表达强度Ⅲ组(空白对照组)为最弱。4.荧光定量PCR检测CGRP1R, NK1R, NPY1R, VIPR1的mRNA在组织工程骨中的表达情况：(1) CGRP1R:不同时间之间CGRP1R表达量有显着性差异(F=114.028,p=0.000),在叁组均如此,F值分别为75.265,58.831,60.946,均为p<0.05；从各时间点看,每一时间点各组的CGRP1R表达量均有显着性差异(F=704.531,p=0.000),在叁个时间点内均如此,F值分别为393.510、290.439、157.263,均为p<0.05,不同时间点和分组之间存在着交互效应(F=4.231,p=0.009)。Ⅰ组和Ⅱ组(感觉神经植入组和血管束植入组)的CGRP1R表达量随着时间呈先升高后降低的趋势,Ⅲ组(空白对照组)CGRP1R表达量随着时间呈先逐渐升高趋势；对每一时间点用LSD法进行多重比较可见,Ⅱ组(血管束植入组)的CGRP1R表达量要高于Ⅰ组(p<0.05),而Ⅰ组(感觉神经植入组)的CGRP1R表达量要高于Ⅲ组(空白对照组)(p<0.05)。(2) NK1R:不同时间之间NK1R表达量有显着性差异(F=141.636,p=0.000),在叁组均如此,F值分别为60.993,61.634,30.602,均为p<0.05；从各时间点看,每一时间点各组的NK1R表达量均有显着性差异(F=972.247,p=0.000),在叁个时间点内均如此,F值分别为578.477、632.202、164.934,均为p<0.05,不同时间点和分组之间存在着交互效应(F=11.272,p=0.000)。NKIR表达量随着时间呈现逐渐升高趋势；对每一时间点用LSD法进行多重比较可见,Ⅱ组(血管束植入组)的NKIR表达量要高于Ⅰ组(p<0.05),而Ⅰ组(感觉神经植入组)的NKIR表达量要高于Ⅲ组(空白对照组)(p<0.05)。(3) NPY1R:不同时间之间NPY1R表达量有显着性差异(F=256.544,p=0.000),在叁组均如此,F值分别为125.793,74.177,99.460,均为p<0.05；从各时间点看,每一时间点各组的NPY1R表达量均有显着性差异(F=1006.545,p=0.000),在叁个时间点内均如此,F值分别为395.125、849.587、138.529,均为p<0.05,不同时间点和分组之间存在着交互效应(F=14.049,p=0.000)。Ⅰ组和Ⅱ组(感觉神经植入组和血管束植入组)的NPY1R表达量随着时间呈先升高后降低的趋势,Ⅲ组(空白对照组)NPY1R表达量随着时间呈先逐渐升高趋势；对每一时间点用LSD法进行多重比较可见,Ⅱ组(血管束植入组)的NPY1R表达量要高于Ⅰ组(p<0.05),而Ⅰ组(感觉神经植入组)的NPY1R表达量要高于Ⅲ组(空白对照组)(p<0.05)。(4) VIPR1:不同时间之间VIPR1表达量有显着性差异(F=74.521,p=0.000),在叁组均如此,F值分别为20.774,89.201,17.486,均为p<0.05；从各时间点看,每一时间点各组的VIPR1表达量均有显着性差异(F=94.285,p=0.000),在叁个时间点内均如此,F值分别为19.909、49.558、28.377,均为p<0.05,不同时间点和分组之间存在着交互效应(F=12.820,p=0.000)。VIPR1表达量随着时间呈先逐渐升高趋势；对每一时间点用LSD法进行多重比较可见,Ⅱ组(血管束植入组)的VIPR1表达量要高于Ⅰ组(p<0.05),而Ⅰ组(感觉神经植入组)的VIPR1表达量要高于Ⅲ组(空白对照组)(p<0.05)。第叁部分血管束、感觉神经束分别植入组织工程骨修复兔股骨大段骨缺损对神经肽受体的中长期表达研究1.X线观察：术后24周后,X线显示各组的生物材料已经降解和吸收,各组的骨痂量较12周有了明显的减少,已经开始塑形阶段,而Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)组织工程骨植入区已经部分骨髓腔再通,塑形程度要优于Ⅲ组(空白对照组),Ⅲ组(空白对照组)钢板对侧的骨皮质还没有完全连续。术后48周,Ⅰ组(感觉神经植入组),Ⅱ组(血管束植入组)和Ⅲ组(空白对照组)的骨塑形程度进一步加强,Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)组织工程骨植入区已经完全骨髓腔再通,骨皮质顺滑,和正常骨类似,而Ⅲ组(空白对照组)的骨皮质和正常骨相比,骨皮质相对紊乱。X线评分示：不同时间之间X线评分值有显着性差异(F=63.268,p=0.002),在叁组均如此,F值分别为19.600,29.901,16.610,均为p<0.05；从各时间点看,每一时间点各组的X线阻射值均有显着性差异(F=26.031,p=0.000),在二个时间点内均如此,F值分别为9.150、20.472,均为p<0.05,不同时间点和分组之间不存在着交互效应(F=0.131,p=0.878)。各组随着时间的延长X线评分值逐步升高；对每一时间点用LSD法进行多重比较可见,在24周和48周时,Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)的评分值之间无统计学差异(p>0.05),而高于Ⅲ组(空白对照组)的评分(p<0.05)。2.组织学检测成骨情况(HE和Masson染色)：HE染色中粉红色的区域为新生骨组织,内可见骨陷窝和骨细胞,同正常骨组织。在24周和48周两个中长期时间点,各组的骨痂明显被吸收完全,切片呈光滑骨皮质包裹骨髓腔状,和正常骨组织类似。在个时间点,Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)的成骨皮质厚度均要大于Ⅲ组(空白对照组)。Masson染色中,绿染的区域为新生胶原组织,而红染则为成熟胶原组织。各组在绿染组织内镶嵌着部分红染的骨组织,此形态同正常骨组织。在24周和48周两个中长期时间点,各组的骨痂明显被吸收完全,切片呈光滑骨皮质包裹骨髓腔状,和正常骨组织类似。在个时间点,Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)的成骨皮质厚度均要大于Ⅲ组(空白对照组)。3.免疫组织化学检测CGRP1R, NK1R, NPY1R, VIPR1在组织工程骨中的表达情况：四种神经肽受体(CGRP1R、NK1R、NPY1R、VIPR1)在各实验组各时间点表达的位置和强度,肉眼观测它们之间并无明显差异。24周时,各组神经肽受体多表达于骨皮质内的小腔隙周围,血管腔周围,骨细胞周围表达,其中Ⅲ组(空白对照组)在表达的强度和数量比Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)要低。随着时间推移(48周),叁组阳性表达的位置和强度与24周相比在肉眼观察下无明显差异,而阳性表达的强度和数量Ⅲ组(空白对照组)为最弱,比Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)要低。4.荧光定量PCR检测CGRP1R, NK1R, NPY1R, VIPR1的mRNA在组织工程骨中的表达情况：(1) CGRP1R:不同时间之间CGRP1R表达量无显着性差异(F=3.149,p=0.093),在叁组均如此,F值分别为4.809,0.354,0.220,均为p>0.05；从各时间点看,每一时间点各组的CGRP1R表达量均有显着性差异(F=70.817,p=0.000),在两个时间点内均如此,F值分别为52.604、26.081,均为p<0.05,不同时间点和分组之间无交互效应(F=0.664,p=0.527)。对每一时间点用LSD法进行多重比较可见,Ⅱ组(血管束植入组)的CGRP1R表达量要高于Ⅰ组和Ⅲ组(p<0.05),而Ⅰ组(感觉神经植入组)的CGRP1R表达量与Ⅲ组(空白对照组)无统计学差异(p>0.05)。(2) NK1R:不同时间之间NK1R表达量无显着性差异(F=0.655,p=0.429),在叁组均如此,F值分别为0.404,0.121,0.247,均为p>0.05；从各时间点看,每一时间点各组的NK1R表达量均有显着性差异(F=298.914,p=0.000),在两个时间点内均如此,F值分别为186.233、124.068,均为p<0.05,不同时间点和分组之间无交互效应(F=0.026,p=0.947)。对每一时间点用LSD法进行多重比较可见,Ⅱ组(血管束植入组)的NK1R表达量要高于Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅲ组(空白对照组)(p<0.05),而Ⅰ组(感觉神经植入组)的NK1R表达量要高于Ⅲ组(空白对照组)(p<0.05)。(3) NPY1R:不同时间之间NPY1R表达量无显着性差异(F=0.502,p=0.488),在叁组均如此,F值分别为0.026,0.065,0.671,均为p>0.05；从各时间点看,每一时间点各组的NPY1R表达量均有显着性差异(F=103.464,p=0.000),在两个时间点内均如此,F值分别为83.247、36.481,均为p<0.05,不同时间点和分组之间无交互效应(F=0.121,p=0.887)。对每一时间点用LSD法进行多重比较可见,Ⅱ组(血管束植入组)的NPY1R表达量要高于Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅲ组(空白对照组)(p<0.05),而Ⅰ组(感觉神经植入组)的NPY1R表达量要高于Ⅲ组(空白对照组)(p<0.05)。(4) VIPR1:不同时间之间VIPR1表达量无显着性差异(F=1.815,p=0.195),在叁组均如此,F值分别为0.150,0.293,2.400,均为p>0.05；从各时间点看,每一时间点各组的VIPR1表达量均有显着性差异(F=25.593,p=0.000),在两个时间点内均如此,F值分别为16.543、10.174,均为p<0.05,不同时间点和分组之间无交互效应(F=0.259,p=0.774)。对每一时间点用LSD法进行多重比较可见,在24周时,Ⅱ组(血管束植入组)的VIPR1表达量要高于Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅲ组(空白对照组)(p<0.05),而Ⅰ组(感觉神经植入组)的VIPR1表达量要高于Ⅲ组(空白对照组)(p<0.05)。；在48周时,Ⅱ组(血管束植入组)的VIPR1表达量要高于Ⅰ组和Ⅲ组(p<0.05),而Ⅰ组(感觉神经植入组)的VIPR1表达量与Ⅲ组(空白对照组)无统计学差异(p>0.05)。结论1. BMSCs和成骨诱导培养的BMSCs均有CGRP1R, NK1R, NPY1R, VIPR1的表达,阳性表达位于细胞膜。2.用real-time PCR的方法可以用来检测骨组织中某些因子的mRNA表达,所以能够作为骨组织分子水平的检测方法。3.各时间点中,Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)的成骨效果,均优于Ⅲ组(空白对照组)。4.短期观察中,4周,8周,12周免疫组化结果显示,CGRP1R, NK1R, NPY1R, VIPR1的表达量,Ⅲ组(空白对照组)的均比Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)最低,多表达在新生骨膜处成骨细胞和小腔隙周围,新生血管周围也可见有阳性表达。5.各组在短期的各时间点(4,8,12周)均检测到有神经肽受体的mRNA表达,实验组各神经肽受体mRNA的表达量在第8周的时候表达最多,并且Ⅱ组(血管束植入组)>Ⅰ组(感觉神经植入组)>Ⅲ组(空白对照组)。6.术后24周,48周各组的成骨评分均随时间推移而增加。各组术后24周,48周的X线显示Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)的成骨效果优于Ⅲ组(空白对照组),结构更接近于正常骨组织,髓腔再通明显。7.术后24周,48周的组织学检测表明叁组的成骨结构均与正常骨组织类似,其中Ⅲ组(空白对照组)骨皮质略薄8.术后24周,48周针对各神经肽受体的免疫组化染色表明各组各受体的阳性表达的分布与正常骨组织的类似,多表达在皮质中的小腔隙周围,成骨细胞周围和骨髓。Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)的阳性表达分布和表达强度比Ⅲ组(空白对照组)广,24周和48周相比,阳性表达的强度和分布无明显差异。9.实时荧光定量PCR表明术后24,48周Ⅰ组(感觉神经植入组)和Ⅱ组(血管束植入组)的神经肽受体mRNA水平与12周的表达水平大约持平,表达趋于平稳。其中Ⅱ组(血管束植入组)的神经肽受体mRNA水平为叁组中最高。(本文来源于《南方医科大学》期刊2011-05-01）
陈思圆,覃俊君,穆天旺,王簕,江汕[2]（2010）在《植入感觉神经束和血管束的组织工程骨修复兔股骨缺损对神经激肽1受体和血管活性肠肽受体1表达的影响》一文中研究指出目的研究植入了感觉神经束和血管束的组织工程骨修复兔股骨缺损对神经激肽1受体(neurokinin1receptor,NK1R)和血管活性肠肽受体1(vasoactive intestinal peptide type1receptor,VIPR1)表达的影响。方法 5月龄健康新西兰大白兔54只,抽取髂骨红骨髓,全骨髓贴壁筛选法分离、培养BMSCs。取第3代BMSCs成骨诱导培养7d后,与β磷酸三钙支架复合培养制备组织工程骨。将54只兔制备单侧股骨1.5cm缺损模型,随机分成3组(n=18),分别在修复缺损的组织工程骨侧槽中植入感觉神经束(A组)、股血管束(B组),以及空白对照(C组)。术后4、8、12周各组分别处死6只兔,对修复骨段进行大体观察、X线片检查成骨情况,提取总RNA行实时荧光定量PCR检测NK1R mRNA和VIPR1mRNA的表达情况,并行免疫组织化学染色检测NK1R和VIPR1的表达情况。结果大体观察和X线片检查均显示A、B组成骨情况优于C组。各组X线片评分随时间延长逐渐升高。术后4周B组X线片评分高于A、C组(P<0.05),A、C组间差异无统计学意义(P>0.05);术后8、12周A、B组X线片评分高于C组(P<0.05);A、B组间差异无统计学意义(P>0.05)。实时荧光定量PCR检测示各组NK1R mRNA和VIPR1mRNA的表达量均于术后8周达峰值,各时间点间表达量差异均有统计学意义(P<0.05);各时间点A、B组NK1R mRNA和VIPR1mRNA表达均高于C组(P<0.05),B组高于A组(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,各组NK1R和VIPR1的阳性表达均在术后8周最强,且A、B组的表达强于C组。结论血管束植入法可以替代感觉神经束植入法构建血管、神经化组织工程骨,并能促进神经肽受体的表达,避免因感觉神经束植入导致支配区的感觉缺失,是一种较理想的复合组织工程骨构建方法 。(本文来源于《中国修复重建外科杂志》期刊2010年07期）
穆天旺[3]（2009）在《血管束、感觉神经束植入构建组织工程骨血管神经化的早期形态学观察》一文中研究指出研究背景由于创伤、感染或肿瘤外科手术等病理性因素造成临床出现大量骨缺损病例,所以大段节段性骨缺损的重建仍是一个重要的临床问题。当前临床治疗方法主要包括骨材料移植(自体移植,同种异体移植或异种移植)、不同生物材料植入或骨传输生长方法(Ilizarov技术),但是这些技术均存在一定的缺陷和不足。骨组织工程虽然在将来有可能取代自体骨移植,但目前必须解决如何同时为大块骨支架材料内细胞供应氧和营养物质的问题。有效的血液循环和神经支配对于骨组织的生长、发育、创伤修复都具有重要的作用。在体内实验中,运用各种不同方法促使所植入材料与宿主体内各种支配因素(血管或神经)结合将有助于解决这一问题。本研究采用显微外科方法将血管束、感觉神经束植入组织工程骨修复大段骨缺损,观察组织工程骨成骨及其血管化和神经化,探讨组织工程骨内血液供应和神经支配的重建与成骨的关系,为其在临床的应用提供一定的理论依据。研究目的初步观察血管束、感觉神经束植入对组织工程骨内血管神经重建的影响,探讨血管束、感觉神经束植入组织工程骨促成骨的可能机制。实验方法1.5～6月龄新西兰大白兔42只,体重2.0～2.5kg,随机分为3组,每组14只。从兔髂前上嵴穿刺抽取骨髓并分离获得骨髓基质干细胞进行扩增、诱导分化为成骨细胞,与带侧槽的β-磷酸叁钙(购自法国贝奥路公司)复合构建组织工程骨;所有动物均制造左侧后肢股骨1.5cm大段节段性骨缺损,采用微型钢板固定,按照骨缺损植入物不同进行分组:A组,组织工程骨组,单纯植入组织工程骨;B组,血管束植入组,在植入组织工程骨的同时将股血管束游离适当距离后植入组织工程骨侧槽;C组,感觉神经束植入组,在植入组织工程骨的同时将隐神经游离适当长度后锐性切断并植入组织工程骨的侧槽。2.影像学观察及组织学观察。术后4、8、12周每组分别取4只动物,对骨缺损区行X线检查后行影像学评分。处死动物取标本行4%多聚甲醛固定,10%乙二胺四乙酸(EDTA)脱钙后石蜡包埋,连续做5μm厚纵行切片,行HE及Masson染色,观察组织工程骨成骨特点。3.对各组标本行CD34(血管内皮细胞标记物)的免疫组化染色。用图像分析软件(Image Pro-Plus 6.0 Media Cybernetics,美国)测定染色阳性新生血管的数量。利用统计软件SPSS13.0对数据进行统计学处理,用3×3析因设计方差分析对处理因素和时间的主效应和交互效应做统计,若有显着性差异则用单向方差分析(One-way ANOVA)对同一时间点各组间用LSD法行多重比较分析,P＜0.05具有统计学差异。4.墨汁灌注观察血管生成。术后12周各组取2只实验动物行墨汁灌注,制备冰冻切片观察组织工程骨血管生成情况。5.对各组标本行突触素(SY)及神经微丝200(NF200)(神经总标记物)的免疫组化染色。用图像分析软件(Image Pro-Plus 6.0 Media Cybernetics,美国)测定阳性染色的积分光密度值(IOD值)(IOD值与免疫表达强度成正比)。利用统计软件SPSS13.0对数据进行统计学处理,用3×3析因设计方差分析对处理因素和时间的主效应和交互效应做统计,若有显着性差异则用单向方差分析(One-wayANOVA)对同一时间点各组间用LSD法行多重比较分析。6.银染色观察支配神经重建。取各时间点各组标本行常规银染色,观察组织工程骨神经重建情况。结果1.影像学评分对各组骨缺损区X线检测的影像学评分行3×3析因设计方差分析显示,各时间点间、各组间评分有统计学差异(F分别为216.001,51.485,均为P=0.000);时间与分组之间交互效应显着(F=3.617,P=0.017)。用One-way ANOVA和LSD法统计分析发现,各组内在4、8、12周均有统计学差异(P＜0.05),随着时间增加,各组评分均显着增加;在各时间点,各组组间有统计学差异(P＜0.05),两两比较B组与C组无显着性差异(P＞0.05),两组评分均高于A组(P＜0.05)。2.组织学观察术后4周血管束植入组在材料外周可见较多血管样结构及大量围绕血管出现的新生骨,材料内部可见材料孔隙内新生血管明显,血管周围纤维组织出现一定程度的胶原表达及成骨;神经束植入组的材料外周血管生成不及血管束植入组明显,但仍可见大量新生骨,材料内部与血管束植入组相似,而且部分区域可见软骨向骨组织转化;组织工程骨组的材料外周血管生成及成骨一般,仍可见较多的炎症细胞存在,材料内部未见明显血管生成及成骨。术后8周各组材料均有一定降解,各组材料外周及周围骨痂成骨增加,血管束植入组与感觉神经束植入组骨痂成熟优于组织工程骨组;血管束植入组与感觉神经束植入组材料内部可见骨岛形成,组织工程骨组材料内部成骨较少。术后12周时血管束植入组的材料外周可见明显血管样结构,血管周围的材料降解明显,大部分被新生骨替代,软骨向类骨质和骨组织转化区域更为广泛、明显,材料内部可见大量新生骨生成;神经束植入组的血管生成及成骨明显增加,也可见大量类似成骨区域;组织工程骨组的材料外周血管生成及成骨明显增加,但材料内部的材料降解程度及新生骨成熟度明显不如其它两组。3.血管内皮细胞标记物CD34的免疫组织化学观察对植入物区新生骨组织内CD34标记新生血管数量行3×3析因设计方差分析显示,各时间点间、各组间有统计学差异(F分别为222.578,189.181,均为P=0.000);时间与分组之间交互效应显着(F=2.964,P=0.038)。用One-way ANOVA和LSD法统计分析发现,在4周、8周、12周各组间均有统计学差异(P＜0.05),表达以B组＞C组＞A组。A组、B组和C组在各时间点组内有统计学差异(P＜0.05),表达均以8周最高。4周时,A、C两组CD34标记血管位置大致相同,多在材料外周及周围骨痂,材料内部有少量血管存在,但B组在在材料内部可见明显新生血管。随着时间增加,叁组的新生血管数量在8周观察点最高,12周时可见血管走向及结构更加粗大,成熟。4.墨汁灌注观察结果术后12周,血管束植入组材料内部可见明显血管结构,血管数量较多,而且血管形态粗大、成熟,血管结构与成骨区相邻。神经束植入组材料内部血管数量比血管束稍差,形态中等,较成熟。组织工程骨组材料内部血管数量少,血管形态一般,欠成熟。5.神经总标记物突触素及神经微丝200的免疫组化观察对植入区新生骨组织内突触素(SY)表达的IOD值行3×3析因设计方差分析显示,各时间点间、各组间有统计学差异(F分别为130.722,103.523,均为P=0.000);时间与分组之间交互效应显着(F=4.867,P=0.004)。用One-way ANOVA和LSD法统计分析发现,在4、8周各组组间均有统计学差异(P＜0.05),表达以B组＞C组＞A组;在12周时B组与C组无显着性差异(P＞0.05),两组均高于A组(P＜0.05)。A组在各时间点组内有统计学差异(P＜0.05),表达以4周＞8周＞12周;B组在8、12周无显着性差异(P＞0.05),均低于4周表达(P＜0.05),C组与B组在各时间点变化一致。4周时,B、c两组SY表达位置大致相同,多在新生骨周围及软组织间隙,A组表达不明显。随着时间增加,叁组SY的表达量均出现一定程度减少,在8周和12周时,SY的分布位置以骨间隙和血管周围最多。对植入区新生骨组织内神经微丝200(NF200)表达的IOD值行3×3析因设计方差分析显示,各时间点间、各组间有统计学差异(F分别为152.848,146.814,均为P=0.000);时间与分组之间交互效应显着(F=5.575,P=0.002)。用One-wayANOVA和LSD法统计分析发现,在4周各组组间均有统计学差异(P＜0.05),表达以B组＞C组＞A组;在8、12周时B组与C组无显着性差异(P＞0.05),两组均高于A组(P＜0.05)。A组、B组和C组在各时间点组内有统计学差异(P＜0.05),表达以4周＞8周＞12周。NF200表达与SY表达大致相同:4周时,B、C两组NF200表达位置多在新生骨周围及软组织间隙。但A组表达不明显。随着时间增加,叁组在组织工程骨内的表达量总体表达减少。在8周和12周时,SY的分布位置以骨间隙和血管周围最多。6.银染色观察结果银染结果显示,在4周时,各组组织工程骨内神经纤维结构多出现在外周,材料内部仅在组织空隙内可见神经纤维样结构,形态较差。在8周时,在新生骨组织间隙内可见大量银染色的神经纤维,以感觉神经束植入组与血管束植入组最为明显,染色的神经纤维结构清晰,交错存在。在12周,可在骨组织内见形态良好的神经纤维结构,在血管腔周围同样可见明显银染纤维。结论1.在骨缺损修复早期,植入血管束的组织工程骨组与植入感觉神经束的组织工程骨组均能促进骨缺损修复,而两组之间无明显差别。2.在骨缺损修复早期,植入血管束的组织工程骨组与植入感觉神经束的组织工程骨组均能促进组织工程骨血液循环重建,而且前者重建效果优于后者。3.在骨缺损修复早期,植入血管束的组织工程骨组与植入感觉神经束的组织工程骨组均能促进组织工程骨支配神经重建,而两者之间总体无明显差别。4.新生血管与支配神经在术后12周均出现不同程度减少,提示骨缺损修复初期(4～8周)在组织工程骨血管与神经重建过程中具有重要意义。5.组织工程骨内血液循环与支配神经重建在骨缺损修复过程中具有重要作用。(本文来源于《南方医科大学》期刊2009-04-01）
张元平,崔继秀,李庆和,马正凯,王永刚[4]（2006）在《组织工程骨体内植入运动与感觉神经束后的成骨效果》一文中研究指出目的:用放射学方法评估和比较两种组织工程骨体内神经支配重建方法的成骨效果,探讨神经化与成骨的相互关系。方法:实验于2003-12/2005-03在南方医科大学南方医院动物所完成。20只新西兰大白兔随机分成3组:组织工程骨组、感觉神经束植入组、运动神经束植入组,每组6只。另2只兔作为骨缺损空白组。①除骨缺损空白组外,其余3组兔均制备组织工程骨。②各组兔均建立股骨1.5cm长骨缺损模型。③组织工程骨组于骨缺损处只嵌入β-磷酸叁钙+经诱导分化的骨髓基质细胞复合物;感觉神经束植入组将隐神经束植入β-磷酸叁钙+经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内;运动神经束植入组将股神经束植入β-磷酸叁钙+经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内并加以固定;骨缺损空白组骨缺损内不植入任何材料。④术后4,8,12周除骨缺损空白组外各组处死2只兔,观察组织工程骨的表面变化、内痂形成、骨缺损修复情况及周围组织反应。摄股骨正位X射线片,用放射影像学评分和X射线阻射影分析比较骨缺损修复情况。骨缺损空白组于术后12和18周各处死1只,摄片观察骨缺损愈合情况。结果:实验兔20只均进入结果分析。①术后各组X射线片观察结果:组织工程骨组、运动神经束植入组在术后4,8,12周时,骨缺损区阻射影、材料吸收变化、截骨端愈合情况大体类似,感觉神经束植入组在各时间点的成骨量与骨痂塑形均较组织工程骨组、运动神经束植入组出现早且截骨端愈合快。②术后各组植入修复骨缺损的放射影像学评分结果:感觉神经束植入组正位照片骨缺损修复评分在4,8,12周均较组织工程骨组、运动神经束植入组的放射影像学评分为优犤4周:(8.333±0.816),(5.333±0.517),(5.500±0.836)分;8周:(11.333±0.516),(7.166±0.408),(8.167±0.307)分;12周:(12.500±0.894),(9.083±0.376),(10.083±0.801)分,P<0.05犦,但组织工程骨组、运动神经束植入组间无明显差异(P>0.05)。③术后各组植入骨缺损阻射密度测量值的比较:感觉神经束植入组在4,8,12周的骨缺损阻射密度相对值均大于组织工程骨组、运动神经束植入组(4周:58.663±2.541,43.501±2.725,44.578±2.948;8周:62.375±0.992,54.638±1.265,54.203±1.556;12周:84.582±1.017,71.683±2.101,73.585±1.975,P<0.05),但组织工程骨组、运动神经束植入组间差异不明显(P>0.05)。结论:利用感觉神经束植入的方法可以提高组织工程骨的成骨作用,而植入运动神经束却无此作用。(本文来源于《中国临床康复》期刊2006年21期）
王永刚[5]（2006）在《感觉神经及运动神经束构建神经化组织工程骨修复兔股骨缺损的实验研究》一文中研究指出组织工程学是应用工程学原理和技术方法对创伤或病损的组织、器官进行修复与重建，是一种全新的治疗思路，超越了以往组织与器官修复重建的思维模式和技术手段，为组织与器官的修复重建带来了一场理论和技术方法上的革命，具有广阔的临床应用前景。创伤、感染、肿瘤等原因引起的骨缺损及骨不连是骨科临床经常遇到的问题，如何进一步提高骨缺损的治疗效果仍是引人关注的问题，临床上常用自体骨或同种异体骨移植，由于存在骨来源有限或免疫排斥反应等，使其应用受到限制，临床效果不尽如意。利用组织工程学技术解决这一问题是近十多年骨科领域研究的热点。 如何提高大块组织工程骨的成骨速度与成骨质量是当前的研究热点。再血管化是最初和最基本的环节，有决定性的影响。如果不能建立有效血循环，组织工程材料的制作只能被限制在薄、小的程度。关于组织工程骨的再血管化技术方法仍处在探索之中。已经证实，促进血管再生、加快血管化过程可以提高组织工程骨的成骨速度与成骨质量。 神经系统对于骨组织的生长发育创伤修复具有调节和营养作用。现在认为，这种作用是肽能神经通过包括神经肽在内的多种多肽类生物活性物质的多种生物效能来实现的。神经肽的作用方式很复杂，作用机理尚不完全清楚，可能是影响骨内的血管发生，控制血管舒缩，调节骨内血流量，进而影响骨代谢，对(本文来源于《第一军医大学》期刊2006-04-01）
岳喜军[6]（2006）在《近红外光谱和聚类分析法快速鉴别周围运动神经和感觉神经束性质的初步研究》一文中研究指出目的：初步研究进红外光谱分析法在鉴别周围神经运动束和感觉束的应用，探讨建立一种快速鉴别周围神经束性质的方法。 方法：将Beagle犬分次麻醉后处死，立即从后背正中将椎管打开，取从硬膜外到脊神经根管入口这一段走行的T_(12)-S_2脊神经的前根和后根，将每一条犬的两类神经根新鲜的标本分别装入标本瓶中，迅速放在液氮里保存备用。取用时在室温下自然解冻，解冻后保存在湿盒里，防止标本脱水干燥。先一部分取Beagle犬的脊神经前根和后根(前根为运动神经，后根为感觉神经)，利用近红外漫透射方式进行快速采样，考察近红外的影响因素，确定实验用参数。分别截取部分两条犬的6根脊神经的前根及6根脊神经的后根共24根进行进红外光谱采样，运用模式识别法中的聚类分析法进行定性分类鉴别。再取这相同的24根脊神经的另一部分，进行切片，用Karnovsky-Roots及Fuminori酶组织化学染色法染色并和进红外光谱法比较。 结果：脊神经的前根和后根其一二阶导数光谱较为相近，不能直观进行鉴别；经聚类分析可以将前根和后根归为两类，达到直观鉴别的目的，平均准确率可达83.3％，和Karnovsky-Roots酶组织化学染色法(本文来源于《南京医科大学》期刊2006-04-01）
李立钧,张键,张峰,吴子征,曹银祥[7]（2005）在《纵行神经束内电极在周围神经感觉信号采集分析中的应用》一文中研究指出目的:观察成年家猫在不同刺激状态下腓浅神经内动作电位的差异,探讨纵行神经束内电极在周围神经感觉信号采集分析中的应用价值。方法:实验于2004-04/07在复旦大学上海医学院病理生理实验室完成。①用直径25μm×25μm的聚四氟乙烯绝缘铂铱合金丝(95%铂+10%铱)制作纵行神经束内微电极,植入成年健康家猫(n=6)左侧踝上腓浅神经内。②将铂铱合金电极与SMUP-E型生物信号处理系统相连,记录的电信号经放大、过滤、采集后(放大倍数×80000,时间常数0.01s,高频滤波10kHz),输入奔腾733计算机进行信号的存储分析。③用毛刷(刷板0.3cm×1.0cm)及自制机械震荡刺激器的钝头金属探针分别对左侧足背皮肤进行搔刮、压力(800～1200g)刺激,3Hz。④以纵行神经束内电极依次记录平静、搔刮和压力刺激时的感觉诱发电位;用MFLab3.01软件包对动作电位的面积、频率、峰值变异系数及功能谱密度等参数进行分析。结果:6只家猫左侧踝上腓浅神经的感觉诱发电位测定结果均纳入分析。①平静、搔刮和压力刺激时的感觉神经动作电位分析:家猫足背皮肤安静状态下间断无规律地发放神经冲动,脉冲0～2个/s;搔刮刺激时,脉冲16～24个/s,发放较规律,波幅波动不大;压力性刺激时,神经冲动呈爆发性释放,迭加成串,脉冲80～104个/s,波形波幅差异较大。②不同刺激状态感觉神经动作电位面积、频率及峰值变异系数分析:搔刮和压力刺激时均高于平静时,压力刺激时高于搔刮刺激时,差异均有显着性(P<0.05～0.01)。③平静、搔刮和压力刺激时感觉神经动作电位的功能谱分析:压力刺激时动作电位的高频成分增加。结论:对皮肤内触、压觉感受器施以触压刺激,随着触压力量的增大,传入纤维上的动作电位频率逐渐增高,发放动作电位的纤维数目也随之增多。通过自制的神经束内微电极,可以敏感地记录到不同刺激形式时感觉信号发放的变化,为采集分析感觉信息用于电子假肢的反馈控制,提供良好界面。(本文来源于《中国临床康复》期刊2005年25期）
杨期东,龙小艳,彭隆祥,徐锡萍,谭爱玲[8]（2003）在《感觉神经束膜炎(附1例报告)》一文中研究指出目的 探讨感觉神经束膜炎(SPN)患者的临床和病理特点及雷公藤多甙治疗的疗效。方法报道1例SPN患者的临床和病理资料,并进行10年系统观察,相隔10年分别行左、右腓肠神经活检,并随访患者雷公藤多甙治疗疗效。结果 本例患者表现为急性起病,进行性全身麻痛,以肢体远端明显;病理特点:腓肠神经束膜增厚,神经纤维间大量胶原纤维沉积,轴索变性,髓鞘脱失;雷公藤多甙治疗后,临床症状好转,生活能自理,病理改变减轻。结论 本例SPN可能是一种自身免疫性疾病,雷公藤多甙治疗有效。(本文来源于《临床神经病学杂志》期刊2003年03期）
杨期东,龙小艳,彭隆祥,徐锡萍,朱凯云[9]（2002）在《感觉神经束膜炎一例》一文中研究指出患者女 ,68岁。渐起全身麻痛 11年。患者于 1989年 3月受凉后出现感冒样症状 ,2 0余天后出现腹泻、腹胀、不伴发热 ,服中药治疗过程中腹泻症状反复 ,间断泻胶胨便 ,某夜惊醒急起出现对称性四肢远端麻木、疼痛 ,呈持续性 ,天气变凉及轻触皮肤使疼(本文来源于《中华内科杂志》期刊2002年12期）
张少成,郭福玲,阎国章,马玉海,贾金鹏[10]（2002）在《神经束间侧侧缝合重建截瘫/四肢瘫感觉功能》一文中研究指出目的 :介绍一种重建截瘫 /四肢瘫部分感觉功能的新方法。方法 :选择具有感觉功能的神经干或束组作为供体神经 ,支配感觉消失区的神经干或束组为受体神经 ,在合适的平面将两神经的束外膜切开约 1～ 1.5cm ,相互紧密并拢后以 9～ 10个“0”无损伤针线侧侧缝合束外膜。结果 :2 1例 (四肢瘫 4例 ,截瘫 17例 )术后获 1～ 5年 (平均 2年 8个月 )的随访 ,3例失访。受区感觉恢复达S3级者 11例 ,S2级者 6例 ,S1级者 2例。但重建感觉区域的感觉定位均转换较差。结论 :周围神经侧侧缝合可以重建截瘫、四肢瘫患者的部分感觉功能。(本文来源于《中国矫形外科杂志》期刊2002年10期）
感觉神经束论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究植入了感觉神经束和血管束的组织工程骨修复兔股骨缺损对神经激肽1受体(neurokinin1receptor,NK1R)和血管活性肠肽受体1(vasoactive intestinal peptide type1receptor,VIPR1)表达的影响。方法 5月龄健康新西兰大白兔54只,抽取髂骨红骨髓,全骨髓贴壁筛选法分离、培养BMSCs。取第3代BMSCs成骨诱导培养7d后,与β磷酸三钙支架复合培养制备组织工程骨。将54只兔制备单侧股骨1.5cm缺损模型,随机分成3组(n=18),分别在修复缺损的组织工程骨侧槽中植入感觉神经束(A组)、股血管束(B组),以及空白对照(C组)。术后4、8、12周各组分别处死6只兔,对修复骨段进行大体观察、X线片检查成骨情况,提取总RNA行实时荧光定量PCR检测NK1R mRNA和VIPR1mRNA的表达情况,并行免疫组织化学染色检测NK1R和VIPR1的表达情况。结果大体观察和X线片检查均显示A、B组成骨情况优于C组。各组X线片评分随时间延长逐渐升高。术后4周B组X线片评分高于A、C组(P<0.05),A、C组间差异无统计学意义(P>0.05);术后8、12周A、B组X线片评分高于C组(P<0.05);A、B组间差异无统计学意义(P>0.05)。实时荧光定量PCR检测示各组NK1R mRNA和VIPR1mRNA的表达量均于术后8周达峰值,各时间点间表达量差异均有统计学意义(P<0.05);各时间点A、B组NK1R mRNA和VIPR1mRNA表达均高于C组(P<0.05),B组高于A组(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,各组NK1R和VIPR1的阳性表达均在术后8周最强,且A、B组的表达强于C组。结论血管束植入法可以替代感觉神经束植入法构建血管、神经化组织工程骨,并能促进神经肽受体的表达,避免因感觉神经束植入导致支配区的感觉缺失,是一种较理想的复合组织工程骨构建方法 。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
感觉神经束论文参考文献
[1].陈思圆.血管束、感觉神经束分别植入组织工程骨修复兔股骨大段骨缺损对神经肽受体的表达研究[D].南方医科大学.2011
[2].陈思圆,覃俊君,穆天旺,王簕,江汕.植入感觉神经束和血管束的组织工程骨修复兔股骨缺损对神经激肽1受体和血管活性肠肽受体1表达的影响[J].中国修复重建外科杂志.2010
[3].穆天旺.血管束、感觉神经束植入构建组织工程骨血管神经化的早期形态学观察[D].南方医科大学.2009
[4].张元平,崔继秀,李庆和,马正凯,王永刚.组织工程骨体内植入运动与感觉神经束后的成骨效果[J].中国临床康复.2006
[5].王永刚.感觉神经及运动神经束构建神经化组织工程骨修复兔股骨缺损的实验研究[D].第一军医大学.2006
[6].岳喜军.近红外光谱和聚类分析法快速鉴别周围运动神经和感觉神经束性质的初步研究[D].南京医科大学.2006
[7].李立钧,张键,张峰,吴子征,曹银祥.纵行神经束内电极在周围神经感觉信号采集分析中的应用[J].中国临床康复.2005
[8].杨期东,龙小艳,彭隆祥,徐锡萍,谭爱玲.感觉神经束膜炎(附1例报告)[J].临床神经病学杂志.2003
[9].杨期东,龙小艳,彭隆祥,徐锡萍,朱凯云.感觉神经束膜炎一例[J].中华内科杂志.2002
[10].张少成,郭福玲,阎国章,马玉海,贾金鹏.神经束间侧侧缝合重建截瘫/四肢瘫感觉功能[J].中国矫形外科杂志.2002