抗性品系论文-陈卓,崔开南,鲁玉杰

抗性品系论文-陈卓,崔开南,鲁玉杰

导读:本文包含了抗性品系论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:磷化氢抗性,赤拟谷盗,熏蒸杀虫,运动行为

抗性品系论文文献综述

陈卓,崔开南,鲁玉杰[1](2019)在《赤拟谷盗磷化氢抗性品系与敏感品系的运动能力的研究》一文中研究指出磷化氢是长期广泛使用的储藏物害虫熏蒸剂,由于单一药剂的重复使用,使得害虫产生了严重的磷化氢抗药性。研究害虫磷化氢抗性机理对解决害虫磷化氢抗性问题有着重要意义。本研究对比分析了赤拟谷盗Tribolium castaneum(Herbst)磷化氢抗性品系与敏感品系在磷化氢熏蒸过程中的运动情况,旨在探究赤拟谷盗磷化氢抗性的行为机制,为解决害虫磷化氢抗性问题提供一定思路。在本项研究中,我们首先使用磷化氢亚致死剂量(LC_(30))分别处理赤拟谷盗的抗性品系、敏感品系,使用高清运动摄像头分别记录两种品系在熏蒸前(5h)和熏蒸过程中(15h)的爬行情况。随后使用Etho Vision动物运动轨迹跟踪系统(诺达思信息科技有限公司)对昆虫运动情况进行分析。昆虫的运动行为评价指标主要有:运动距离(mm)、运动速度(mm/s)。通过该项研究发现,在未进行熏蒸的5h内,赤拟谷盗磷化氢抗性品系总活动量小于敏感品系。在注射磷化氢气体后,赤拟谷盗磷化氢抗性品系运动量减小,并在熏蒸起始的5h内始终保持相对较低的运动量。而赤拟谷盗敏感品系在注射磷化氢气体后,其运动量大幅度增加,并在熏蒸起始后的5~6h内始终保持相对较高的运动量。在熏蒸过程中,赤拟谷盗抗性品系在熏蒸的6~10h内运动量有着一定的增加,在随后的11~15h内运动量降低,并最终保持在一个极低的水平。赤拟谷盗敏感品系在熏蒸起始出现运动量大幅度增加后,在熏蒸的7~15h运动量逐步降低。在熏蒸处理的15h,赤拟谷盗磷化氢抗性品系总体运动量小于敏感品系。这项研究结果表明,无论是否进行熏蒸处理,赤拟谷盗磷化氢抗性品系运动量小于敏感品系。同时在熏蒸处理过程中,磷化氢抗性品系与敏感品系所出现的运动高峰期有着一定差异。相比于赤拟谷盗敏感品系,赤拟谷盗磷化氢抗性品系在熏蒸起始便降低其运动量,降低其呼吸速率,从而减少了其磷化氢的吸入量,降低其新陈代谢速率,这可能是赤拟谷盗磷化氢抗性机制之一。(本文来源于《华中昆虫研究》期刊2019年00期)

张家昊[2](2019)在《两种双酰胺杀虫剂抗性品系小菜蛾肠道细菌的研究及氟苯虫酰胺降解菌的筛选》一文中研究指出小菜蛾是全球范围内危害十字花科蔬菜生产最严重的害虫之一,它对合成杀虫剂的抗性发展迅速,给农业生产造成了巨大的损失。研究其抗药性机制对于有效进行害虫的综合治理以及新型药剂的开发至关重要。最近的研究表明昆虫肠道微生物与杀虫剂抗性之间存在潜在的联系。双酰胺类杀虫剂作为一种主要以胃毒方式发挥作用的药剂,到目前还没有小菜蛾肠道微生物与双酰胺杀虫剂抗性之间关系的研究报道。本文我们选择了2种双酰胺杀虫剂(氯虫苯甲酰胺和氟苯虫酰胺)抗性品系和敏感品系小菜蛾为研究对象,采用传统分离培养法和高通量测序技术,研究了氯虫苯甲酰胺抗性品系、氟苯虫酰胺抗性品系和敏感品系小菜蛾幼虫肠道细菌菌群结构的差异;使用高效液相色谱法对具有双酰胺杀虫剂的降解能力的菌进行了初步筛选。主要结论如下:1.通过分离纯培养的方法共得到18个菌种,分为3个门,分属于厚壁菌门(Firmi cutes)、变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteria),在两种抗性品系和敏感品系中厚壁菌门均为优势菌。2.通过高通量16S rRNA测序,15个样品共得到了38个OTUs,分属于7个门,主要为变形菌门、厚壁菌门、放线菌门、蓝菌门(Cyanobacteria)和拟杆菌门(Bactero ides)。3个品系小菜蛾优势菌属均为肠杆菌属(Enterobacter)、肉杆菌属(Carnobact erium)、不动杆菌属(Acinetobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)、葡萄球菌属(Staphy lococcus)、肠球菌属(Enterococcus)和假单胞菌属(Pseudomonas)。3.两个抗性品系肠道细菌群落较敏感品系表现出相同的变化。抗性品系较敏感品系变形菌门丰度上升,厚壁菌门丰度下降;抗性品系中肠杆菌属、沙雷氏菌属、芽孢杆菌属(Bacillus)、厌氧芽孢杆菌属(Anoxybacillus)、短芽孢杆菌属(Brevibacillus)、根瘤菌属(Rhizobium)含量增多,肉杆菌属、葡萄球菌属、不动杆菌属、假单孢菌属丰度下降。变形菌门肠杆菌属在敏感品系中占总菌量的62.61%,而在氯虫苯甲酰胺抗性品系和氟苯虫酰胺抗性品系中分别占74.36%和73.65%;厚壁菌门的肉杆菌属占敏感品系总菌量的24.70%,占氯虫苯甲酰胺抗性品系的11.30%占氟苯虫酰胺抗性品系的6.00%。肠杆菌丰度的上升和肉杆菌丰度的下降,是变形菌门和厚壁菌门变化的主要原因。4.利用来自氟苯虫酰胺抗性品系小菜蛾肠道细菌,检测了其对氟苯虫酰胺的耐受性以及生物降解能力,发现沙雷氏菌(Serratia liquefaciens)、肠杆菌(Enterobacter xiangfangensis)、芽孢杆菌(Bacillus pumilus)和肉杆菌(Carnobacterium maltaromaticu m)能够在氟苯虫酰胺无机盐培养基中生长;肠杆菌(E.xiangfangensis)、肠球菌(E nterococcus casseliflavus)、葡萄球菌(Staphylococcus succinus)、芽孢杆菌(B.pumi lus)、沙雷氏菌(S.liquefaciens)和肉杆菌(C.maltaromaticum)组成的混合菌对氟苯虫酰胺具有生物降解功能,证实肠道微生物在小菜蛾的抗药性中发挥了作用。(本文来源于《山东农业大学》期刊2019-03-01)

郭金梅,罗绪强,张淑卿[3](2017)在《截形叶螨吡螨胺抗性品系抗性遗传力及风险评估研究》一文中研究指出【目的】明确吡螨胺对截形叶螨的抗性遗传力及其抗性风险.【方法】以室内连续汰选25代的吡螨胺抗性品系(Te-R)为研究对象,采用阈值估算法估算了其抗性遗传力及抗性增加5倍和10倍的风险.【结果】在室内连续选育25代后,汰选品系(Te-R)抗性倍数为20.284倍,现实遗传力为0.013,在杀死率为70%~80%时,抗性增长5倍,吡螨胺可使用5-7代,抗性增长10倍,可使用7-11代.【结论】因而,截形叶螨对吡螨胺抗性遗传力较小,在田间防治截形叶螨时,吡螨胺具有较低的抗性风险.截形叶螨对吡螨胺抗性遗传力较小,在田间防治截形叶螨时,吡螨胺具有较低的抗性风险.(本文来源于《甘肃农业大学学报》期刊2017年03期)

王小军,赵伊英,赵倩,包建红,张燕娜[4](2017)在《土耳其斯坦叶螨多重抗性品系选育及解毒酶活性的变化》一文中研究指出为探索土耳其斯坦叶螨的多重抗药性及其生化机理,在室内对敏感系(SS)土耳其斯坦叶螨分别用螺螨酯、甲氰菊酯和阿维菌素的混剂进行处理,选育出多重抗性品系(Mp-R).结果表明:选育至15代,土耳其斯坦叶螨的抗性指数达35.74倍.对不同品系的解毒酶活性分析显示,Mp-R品系相对SS品系的羧酸酯酶(Car E)、谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFO)的比活力分别是SS品系的1.21、1.53、9.18倍.说明Car E、GSTs、MFO的活性升高可促进土耳其斯坦叶螨对3种杀虫剂多重抗性的形成;MFO的活性升高可能是土耳其斯坦叶螨对3种杀虫剂产生多重抗性的主要原因.测定Mp-R品系和单抗品系(Ip-R)的农药感性和解毒酶活力变化发现,3种杀虫剂的混合使用可能会延缓土耳其斯坦叶螨对甲氰菊酯的抗性形成,加快对阿维菌素的抗性形成.(本文来源于《应用生态学报》期刊2017年09期)

周兴隆,杨顺义,李静静,沈慧敏[5](2017)在《二斑叶螨多重抗性品系的选育及其解毒酶活力分析》一文中研究指出【目的】明确二斑叶螨对杀虫杀螨剂的多重抗性机制,为延缓二斑叶螨抗性发展及其抗性治理提供依据。【方法】以螺螨酯、甲氰菊酯和阿维菌素为靶标,通过室内抗性汰选获得二斑叶螨多重抗性品系(Mp-R),采用生化分析方法研究了Mp-R和敏感品系(SS)羧酸酯酶(CarEs)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFOs)的活性差异,并估计了其抗性遗传力及相对适合度。【结果】经过连续50代室内抗性选育,二斑叶螨对阿维菌素、甲氰菊酯和螺螨酯的抗性倍数分别为603.03,167.65和51.77倍,其抗性发展趋势分别呈"慢-快-慢","慢-快"及缓慢上升趋势;与敏感品系相比,3大解毒酶活力在二斑叶螨各发育阶段均未见大幅度上升,仅Mp-R品系卵中MFOs比活力上升幅度最大,为SS品系的1.8倍;二斑叶螨对螺螨酯、甲氰菊酯和阿维菌素的抗性遗传力分别为0.020 3,0.038 7和0.064 2;Mp-R品系相对适合度为0.381 8(Rf<1),存在一定程度的生殖不利性。【结论】阿维菌素的抗性遗传力最大,具有较高的抗性风险;甲氰菊酯次之;螺螨酯的抗性遗传力最小,抗性风险较低;阿维菌素、甲氰菊脂和螺螨酯混用有利于二斑叶螨抗性治理。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2017年06期)

陈耀年,汝阳,尚素琴[6](2016)在《巴氏新小绥螨对二斑叶螨混合抗性品系和敏感品系的捕食功能》一文中研究指出为明确巴氏新小绥螨对二斑叶螨混合抗性品系(R)和敏感品系(S)捕食功能的差异,在RH(75±5)%、光周期16L:8D条件下,设置16、20、24、28和32℃5个温度梯度,研究了巴氏新小绥螨对两个品系二斑叶螨各螨态的捕食效能。结果表明,巴氏新小绥螨对两个品系二斑叶螨各螨态的捕食功能反应均属于HollingⅡ型。16~28℃范围内,对二者的攻击系数、捕食能力、最大日捕食量均随温度升高而增加,处理时间则缩短。28℃时对雌成螨、若螨和卵捕食量最高,R品系为7.5700头、14.4928头和16.0256粒,S品系为7.9114头、18.3150头和20.1207粒;处理时间最短,R品系为0.1321、0.0690和0.0624 d,S品系为0.1264、0.0546和0.0497 d,温度达到32℃时,捕食量下降。在同一温度下,对S品系的捕食能力显着大于R品系(P<0.05)。说明巴氏新小绥螨对二斑叶螨混合抗性品系有一定的拒食作用,这与二斑叶螨R品系在长期药剂选择压力下体壁硬化有关。因此,田间防治二斑叶螨时要交替轮换使用化学农药,保护天敌实现生物防治和化学防治相协调的同时,避免或延缓其产生抗药性,从而更好地实现二斑叶螨的综合防控。(本文来源于《中国生物防治学报》期刊2016年04期)

周兴隆,宋丽雯,杨顺义,李静静,王进军[7](2016)在《二斑叶螨多重抗性品系解毒酶基因表达模式解析》一文中研究指出【目的】二斑叶螨(Tetranychus urticae)是一种重要的农业害螨,由于个体小、繁殖快等特点,极易产生抗药性,论文从生理生化和分子水平探讨二斑叶螨m RNA水平相对表达量的变化,旨在明确二斑叶螨对混剂的多重抗性机制,为该螨的综合治理提供依据。【方法】在温度(25±l)℃,相对湿度60%±5%,光周期L﹕D=16 h﹕8 h的室内条件下,于盆栽豇豆苗上饲养不接触任何药剂的二斑叶螨敏感品系(SS)和用螺螨酯、甲氰菊酯、阿维菌素以其单剂的致死中浓度(LC50)为汰选浓度混合连续汰选的多重抗性品系(Mp-R);Mp-R品系用药4—5次待其种群扩增后,参照FAO推荐的叶片残毒法进行室内毒力测定一次,计算其LC50,求出抗性倍数(RR),并记为一个汰选周期;连续汰选3个周期后,逐渐增加汰选浓度,用Polo Plus软件求其毒力回归方程、LC50、抗性指数及卡方值;采用生化分析法测定选育50代的二斑叶螨SS与Mp-R品系卵、幼螨、若螨、雄成螨、雌成螨的谷胱甘肽S转移酶(GSTs)、羧酸酯酶(Car Es)、多功能氧化酶(MFOs)的活性,以ELFn为内参基因,采用RT-q PCR技术以比较Ct值的方法计算二斑叶螨Mp-R品系中10个与抗性相关的解毒酶基因的表达量。【结果】在室内经50代抗性选育,二斑叶螨对阿维菌素、甲氰菊酯及螺螨酯的LC50分别达到1 103.55、5 993.33和2 345.62 mg?L-1,抗性倍数分别为603.03、167.65和51.77倍。卵中Mp-R品系MFOs比活力显着高于SS品系,GSTs、Car Es比活力差异不显着;其他发育阶段Mp-R品系的GSTs、Car Es比活力显着高于SS品系,MFOs比活力则差异不显着;Mp-R品系雌成螨的GSTs、Car Es比活力显着高于其他发育阶段,卵的MFOs比活力显着高于其他发育阶段。与敏感品系相比,二斑叶螨Tu GSTd05、Tu GSTd06与Tu GSTd09基因表达量在Mp-R品系各发育阶段显着上调1.80倍以上,Tu GSTd01表达量在若螨期显着上调1.63倍,其他发育阶段差异不显着;CYP392E10表达量在卵中极显着上调5.87倍,幼螨、若螨阶段显着上调2.15倍和2.09倍,成螨阶段表达量差异不显着;CYP392A6在卵、幼螨与若螨阶段表达量均显着上调1.89、1.64和1.59倍,在成螨阶段表达量差异不显着。CYP392A16在各发育阶段均极显着上调,卵中上调6.97倍,幼螨中上调8.20倍,若螨中上调8.88倍,雄成螨上调7.34倍,雌成螨上调8.59倍。CYP392D 8在卵、幼螨和雄、雌成螨中表达量均显着上调2.18、2.00、2.03和2.41倍,在若螨阶段表达量差异不显着;Tu CCE35在若螨及雄、雌成螨中表达量显着上调1.58、1.86和2.65倍;Tu CCE36在卵和雄、雌成螨中表达量显着上调1.73、1.89和2.14倍。【结论】与敏感品系相比,二斑叶螨Mp-R品系10个与抗性相关的解毒酶基因表达量在其不同发育阶段均有不同程度的变化。CYP392A16表达量在各发育阶段上调较大,可能参与了二斑叶螨多重抗性的形成;其余基因表达量均未见大幅度上调,这些基因是否参与了对3种药剂的代谢还需进一步验证。(本文来源于《中国农业科学》期刊2016年09期)

姚富姣[8](2016)在《赤拟谷盗磷化氢敏感和抗性品系数字基因表达谱分析》一文中研究指出赤拟谷盗(Tribolium castaneum. Herbst)是广泛分布于世界各地的储粮害虫,通过直接取食、粪便污染及加速霉变等方式对储粮进行危害。目前,全球公认最优良的储粮熏蒸剂是磷化氢(PH_3)。由于长期以来对磷化氢不科学的使用,使得赤拟谷盗在全球范围内产生了不同程度的抗性。随着世界贸易不断发展,其危害范围越来越广泛,抗性越来越严重。前人对于磷化氢的研究都是从某一方面出发,缺乏系统性、完整性。mRNA基因表达谱可在整体水平上研究细胞中基因转录的情况及规律,综合考虑环境与基因组相互作用,为磷化氢毒理及抗性机制的研究提供有效的研究方法,赤拟谷盗全基因组测序的完成,也为从整体水平研究熏蒸剂磷化氢提供了坚实的基础。为了进一步了解磷化氢的毒理机制和昆虫的抗性机制,本研究以赤拟谷盗为研究对象,采用高通量Illumina RNA-seq技术,构建了未熏蒸敏感品系(NF S)、未熏蒸抗性品系(NF R)、熏蒸后敏感品系(PF_S20)和熏蒸后抗性品系(PF R20)的数字基因表达谱。筛选NF_R vs NF_S、PF_R20 vs NF_R、PF_S20vsNF_S和PF_R20 vs PF_S20的差异表达基因,并进行GO和KEGG功能注释及富集分析。利用数字基因表达谱测序结果,本研究对磷化氢熏蒸后,赤拟谷盗呼吸作用、抗氧化物质和解毒酶的表达变化进一步分析。最后,采用qRT-PCR技术验证测序分析结果。主要结果如下:1.测序数据。4个样本的原始测序数据经过滤后,分别产生6,653,758 (NF_R)、 7,838,702 (NF_S),6.675,764 (PF_R20)和8,257,496(PF_S20)个测序序列,平均序列长度53 bp。2.差异表达基因筛选。NF_R vs NF_S差异表达基因为425个,PF_R20 vs NF_R差异表达基因为559个,PF_S20 vs NF_S差异表达基因为975个,PF_R20 vs PF_S20差异表达基因为1400个。3.差异表达基因功能分析。(1)对NF_R vs NF_S差异表达基因的功能分析,可以得知抗性品系和敏感品系的差异。GO富集结果表明,二者的差异主要表现在线粒体功能、蛋白质代谢和几丁质代谢等方面。KEGG富集结果表明,二者主要在抗氧化方面有差异。(2)对PF_S20 vs NF_S差异表达基因的功能分析,探究磷化氢的毒理机制。GO富集结果表明,磷化氢显着影响了敏感品系线粒体的功能,GO富集和KEGG通路富集结果表明,磷化氢熏蒸影响了糖类代谢和蛋白质代谢。(3)对PF_R20vsNF_R差异表达基因的功能分析,探究磷化氢的抗性机制。GO富集和KEGG富集结果表明,磷化氢熏蒸后,抗性品系蛋白质的降解和几丁质分解发生了变化。(4)对PF_R20 vs PF_S20差异表达基因的功能分析,可以得知敏感品系和抗性品系在磷化氢熏蒸后的差异。GO富集结果表明,熏蒸后抗性品系和敏感品系在线粒体功能、糖代谢、蛋白质代谢等方面有差异。KEGG富集结果表明,二者主要在糖类代谢、蛋白质代谢、抗氧化、解毒等方面有差异。4.从转录水平初步分析磷化氢熏蒸后,敏感和抗性品系呼吸作用、抗氧化物质和解毒酶表达差异。(1)磷化氢可能促进敏感品系的糖酵解,促进抗性品系叁羧酸循环。(2)磷化氢使赤拟谷盗抗氧化物质SOD、POD和HSP相关基因的表达量显着上调,且抗性品系上调表达倍数高于敏感品系。(3)通过对解毒酶表达差异的分析发现,磷化氢可显着影响敏感品系单加氧酶的活性;可使敏感和抗性品系GSTs相关基因总体上调表达;使抗性品系CarE相关基因上调表达,敏感品系相关基因表达趋势不一致。5. qRT-PCR验证。为了确认数字基因表达谱的可靠性,选择6个差异表达基因,进行荧光实时定量PCR初步验证。结果证明,数字基因表达谱测序结果与荧光实时定量结果趋势一致,该方法可靠。综上所述,磷化氢使赤拟谷盗敏感品系产生毒理反应的机制,可能与磷化氢影响了敏感品系线粒体的正常功能、糖类代谢和蛋白质代谢相关;抗性品系之所以对磷化氢产生抗性,可能是由于抗性品系可以维持线粒体的功能,从而维持正常的能量代谢;可以及时降解受损伤的蛋白质;抗氧化能力强于敏感品系等原因。(本文来源于《陕西师范大学》期刊2016-05-01)

刘洪霞,徐劲秋,刘曜,冷培恩[9](2016)在《淡色库蚊吡丙醚抗性品系和敏感品系羧酸酯酶生化性质差异研究》一文中研究指出目的比较淡色库蚊抗吡丙醚种群和敏感种群羧酸酯酶生化特征的差异,初步探讨其生化抗性机制。方法参照van Aspern(1962)的方法测定羧酸酯酶活性。结果淡色库蚊抗性品系和敏感品系羧酸酯酶水解活性随底物浓度(α-乙酸萘酯或β-乙酸萘酯)的增加而升高;在一定浓度范围内,抗性品系对这两种底物的水解活性均高于敏感品系。β-乙酸萘酯为底物时,抗性品系羧酸酯酶的米氏常数(K_m)和最大反应速度(V_(max))分别为27.20×10~(-5)mol/L和115.00×10~(-5)A/(mg·pro·min),敏感品系K_m和V_(max)分别为104.00×10~(-5)mol/L和207.00×10~(-5)A/(mg·pro·min),两者差异有统计学意义(t_b=2.740,t_c=3.160,P<0.05)。α-乙酸萘酯为底物时,抗性品系羧酸酯酶K_m为131.00×10~(-5)mol/L,与敏感品系K_m(75.20×10~(-5)mol/L)比较差异无统计学意义,而V_(max)则差异有统计学意义。胆碱酯酶抑制剂测定结果表明,抗性品系羧酸酯酶对敌敌畏和残杀威的敏感性高于敏感品系。结论羧酸酯酶可能与淡色库蚊对吡丙醚的抗性有关。(本文来源于《中国媒介生物学及控制杂志》期刊2016年02期)

周兴隆,杨顺义,郝雨,王进军,张新虎[10](2015)在《二斑叶螨多重抗性品系最优内参基因的筛选及CYP392A亚家族基因的表达分析》一文中研究指出【目的】筛选出二斑叶螨Tetranychus urticae Koch抗甲氰菊酯、阿维菌素及螺螨酯混剂的实时定量PCR最优内参基因。【方法】选取5.8S rRNA,α-tubulin,TBP,β-actin,ELFn,RPL13a,GAPDH和SDHA 8个候选内参基因,以Ge Norm,Best Keeper和Normfinder 3个软件分析这8个基因在二斑叶螨多重抗性品系中的表达稳定性,并以筛选的内参基因分析二斑叶螨P450酶系CYP392A亚家族基因的表达水平。【结果】经Ge Norm,Best Keeper和Normfinder 3个软件综合评价确定ELFn基因为二斑叶螨敏感品系(susceptible strain,SS)和多重抗性品系(multipesticide resistant strain,Mp-R)各发育阶段的最优内参基因。以ELFn为内参基因对二斑叶螨CYP392A亚家族16个基因表达量进行分析,结果表明:经多重抗性选育40代后,Mp-R品系卵期CYP392A1表达量显着上调;CYP392A16基因在各发育阶段表达量极显着高于SS品系相应发育阶段;其他基因表达量在敏感品系和抗性品系之间差异不显着。【结论】筛选出了SS和Mp-R品系中各发育阶段最佳内参基因为EFLn;Mp-R品系CYP392A亚家族16个基因的表达量在幼螨和若螨阶段低于卵与成螨阶段,其中CYP392A16基因在二斑叶螨多重抗性的形成中起主要作用。该结果为二斑叶螨多重抗性研究奠定了一定基础。(本文来源于《昆虫学报》期刊2015年11期)

抗性品系论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

小菜蛾是全球范围内危害十字花科蔬菜生产最严重的害虫之一,它对合成杀虫剂的抗性发展迅速,给农业生产造成了巨大的损失。研究其抗药性机制对于有效进行害虫的综合治理以及新型药剂的开发至关重要。最近的研究表明昆虫肠道微生物与杀虫剂抗性之间存在潜在的联系。双酰胺类杀虫剂作为一种主要以胃毒方式发挥作用的药剂,到目前还没有小菜蛾肠道微生物与双酰胺杀虫剂抗性之间关系的研究报道。本文我们选择了2种双酰胺杀虫剂(氯虫苯甲酰胺和氟苯虫酰胺)抗性品系和敏感品系小菜蛾为研究对象,采用传统分离培养法和高通量测序技术,研究了氯虫苯甲酰胺抗性品系、氟苯虫酰胺抗性品系和敏感品系小菜蛾幼虫肠道细菌菌群结构的差异;使用高效液相色谱法对具有双酰胺杀虫剂的降解能力的菌进行了初步筛选。主要结论如下:1.通过分离纯培养的方法共得到18个菌种,分为3个门,分属于厚壁菌门(Firmi cutes)、变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteria),在两种抗性品系和敏感品系中厚壁菌门均为优势菌。2.通过高通量16S rRNA测序,15个样品共得到了38个OTUs,分属于7个门,主要为变形菌门、厚壁菌门、放线菌门、蓝菌门(Cyanobacteria)和拟杆菌门(Bactero ides)。3个品系小菜蛾优势菌属均为肠杆菌属(Enterobacter)、肉杆菌属(Carnobact erium)、不动杆菌属(Acinetobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)、葡萄球菌属(Staphy lococcus)、肠球菌属(Enterococcus)和假单胞菌属(Pseudomonas)。3.两个抗性品系肠道细菌群落较敏感品系表现出相同的变化。抗性品系较敏感品系变形菌门丰度上升,厚壁菌门丰度下降;抗性品系中肠杆菌属、沙雷氏菌属、芽孢杆菌属(Bacillus)、厌氧芽孢杆菌属(Anoxybacillus)、短芽孢杆菌属(Brevibacillus)、根瘤菌属(Rhizobium)含量增多,肉杆菌属、葡萄球菌属、不动杆菌属、假单孢菌属丰度下降。变形菌门肠杆菌属在敏感品系中占总菌量的62.61%,而在氯虫苯甲酰胺抗性品系和氟苯虫酰胺抗性品系中分别占74.36%和73.65%;厚壁菌门的肉杆菌属占敏感品系总菌量的24.70%,占氯虫苯甲酰胺抗性品系的11.30%占氟苯虫酰胺抗性品系的6.00%。肠杆菌丰度的上升和肉杆菌丰度的下降,是变形菌门和厚壁菌门变化的主要原因。4.利用来自氟苯虫酰胺抗性品系小菜蛾肠道细菌,检测了其对氟苯虫酰胺的耐受性以及生物降解能力,发现沙雷氏菌(Serratia liquefaciens)、肠杆菌(Enterobacter xiangfangensis)、芽孢杆菌(Bacillus pumilus)和肉杆菌(Carnobacterium maltaromaticu m)能够在氟苯虫酰胺无机盐培养基中生长;肠杆菌(E.xiangfangensis)、肠球菌(E nterococcus casseliflavus)、葡萄球菌(Staphylococcus succinus)、芽孢杆菌(B.pumi lus)、沙雷氏菌(S.liquefaciens)和肉杆菌(C.maltaromaticum)组成的混合菌对氟苯虫酰胺具有生物降解功能,证实肠道微生物在小菜蛾的抗药性中发挥了作用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

抗性品系论文参考文献

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抗性品系论文-陈卓,崔开南,鲁玉杰
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