导读:本文包含了离体胰腺腺泡细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:硫化氢,NaHS,雨蛙素,胰腺腺泡细胞
离体胰腺腺泡细胞论文文献综述
付兰英[1]（2013）在《H_2S通过PI_3K/AKT-NF-κB通路调节离体大鼠胰腺腺泡细胞TNF-α、IL-1β、IL-10的表达》一文中研究指出研究目的和背景：急性胰腺炎(Acute Pancreatitis，AP)是临床常见急腹症之一,约75-80%呈自限性，20-25%发展成为重症急性胰腺炎(Severe Acute Pancreatitis,SAP)。重症急性胰腺炎中，死亡率约20%-60%。目前AP发病机制不清楚，主要有胰酶自身消化、氧化应激损伤、炎症介质反应等参与其中。随着对发病机制研究不断深入，认为炎症因子在AP的病理过程中起重要作用。炎症因子不仅能募集炎性细胞到损伤胰腺组织，同时促炎细胞因子级联反应能诱发全身炎症反应综合征(systemic inflammationresponse syndrome, SIRS)，而SIRS能导致全身多器官功能障碍综合症(multi-organdysfunction syndrome, MODS)，从而增加并发症的发生及死亡的风险。因此，有效调控炎症因子的产生和相互作用，对AP的防治有重要意义。近年来，随着对多种炎症模型研究的逐步加深，发现炎症反应的激活是由细胞内外多条信号传导通路实现的，并发现磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸/苏氨酸激酶(phosphatidylinositol-3-kinase/serine/threonine kinase, PI_3K/AKT)通路参与大多数炎症过程；当PI_3K/AKT磷酸化后，激活核转录因子(nuclear factor-κB, NF-κB)，启动和调控炎症因子基因转录，发挥多种生物学效应。硫化氢(hydrogen sulfide, H_2S)为无色有刺激气味的水溶性有毒气体。在大气层中浓度如高于600ppm具有致死毒性。最近研究发现在哺乳动物体内，H_2S因浓度较低，且分子量小可自由通过细胞膜，被认为是继NO、CO后的第叁种新型气体信号分子，参与调节多种生物效应。H_2S主要以L-半胱氨酸为底物通过激活5’-磷酸吡哆醛依赖性酶：胱硫醚-γ裂解酶(cystathionine γ-lyase, CSE, EC4.4.1.1)和胱硫醚-β合成酶(cystathionine β-synthase, CBS, EC4.2.1.22)生成；同时，还可以以α酮戊二酸为底物通过3-巯基丙酮酸盐硫转移酶(3-Mercaptopyruvate sulfurtransferase,3MTS)产生。CBS主要存在于中枢神经系统中，而CSE活性在外周组织中较高。已有大量证据显示H_2S参与调节心脏、血管、胃肠、呼吸、内分泌及神经传递等方面功能，但其在炎症过程中的作用尚存争议。基于此，我们认为该信号通路可能是炎症反应过程中的关键信号通路之一，如果能对其进行有效的调节和阻断，则能遏制细胞因子的产生和相互作用，提高AP的治疗效果。因此，本文实验通过，以雨蛙素刺激的大鼠胰腺腺泡细胞为体外AP模型，给予不同浓度的外源性H_2S供体(NaHS)和CSE抑制剂炔丙基甘氨酸(DL-propargylglycine,PAG)，Real-time PCR法检测炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-10)及CSEmRNA的表达水平，并使用PI_3K抑制剂LY294002及NF-κB抑制剂BAY11-7082预处理各组胰腺腺泡细胞，Western blotting法检测各组胰腺腺泡细胞磷酸化AKT(p-AKT)、IκBα及NF-κB水平，探讨H_2S通过PI_3K-AKT通路调节AP时炎症反应，以期能为早期干预AP提供新的靶点。研究方法：1.雨蛙素(10-7mol/L)处理离体胰腺腺泡细胞，诱导大鼠胰腺腺泡细胞损伤模型2.实验分组：1)正常组：正常腺泡细胞2)雨蛙素组：雨蛙素(10-7mol/L)处理离体胰腺腺泡细胞60min3)不同浓度NaHS+雨蛙素组：不同浓度(5、10、20、40μmol/L)NaHS预处理30min后，与雨蛙素(10-7mol/L)共孵育细胞60min。4)不同时间NaHS+雨蛙素组：NaHS(5μmol/L)预处理(10、30、60)后，与雨蛙素(10-7mol/L)共孵育细胞60min。5)PAG+雨蛙素组：PAG预处理60min后，与雨蛙素(10-7mol/L)共孵育细胞60min。6)LY294002+NaHS+雨蛙素组：NaHS(5μmol/L、60min)预处理前，LY294002处理30min后，与雨蛙素(10-7mol/L)共孵育细胞60min。7) BAY11-7082+NaHS+雨蛙素组：NaHS(5μmol/L、60min)预处理前，BAY11-7082处理30min后，与雨蛙素(10-7mol/L)共孵育细胞60min。3.采用Real-Time PCR法检测各组炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-10)及CSE的mRNA的表达，Western blotting法检测胰腺腺泡细胞磷酸化AKT(p-AKT)、IκBα及NF-κB水平。结果外源性给予不同浓度H_2S供体NaHS后，对雨蛙素刺激腺泡细胞表达细胞活素的影响不同，NaHS在5、10μmol/L浓度时TNF-α、IL-1β的水平降低，IL-10的水平升高。且5μmol/L时TNF-α(P=0.0012)、IL-1β(P=0.0090)、IL-10(P=0.0011)的水平与雨蛙素组比较有统计学意义。但当NaHS浓度升至20、40μmol/L时增加TNF-α、IL-1β的表达。5μM NaHS不同时间(10、30、60)预处理腺泡细胞后，对促炎因子(TNF-α，IL-1β)的抑制作用随着时间的延迟而增加，在60min时TNF-α(P=0.0027)、IL-1β(P=0.0082)的水平显着低于雨蛙素组，IL-10显着高于雨蛙素组(P=0.0072)。与正常组比较，雨蛙素组CSE的表达水平明显降低(P=0.0180)；PAG预处理后,CSE的水平进一步降低(P=0.0122)。PAG组TNF-α(P=0.0025)及IL-1β(P=0.0071)的水平明显高于雨蛙素组，而IL-10水平显着低于雨蛙素组(P=0.0056)；NaHS处理组与PAG组比较，CSE的水平较明显升高(P=0.0136)，TNF-α (P=0.0053)、IL-1β(P=0.0041)的水平明显降低，IL-10的水平显着(P=0.0091)。LY294002与NaHS共同孵育，与雨蛙素组比较，TNF-α(P=0.0036)、IL-1β(P=0.0039的水平显着降低，IL-10的水平明显升高(P=0.0078)。与雨蛙素组比较，NaHS处理后细胞浆内p-AKT表达降低(P=0.0037)，IκBα的降解减少(P=0.0048)，NF-κB p65入核减少(P=0.0095)，LY294002处理进一步降低细胞浆内p-AKT表达(P=0.0051)，减少IκBα的降解(P=0.0078)，减少NF-κB p65入核(P=0.0053)。BAY11-7082与NaHS共同孵育，与雨蛙素组比较，TNF-α(P=0.0052)、IL-1β(P=0.0031)的水平显着降低，IL-10的水平明显升高(P=0.0125)。与雨蛙素组比较，NaHS处理后细胞浆IκBα的降解减少(P=0.0074)，NF-κB p65入核减少(P=0.0042)，BAY11-7082处理进一步减少细胞浆内IκBα的降解(P=0.0016)，减少NF-κB p65入核(P=0.0025)。结论1.在雨蛙素诱导的体外胰腺腺泡细胞损伤模型中，损伤胰腺腺泡细胞内源性H_2S生成酶CSE减少，抑制CSE后进一步增加炎症介质的表达，证实内源性H_2S参与体外胰腺腺泡细胞的炎症损伤过程，可能参与胰腺炎的发生发展。给予一定剂量外源性H_2S(NaHS)可减轻胰腺腺泡细胞损伤炎症程度，且与剂量有关，低浓度时抑制炎症反应。2.低浓度H_2S降低AKT磷酸化，抑制NF-κB的入核，通过PI_3K/AKT-NF-κB通路负性调节损伤胰腺腺泡细胞的炎症反应。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2013-05-01）
付兰英,饶春燕,赵晓晏[2]（2013）在《硫化氢对离体大鼠胰腺腺泡细胞炎症因子表达的影响》一文中研究指出目的以雨蛙素刺激的大鼠胰腺腺泡细胞为体外急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型,研究硫化氢(H2S)对AP时胰腺腺泡细胞炎症因子表达的影响及机制。方法分离25只SD大鼠胰腺腺泡细胞,用雨蛙素(10-7mol/L)诱导体外AP模型,用不同浓度NaHS(5、10、20、40μmol/L)及不同时间(10、30、60 min)NaHS(5μmol/L)处理,Real-timePCR检测炎症因子mRNA水平。再用CSE抑制剂PAG处理,Real-time PCR检测炎症因子mRNA水平及CSE mRNA水平。进一步用NF-κB抑制剂BAY 11-7082处理后,Real-time PCR检测炎症因子mRNA水平,Western blot检测浆内IκBα及核内NF-κBp65的蛋白表达。结果当5μmol/L NaHS预处理60 min时,TNF-α水平(14.70±1.10)、IL-1β水平(14.42±0.83)显着低于雨蛙素组(P<0.05),IL-10水平(12.20±0.55)显着高于雨蛙素组(P<0.05);CSE抑制剂PAG预处理60 min后,TNF-α水平(37.38±0.89)、IL-1β水平(24.45±0.76)显着高于雨蛙素组(P<0.05),CSE水平(0.14±0.03)、IL-10水平(0.14±0.03)显着低于雨蛙素组(P<0.05);NF-κB抑制剂BAY 11-7082预处理30 min,TNF-α水平(9.17±0.96)、IL-1β水平(2.90±0.17)显着低于雨蛙素组(P<0.05),IL-10水平(40.00±1.00)显着高于雨蛙素组(P<0.05),并且胞浆内IκBα(0.90±0.01)的降解及细胞核内NF-κBp65(0.70±0.04)的蛋白表达明显低于雨蛙素组(P<0.05)。结论小剂量H2S供体NaHS在雨蛙素孵育的胰腺腺泡细胞中具有一定抗炎作用,且该作用是通过抑制NF-κB通路从而抑制腺泡细胞表达促炎因子实现的。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2013年08期）
陆新元,李永渝,李学晋,李艳娜,李琨[3]（2008）在《急性胰腺炎大鼠血清、腹水对离体胰腺腺泡细胞的损伤》一文中研究指出目的:观察急性胰腺炎(AP)大鼠血清、腹水对大鼠离体胰腺腺泡细胞的损伤作用,探讨AP细胞钙超载的可能机制。方法:采用大鼠胰胆管逆行注射3%去氧胆酸钠复制AP模型,分别在1、5、10h取动物的血清、腹水备用。胶原酶法分离、培养正常大鼠胰腺腺泡细胞,给予1、5、10h AP大鼠血清、腹水刺激;采用MTT法检测胰腺腺泡细胞的存活率;用荧光染料Fura-2/AM负载后,给予1、5、10h AP大鼠血清、腹水刺激,采用钙离子成像系统,观察单个胰腺腺泡细胞游离钙水平的变化。结果:AP模型复制后1h,血清淀粉酶活性即明显升高,同时胰腺组织破坏严重;经AP腹水、血清刺激的胰腺腺泡细胞,其存活率降低;胰腺腺泡细胞内游离钙浓度明显升高(P<0.05),且随AP病程时间延长,AP腹水、血清的刺激作用越明显。结论:在AP大鼠血清、腹水刺激下,胰腺腺泡细胞存活率下降,同时有细胞钙超载发生。(本文来源于《中国中西医结合外科杂志》期刊2008年03期）
张红,李永渝,王升年,张孔华,吴咸中[4]（2003）在《脂多糖对离体大鼠胰腺腺泡细胞钙稳态的影响(英文)》一文中研究指出目的:研究脂多糖(LPS)对胰腺腺泡细胞钙稳态的影响,及胞浆内钙超载时钙离子的来源,以探讨LPS致胰腺腺泡细胞损伤的机制。方法:胶原酶法分离胰腺腺泡细胞,Fluo-3/AM负载后,在无钙或含生理钙离子浓度的培养液中加入不同浓度LPS,采用激光共聚焦显微镜观察单个胰腺腺泡细胞[Ca~(2+)]_i。另外采用MTT法检测LPS作用的不同时间点胰腺腺泡细胞的活性。结果:LPS可致胰腺腺泡细胞损伤、细胞内[Ca~(2+)]_i显着升高,且呈浓度依赖性(P<0.05):在含1mmol/L依他酸的培养液中,LPS致腺泡细胞损伤程度明显减轻(P<0.05)、仅引起胰腺腺泡细胞[Ca~(2+)]_i缓慢、微弱的升高,而再次恢复培养液中Ca~(2+)至生理浓度,引发快速、幅度更高而持久的[Ca~(2+)]_i变化。腺泡细胞内[Ca~(2+)]_i的变化明显先于腺泡细胞的损伤。结论:LPS导致胰腺腺泡细胞内钙超载,主要源于胞外Ca~(2+)内流。钙超载作为早期的病理事件参与腺泡细胞损伤的发生,钙稳态失衡是LPS致胰腺细胞损伤的主要因素之一。(本文来源于《Acta Pharmacologica Sinica》期刊2003年08期）
离体胰腺腺泡细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的以雨蛙素刺激的大鼠胰腺腺泡细胞为体外急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)模型,研究硫化氢(H2S)对AP时胰腺腺泡细胞炎症因子表达的影响及机制。方法分离25只SD大鼠胰腺腺泡细胞,用雨蛙素(10-7mol/L)诱导体外AP模型,用不同浓度NaHS(5、10、20、40μmol/L)及不同时间(10、30、60 min)NaHS(5μmol/L)处理,Real-timePCR检测炎症因子mRNA水平。再用CSE抑制剂PAG处理,Real-time PCR检测炎症因子mRNA水平及CSE mRNA水平。进一步用NF-κB抑制剂BAY 11-7082处理后,Real-time PCR检测炎症因子mRNA水平,Western blot检测浆内IκBα及核内NF-κBp65的蛋白表达。结果当5μmol/L NaHS预处理60 min时,TNF-α水平(14.70±1.10)、IL-1β水平(14.42±0.83)显着低于雨蛙素组(P<0.05),IL-10水平(12.20±0.55)显着高于雨蛙素组(P<0.05);CSE抑制剂PAG预处理60 min后,TNF-α水平(37.38±0.89)、IL-1β水平(24.45±0.76)显着高于雨蛙素组(P<0.05),CSE水平(0.14±0.03)、IL-10水平(0.14±0.03)显着低于雨蛙素组(P<0.05);NF-κB抑制剂BAY 11-7082预处理30 min,TNF-α水平(9.17±0.96)、IL-1β水平(2.90±0.17)显着低于雨蛙素组(P<0.05),IL-10水平(40.00±1.00)显着高于雨蛙素组(P<0.05),并且胞浆内IκBα(0.90±0.01)的降解及细胞核内NF-κBp65(0.70±0.04)的蛋白表达明显低于雨蛙素组(P<0.05)。结论小剂量H2S供体NaHS在雨蛙素孵育的胰腺腺泡细胞中具有一定抗炎作用,且该作用是通过抑制NF-κB通路从而抑制腺泡细胞表达促炎因子实现的。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
离体胰腺腺泡细胞论文参考文献
[1].付兰英.H_2S通过PI_3K/AKT-NF-κB通路调节离体大鼠胰腺腺泡细胞TNF-α、IL-1β、IL-10的表达[D].第叁军医大学.2013
[2].付兰英,饶春燕,赵晓晏.硫化氢对离体大鼠胰腺腺泡细胞炎症因子表达的影响[J].第叁军医大学学报.2013
[3].陆新元,李永渝,李学晋,李艳娜,李琨.急性胰腺炎大鼠血清、腹水对离体胰腺腺泡细胞的损伤[J].中国中西医结合外科杂志.2008
[4].张红,李永渝,王升年,张孔华,吴咸中.脂多糖对离体大鼠胰腺腺泡细胞钙稳态的影响(英文)[J].ActaPharmacologicaSinica.2003