生长素抑制蛋白基因论文-文友义

生长素抑制蛋白基因论文-文友义

导读:本文包含了生长素抑制蛋白基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:生长素抑制蛋白基因,OsARP1,CRISPR,Cas9,种子萌发

生长素抑制蛋白基因论文文献综述

文友义[1](2019)在《OsARP1生长素抑制蛋白基因对水稻种子萌发和幼苗生长的影响》一文中研究指出生长素抑制蛋白基因(Auxin repressed protein gene,ARP)受到生长素(IAA)信号抑制表达,在植物的生长、发育、抗病、抗逆以及种子休眠等过程中发挥重要的作用。但有关水稻生长素抑制基因OsARP1的研究,目前还没见报道。本文采用基因过表达和CRISPR/Cas9基因敲除转基因技术,创建水稻OsARP1基因过表达及其启动子和外显子敲除转基因植株,研究这些转基因植株在种子萌发和幼苗生长等方面的差异,获得了如下结果:1、获得了OsARP1过量表达载体转化再生植株191株,对其中60株进行阳性检测发现了转基因阳性植株56株,阳性率为93.33%。采用qRT-PCR方法对56株T_0代转基因阳性植株OsARP1基因的表达量进行分析,发现表达量高于野生型2倍以上的有27株,占阳性植株总数的48%。2、获得了OsARP1启动子敲除载体转化再生植株112株,对其中47株进行阳性检测发现了转基因阳性植株44株,阳性率为93.62%。对44株阳性植株靶点序列进行分析,发现31株靶点序列发生了变异,变异率为70.45%;在靶点1发生变异的植株28株,纯合变异13株;在靶点2发生变异的植株27株,纯合变异8株;在两个靶位点都发生变异的24株,纯合变异8株。共发现85个变异位点,平均每株变异植株具有2.74个变异位点。在总共85个变异位点中,碱基替换30个,其中单碱基替换26个;碱基缺失36个,其中单碱基缺失14个,5个及5个以上多碱基缺失11个;碱基插入19个,其中单碱基插入14个,5个及5个以上多碱基插入2个;杂合变异位点62个,纯合变异位点23个,纯合变异位点占总变异位点的27.06%。qRT-PCR分析了3种启动子敲除纯合变异株OsARP1基因表达量,发现OsARP1启动子序列变异明显地降低该基因表达。3、获得了OsARP1外显子敲除载体转化再生植株215株,对其中50株进行阳性检测发现了转基因阳性植株47株,阳性率为94.00%。对47株转基因阳性植株靶点序列进行分析,发现33株靶点序列发生了变异,变异率为70.21%。在靶点1发生变异的植株28株,纯合变异10株;在靶点2发生变异的30株,纯合变异的8株;在两个靶位点都发生变异的28株,纯合变异6株。共发现71个变异位点,平均每株变异植株具有2.15个变异位点。在总共71个变异位点中,碱基替换15个,其中单碱基替换8个;碱基缺失41个,其中单碱基缺失3个,5个及5个以上的多碱基缺失33个;碱基插入15个,其中单碱基插入7个,5个及5个以上的碱基插入2个;杂合变异位点55个,纯合变异位点16个,纯合变异率为22.53%。4、从T_0代启动子敲除和外显子敲除变异植株中各选取3株纯合变异植株繁殖T_1代,成功测定了31株启动子敲除和36株外显子敲除T_1代植株的靶点序列,分别发现29株和35株与T_0代植株变异完全一致,只有3株T_1代植株发生了新的变异。95.52%的T_1代植株变异与T_0代变异类型完全相同。5、测定了上述3种启动子敲除和3种外显子敲除纯合变异植株的种子萌发率和幼苗株高,发现OsARP1启动子和外显子敲除植株的萌发率和幼苗株高均明显低于野生型,表明水稻OsARP1基因表达下调或功能缺失都有可能明显地影响水稻生长发育。上述研究结果为进一步研究水稻生长素抑制蛋白基因对水稻生长发育以及抗逆、抗病中的作用提供了良好的研究材料。(本文来源于《南昌大学》期刊2019-05-26)

陈静,江玲,胡晓辉,翟虎渠,万建民[2](2016)在《花生生长素抑制蛋白基因AhARP的表达分析》一文中研究指出种子休眠性是花生重要的农艺性状。为了挖掘控制花生种子休眠的重要基因,以花育52号为试材,通过转录组测序获得生长素抑制蛋白基因的全长,该基因全长为918bp,开放阅读框为363bp,编码121个氨基酸,推导出的蛋白质分子量为13.44 k Da,理论等电点p I=9.64。序列比对表明,该序列与花生生长素抑制蛋白基因Ah ARP一致,确认该c DNA序列为编码花生生长素抑制蛋白基因的全长c DNA序列。荧光定量PCR结果表明,Ah ARP基因在种子休眠阶段表达量较高,种子休眠解除后表达量降低;乙烯利释放吸涨种子休眠过程中,Ah ARP基因受到明显诱导;说明Ah ARP基因可能与花生种子休眠有关。Ah ARP基因的序列、结构、性质以及功能的初步分析,为进一步研究该基因在花生种子休眠中的功能机制奠定了基础。(本文来源于《核农学报》期刊2016年04期)

孙帆,罗朝兵,周燕妮,张凌云[3](2014)在《青杄生长素抑制蛋白基因PwARP-1的克隆及表达分析》一文中研究指出从青杄的cDNA文库中筛选出一个生长素抑制蛋白基因PwARP-1(Auxin-repressed protein 1),并通过RACE-PCR技术获得PwARP-1 cDNA全长。生物信息学分析显示,PwARP-1基因编码155个氨基酸残基的蛋白,分子量为17.1 kD,理论等电点为10.07,富含无规则卷曲。以多年生青杄和青杄幼苗为研究材料,通过RT-qPCR技术检测PwARP-1的组织特异性表达、激素的响应模式及种子萌发过程中的表达量模式。结果表明,PwARP-1在青杄各个组织中均有表达,在花粉中表达量最高,在种子中的表达量最低。PwARP-1在种子萌发过程中表达量呈先上升,在第10天表达量达到最高后开始下降。进一步试验表明,PwARP-1能响应多种逆境胁迫和激素处理。在赤霉素(GA)和生长素(IAA)处理下PwARP-1的表达量被抑制。在干旱胁迫和油菜素内酯(BR)激素处理下PwARP-1的表达量逐渐升高,而在在盐胁迫、茉莉酸甲酯(MeJA)和脱落酸(ABA)等激素处理下PwARP-1的表达量先下降后上升。这些结果显示PwARP-1可能参与了植物种子萌发、多种逆境胁迫和激素响应过程。(本文来源于《生物技术通报》期刊2014年04期)

苏军,钟晨,丁伟,周葱,张宇[4](2013)在《砀山酥梨不同程度缺铁叶片生长素抑制蛋白基因表达分析》一文中研究指出以‘砀山酥梨’为材料,采用酶联免疫分析法(ELISA),测定叶片中内源IAA的含量。依据已构建的缺铁叶片SSH文库中生长素抑制蛋白(ARP)基因片段的序列信息,应用RACE技术克隆其cDNA全长,通过实时荧光定量(qRT-PCR)技术,分析ARP基因的相对表达量。结果表明:(1)ARP基因cDNA全长为707bp,其中开放阅读框为351bp,编码116个氨基酸,推测的蛋白质分子量为12.82kD;该蛋白可能定位于微体,属于非分泌型、非跨膜蛋白类,并具有ARP基因家族的保守结构域。(2)在不同程度缺铁叶片中ARP基因的表达量存在差异,随着缺铁程度的增加,表达量显着升高,同时叶片中内源IAA含量逐渐降低。据此推测,ARP基因可能负反馈调节缺铁黄化叶片中IAA的水平,从而调控叶片的生长发育。(本文来源于《西北植物学报》期刊2013年02期)

王新超,马春雷,杨亚军,姚明哲,金基强[5](2011)在《茶树生长素抑制蛋白基因CsARP1的克隆与表达分析》一文中研究指出从茶树休眠芽抑制消减杂交文库中分离得到生长素抑制蛋白基因的3'-片段,以休眠芽为材料,利用RACE技术克隆了其cDNA全长,并利用荧光定量PCR研究了该基因在不同休眠阶段芽的相对表达量。结果从茶树休眠芽中获得一个全长为711bp的生长素抑制蛋白基因CsARP1(GenBank登录号为HQ225758)。该基因开放阅读框为357bp,编码118个氨基酸,推测的蛋白质分子量为12.82KD,等电点约为9.57。多序列比对结果显示,该基因编码的氨基酸序列与其他植物的ARP蛋白序列相似性达到70%以上,具有生长素抑制基因家族的保守结构域。荧光定量PCR结果表明,CsARP1基因在休眠阶段表达量较高,而在解除休眠(萌发)后表达量较低,说明CsARP1基因可能与茶树芽休眠有关。(本文来源于《核农学报》期刊2011年05期)

生长素抑制蛋白基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

种子休眠性是花生重要的农艺性状。为了挖掘控制花生种子休眠的重要基因,以花育52号为试材,通过转录组测序获得生长素抑制蛋白基因的全长,该基因全长为918bp,开放阅读框为363bp,编码121个氨基酸,推导出的蛋白质分子量为13.44 k Da,理论等电点p I=9.64。序列比对表明,该序列与花生生长素抑制蛋白基因Ah ARP一致,确认该c DNA序列为编码花生生长素抑制蛋白基因的全长c DNA序列。荧光定量PCR结果表明,Ah ARP基因在种子休眠阶段表达量较高,种子休眠解除后表达量降低;乙烯利释放吸涨种子休眠过程中,Ah ARP基因受到明显诱导;说明Ah ARP基因可能与花生种子休眠有关。Ah ARP基因的序列、结构、性质以及功能的初步分析,为进一步研究该基因在花生种子休眠中的功能机制奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

生长素抑制蛋白基因论文参考文献

[1].文友义.OsARP1生长素抑制蛋白基因对水稻种子萌发和幼苗生长的影响[D].南昌大学.2019

[2].陈静,江玲,胡晓辉,翟虎渠,万建民.花生生长素抑制蛋白基因AhARP的表达分析[J].核农学报.2016

[3].孙帆,罗朝兵,周燕妮,张凌云.青杄生长素抑制蛋白基因PwARP-1的克隆及表达分析[J].生物技术通报.2014

[4].苏军,钟晨,丁伟,周葱,张宇.砀山酥梨不同程度缺铁叶片生长素抑制蛋白基因表达分析[J].西北植物学报.2013

[5].王新超,马春雷,杨亚军,姚明哲,金基强.茶树生长素抑制蛋白基因CsARP1的克隆与表达分析[J].核农学报.2011

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