官艳东:棕榈酸对围产期奶牛中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响论文

官艳东:棕榈酸对围产期奶牛中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响论文

本文主要研究内容

作者官艳东(2019)在《棕榈酸对围产期奶牛中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响》一文中研究指出:围产期奶牛在产后体内易出现能量负平衡,从而使得血浆中非脂化脂肪酸的浓度大大升高。最新的研究证实高浓度的非脂化脂肪酸可以导致围产期亚急性炎症尤其是代谢性炎症。同时,棕榈酸是非脂化脂肪酸毒性最大且变化最大的脂肪酸,有可能参与炎症与免疫抑制,但进一步的机制并不明确。中性粒细胞作为动物机体先天免疫系统的主要效应细胞,较新的机制发现中性粒细胞胞外诱捕网的形成是免疫机制之一。为明确中性粒细胞胞外诱捕网的形成是否为棕榈酸诱导炎症和免疫应答的机制,本研究将探讨奶牛围产期对中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响和机制。研究采用红细胞裂解法分离了围产期产后奶牛(DIM:7-12)的外周血中性粒细胞培养,使用荧光显微镜(SYTOX Orange染料)、扫描电子显微镜观察中性粒细胞胞外诱捕网的形态,使用Picogreen荧光染料对双链DNA进行定量测定,TMB法测定髓过氧化物酶(MPO)的水平,来明确棕榈酸是否能引起中性粒细胞胞外诱捕网的形成。其次,使用比色法检测乳酸脱氢酶活性,使用DHCF法检测活性氧水平,辣根过氧化物酶比色法检测过氧化氢的活性水平,Western blot技术检测PI3K/Akt通路相关蛋白Akt、p-Akt、NE、Nox2和H3的表达水平,探讨棕榈酸诱导的中性粒细胞胞外诱捕网的机制。结果发现:分离得到中性粒细胞的平均活率为97%,纯度为96%。相对于对照组,棕榈酸可导致乳酸脱氢酶活力显著降低,细胞外DNA的释放显著增加,细胞外双链DNA含量显著增多,胞外网状结构数量显著增多。棕榈酸可引起中性粒细胞胞内ROS和H2O2水平显著升高,但L-Epicatechin使得ROS和H2O2水平显著降低。棕榈酸可导致中性粒细胞的MPO活性水平显著上升,L-Epicatechin可使抑制棕榈酸诱导的中性粒细胞胞外MPO水平。棕榈酸可引起Nox2,Akt和p-Akt蛋白表达水平均显著增加,L-Epicatechin可抑制棕榈酸诱导的Nox2,Akt和p-Akt蛋白表达水平显著增加。结论:棕榈酸可以导致中性粒细胞胞外诱捕网的生成;其机制可能是激活PI3K/Akt通路相关蛋白,引起中性粒细胞产生氧化应激,导致中性粒细胞胞外诱捕网的形成。

Abstract

wei chan ji nai niu zai chan hou ti nei yi chu xian neng liang fu ping heng ,cong er shi de xie jiang zhong fei zhi hua zhi fang suan de nong du da da sheng gao 。zui xin de yan jiu zheng shi gao nong du de fei zhi hua zhi fang suan ke yi dao zhi wei chan ji ya ji xing yan zheng you ji shi dai xie xing yan zheng 。tong shi ,zong lv suan shi fei zhi hua zhi fang suan du xing zui da ju bian hua zui da de zhi fang suan ,you ke neng can yu yan zheng yu mian yi yi zhi ,dan jin yi bu de ji zhi bing bu ming que 。zhong xing li xi bao zuo wei dong wu ji ti xian tian mian yi ji tong de zhu yao xiao ying xi bao ,jiao xin de ji zhi fa xian zhong xing li xi bao bao wai you bu wang de xing cheng shi mian yi ji zhi zhi yi 。wei ming que zhong xing li xi bao bao wai you bu wang de xing cheng shi fou wei zong lv suan you dao yan zheng he mian yi ying da de ji zhi ,ben yan jiu jiang tan tao nai niu wei chan ji dui zhong xing li xi bao bao wai you bu wang xing cheng de ying xiang he ji zhi 。yan jiu cai yong gong xi bao lie jie fa fen li le wei chan ji chan hou nai niu (DIM:7-12)de wai zhou xie zhong xing li xi bao pei yang ,shi yong ying guang xian wei jing (SYTOX Orangeran liao )、sao miao dian zi xian wei jing guan cha zhong xing li xi bao bao wai you bu wang de xing tai ,shi yong Picogreenying guang ran liao dui shuang lian DNAjin hang ding liang ce ding ,TMBfa ce ding sui guo yang hua wu mei (MPO)de shui ping ,lai ming que zong lv suan shi fou neng yin qi zhong xing li xi bao bao wai you bu wang de xing cheng 。ji ci ,shi yong bi se fa jian ce ru suan tuo qing mei huo xing ,shi yong DHCFfa jian ce huo xing yang shui ping ,la gen guo yang hua wu mei bi se fa jian ce guo yang hua qing de huo xing shui ping ,Western blotji shu jian ce PI3K/Akttong lu xiang guan dan bai Akt、p-Akt、NE、Nox2he H3de biao da shui ping ,tan tao zong lv suan you dao de zhong xing li xi bao bao wai you bu wang de ji zhi 。jie guo fa xian :fen li de dao zhong xing li xi bao de ping jun huo lv wei 97%,chun du wei 96%。xiang dui yu dui zhao zu ,zong lv suan ke dao zhi ru suan tuo qing mei huo li xian zhe jiang di ,xi bao wai DNAde shi fang xian zhe zeng jia ,xi bao wai shuang lian DNAhan liang xian zhe zeng duo ,bao wai wang zhuang jie gou shu liang xian zhe zeng duo 。zong lv suan ke yin qi zhong xing li xi bao bao nei ROShe H2O2shui ping xian zhe sheng gao ,dan L-Epicatechinshi de ROShe H2O2shui ping xian zhe jiang di 。zong lv suan ke dao zhi zhong xing li xi bao de MPOhuo xing shui ping xian zhe shang sheng ,L-Epicatechinke shi yi zhi zong lv suan you dao de zhong xing li xi bao bao wai MPOshui ping 。zong lv suan ke yin qi Nox2,Akthe p-Aktdan bai biao da shui ping jun xian zhe zeng jia ,L-Epicatechinke yi zhi zong lv suan you dao de Nox2,Akthe p-Aktdan bai biao da shui ping xian zhe zeng jia 。jie lun :zong lv suan ke yi dao zhi zhong xing li xi bao bao wai you bu wang de sheng cheng ;ji ji zhi ke neng shi ji huo PI3K/Akttong lu xiang guan dan bai ,yin qi zhong xing li xi bao chan sheng yang hua ying ji ,dao zhi zhong xing li xi bao bao wai you bu wang de xing cheng 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自西北农林科技大学的官艳东,发表于刊物西北农林科技大学2019-07-11论文,是一篇关于围产期奶牛论文,棕榈酸论文,中性粒细胞胞外诱捕网论文,通路论文,西北农林科技大学2019-07-11论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自西北农林科技大学2019-07-11论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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