导读:本文包含了阳春砂论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:阳春砂,果型,乙酸龙脑酯,挥发油
阳春砂论文文献综述
王延谦,杨春勇,罗承彬,彭建明,李戈[1]（2019）在《不同产地阳春砂果实形态特征与药用成分分析》一文中研究指出[目的]分析不同产地阳春砂果实形态特征与药用成分含量差异,探究更科学的品质评价方法。[方法]收集云南、广东、广西3个产区共9个产地的阳春砂成熟新鲜果实,采用电子数显卡尺和电子天平测量果实形态特征,采用气相色谱法检测乙酸龙脑酯和挥发油含量,并利用加权系数法对药用成分进行综合加权评分。[结果]阳春砂存在大果型、小果型、长果型、圆果型、红果型、黑果型6种果型特征,道地产地广东阳春均为红色小果长形,云南产果型变异最丰富。广东阳春春湾镇产乙酸龙脑酯含量最高,云南马关八寨镇产总挥发油含量最高,采用加权系数法进行综合加权评分,云南景洪基诺乡产评分最高。[结论]根据药用成分含量和综合加权评分将阳春砂分为优质品、良品、合格品、不合格品4个等级,云南景洪基诺乡产为优质品,广东阳春春湾镇产为良品,其他均为合格品。该研究可为不同产地阳春砂鉴定和砂仁药材商品质量控制提供一定参考。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2019年19期）
任薇,杜建平,夏能能,赵自明[2]（2019）在《基于天眼查对岭南道地药材阳春砂、广藿香、广佛手生产基地的分析》一文中研究指出以首批纳入《广东省岭南中药保护条例》的品种阳春砂、广藿香、广佛手为例,基于政府公开数据的集成平台天眼查系统对其在广东省内的生产种植基地进行分析,以期掌握其分布和发展现状,为后续制定相关中药材生产基地评估标准打下基础。(本文来源于《按摩与康复医学》期刊2019年12期）
王虹,李萌,马东明,叶鹏,詹若挺[3]（2019）在《阳春砂萜类合酶AvTPS1启动子的克隆及其活性分析》一文中研究指出目的获得药用植物阳春砂Amomumvillousm的萜类合酶基因Av TPS1的启动子并进行活性分析。方法从阳春砂叶片基因组DNA(g DNA)中克隆获得Av TPS1基因,再通过FPNI-PCR的方法从阳春砂叶片g DNA中克隆Av TPS1的启动子并进行序列分析,构建由该启动子驱动β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)的重组表达载体p CAM-Av TPS1p,利用农杆菌介导法注射侵染烟草Nicotianabenthamiana叶片进行瞬时表达来验证Av TPS1启动子的活性。结果获得Av TPS1的g DNA序列长度为2444 bp,经过序列比对发现Av TPS1含有7个外显子和6个内含子;通过FPNI-PCR成功获得568bp的Av TPS1启动子序列,其含有10种顺式作用元件,包括保守元件TATA-box和CAAT-box,以及可被转录因子MYC结合的G-box等;通过GUS染色发现Av TPS1启动子启动了GUS基因的表达,使转基因烟草叶片呈现蓝色。结论 Av TPS1启动子被成功克隆,且通过实验验证其具有启动基因表达的功能,为进一步研究Av TPS1在萜类合成途径的功能及其受转录因子调节的机制奠定了基础。(本文来源于《中草药》期刊2019年09期）
李萌,王虹,赵海莹,黄韵萍,杨锦芬[4]（2019）在《阳春砂WRKY40的克隆、分析及原核表达》一文中研究指出转录因子可有效调控植物次生代谢产物的生物合成,本研究从姜科药用植物阳春砂(Amomum villosum Lour.)中克隆获得两个WRKY转录因子基因,命名为AvWRKY 40-1和AvWRKY 40-2。两个基因的编码框分别为852 bp和885 bp,分别编码283和294个氨基酸。Av WRKY 40-1和Av WRKY 40-2编码的蛋白序列一致性为75%,在GenBank中均比对上拟南芥的WRKY 40,且均含有WRKY转录因子家族所共有的WRKKYGQK七肽序列及CX5CX23HNH锌指结构域。系统发育进化树表明:Av WRKY 40-1和Av WRKY 40-2与菠萝(Ananas comosus)的AcWRKY 71亲缘关系最近,且与单子叶植物的WRKY聚为一支。两个基因在阳春砂果皮和种子团中的表达有差异,并且与阳春砂转录组中筛选出来的萜类合酶基因表达相关性也存在差异,AvWRKY 40-1表现出与萜类合酶基因更高的相关性。成功构建了两个基因的重组表达载体pDEST 17-Av WRKY 40-1和pDEST 17-Av WRKY 40-2,经诱导表达得到其融合蛋白。本研究首次克隆阳春砂的WRKY类转录因子基因并获得其融合蛋白,为后续Av WRKY 40-1和Av WRKY 40-2的功能鉴定及其对萜类的代谢调控研究提供基础。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年06期）
邱佳佳,罗登花,刘洋,刘军民[5]（2019）在《道地产区阳春砂不同种质类型的果实品质分析》一文中研究指出目的对道地产区阳春砂不同种质类型的果实品质进行分析和比较,为其种质资源的评价及优良品种选育研究提供科学依据。方法采用常规的中药材性状鉴定方法观察与描述阳春砂不同种质类型(长果、圆果、黄苗仔)果实的性状特征;照《中国药典》(2015年版四部)挥发油测定法甲法测定种子团中挥发油的含量,并采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术结合质谱数据库检索系统对挥发油组分进行分离鉴定,运用色谱峰面积归一化法计算各组分相对质量比;采用气相色谱法测定不同种质类型阳春砂果实中樟脑、龙脑及乙酸龙脑酯含量。结果阳春砂不同种质类型的果实外观性状特征上的差异主要体现在形状、大小、果皮厚度及种子团粒数等方面。长果、圆果和黄苗仔的挥发油含量分别为3.45%、3.33%、3.15%;乙酸龙脑酯含量分别为1.56%、1.19%、0.92%;樟脑含量分别为0.16%、0.15%、0.14%;龙脑含量分别为0.26%、0.12%、0.09%。叁者的乙酸龙脑酯及挥发油的含量均达到了现行版《中国药典》的要求。结论阳春砂不同种质类型果实的挥发油含量及组分存在一定的差异,长果的挥发油、乙酸龙脑酯、樟脑及龙脑的含量最高,圆果其次,黄苗仔最低,表明阳春砂不同种质类型的果实品质存在一定的差异。(本文来源于《中药新药与临床药理》期刊2019年02期）
李明晓,陈树辉,苏景,汤丽云,徐杰[6]（2019）在《阳春砂愈伤组织的诱导》一文中研究指出目的:通过阳春砂组织培养获得愈伤组织,建立阳春砂愈伤组织的诱导体系。方法:将阳春砂根状茎芽及阳春砂试管苗的茎段、根尖作为愈伤组织诱导的外植体材料,接种到以MS为基本培养基,分别添加不同浓度的6-苄基腺嘌呤(6-BA),ɑ-萘乙酸(NAA)及2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的培养基中(各培养基的p H约为5. 8),探讨不同外植体材料及不同培养基对阳春砂愈伤组织诱导的影响。结果:研究结果显示,阳春砂根状茎芽及试管苗的茎段、根尖3种外植体材料均能有效地诱导产生愈伤组织;其中阳春砂根状茎芽、试管苗茎段2种外植体材料诱导产生愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA(1. 5 mg·L-1)+2,4-D(1. 0 mg·L-1)+NAA(0. 5 mg·L-1),最高诱导率分别为15%和60%;试管苗根尖诱导产生愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA(2. 0 mg·L-1)+2,4-D(1. 0 mg·L-1)+NAA(1. 0 mg·L-1),最高诱导率76%,为阳春砂愈伤组织诱导的最佳外植体材料。结论:该研究初步建立了阳春砂的根状茎芽及试管苗的茎段、根尖3种外植体的愈伤组织诱导体系,试管苗根尖为愈伤组织诱导的最佳外植体。(本文来源于《中国实验方剂学杂志》期刊2019年08期）
魏洁书,杨锦芬,詹若挺[7]（2018）在《基于rbcL基因的阳春砂及其5种同属混淆品的鉴别》一文中研究指出目的采用基于rbcL基因的DNA条形码鉴别阳春砂及其5种同属混淆品。方法从Gen Bank数据库获取阳春砂与5种同属混淆品的rbcL基因序列。采用Clustal X软件进行序列比对分析,用MEGA软件构建聚类树。结果 rbcL序列比对后有效序列为491bp,GC平均含量为42. 2%,阳春砂及其同属混淆品白豆蔻、云南豆蔻、长柄豆蔻、九翅豆蔻的rbcL序列共存在10处碱基差异,与草果的rbcL序列存在55处碱基差异,基于rbcL基因的聚类树能较好地区分阳春砂及其5种同属混淆品。结论 rbcL基因能有效地鉴别阳春砂及其5种同属混淆品。(本文来源于《时珍国医国药》期刊2018年10期）
王虹[8]（2018）在《阳春砂单萜合酶基因的功能鉴定和MYC转录因子的克隆及原核表达》一文中研究指出1.目的阳春砂Amomum villosum Lour.的干燥成熟果实称为砂仁,是广东的道地药材之一,具有温脾止泻、化湿开胃、理气安胎的功效。本课题组前期已经对不同成熟时期和经过茉莉酸甲酯诱导的阳春砂进行了转录组测序,并筛选出了多个预测与阳春砂挥发性萜类合成相关的萜类合酶和转录因子基因,本论文对已克隆的单萜合酶基因AvTPS1和AvTPS3进行功能鉴定,并对两个转录因子AvMYC2、AvMYC4b基因进行克隆、蛋白纯化及原核表达,以进一步认识阳春砂的萜类次生代谢途径中的关键基因。2.方法2.1 AvTPS1、AvTPS3的功能鉴定2.1.1蛋白原核表达及酶促反应以课题组前期克隆的AvTPS1和AvTPS3为基础,利用In-fusion反应将去除转运肽的编码区构建到带双His标签的原核表达载体pET32a上,利用大肠杆菌Rosetta表达菌株进行原核表达,利用Ni-NTA柱纯化重组蛋白AvTPS1和AvTPS3,进行酶促反应并利用GC-MS进行产物检测。2.1.2亚细胞定位利用In-fusoin反应将AvTPS1和AvTPS3的编码区构建到瞬时表达载体pAN580上,用酶解法分离获得烟草Nicotiana tabacum原生质体,通过PEG介导法将重组载体转化烟草原生质体,利用激光共聚焦显微镜观察AvTPS1和AvTPS3在植物细胞内的定位。2.1.3实时荧光定量PCR和阳春砂挥发性萜类的测定以阳春砂45 DAF(Days After Flower)和75 DAF的果实(分为果皮和种子团)以及叶、根、匍匐茎为材料,分别提取阳春砂总RNA并反转录,利用实时荧光定量PCR法测定基因相对表达量;用超声提取法和GC-MS测定阳春砂上述组织部位的挥发性萜类含量。对AvTPS1和AvTPS3在阳春砂不同组织部位的基因相对表达量与相关的挥发性单萜含量进行分析。2.1.4启动子的克隆及活性分析从阳春砂叶片基因组DNA(gDNA)中克隆AvTPS1、AvTPS3基因,再根据AvTPS1和AvTPS3 gDNA序列设计引物,通过FPNI-PCR的方法从阳春砂叶片gDNA中克隆启动子并进行序列分析,构建由该启动子驱动GUS基因的重组表达载体pCAMBIA-AvTPS1p,转化农杆菌。利用农杆菌介导法侵染烟草Nicotiana benthamiana叶片,进行瞬时表达验证AvTPS1启动子的活性。2.2转录因子AvMYC2、AvMYC4b的克隆及原核表达以转录组中AvMYC2(Unigene0136713)和AvMYC4b(Unigene0074125)为目标基因分别通过普通PCR和RACE进行克隆。再利用In-fusion构建表达载体pMAL-C5X-AvMYC2及pET32a-AvMYC4b,并将其转化进Rosetta菌株进行蛋白表达,分别利用MBP标签和Ni-NTA柱进行蛋白纯化。3.结果3.1阳春砂单萜合酶AvPS和AvBPPS的功能鉴定3.1.1 AvTPS1和AvTPS3的体外蛋白功能通过原核表达和分离纯化,获得AvTPS1和AvTPS3重组蛋白。经过体外酶活鉴定,AvTPS1催化GPP底物生成α-蒎烯(36.69%)和β-蒎烯(63.31%),将其命名为蒎烯合酶(pinene synthase,AvPS)。重组蛋白AvTPS3以GPP为底物,产物经过碱性磷酸酶处理后,通过GC-MS检测到龙脑基二磷酸脱磷酸后的产物龙脑(65.91%),以及莰烯(17.31%)、β-月桂烯(3.63%)和柠檬烯(13.14%),因此,按其主产物将AvTPS3命名为龙脑基二磷酸合酶(bornyl diphosphate synthase,AvBPPS)。3.1.2 AvPS和AvBPPS的亚细胞定位通过亚细胞定位实验,发现AvPS和AvBPPS均定位于叶绿体,符合生物信息学的预测和单萜合酶定位于质体的特点。3.1.3 AvPS和AvBPPS在阳春砂不同组织中的表达量与相关挥发性萜类的分析实时荧光定量PCR结果显示AvPS主要在果皮中表达,特别是在45 DAF的果皮中高表达,其他组织有少量表达,而在种子团中不表达。AvBPPS在种子团中高表达,特别是在45 DAF的种子团中显着高表达,而在其他组织的表达水平较低。挥发性萜类测定的结果表明阳春砂含有丰富的挥发性萜类,特别是单萜。总共检测到15种单萜化合物、9种倍半萜化合物,其中乙酸龙脑酯在药用部位种子团中显着富集(占总单萜相对含量(29)50%)。果皮、根、匍匐茎和叶中均检测到α-蒎烯和β-蒎烯,与AvPS的表达相符,因此推测AvPS参与阳春砂果皮、根、匍匐茎和叶中蒎烯的合成。由于蒎烯是与生物防御相关的萜类化合物,结合AvPS在果皮中的高表达和蒎烯在果皮中的高含量,推测AvPS可能参与阳春砂的生物防御。由于AvBPPS的主产物龙脑基二磷酸是龙脑、樟脑和乙酸龙脑酯的关键前体,本文分析了阳春砂挥发性萜类中与AvBPPS直接和间接相关的6种挥发性萜类(莰烯、柠檬烯、β-月桂烯和龙脑、樟脑、乙酸龙脑酯),发现AvBPPS在种子团中的高表达与这6种挥发性萜类,特别是乙酸龙脑酯,在种子团中的富集相关,推测AvBPPS是阳春砂主要药效物质乙酸龙脑酯下游生物合成途径的关键酶。3.1.4阳春砂AvPS和AvBPPS gDNA的克隆以及AvPS启动子的克隆和鉴定获得了AvPS和AvBPPS的gDNA,序列长度分别为2 444 bp和2 374 bp,经过序列比对发现它们均含有7个外显子和6个内含子。通过FPNI-PCR获得568 bp的AvPS启动子序列,其含有10种顺式作用元件,包括启动子保守元件TATA-box和CAAT-box以及可被转录因子MYC结合的G-box,推测AvPS受MYC类转录因子的调控。瞬时表达结果证明AvPS启动子启动了GUS基因的表达,具有启动子的功能。3.2阳春砂转录因子AvMYC2、AvMYC4b的克隆与原核表达克隆获得阳春砂MYC转录因子AvMYC2和AvMYC4b。AvMYC2的cDNA序列全长2 075 bp,包含171 bp的5’UTR,1644 bp的ORF和260 bp的3’UTR,编码547个氨基酸,预测蛋白大小为59 kDa。AvMYC4b全长2 579 bp,包含195bp的5’UTR,1 995 bp的ORF和389 bp的3’UTR,编码664个氨基酸,预测蛋白大小为72 kDa。经过生物信息学分析,AvMYC2、AvMYC4b氨基酸序列与其他植物的MYC相似,含有转录因子MYC家族的保守结构域,预测可定位于细胞核中。成功构建重组表达载体pMAL-C5X-AvMYC2及pET32a-AvMYC4b,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3)细胞,经过诱导表达与纯化,获得重组蛋白,与预测蛋白大小一致。4.结论本文鉴定了单萜合酶AvPS和AvBPPS的功能,AvPS生成α-蒎烯和β-蒎烯;AvBPPS以龙脑基二磷酸为主产物,以莰烯、β-月桂烯、柠檬烯为次要产物。AvPS和AvBPPS均定位于叶绿体中。AvBPPS参与乙酸龙脑酯、龙脑、樟脑、莰烯、β-月桂烯、柠檬烯的生物合成途径,是阳春砂主要药效物质乙酸龙脑酯生物合成途径的关键酶。AvPS参与阳春砂中α-蒎烯和β-蒎烯合成,根据AvPS的启动子含有G-box推测其可能受MYC转录因子的调控。另一方面,从阳春砂中克隆得到转录因子AvMYC2、AvMYC4b,并获得了相应的纯化蛋白,为其后续的生物功能鉴定及AvPS的转录调控研究奠定了基础。(本文来源于《广州中医药大学》期刊2018-05-01）
徐杰[9]（2018）在《阳春砂花丝、花柱运动机制的研究》一文中研究指出阳春砂(Amomum villosum Lour.)来源于姜科豆蔻属,是多年生常绿草本植物,以其干燥成熟的果实春砂仁入药,是着名的“四大南药”之一,具有化湿开胃、温脾止泻、理气安胎的功效,为传统的大宗常用中药材,已有1300多年的应用历史。由于阳春砂特殊的花器官结构——假合蕊柱,阻碍了蜜蜂等媒介为之授粉,导致阳春砂的自然结实率极低,仅为1.17%,严重的限制了春砂仁产业的发展。道地产区阳春市多采用人工授粉以提高产量,但人工授粉劳动强度高,而且即使通过人工授粉平均亩产仍不足5 kg,这抑制了农户种植的积极性。如果能人为改变阳春砂的花器官结构,使蜜蜂等虫媒可以帮助授粉,提高自然授粉率,从而提高阳春砂的产量,将有利于扩大春砂仁的生产,解决当前供不应求的市场现状,同时减少生产种植成本,提高农民的收入。本课题组陈红研究发现,阳春砂的假合蕊柱结构是在阳春砂小花生长发育过程中雌雄蕊的相对运动形成的。因此,本文在陈红的研究基础上进一步研究阳春砂花丝、花柱的运动机理,以期为改变阳春砂花器官结构的研究奠定基础,为提高阳春砂自然授粉率提供理论根据。研究结果如下:(1)研究了阳春砂花丝、花柱运动的结构基础和运动发生的部位以及时间采用陈红建立的阳春砂小花生长时期的划分标准,按照长度从0.5 cm的小花开始,每伸长0.5 cm为一个时期,至开花后一天共划分为0~7个不同的生长时期:第0时期、第1时期、第2时期、第3时期、第4时期、第5时期、第6时期、第7时期。第6时期为开花当天,第7时期为花后一天。通过制作不同生长时期的花丝、花柱的石蜡切片,测定了花丝和花柱在不同生长时期的细胞大小和分布。发现阳春砂花丝的运动是由于花丝远近轴侧细胞生长速率的不平衡导致的,并且这种运动是从花丝形态学上端至形态学下端依次发生的。0~3时期,花丝各部位远轴侧细胞基本均大于近轴侧,且超过近轴侧3.52%~56.00%;到了第4时期和第5时期,花丝部位4、5近轴侧的细胞比远轴侧大7.15%~29.84%;到了第6时期,花丝近轴侧各部位的细胞大小均大于远轴侧,且超过远轴2.24%~21.38%,花丝已经完全由近轴侧向远轴侧弯曲。因此,花丝的弯曲运动是由于远近轴侧细胞增大的速率不平衡导致的,运动发生时间主要始于第3~4时期,运动发生的部位始于形态学上端的部位4和部位5,逐渐向形态学下端延伸。阳春砂花柱的运动是由于花柱远近轴侧细胞的分布以及生长速率的不平衡导致的。花柱远近轴侧的结构是不对称的,近轴侧比远轴侧多了4~6层较大的薄壁细胞。在小花生长发育的全过程中,同一部位近轴侧细胞均显着大于远轴侧。不同时期部位1、2、3远近轴侧细胞大小相差不大;部位4、5近轴侧细胞比远轴侧细胞大25.36%~115.99%。小花在第3~4时期开始,部位5远近轴侧细胞迅速增大,近轴侧细胞增大71.67%,远轴侧细胞增大25.04%;到了第5~6时期,部位4近轴侧细胞迅速增大31.92%,远轴侧细胞增大18.33%,部位4、5近轴侧细胞增大的速率均大于远轴侧,导致花柱近轴侧生长速率大于远轴侧,并且由近轴侧向远轴侧运动。因此,花柱由弯曲变直的过程也是起始于3~4时期,运动发生的部位主要在部位4和部位5。远近轴侧细胞形态的不对称是其运动的基础,细胞生长速率的不平衡是其运动的根本原因。(2)研究了四种植物激素在花丝、花柱中的分布和相对含量通过免疫组化的方法测定了不同生长时期花丝、花柱中IAA、GA_3、CTK、ABA的相对含量和分布特性。3~4时期,花丝远近轴侧IAA含量均显着下降,近轴侧下降了52.05%,远轴侧下降了91.34%,远轴侧IAA含量下降的速率远大于近轴侧,导致远轴侧细胞的生长速率小于近轴侧;远轴侧CTK含量下降37.14%,而近轴侧CTK含量仅下降3.74%,远轴侧细胞分裂能力迅速减弱,花丝近轴侧细胞分裂活跃,细胞数目增多;近轴侧GA_3相对含量上升了12.02%,而远轴侧GA_3含量下降了7.05%,使近轴侧细胞生长速率大于远轴侧。因此,可能是IAA、CTK、GA_3叁者的共同作用,促进了近轴侧细胞体积的增大和细胞数目的增多,最终导致花丝从3~4时期开始,由近轴侧向远轴侧弯曲运动。1~3时期,花柱远轴侧高浓度IAA、GA_3、ABA抑制了细胞体积的增大,导致远轴侧细胞均小于近轴侧;但花柱远轴侧高浓度的IAA和GA_3协同高浓度的CTK促进了远轴侧细胞分裂,使远轴侧细胞数目增多且超过近轴侧,花柱呈现由远轴侧向近轴侧弯曲的形态。3~4时期开始,花柱近轴侧IAA、GA_3和ABA下降到适宜的浓度,对近轴侧细胞生长的抑制作用解除,而远轴侧IAA和GA_3持续上升了21.61%和33.21%,对远轴侧细胞生长的抑制增强;近轴侧CTK含量升高12.86%,且显着高于远轴侧,使近轴侧细胞分裂比远轴侧活跃,细胞数目迅速增多;因此,可能是IAA、CTK、GA_3、ABA四者的共同作用,促进花柱近轴侧细胞体积增大和数目增多,使花柱近轴侧快速伸长,导致花柱从3~4时期开始,由近轴侧向远轴侧运动,最终由弯曲形态变竖直。(3)获得了阳春砂花丝、花柱的转录组信息由于现今在NCBI中未有阳春砂的参考基因组或转录组序列,若想利用表达谱测序的方法研究花丝、花柱在弯曲运动前后基因表达量的变化,则必须构建一个总样品的转录本作为参考序列。因此我们提取1~7时期花丝、花柱的总RNA,然后等量混合,通过质检后利用Illumina测序技术进行测序,获得花丝、花柱总的转录组信息。共获得94584个unigenes,其中共有62174个unigenes被注释,注释率为65.73%。有1656个unigenes注释到植物激素信号转导途径。其中注释到生长素信号转导途径的unigenes有329个;注释到赤霉素信号转导途径的unigenes有438个;注释到细胞分裂素信号转导途径的unigenes有245个;注释到脱落酸信号转导途径的unigenes有168个;注释到油菜素内酯信号转导途径的unigenes有191个;注释到茉莉酸信号转导途径的unigenes有176个;注释到水杨酸信号转导途径的unigenes有74个;注释到乙烯信号转导途径的unigenes有139个。进一步对转录组数据进行挖掘,有42个unigenes注释到生长素生物合成酶基因;有50个unigenes注释到赤霉素生物合成酶基因;有45个unigenes注释到细胞分裂素生物合成酶基因;共有13个unigenes注释到茉莉酸生物合成酶基因;有18个unigenes注释到油菜素内酯生物合成酶基因;有29个unigenes注释到脱落酸生物合成酶基因;有24个unigenes注释到水杨酸生物合成酶基因;共有23个unigenes注释到乙烯生物合成酶基因。(4)获得了不同生长时期花丝、花柱的表达谱,筛选出了可能调控花丝、花柱运动的关键基因以获得的阳春砂花丝、花柱的转录组作为参考序列,对不同时期花丝、花柱分别单独进行表达谱测序分析。提取1~7时期花丝、花柱的总RNA,通过质检后采用BGI-Seq500测定不同生长时期花丝、花柱的基因表达谱,关注1~7时期花丝、花柱激素合成酶以及信号转导关键因子基因表达量的变化,并且筛选出了大量可能调控花丝、花柱弯曲运动的差异表达的基因。第3~4时期是花丝、花柱运动发生的起始时间。3~4时期,花丝中AUX1基因上调表达,GA_(20)ox、GA_3ox、TCH4、CYCD3基因下调表达;花柱中AUX1、CKX、B-ARR、GA_2ox、PIF4、CYP85A2、BKI1基因上调表达,TAA1、CPS、GA_3ox、GID2基因下调表达。这些差异表达的基因可能是调控花丝、花柱运动的关键基因。通过对相同时期花丝、花柱差异表达基因富集性分析发现,相同时期在花丝与花柱激素生物合成和信号转导途径中共有差异表达的基因有AUX1、GH3、ARF、AUX/IAA、SAUR、B-ARR、KS、KO、KAO、GA_3ox、GA_2ox、PIF3、GID2、AOC、AOS、JAR1、JAZ、CYP85A2、CYCD3、BRI1、BKI1、TCH4、BAK1、AO、ZEP、NCED、NPR1、PR-1、ACS、ACO、SIMKK,且除了KS基因外,相同时期,相同基因在花丝和花柱中差异表达完全趋势均相同,因此说明这些差异表达的基因对花丝和花柱的运动有着重要的调控作用,并且这种调控是同步的。利用RT-PCR法对花丝、花柱中3个赤霉素生物合成酶基因和2个赤霉素信号转导因子的相对表达量进行了分析,发现花丝、花柱GA_3ox、GA_(20)ox、GA_2ox等基因的相对表达量的变化趋势与表达谱测序数据中对应基因表达量的变化趋势一致,并且呈显着正相关,说明表达谱测序的数据是真实可靠的。(5)分析了阳春砂花丝、花柱在生长发育过程中部分激素生物合成酶基因表达量与相应激素含量的相关性将不同生长时期的花丝、花柱中生长素、细胞分裂素、赤霉素和脱落酸生物合成酶基因的表达量以及与花丝、花柱远近轴侧IAA、CTK、GA_3、ABA的相对含量做相关性分析,发现大多数相同的酶基因在花丝与花柱中的表达量呈极显着正相关,说明花丝与花柱的运动之间有着较强的关联性。激素生物合成酶基因的表达量与花丝、花柱远近轴侧激素的相对含量部分呈现正相关,说明在花丝、花柱的生长发育过程中,激素合成酶基因的表达与相应激素的含量存在一定的相关性。总结以上研究结果,阳春砂花丝、花柱运动的起始时间均为3~4时期,花丝运动的起始部位是部位4和部位5,并且由形态学上端向形态学下端延伸;花柱运动的部位主要集中在形态学上端的部位4和部位5。阳春砂花丝在3~4时期发生弯曲运动的机制可能是:GA_3含量的上升,AUX1基因的上调表达,两者共同促进了花丝近轴侧的生长;GA_3ox、GA_(20)ox的下调表达,使远轴侧GA_3含量下降,同时IAA和CTK的含量也下降,叁者共同抑制了花丝远轴侧的生长,最终导致花丝近轴侧生长速率超过远轴侧,并由近轴侧向远轴侧弯曲运动。阳春砂花柱在3~4时期发生弯曲运动的机制可能是:GA_2ox基因上调表达,GA_3ox、GA_(20)ox基因下调表达使花柱近轴侧GA_3含量下降,高浓度的GA_3对近轴侧生长抑制解除,同时CTK、IAA含量上升,B-ARR、AUX1基因上调表达,促进了花柱近轴侧的生长;而GA_3含量的上升,PIF4基因上调表达,ABA含量的上升,叁者共同抑制了花柱远轴侧的生长,最终导致花柱由近轴侧向远轴侧运动,最终变直。(本文来源于《广州中医药大学》期刊2018-04-01）
王虹,马东明,蒋研风羊,罗子俊,杨锦芬[10]（2018）在《阳春砂转录因子AvMYC4b的克隆及原核表达》一文中研究指出目的阳春砂是中药砂仁的主要来源植物,其转录组中已筛选出预测与萜类合成相关的候选转录因子unigene,对其进行克隆、序列分析和原核表达,以进一步认识阳春砂药效物质萜类合成的调控元件。方法根据阳春砂转录组数据中预测为AvMYC4b的Unigene0074125序列设计特异引物,提取阳春砂叶片RNA并反转录成c DNA,以此为模板经PCR扩增得到AvMYC4b的核心片段,再通过RACE技术获得全长c DNA,然后进行编码区全长的GATEWAY TOPO克隆。通过LR反应构建原核表达载体,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)细胞,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)和阿拉伯糖在16℃下培养诱导融合蛋白表达,收集菌体,经过裂解、超声、纯化,用SDS-PAGE检测蛋白表达结果。结果克隆获得的AvMYC4b全长有2 579 bp,包含195 bp的5’UTR,1 995 bp的ORF和389 bp的3’UTR,编码664个氨基酸,预测蛋白相对分子质量为72 211。经过生物信息学分析,AvMYC4b氨基酸序列与其他植物的MYC相似,含有转录因子MYC家族的保守结构域,预测可定位于细胞核中。成功构建重组表达载体p DEST17-AvMYC4b并转化Rosetta(DE3)细胞,经诱导表达得到AvMYC4b融合蛋白,SDS-PAGE结果显示蛋白相对分子质量约80 000,与预测相符。结论从阳春砂中克隆得到b HLH家族转录因子AvMYC4b,并建立了AvMYC4b原核表达系统,为该转录因子的生物功能研究奠定了基础。(本文来源于《中草药》期刊2018年06期）
阳春砂论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以首批纳入《广东省岭南中药保护条例》的品种阳春砂、广藿香、广佛手为例,基于政府公开数据的集成平台天眼查系统对其在广东省内的生产种植基地进行分析,以期掌握其分布和发展现状,为后续制定相关中药材生产基地评估标准打下基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
阳春砂论文参考文献
[1].王延谦,杨春勇,罗承彬,彭建明,李戈.不同产地阳春砂果实形态特征与药用成分分析[J].安徽农业科学.2019
[2].任薇,杜建平,夏能能,赵自明.基于天眼查对岭南道地药材阳春砂、广藿香、广佛手生产基地的分析[J].按摩与康复医学.2019
[3].王虹,李萌,马东明,叶鹏,詹若挺.阳春砂萜类合酶AvTPS1启动子的克隆及其活性分析[J].中草药.2019
[4].李萌,王虹,赵海莹,黄韵萍,杨锦芬.阳春砂WRKY40的克隆、分析及原核表达[J].分子植物育种.2019
[5].邱佳佳,罗登花,刘洋,刘军民.道地产区阳春砂不同种质类型的果实品质分析[J].中药新药与临床药理.2019
[6].李明晓,陈树辉,苏景,汤丽云,徐杰.阳春砂愈伤组织的诱导[J].中国实验方剂学杂志.2019
[7].魏洁书,杨锦芬,詹若挺.基于rbcL基因的阳春砂及其5种同属混淆品的鉴别[J].时珍国医国药.2018
[8].王虹.阳春砂单萜合酶基因的功能鉴定和MYC转录因子的克隆及原核表达[D].广州中医药大学.2018
[9].徐杰.阳春砂花丝、花柱运动机制的研究[D].广州中医药大学.2018
[10].王虹,马东明,蒋研风羊,罗子俊,杨锦芬.阳春砂转录因子AvMYC4b的克隆及原核表达[J].中草药.2018