导读:本文包含了化学发光酶免疫分析方法论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:α-cyano,pyrethroid,pesticides,broad-specific,monoclonal,antibody,enzyme,linked,immunoassay,chemiluminescent,enzyme,immunoassay
化学发光酶免疫分析方法论文文献综述
Taheri,Niusha[1]（2016）在《农产品中叁种氰基菊酯类农药残留的化学发光酶免疫分析方法研究》一文中研究指出Synthetic pyrethroids are widely used in domestic, public health, agricultural, forestry, and veterinary applications for their remarkably high insecticidal activity and low mammalian toxicity compared with organochlorinated and organophosphate compounds. The α-cyano pyrethroids such as deltamethrin, cypermethrin,λ-cyhalothrin, fenpropathrin and fenvalerate, are quickly becoming the dominant. Although pyrethroids are thought to be safe for humans, due to the extensive human use and release of synthetic pyrethroids, their toxic effects on ecological, environmental, and human health have become increasingly concerned. Therefore, it is necessary to determine α-cyano pyrethroid residues in the environment and agricultural products for regulatory and monitoring purposes.In this study, a new monoclonal antibody (mAb) was first produced based on a genetic hapten containing the common moiety of α-cyano pyrethroids but without one side chain of the cyclopropane ring. A comptitive indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was established to characterize the mAb, using the antigen-coated format. Afterward, assay condition was optimized for pH and ionic strength of assay buffer, organic solvent concentration and reaction time. The optimal ELISA was broad-specific to three a-cyano pyrethroids, and the half-maximal inhibition concentration (IC50) of fenpropathrin, delthamethrin and λ-cyhalothrin were 2.6,8.2 and 31.1 ng mL-1. The cross-reactivity to other pyrethroids was not obvious, except 1.7% for cypermethrin.To further improve the assay performances, an indirect competitive chemiluminescent enzyme immunoassay (CLEIA) was employed by introducing an enhanced chemiluminescent (ECL) reaction as the end-point detection system. Under the optimum conditions, the CLEIA showed IC50 values of 1.9,3.4 and 4.3 ng mL-1 for fenpropathrin, delthamethrin and λ-cyhalothrin. The cross-reactivity to other pyrethroids was also not obvious, except 5% for cypermethrin. Compared with the colorimetric ELISA, the ability of the chemiluminescent reagents to detect lower concentrations of horseradish peroxidase did allow to decrease the consumption of antibody and antigen (antibody concentration inCLEIA was two-fold less than that used in ELISA, and antigen concentration was four-fold less). Additionally, the CLEIA presented other advantages over the ELISA, such as better assay sensitivity and less reaction time.Moreover, the immuoassay application was performed to determination fenpropathrin, deltamethrin and λ-cyhalothrin tap in water and agriculture samples (orange, eggplant, and cowpea samples), using recovery tests at different spiked levels. Matrix interferences on the standard calibration curves were also investigated to determine suitable dilution times for sample extracts. It was found that CLEIA was more tolerant to sample matrices than ELISA, since less dilution times were needed in CLEIA for both water and agriculture samples. Overall, recovery results obtained from CLEIA was correlated well with those from the instrumental method of gas chromatography equipped with an electron capture detector (GC-ECD), both in terms of accuracy and precision.To the best of our knowledge, this is the first study on CLEIA method for the detection of a-cyano pyrethroids, which is suitable as a rapid screening tool for the control of pesticide contamination in agricultural products.(本文来源于《浙江大学》期刊2016-03-20）
周裕军,张荣升,周明国[2]（2015）在《脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备及化学发光酶免疫分析方法的建立》一文中研究指出脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)主要是由小麦赤霉病菌产生的,对人畜具有很高毒性的微生物毒素。建立快速准确的检测方法,对于保障食品安全具有重要意义。本文研究了DON单克隆抗体及化学发光酶免疫检测方法。通过合成DON半抗原,采用单克隆抗体技术制备出分泌抗DON单克隆抗体的杂交瘤细胞株5E8。抗体的亚型为IgGl,效价达到了8×10~5,与结构类似的毒素间没有明显的交叉反应。通过优化化学发光底物缓冲体系及增强剂种类,最终配制出化学发光效果良好的底物溶液。在该溶液基础上,优化包被抗原以及抗体的浓度,选择合适的封闭物,并对pH值、离子强度、乙腈含量和羊抗鼠IgG的浓度等条件进行优化,最终确定的分析条件为:包被抗原稀释8000倍,DON单克隆抗体稀释5000倍,封闭物为3%脱脂奶粉,工作溶液为包含10%乙腈、pH 7.4、0.4M Na~+强度的磷酸盐缓冲溶液,羊抗鼠IgG的稀释倍数为5000倍。在最优条件基础上,建立了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的间接竞争化学发光酶免疫分析标准曲线。其检测下限IC_(10)为O.5602μg/L,灵敏度IC50为18.62μg/L。在小麦、燕麦、玉米中添加DON标准品,进行检测分析,平均回收率89.47%~114.38%,而变异系数为5.71%~11.42%。对所建立的方法用气相色谱进行了评估,分析结果具有很高的相似度,相关系数R~2大于0.99。分别使用几种药剂防治小麦赤霉病,采集发病的小麦样品,用本研究建立的间接竞争化学发光酶免疫分析方法对发病小麦中的DON含量进行检测。且与市售呕吐毒素(DON)ELISA检测试剂盒的检测结果进行相关性分析。结果显示,该化学发光酶免疫分析方法能准确测定DON的含量,且与商品化试剂盒的ELISA方法有着良好的相关性,相关系数R~2大于0.99。说明建立的化学发光酶免疫分析方法的检测结果可靠、准确,分析方法在田间小麦样品DON含量的检测方面有着良好的应用前景。(本文来源于《中国植物病理学会2015年学术年会论文集》期刊2015-07-21）
余晓敏[3]（2015）在《原发性肝癌肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法在临床中的应用》一文中研究指出目的探讨原发性肝癌肿瘤标志物化学发光酶免疫分析法在临床中的应用价值。方法选取2013年2—8月收治的肝癌患者100例及正常体检者100例,将肝癌患者作为观察组,正常体检者作为对照组。两组患者进入院后,分别检测AFU(血清α-L-岩藻糖苷酶)、AFP(甲胎蛋白)、CHE(胆碱酯酶)、GGT(γ-谷氨酰基转移酶)、SF(铁蛋白)等指标,并进行对比分析。计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果观察组AFU、AFP、CHE、SF分别为(52.00±0.20)、(32.00±1.20)、(45.25±1.10)×103U/L、(252.00±1.20)μg/L,对照组分别为(32.00±1.20)、(18.00±0.10)、(5.25±1.10)×103U/L、(198.20±0.20)μg/L,两组比较差异均有意义(t=164.399、116.264、257.130、442.233,均P<0.05)。观察组AFU、AFP、CHE、SF检测阳性率分别为8.00%、44.00%、54.00%、57.00%,对照组分别为43.00%、70.00%、85.00%、87.00%,两组比较差异均有统计学意义(χ2=32.241、13.792、22.668、22.321,均P<0.05)。结论检测肿瘤标志物化学发光酶免疫分析法对原发性肿瘤的临床诊断与分析中起到至关重要的作用,扮演着必不可少的角色,具有重要的临床应用价值与可行性,值得推广应用。(本文来源于《社区医学杂志》期刊2015年14期）
朱彬,朱帆,徐振林,杨金易,柳春红[4]（2015）在《酱油与白酒中邻苯二甲酸二甲酯的化学发光酶免疫分析方法研究》一文中研究指出本研究以邻苯二甲酸二甲酯(DMP)为研究目标,以4-氨基邻苯二甲酸二甲酯为半抗原,通过重氮化法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DMP的特异性兔多克隆抗体。通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被原浓度为50μg/L,一抗浓度为92.5μg/L,二抗浓度为1μg/m L,药物稀释液为p H 6.0的纯水,竞争反应时间为40 min,基于此建立了间接竞争化学发光酶联免疫分析法检测DMP。本方法对DMP的检出限为0.29μg/L,线性检测范围为0.74~30.32μg/L,与13种结构和功能类似物的交叉反应率均<5%,通过倍比稀释降低白酒、酱油样品基质干扰,对样品的平均回收率在80.2%~116.0%之间,平均相对标准偏差<3.6%,结果与GC-MS法的测定结果相符。本方法适用于食品样品中DMP的快速检测。(本文来源于《分析化学》期刊2015年07期）
戴尽波,徐振林,刘凤银,杨金易,孙远明[5]（2015）在《化学发光酶免疫分析测定鱼肉中呋喃它酮代谢物方法研究》一文中研究指出建立了呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)间接竞争化学发光酶免疫分析(ic CLEIA)检测方法,通过单因素实验优化了包被原浓度、抗体稀释倍数、反应缓冲体系及浓度、竞争反应时间等参数,结果表明ic CLEIA最佳反应条件为:包被抗原浓度为10 ng/m L,抗体稀释60000倍,最佳竞争时间为50 min,体系缓冲液0.01 mol/L PBS(p H 7.4)。在优化的条件下,本方法的线性检测范围为0.026~3.52μg/L,IC50为0.29μg/L,检出限(LOD,IC10)为0.012μg/L。对鱼肉样品的平均添加回收率在101.4%~115.5%之间。建立的ic CLEIA方法可用于实际样品中AMOZ残留检测。(本文来源于《分析化学》期刊2015年06期）
米娜瓦尔·克里木,买日也木·肉孜[6]（2015）在《原发性肝癌肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法在临床上的应用》一文中研究指出目的探讨原发性肝癌肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法在临床上的应用效果。方法选择2013年4月~2015年4月到我院治疗的60例原发性肝癌患为观察组研究对象,同期在我院进行体检的60名健康人作为对照组,进行肿瘤标志物检测,并探讨该分析方法在临床诊断原发性肝癌中的应用价值。结果观察组患者的af P(甲脂蛋白)、c He(胆碱酯酶)、sf(铁蛋白)、GGt(γ-谷氨酰转肽酶)、AFU(α-L-岩藻糖苷酶)指标的检测阳性率显着高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论原发性肝癌肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法具有较高的临床应用价值,值得推广。(本文来源于《世界最新医学信息文摘》期刊2015年41期）
张荣升[7]（2015）在《脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备及化学发光酶免疫分析方法的建立》一文中研究指出脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)主要是由小麦赤霉病菌产生的,对人畜具有很高毒性的微生物毒素。建立快速准确的检测方法,对于保障食品安全具有重要意义。本文研究了 DON单克隆抗体及化学发光酶免疫检测方法。通过合成脱氧雪腐镰刀菌烯醇半抗原,借助活泼酯法将卵清蛋白(OVA)与DON半抗原偶联,获得包被抗原;以偶联有牛血清白蛋白(BSA)的市售DON免疫抗原来免疫BALB/c小鼠;检测血清,选取免疫效果最好的小鼠,取其脾脏细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0进行细胞融合。经过多次筛选和亚克隆,以及对杂交瘤细胞上清培养液的检测,最终筛选出一株能稳定分泌抗DON单克隆抗体的杂交瘤细胞株5E8。抗体的亚型为IgG1,效价达到了 8×105,与结构类似的毒素间没有明显的交叉反应。通过筛选化学发光底物缓冲体系及增强剂种类,并优化增强剂、鲁米诺和氧化剂的浓度,确定发光增敏液的保存时间,最终配制出化学发光效果良好的底物溶液。在该溶液基础上,优化包被抗原以及抗体的浓度,选择合适的封闭物,并对pH值、离子强度、乙腈含量和羊抗鼠IgG的浓度等条件进行优化,最终确定的分析条件为:包被抗原稀释8000倍,DON单克隆抗体稀释5000倍,封闭物为3%脱脂奶粉,工作溶液为包含10%乙腈、pH 7.4、0.4MNa+强度的磷酸盐缓冲溶液,羊抗鼠IgG的稀释倍数为5000倍。在最优条件基础上,建立了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的间接竞争化学发光酶免疫分析标准曲线。其检测下限IC10为0.5602μ吨/L,灵敏度IC50为18.62μ吨/L。在小麦、燕麦、玉米中添加DON标准品,进行检测分析,平均回收率89.47%-114.38%,而变异系数为5.71%-11.42%。对所建立的方法用气相色谱进行了评估,分析结果具有很高的相似度,相关系数R2大于0.99。制备了 DON酶标抗原,优化了包被抗体的浓度及酶标抗原的浓度,选择了合适的乙腈含量及竞争反应时间。在制备的化学发光底物溶液和酶标抗原的基础上,最终优化后的条件为:包被抗体稀释10000倍,酶标抗原稀释4000倍,体系的竞争反应时间为30min,工作溶液的乙腈含量为5%。在最优条件基础上,建立了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的直接竞争化学发光酶免疫分析标准曲线。其检测下限IC10为0.6931μg/L,灵敏度IC50为30.46μg/L。在小麦、燕麦、玉米中添加DON标准品,进行检测分析,平均回收率88.57%-116.38%,而变异系数为7.31%-10.21%。对所建立的方法用气相色谱进行了评估,分析结果具有很高的相似度,相关系数R2大于0.99。分别使用几种药剂防治小麦赤霉病,采集发病的小麦样品,用本研究建立的间接竞争和直接竞争化学发光酶免疫分析方法对发病小麦中的DON含量进行检测。考虑漂移现象和基质效应对测定的干扰,要进行精确检测。将间接竞争和直接竞争方法的检测结果进行对比分析;且分别与市售呕吐毒素(DON)ELISA检测试剂盒的检测结果进行相关性分析。结果显示,两种化学发光酶免疫分析方法均能准确测定DON的含量,且与商品化试剂盒的ELISA方法有着良好的相关性,相关系数R2大于0.99。说明建立的化学发光酶免疫分析方法的检测结果可靠、准确,分析方法在田间小麦样品DON含量的检测方面有着良好的应用前景。(本文来源于《南京农业大学》期刊2015-05-01）
顾华兵,陈银辉,樊凌翰,雷江红,邢佑尚[8]（2014）在《禽肉中氯霉素残留化学发光酶免疫分析方法的建立》一文中研究指出研究旨在建立检测禽肉中氯霉素残留的化学发光酶免疫分析方法(CLEIA);通过方阵法确定包被抗体及酶标抗原的浓度,建立了氯霉素直接竞争性CLEIA的标准曲线,用CLEIA与液相色谱串联方法(LC-MS/MS)检测禽肉中氯霉素的含量。结果表明,建立的检测鸡肉和鸭肉中氯霉素残留的CLEIA法,检测限分别为13.4 pg/g和12.8 pg/g,CLEIA法的回收率为74.7%~107.8%,变异系数为4.5%~11.5%,CLEIA和LC-MS/MS两种方法分析结果无显着性差异(P>0.05)。(本文来源于《中国家禽》期刊2014年23期）
陆建文[9]（2014）在《原发性肝癌肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法及应用探析》一文中研究指出目的:探析原发性肝癌患者采取肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法的应用效果。方法:选取2012年5月-2014年5月笔者所在医院接诊的原发性肝癌患者47例作为研究对象(研究组),将同期接待的正常体检者50例作为对照组,皆采取肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法对α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、铁蛋白(SF)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、甲胎蛋白(AFP)、血清胆碱酯酶(CHE)等指标进行检测分析,观察记录前述五种指标在两组对象中的水平(均值)及检测阳性率情况,并进行对比分析。结果:两组对象AFU、SF、GGT、AFP、CHE等指标水平差比较,差异有统计学意义(P<0.01);研究组五种指标单个检出阳性率要明显高于对照组(P<0.01),同时五个指标联合检测所得阳性率也要明显高于对照组(P<0.05)。结论:原发性肝癌患者采取肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法检验有着很高的临床价值,单个肿瘤标志物检测可检出阳性率情况,而联合检验则检出阳性率更高,值得借鉴。(本文来源于《中外医学研究》期刊2014年28期）
房芳,敬思群,李锦丰,曹际娟,徐静[10]（2014）在《一种沙门氏菌化学发光酶免疫分析方法的建立》一文中研究指出主要研究沙门氏菌的化学发光酶免疫(CLEIA)快速检测方法。以猪霍乱沙门氏菌(Salmonella choleraesuis)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)、肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)作为抗原,沙门氏菌多克隆抗体作为一抗,辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG(IgGHRP)作为酶标二抗,选用HRP-鲁米诺-H2O2化学发光体系,通过优化底物中各组分条件,建立了一种可同时检测3种沙门氏菌的间接CLEIA方法,此方法检测限为1×104 cfu/mL,且与其他3种常见肠道致病菌均无交叉反应。对人工添加牛乳样品预增菌后,应用建立的沙门氏菌间接CLEIA快速检测方法进行沙门氏菌检测,检测准确率可达到97.33%。该研究建立的沙门氏菌间接CLEIA快速检测方法简便、快速、准确,具有良好的特异性和重复性。(本文来源于《食品科技》期刊2014年08期）
化学发光酶免疫分析方法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)主要是由小麦赤霉病菌产生的,对人畜具有很高毒性的微生物毒素。建立快速准确的检测方法,对于保障食品安全具有重要意义。本文研究了DON单克隆抗体及化学发光酶免疫检测方法。通过合成DON半抗原,采用单克隆抗体技术制备出分泌抗DON单克隆抗体的杂交瘤细胞株5E8。抗体的亚型为IgGl,效价达到了8×10~5,与结构类似的毒素间没有明显的交叉反应。通过优化化学发光底物缓冲体系及增强剂种类,最终配制出化学发光效果良好的底物溶液。在该溶液基础上,优化包被抗原以及抗体的浓度,选择合适的封闭物,并对pH值、离子强度、乙腈含量和羊抗鼠IgG的浓度等条件进行优化,最终确定的分析条件为:包被抗原稀释8000倍,DON单克隆抗体稀释5000倍,封闭物为3%脱脂奶粉,工作溶液为包含10%乙腈、pH 7.4、0.4M Na~+强度的磷酸盐缓冲溶液,羊抗鼠IgG的稀释倍数为5000倍。在最优条件基础上,建立了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的间接竞争化学发光酶免疫分析标准曲线。其检测下限IC_(10)为O.5602μg/L,灵敏度IC50为18.62μg/L。在小麦、燕麦、玉米中添加DON标准品,进行检测分析,平均回收率89.47%~114.38%,而变异系数为5.71%~11.42%。对所建立的方法用气相色谱进行了评估,分析结果具有很高的相似度,相关系数R~2大于0.99。分别使用几种药剂防治小麦赤霉病,采集发病的小麦样品,用本研究建立的间接竞争化学发光酶免疫分析方法对发病小麦中的DON含量进行检测。且与市售呕吐毒素(DON)ELISA检测试剂盒的检测结果进行相关性分析。结果显示,该化学发光酶免疫分析方法能准确测定DON的含量,且与商品化试剂盒的ELISA方法有着良好的相关性,相关系数R~2大于0.99。说明建立的化学发光酶免疫分析方法的检测结果可靠、准确,分析方法在田间小麦样品DON含量的检测方面有着良好的应用前景。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
化学发光酶免疫分析方法论文参考文献
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[2].周裕军,张荣升,周明国.脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备及化学发光酶免疫分析方法的建立[C].中国植物病理学会2015年学术年会论文集.2015
[3].余晓敏.原发性肝癌肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法在临床中的应用[J].社区医学杂志.2015
[4].朱彬,朱帆,徐振林,杨金易,柳春红.酱油与白酒中邻苯二甲酸二甲酯的化学发光酶免疫分析方法研究[J].分析化学.2015
[5].戴尽波,徐振林,刘凤银,杨金易,孙远明.化学发光酶免疫分析测定鱼肉中呋喃它酮代谢物方法研究[J].分析化学.2015
[6].米娜瓦尔·克里木,买日也木·肉孜.原发性肝癌肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法在临床上的应用[J].世界最新医学信息文摘.2015
[7].张荣升.脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备及化学发光酶免疫分析方法的建立[D].南京农业大学.2015
[8].顾华兵,陈银辉,樊凌翰,雷江红,邢佑尚.禽肉中氯霉素残留化学发光酶免疫分析方法的建立[J].中国家禽.2014
[9].陆建文.原发性肝癌肿瘤标志物化学发光酶免疫分析方法及应用探析[J].中外医学研究.2014
[10].房芳,敬思群,李锦丰,曹际娟,徐静.一种沙门氏菌化学发光酶免疫分析方法的建立[J].食品科技.2014
标签：α-cyano; pyrethroid; pesticides; broad-specific; monoclonal; antibody; enzyme; linked; immunoassay; chemiluminescent;