本文主要研究内容
作者张莹（2019）在《系列锍类化合物的合成及其转染能力的研究》一文中研究指出：阳离子脂质体由于载体可控、具有明确的分子构成、质粒容量高等优点,成为了应用最为广泛的基因载体。但是由于其传递难度大、蛋白表达率低等缺点,合成新型阳离子脂质体尤为重要。近年来对新型阳离子脂质体的研究逐渐增多。多数的阳离子脂质体包含极性电荷区、非极性脂肪长链,以及连接两者的过渡基团。极性电荷区多为含有可质子化的氮原子构成。本研究设计一组含有硫正离子为电荷部分的化合物,应用有机化学合成方法合成了3组共24个锍正离子化合物,并用碳谱、氢谱、质谱对化合物进行表征。第一组化合物以四氢噻吩/四氢噻喃为原料,连接不同长度的烷烃链后获得8个锍正离子化合物。第二组化合物以四氢噻吩/四氢噻喃为原料,连接不同长度乙氧基链后获得4个锍正离子化合物。第三组化合物基于以上两组化合物进行结构修饰,以四氢噻吩/四氢噻喃为原料,依次连接不同乙氧基链和不同长度的烷烃链后获得12个锍正离子化合物。对获得的24个化合物检测与DNA的复合能力和物理性质。通过琼脂糖凝胶阻滞实验证明,第一组化合物在烷烃链长为12,16时,在S/P比为30/1时具有与DNA的复合能力;第二组化合物不具备与DNA的复合能力;第三组化合物在烷烃链长为12时,在S/P为30/1时具有与DNA的复合能力;烷烃链长为16时,在S/P为10/1时即表现出复合能力。对具有DNA复合能力的化合物,检测与DNA复合物粒径大小及Zeta电势,实验证明,各复合物的粒径均在100 nm300 nm之间。烷烃链长为12的化合物形成的复合物的电势为负电势在-20-10之间,烷烃链长为16的化合物形成的复合物的电势为正电势,在+20+40之间。通过性能检测,筛出6个具有DNA复合能力,且纳米复合物符合作为载体特征的化合物。对该6个化合物检测对三种肝癌细胞Hep3B、HepG2、Huh7细胞毒性。实验采用MTT法测定细胞毒性,用聚乙烯亚胺（25 kDa）为阳性对照药物。实验结果显示,对于HepG2细胞,化合物5-16、6-16、5-3-16、6-3-16、5-4-16、6-4-16的48 h的IC50值分别为6.93±2.59、40.25±1.09、21.28±1.52、0.36±0.13、20.91±0.68和17.33±3.22 ng/mL,与PEI的IC50值46.94±0.99 ng/mL相差不大,对于Hep3B细胞,化合物5-16、6-16、5-3-16、6-3-16、5-4-16、6-4-16的48 h的IC50值分别为0.17±0.37、0.27±2.10、2.53±2.40、8.71±1.81、6.89±1.80,6.14±3.35?g/mL,与PEI的IC50值1.55±1.43?g/mL细胞毒性略小,对于Huh7细胞,化合物5-16、6-16、5-3-16、6-3-16、5-4-16、6-4-16的48 h的IC50值分别为6.32±0.66、4.49±1.06、640±2.58、180±2.04、86±0.23、110±1.14 ng/mL相比于PEI的IC50值0.74±1.85 ng/mL细胞毒性略大。通过荧光显微镜观测,具有与DNA复合能力的6个化合物对HepG2转染效果相较于聚乙烯亚胺效果较弱。本研究设计并合成的三组新型锍正离子化合物并研究其作为基因载体的能力,实验用核磁和质谱对化合物进行鉴定表征。通过对性能检测,逐步筛出具有DNA复合能力和具有适当载体效果的化合物。实验表明同时含有乙氧基和较长烷烃链的化合物作为药物载体的能力较强。乙氧基链可以增强化合物的溶解性,较长的烷烃链对DNA的结合能力较强。实验筛检出6个具备与DNA复合能力且复合物粒径适中,电动电势为正电势的锍正离子化合物。这6个化合物的细胞毒性与PEI相近,但是在HepG2中转染能力弱于PEI。本研究为新型阳离子脂质体类基因载体的开发利用提供了新的理论基础,该类化合物的结构还需进一步优化,以满足作为基因载体的需求。
Abstract
yang li zi zhi zhi ti you yu zai ti ke kong 、ju you ming que de fen zi gou cheng 、zhi li rong liang gao deng you dian ,cheng wei le ying yong zui wei an fan de ji yin zai ti 。dan shi you yu ji chuan di nan du da 、dan bai biao da lv di deng que dian ,ge cheng xin xing yang li zi zhi zhi ti you wei chong yao 。jin nian lai dui xin xing yang li zi zhi zhi ti de yan jiu zhu jian zeng duo 。duo shu de yang li zi zhi zhi ti bao han ji xing dian he ou 、fei ji xing zhi fang chang lian ,yi ji lian jie liang zhe de guo du ji tuan 。ji xing dian he ou duo wei han you ke zhi zi hua de dan yuan zi gou cheng 。ben yan jiu she ji yi zu han you liu zheng li zi wei dian he bu fen de hua ge wu ,ying yong you ji hua xue ge cheng fang fa ge cheng le 3zu gong 24ge liu zheng li zi hua ge wu ,bing yong tan pu 、qing pu 、zhi pu dui hua ge wu jin hang biao zheng 。di yi zu hua ge wu yi si qing sai fen /si qing sai nan wei yuan liao ,lian jie bu tong chang du de wan ting lian hou huo de 8ge liu zheng li zi hua ge wu 。di er zu hua ge wu yi si qing sai fen /si qing sai nan wei yuan liao ,lian jie bu tong chang du yi yang ji lian hou huo de 4ge liu zheng li zi hua ge wu 。di san zu hua ge wu ji yu yi shang liang zu hua ge wu jin hang jie gou xiu shi ,yi si qing sai fen /si qing sai nan wei yuan liao ,yi ci lian jie bu tong yi yang ji lian he bu tong chang du de wan ting lian hou huo de 12ge liu zheng li zi hua ge wu 。dui huo de de 24ge hua ge wu jian ce yu DNAde fu ge neng li he wu li xing zhi 。tong guo qiong zhi tang ning jiao zu zhi shi yan zheng ming ,di yi zu hua ge wu zai wan ting lian chang wei 12,16shi ,zai S/Pbi wei 30/1shi ju you yu DNAde fu ge neng li ;di er zu hua ge wu bu ju bei yu DNAde fu ge neng li ;di san zu hua ge wu zai wan ting lian chang wei 12shi ,zai S/Pwei 30/1shi ju you yu DNAde fu ge neng li ;wan ting lian chang wei 16shi ,zai S/Pwei 10/1shi ji biao xian chu fu ge neng li 。dui ju you DNAfu ge neng li de hua ge wu ,jian ce yu DNAfu ge wu li jing da xiao ji Zetadian shi ,shi yan zheng ming ,ge fu ge wu de li jing jun zai 100 nm300 nmzhi jian 。wan ting lian chang wei 12de hua ge wu xing cheng de fu ge wu de dian shi wei fu dian shi zai -20-10zhi jian ,wan ting lian chang wei 16de hua ge wu xing cheng de fu ge wu de dian shi wei zheng dian shi ,zai +20+40zhi jian 。tong guo xing neng jian ce ,shai chu 6ge ju you DNAfu ge neng li ,ju na mi fu ge wu fu ge zuo wei zai ti te zheng de hua ge wu 。dui gai 6ge hua ge wu jian ce dui san chong gan ai xi bao Hep3B、HepG2、Huh7xi bao du xing 。shi yan cai yong MTTfa ce ding xi bao du xing ,yong ju yi xi ya an （25 kDa）wei yang xing dui zhao yao wu 。shi yan jie guo xian shi ,dui yu HepG2xi bao ,hua ge wu 5-16、6-16、5-3-16、6-3-16、5-4-16、6-4-16de 48 hde IC50zhi fen bie wei 6.93±2.59、40.25±1.09、21.28±1.52、0.36±0.13、20.91±0.68he 17.33±3.22 ng/mL,yu PEIde IC50zhi 46.94±0.99 ng/mLxiang cha bu da ,dui yu Hep3Bxi bao ,hua ge wu 5-16、6-16、5-3-16、6-3-16、5-4-16、6-4-16de 48 hde IC50zhi fen bie wei 0.17±0.37、0.27±2.10、2.53±2.40、8.71±1.81、6.89±1.80,6.14±3.35?g/mL,yu PEIde IC50zhi 1.55±1.43?g/mLxi bao du xing lve xiao ,dui yu Huh7xi bao ,hua ge wu 5-16、6-16、5-3-16、6-3-16、5-4-16、6-4-16de 48 hde IC50zhi fen bie wei 6.32±0.66、4.49±1.06、640±2.58、180±2.04、86±0.23、110±1.14 ng/mLxiang bi yu PEIde IC50zhi 0.74±1.85 ng/mLxi bao du xing lve da 。tong guo ying guang xian wei jing guan ce ,ju you yu DNAfu ge neng li de 6ge hua ge wu dui HepG2zhuai ran xiao guo xiang jiao yu ju yi xi ya an xiao guo jiao ruo 。ben yan jiu she ji bing ge cheng de san zu xin xing liu zheng li zi hua ge wu bing yan jiu ji zuo wei ji yin zai ti de neng li ,shi yan yong he ci he zhi pu dui hua ge wu jin hang jian ding biao zheng 。tong guo dui xing neng jian ce ,zhu bu shai chu ju you DNAfu ge neng li he ju you kuo dang zai ti xiao guo de hua ge wu 。shi yan biao ming tong shi han you yi yang ji he jiao chang wan ting lian de hua ge wu zuo wei yao wu zai ti de neng li jiao jiang 。yi yang ji lian ke yi zeng jiang hua ge wu de rong jie xing ,jiao chang de wan ting lian dui DNAde jie ge neng li jiao jiang 。shi yan shai jian chu 6ge ju bei yu DNAfu ge neng li ju fu ge wu li jing kuo zhong ,dian dong dian shi wei zheng dian shi de liu zheng li zi hua ge wu 。zhe 6ge hua ge wu de xi bao du xing yu PEIxiang jin ,dan shi zai HepG2zhong zhuai ran neng li ruo yu PEI。ben yan jiu wei xin xing yang li zi zhi zhi ti lei ji yin zai ti de kai fa li yong di gong le xin de li lun ji chu ,gai lei hua ge wu de jie gou hai xu jin yi bu you hua ,yi man zu zuo wei ji yin zai ti de xu qiu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自黑龙江八一农垦大学的张莹，发表于刊物黑龙江八一农垦大学2019-07-08论文，是一篇关于锍正离子化合物论文,转染能力论文,基因传递论文,黑龙江八一农垦大学2019-07-08论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自黑龙江八一农垦大学2019-07-08论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。