导读:本文包含了人胚肺成纤维论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:二氧化硅,肺纤维化,THP-1细胞,HFL-1细胞
人胚肺成纤维论文文献综述
刘静,王而今,曾明[1]（2019）在《鞘磷脂类信号通路在SiO2诱导人胚肺成纤维细胞纤维化的作用研究》一文中研究指出目的:利用人外周血单核细胞系(THP-1)来源巨噬细胞和人胚肺成纤维细胞(HFL-1)构建矽肺纤维化体外模型,探讨鞘磷脂类信号通路在矽肺纤维化中的作用及外源性重组人酸性神经酰胺酶(rAC)干预对纤维化的拮抗效应。方法:用CCK8法检测细胞生存率;ELISA法检测样本中TGF-β1、TNF-α、IL-8、S1P含量;DCFH-DA荧光探针法测细胞内ROS的含量;硫代巴比妥酸法测细胞内MDA含量;消化法测羟脯氨酸含量;Western Blot法测定细胞内α-SMA、FN、ColⅠ和ColⅢ蛋白表达;UPLC法测细胞中ASMase、ACase活性和Cer、Sph含量。结果:在本实验条件下,使用100 ng/mL PMA诱导THP-1细胞24 h后,再用不含PMA的完全培养基培养48 h是构建矽肺纤维化体外模型中人来源巨噬细胞较好的诱导方法。100 mg/mL二氧化硅(Si O2)粉尘染毒使巨噬细胞ROS、MDA的分泌增加,并使TGF-β1、TNF-α、IL-8等炎症因子的表达呈时间依赖性增加,rAC的干预能抑制这一现象。采用100mg/m L SiO2粉尘染毒12 h后的巨噬细胞上清液能诱导HFL-1细胞α-SMA、FN、ColⅠ和ColⅢ的表达增加并具有时间依赖关系;同时使HFL-1细胞内ASMase、ACase活性增加,Cer、Sph、S1P表达增加;rAC在SiO2粉尘染毒阶段和上清液刺激阶段的干预均能鞘磷脂信号通路的激活并能不同程度减缓HFL-1细胞纤维化。结论:Si O2粉尘染毒可能通过启动巨噬细胞氧化应激,促其分泌多种炎症因子及激活HFL-1细胞鞘磷脂类信号通路,进而刺激HFL-1细胞向肌成纤维细胞的转化并分泌一系列细胞外基质,导致HFL-1细胞纤维化。鞘磷脂类信号通路可能作为上游信号通路,同时参与了THP-1来源巨噬细胞氧化应激、炎症因子分泌及HFL-1成纤维细胞纤维化反应的过程。外源性r AC干预可能通过抑制巨噬细胞氧化应激和炎症因子分泌,阻抑HFL-1细胞鞘磷脂类信号通路的活化和纤维化相关蛋白表达,从而拮抗矽尘致HFL-1细胞纤维化的发生和发展。(本文来源于《2019全国呼吸毒理与卫生毒理学术研讨会论文集》期刊2019-10-25）
王馨悦,王素华,王丽,赵宇航,高艳荣[2]（2019）在《亚砷酸钠致人胚肺成纤维细胞损伤中自噬和凋亡的关系》一文中研究指出[背景]砷可导致细胞损伤,引起细胞自噬和凋亡,而细胞自噬与凋亡之间目前没有明确界限,二者关系目前尚不明确。[目的]探讨亚砷酸钠致人胚肺成纤维细胞(HELF)损伤中细胞自噬与凋亡的关系。[方法 ]HELF细胞株培养3 d后传代,随机分为对照组、亚砷酸钠处理组(亚砷酸钠浓度分别为5、10、20μmol/L)、自噬抑制组(20μmol/L NaAsO_2+5 mmol/L 3-甲基腺嘌呤)、凋亡抑制组(20μmol/L NaAsO_2+20μmol/L Caspase抑制剂z-VAD-FMK),染毒48 h后,MTT实验检测细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态学改变。提取细胞上清液、蛋白,ELISA法测定上清液中白介素(IL)-1β、IL-6、干扰素受体(IFN)-α含量。Western blot检测自噬相关蛋白p62和LC3的表达水平。Caspase试剂盒检测凋亡相关蛋白caspase3/7。[结果 ]各组细胞存活率在染毒12、24、48 h后均低于对照组(P <0.05)。随着染毒浓度增加细胞形态学改变,由紧密的梭形逐渐变为松散的圆形。10、20μmol/L砷染毒组HELF细胞上清液中IL-1β表达量升高(P <0.05);各砷染毒组细胞培养上清液中促炎因子IL-6、IFN-α表达量高于对照组(P <0.05);与20μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组呈现促炎因子表达量升高的趋势,凋亡抑制组呈现降低的趋势。与对照组相比,砷染毒组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达量呈升高的趋势,p62蛋白的表达量呈降低的趋势;与20μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达量降低(P <0.05),p62蛋白表达量呈升高的趋势;凋亡抑制组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达水平呈升高趋势,p62蛋白的表达水平呈降低趋势。随着染毒浓度增加,与对照组相比,10、20μmol/L砷暴露组凋亡相关蛋白caspase3/7表达量增多(P <0.05);与20μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组caspase3/7表达量升高(P <0.05),凋亡抑制组表达量降低(P <0.05)。[结论 ]亚砷酸钠染毒后可引起HELF发生炎症反应、细胞自噬和凋亡,且细胞自噬与凋亡之间可能存在一定的拮抗关系。(本文来源于《环境与职业医学》期刊2019年09期）
李鹏,刘咏梅,刘振华[3]（2019）在《敲减HMGA2基因抑制TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞生长及胶原合成》一文中研究指出目的:探讨敲减高迁移率族蛋白A2(HMGA2)基因表达对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞活力、凋亡、胶原合成和氧化应激的影响。方法:实验分为空白组、TGF-β1组、阴性转染对照组和HMGA2 siRNA(si-HMGA2)组。Western blot检测HMGA2、AKT和p-AKT蛋白水平;MTT法及流式细胞术分别检测细胞活力及凋亡率;RT-qPCR检测Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)和COL-Ⅲ的mRNA表达;DCFH-DA探针检测细胞活性氧簇(ROS)的含量。结果:与空白组比较,TGF-β1组HMGA2和p-AKT的蛋白水平、细胞活力及COL-Ⅰ和COL-Ⅲ的mRNA表达均明显升高,细胞凋亡率及ROS水平则明显降低(P<0.05);与TGF-β1组比较,si-HMGA2组HMGA2和p-AKT的蛋白水平、细胞活力及COL-Ⅰ和COL-Ⅲ的mRNA表达均明显降低,细胞凋亡率及ROS水平则明显升高(P<0.05)。结论:敲减HMGA2基因可抑制TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞生长和胶原合成,促进细胞凋亡及ROS产生,其机制可能与下调PI3K/AKT信号通路有关。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2019年09期）
周志斌,杜玉霞,蔡茂胜,曾奕明[4]（2019）在《脱氧核糖核酸酶和阿替普酶对人胚肺成纤维细胞生长的影响》一文中研究指出目的观察脱氧核糖核酸酶(DNase)、阿替普酶(rt-PA)和联合酶(DNase+rt-PA)对人胚肺成纤维细胞(HFL-1)生长的影响。方法将HFL-1细胞分为4组:空白组、DNase组、rt-PA组和联合酶组。除空白组外,其余3组加入极低、低、中、高4个剂量的相应酶:DNase(2,5,10,20 U)、rt-PA(4,10,20,40μg)和联合酶(2 U+4μg,5 U+10μg,10 U+20μg,20 U+40μg)。用四甲基偶氮唑蓝法测得的光密度(OD)值代表酶作用24,48,72,96 h后的细胞增殖水平。结果细胞培养96 h后,空白组和中、高2个剂量DNase组的细胞增殖水平(OD值)分别为1.02±0.30, 0.52±0.12和0.34±0.05,中、高2个剂量DNase组与空白组比较差异均有统计学意义(均P<0.01);低、中2个剂量联合酶组OD值分别为0.51±0.01,0.27±0.01,联合酶与DNase单酶的低、中2个剂量(0.75±0.04,0.52±0.12)相比,对细胞的抑制作用更强,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 DNase、rt-PA对HFL-1细胞的生长具有抑制作用,在一定剂量范围内,rt-PA能增强DNase的抑制作用。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2019年16期）
孙蕊,牛洁,曹芳,夏瑶丹,焦扬[5]（2019）在《薯蓣皂苷元对LPS诱导的人胚肺成纤维细胞的干预机制研究》一文中研究指出目的基于MAPK信号通路研究薯蓣皂苷元对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)的影响,探讨薯蓣皂苷元干预肺间质纤维化的机制。方法通过LPS诱导MRC-5细胞建立肺纤维化模型,利用CCK-8法检测细胞增殖水平,免疫荧光法检测α-平滑肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)表达水平,ELISA法检测TGF-β1、IL-6蛋白表达水平,Western blot测定p-38、p-p38、jnk、p-jnk表达水平。结果以LPS诱导MRC-5细胞能够成功建立肺纤维化细胞模型,40μmol/L薯蓣皂苷元组细胞增殖水平较模型组明显降低(P<0.01),薯蓣皂苷元组α-SMA表达水平较模型组均有明显下降(P<0.01)。与模型组比,10μmol/L薯蓣皂苷元组、40μmol/L薯蓣皂苷元组TGF-β1表达水平明显下降(P<0.01),20μmol/L薯蓣皂苷元组TGF-β1表达水平未见明显下降(P>0.05);与模型组比,10μmol/L薯蓣皂苷元组IL-6表达水平未见明显下降(P>0.05),而20μmol/L及40μmol/L薯蓣皂苷元组IL-6表达明显高于模型组(P<0.01);各组p-38、jnk表达水平无明显差异(P>0.05),p-p38、p-jnk表达水平薯蓣皂苷元组较模型组明显下降(P<0.01)。结论薯蓣皂苷元通过下调LPS诱导的MRC-5细胞中的TGF-β1的表达,可以抑制Smad通路及非Smad通路中诱导肺纤维化的信号通路,阻碍上皮细胞间质化(EMT)进程。并且通过下调TGF-β1表达,薯蓣皂苷元可以有效地抑制MAPK通路中的p38MAPK通路及jnk通路的磷酸化激活,降低α-SMA表达,减少炎性反应、细胞凋亡的发生,从而达到抗肺纤维化的目的。(本文来源于《环球中医药》期刊2019年07期）
孙金玲[6]（2019）在《柴胡皂甙D通过调控TGF-β1/Smads信号通路抑制人胚肺成纤维细胞增殖和胶原蛋白产生》一文中研究指出目的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种进行性、局限于肺部、病因不明、以慢性进行性肺纤维化伴蜂窝状改变为特征的肺部疾病。发病机制尚不明确,预后不佳。目前临床上仍缺乏有效的治疗手段。其病理特点主要表现为肺泡上皮细胞损伤、成纤维细胞大量聚集以及细胞外基质聚积的普通间质性肺炎(usual interstitial pneumonia,UIP)。柴胡皂甙d(saikosaponin d,SSd)为中药柴胡的主要有效成分,研究表明其具有抗炎、抗肿瘤、抗器官纤维化等作用。本研究通过探讨SSd对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞增殖转化、胶原形成以及对TGF-β1/果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白家族(Smads)信号通路的影响,深入研究SSd抗肺纤维化的作用机制,以期为临床治疗IPF提供潜在的靶点。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HELF),设立五组:正常对照组(单纯含胎牛血清DMEM培养基培养)、模型组即1 ng/mL TGF-β1处理组、低浓度SSD组即1 ng/mL TGF-β1联合0.5μmol/L SSD处理组、中浓度SSD组即1 ng/mL TGF-β1联合1μmol/L SSD处理组和高浓度SSD组即1 ng/mL TGF-β1联合2μmol/L SSD处理组。通过CCK-8法检测各组HELF的增殖情况,荧光定量PCR法检测各组细胞中Smad2、Smad3、Smad7的mRNA相对表达水平,Western blottting法检测各组细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原蛋白(Col I)、Smad2、Smad3、磷酸化的Smad2(p-Smad2)、p-Smad3、Smad7的蛋白表达水平。结果(1)与正常对照组比较,模型组细胞增殖活性明显增加(P<0.05),Col-I、α-SMA表达增加(P<0.05),Smad2和Smad3 mRNA的表达显着上调(P<0.05),Smad7mRNA表达显着下调(P<0.05);Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达显着增加(P<0.05),Smad7的蛋白表达显着下调(P<0.05);(2)与模型组比较,SSd不同剂量处理组细胞增殖降低(P<0.01),均逆转上述指标的改变,中高浓度组作用较明显,呈一定的剂量效应关系(P<0.05)。结论SSd能通过调控TGF-β1/Smad信号途径,抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞增殖转化及胶原生成,从而发挥对肺纤维化的治疗效果。(本文来源于《江苏大学》期刊2019-05-01）
沈明香[7]（2019）在《EGF诱导人胚肺成纤维细胞衰老的机制研究》一文中研究指出研究背景与目的:细胞衰老是细胞发生不可逆的生长停滞的现象。衰老细胞具有一系列的特征,如β-半乳糖苷酶活性升高、DNA损伤累积、衰老相关的异染色质凝集点(SAHF)增加及衰老相关蛋白的表达增加等。表皮生长因子EGF是一个重要的有丝分裂原,目前大多数的研究表明EGF能够抑制细胞衰老、延长细胞寿命,仅有少数研究提出EGF能够抑制细胞生长、诱导细胞衰老或凋亡,但其中的机制尚未被阐明。本研究发现EGF能够诱导人胚肺成纤维细胞IMR90发生衰老,所以本课题主要对EGF诱导IMR90细胞衰老的机制进行了探究。研究方法与结果:在本研究中,我们发现EGF能够诱导IMR90细胞发生衰老。首先,细胞生长曲线和Brd U掺入实验证明了EGF处理抑制了IMR90细胞的生长。通过观察,发现经EGF处理的细胞呈现出衰老细胞的表征,SA-β-gal染色和DAPI染色的结果表明EGF诱导IMR90细胞发生了衰老。在此基础上,免疫荧光和免疫印迹技术的检测结果显示,53BP1凝集点形成,γH2A.X和53BP1蛋白水平上调,表明EGF处理引发了DNA损伤反应;p38、p-p38、p53、p-p53、p21和p16蛋白水平上调,表明EGF激活了衰老相关信号通路。在探究EGF诱导IMR90细胞衰老的机制的过程中,Ras-GTP assay和免疫印迹的结果表明EGF刺激之后,细胞内的Ras-GTP、p-ERK1/2蛋白水平上调,EGF激活了细胞内的Ras信号通路;利用慢病毒敲减BRaf抑制了EGF引起的细胞衰老。因此,推测EGF是通过激活Ras-Raf-MEK-ERK通路诱导IMR90细胞发生衰老的。此外,我们还发现EGF诱导IMR90细胞衰老与细胞周期相关,处于G2/M期的细胞更容易被EGF诱导发生衰老。研究结论与意义:综合以上研究内容,我们发现EGF通过激活EGFR下游的Ras信号通路,引起细胞内DNA损伤反应和衰老相关信号通路的激活,导致IMR90细胞的衰老。这些研究成果丰富了人们对EGF生物学功能的认知,有助于推动EGF诱导细胞衰老的机制的研究。(本文来源于《江苏大学》期刊2019-05-01）
毕磊[8]（2019）在《siRNA沉默IGFBP5对人胚肺成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响》一文中研究指出目的用硅肺患者肺泡巨噬细胞的上清培养液刺激人肺成纤维细胞(MRC-5)建立体外硅肺模型;应用RNA干扰技术沉默MRC-5中IGFBP5基因,免疫细胞化学法和ELISA法检测MRC-5细胞中I型和III型胶原的表达和含量,探讨IGFBP5基因与硅肺纤维化的关系。方法1体外硅肺模型建立:于应急管理部尘肺病康复中心取得II期硅肺患者的支气管肺泡灌洗液中的肺泡巨噬细胞,体外培养18h后收集用含SiO_2(50μg/ml)的培养液刺激肺泡巨噬细胞所获得条件培养上清,用条件培养上清与MRC-5共孵育建立体外硅肺模型。2 IGFBP5干扰质粒构建及最佳干扰质粒的选择:上海吉玛公司构建IGFBP5干扰质粒及阴性质粒,将干扰质粒及阴性质粒转染入MRC-5内,48h后采用RT-PCR和Western blot法筛选出干扰效率最高的载体。3实验分组:分为空白组(C)、SiO_2刺激组(S)、质粒转染组(T)和阴性质粒转染组(N)。4 MRC-5中I型和III型胶原蛋白的表达和含量的测定:各组MRC-5培养12小时(半天)、24小时(一天)、36小时(一天半)、48小时(两天)和60小时(两天半)后,ICC法和ELISA法检测两种胶原蛋白的表达和含量。结果1大容量双肺灌洗术后灌洗液中获得含有大量活化的巨噬细胞,经二氧化硅粉尘二次刺激后获得条件培养上清。2条件培养上清能有效地刺激MRC-5细胞产生I、Ⅲ型。3干扰质粒转染后激光共聚焦显微镜下观察质粒:脂质体LipofectamineTM2000=2ug:3ul时,细胞转染效率最高。4通过RT-PCR、Western-blot方法检测四种质粒转染后IGFBP5mRNA和蛋白的表达,四种质粒都能不同程度的沉默IGFBP5基因,干扰质粒转染MRC-5细胞的IGFBP5的mRNA和蛋白的相对表达量较空白组均有降低,四组质粒转染组蛋白的相对表达量与阴性质粒转染组相比,与对照组相比,均具有统计学意义,RT-PCR方法(F=156.478,P<0.05),Western-blot方法(F=967.144,P<0.05),其中质粒A的效果最明显,降低IGFBP5的蛋白效果最好。5 ICC法和ELISA法检测MRC-5中的I、III型胶原的表达和含量相同时间点C组MRC-5中的I、III型胶原的表达和含量最低,S组和N组MRC-5中的I、III型胶原的表达和含量最高,S组和N组表达无差别,P>0.05。T组MRC-5中的I、III型胶原的表达和含量明显低于S组和N组,高于C组,两两比较差异有统计学意义,P<0.05。同一组不同时间点比较MRC-5中的I、III型胶原的表达和含量,12h、24h、36h、48h、60h五个时间点,可见I型胶原的表达和含量36h小时达到峰值,III型胶原的表达和含量48h小时达到峰值。结论1利用RNA干扰技术,将IGFBP5-SiRNA转染入MRC-5细胞内,可有效抑制IGFBP5基因的表达。2沉默硅肺相关上调基因IGFBP5后,经AM上清刺激的MRC-5细胞内I、III型胶原蛋白表达量减少。图10幅;表7个;参77篇。(本文来源于《华北理工大学》期刊2019-04-09）
王路遥[9]（2019）在《纳米二氧化硅诱导巨噬细胞引起人胚肺成纤维细胞蛋白表达差异研究》一文中研究指出目的本实验建立巨噬细胞-成纤维细胞体外模型,将纳米二氧化硅刺激的THP-1源性巨噬细胞上清作用于MRC-5,通过蛋白质组学方法检测MRC-5蛋白表达水平变化,探讨纳米二氧化硅对MRC-5蛋白表达的影响,为探索人体纳米二氧化硅暴露导致呼吸系统炎症反应和纤维化趋势的生物标志物提供依据。方法常规培养THP-1和MRC-5细胞。实验前预先用PMA将THP-1诱导成巨噬细胞。将THP-1源性巨噬细胞随机分为对照组和五个浓度梯度实验组,粉尘作用浓度分别为(0、6.25、12.5、25、50、100)μg/ml,作用时间为24h。MTT法检测细胞存活率,AnnexinV-FITC法检测细胞凋亡率,酶偶联比色法和TBA法分别检测细胞上清LDH和MDA水平。同样将MRC-5随机分为对照组和五个浓度梯度实验组,分别加入相应浓度处理组的巨噬细胞上清,作用时间为24h。MTT法检测细胞增值率,样本碱水解法检测细胞上清Hyp的分泌水平,阐述纳米二氧化硅对巨噬细胞及成纤维细胞的损伤作用,评价体外模型构建是否成功。选取巨噬细胞上清对MRC-5毒性作用最明显的一组,使用液相-质谱仪对该组和对照组细胞蛋白进行定性、定量分析,筛选两组间的差异蛋白。选取其中有代表性的蛋白经蛋白免疫印迹法验证差异性,评价质谱结果的可靠性。其中,对细胞存活率、增值率等常规实验均设立相同浓度梯度的微米二氧化硅处理组作为纳米作用强度的阳性对照,差异蛋白检测仅针对纳米二氧化硅实验组。结果1透射电镜结果显示,实验所用纳米颗粒粒径在20~50nm之间;粉尘粒度仪结果显示,无血清RMPI1640培养基中纳米颗粒轻微团聚,平均粒径为166.8nm。2倒置显微镜下观察,纳米组的巨噬细胞出现细胞变圆、细胞膜皱缩、胞质内产生空泡甚至破裂死亡等变化,随着粉尘浓度的升高,胞质内颗粒物沉积量增加,细胞贴壁状态变差。3 MTT法检测巨噬细胞的存活率:纳米组巨噬细胞存活率在粉尘浓度为6.25μg/ml时较对照组无统计学差异,其余各组均较对照组低(P<0.05);与同浓度微米组相比,纳米组在粉尘浓度为6.25、12.5、25μg/ml时细胞存活率低(P<0.05),其余各组无统计学差异。4 Annexin V-FITC法检测巨噬细胞凋亡水平:纳米组各剂量组细胞凋亡率较对照组均高(P<0.05);与同浓度微米组相比,纳米组在粉尘浓度为6.25、25μg/ml时细胞凋亡率高(P<0.05),其余各组无统计学差异。5酶偶联比色法检测细胞上清LDH分泌水平:纳米组巨噬细胞上清LDH含量在粉尘浓度为6.25μg/ml时较对照组无统计学差异,其余各组细胞上清LDH含量均较对照组高(P<0.05);与同浓度微米组相比,纳米组在粉尘浓度为25、50、100μg/ml时巨噬细胞上清的LDH活力高(P<0.05),其余各组无统计学差异。6 TBA法检测细胞上清MDA分泌水平:纳米组细胞上清MDA含量在粉尘浓度为6.25μg/ml时较对照组无统计学差异,其余组细胞上清MDA含量较对照组上升(P<0.05);与同浓度微米组相比,纳米各处理组MDA活力差异均无统计学意义。7 MTT法检测MRC-5的增值率:纳米组在粉尘浓度为6.25μg/ml时细胞增值率较对照组无统计学差异,其余组细胞增值率较对照组高(P<0.05);与同浓度微米组相比,纳米组在12.5μg/ml时细胞增值率高(P<0.05),其余各组均无统计学差异。8样本碱水解法检测MRC-5上清Hyp的分泌水平::纳米组在粉尘浓度为6.25、12.5μg/ml时细胞上清Hyp含量与较照组无统计学差异,其余各组上清Hyp含量较对照组高(P<0.05);与同浓度微米组相比,粉尘浓度为100μg/ml时纳米组MRC-5上清Hyp含量高(P<0.05),其余各组差异无统计学意义。9液相-质谱仪检测差异蛋白,western-blot法检测差异蛋白:经检测分析,两组样品共检测蛋白质3174个,其中差异蛋白234个。差异蛋白主要富集在核糖体通路,参与调节细胞凋亡、生长与分化,监督蛋白正确折迭,对外源性刺激产生氧化应激反应等生物过程;选择表达上调的蛋白中与其他蛋白相互作用明显且有代表性的P4HB和HSP90B1蛋白进行验证差异蛋白的实验,结果显示,实验组两种目的蛋白较对照组表达均高(P<0.05),验证了质谱结果的可靠性。结论1纳米二氧化硅可降低THP-1源性巨噬细胞的存活率,导致细胞损伤并发生凋亡作用,在相应浓度作用强度大于微米二氧化硅。2纳米二氧化硅作用于巨噬细胞诱发其分泌的细胞因子可引起MRC-5增值和Hyp分泌量增加,在相应浓度作用强度大于微米二氧化硅。3纳米二氧化硅作用于巨噬细胞诱发其分泌的细胞因子可引起MRC-5发生蛋白水平的改变,调控细胞凋亡、蛋白合成及细胞生长等生物过程。其中,SerpinB2蛋白可能是人体肺成纤维细胞暴露于纳米二氧化硅颗粒引起炎症反应和纤维化趋势的生物标志物。图10幅;表10个,参115篇。(本文来源于《华北理工大学》期刊2019-04-08）
郭彩霞,于洪涛,石红梅,商玉立[10]（2019）在《COX-2基因对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞生长及Notch信号通路的影响及其作用机制》一文中研究指出目的探讨抑制环氧合酶-2(COX-2)基因表达对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞系MRC-5活力、胶原合成和转化及Notch信号通路的影响。方法将MRC-5细胞分为对照组、TGF-β1组、NC组和COX-2-siRNA组,各组细胞处理48 h,Western blotting检测COX-2、胶原合成相关的COL-Ⅰ和COL-Ⅲ、 EMT标志物α-SMA及Notch信号通路受体Notch1及配体Jagged1的蛋白表达;CCK8法检测各组细胞活力。结果 TGF-β1组COX-2的表达显着高于对照组,COX-2-siRNA组COX-2的表达显着低于TGF-β1组(P<0.05),NC组COX-2的表达与TGF-β1组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,TGF-β1组细胞活力及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、Notch1和Jagged1的蛋白表达均显着升高(P<0.05),与TGF-β1组比较,COX-2-siRNA组细胞活力及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、Notch1和Jagged1的蛋白表达均显着降低(P<0.05)。结论抑制COX-2基因表达中可能通过降低MRC-5细胞活力、抑制细胞胶原合成和转化,并下调Notch信号通路,从而对肺纤维化起保护作用。(本文来源于《中国比较医学杂志》期刊2019年03期）
人胚肺成纤维论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[背景]砷可导致细胞损伤,引起细胞自噬和凋亡,而细胞自噬与凋亡之间目前没有明确界限,二者关系目前尚不明确。[目的]探讨亚砷酸钠致人胚肺成纤维细胞(HELF)损伤中细胞自噬与凋亡的关系。[方法 ]HELF细胞株培养3 d后传代,随机分为对照组、亚砷酸钠处理组(亚砷酸钠浓度分别为5、10、20μmol/L)、自噬抑制组(20μmol/L NaAsO_2+5 mmol/L 3-甲基腺嘌呤)、凋亡抑制组(20μmol/L NaAsO_2+20μmol/L Caspase抑制剂z-VAD-FMK),染毒48 h后,MTT实验检测细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态学改变。提取细胞上清液、蛋白,ELISA法测定上清液中白介素(IL)-1β、IL-6、干扰素受体(IFN)-α含量。Western blot检测自噬相关蛋白p62和LC3的表达水平。Caspase试剂盒检测凋亡相关蛋白caspase3/7。[结果 ]各组细胞存活率在染毒12、24、48 h后均低于对照组(P <0.05)。随着染毒浓度增加细胞形态学改变,由紧密的梭形逐渐变为松散的圆形。10、20μmol/L砷染毒组HELF细胞上清液中IL-1β表达量升高(P <0.05);各砷染毒组细胞培养上清液中促炎因子IL-6、IFN-α表达量高于对照组(P <0.05);与20μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组呈现促炎因子表达量升高的趋势,凋亡抑制组呈现降低的趋势。与对照组相比,砷染毒组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达量呈升高的趋势,p62蛋白的表达量呈降低的趋势;与20μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达量降低(P <0.05),p62蛋白表达量呈升高的趋势;凋亡抑制组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达水平呈升高趋势,p62蛋白的表达水平呈降低趋势。随着染毒浓度增加,与对照组相比,10、20μmol/L砷暴露组凋亡相关蛋白caspase3/7表达量增多(P <0.05);与20μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组caspase3/7表达量升高(P <0.05),凋亡抑制组表达量降低(P <0.05)。[结论 ]亚砷酸钠染毒后可引起HELF发生炎症反应、细胞自噬和凋亡,且细胞自噬与凋亡之间可能存在一定的拮抗关系。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人胚肺成纤维论文参考文献
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