袁斌:电镜单颗粒技术解析尿素酰胺水解酶功能相关的构象变化机制论文

袁斌:电镜单颗粒技术解析尿素酰胺水解酶功能相关的构象变化机制论文

本文主要研究内容

作者袁斌(2019)在《电镜单颗粒技术解析尿素酰胺水解酶功能相关的构象变化机制》一文中研究指出:尿素酰胺水解酶(Urea amidolyase,UA)属于生物素依赖的羧化酶家族,能够将尿素转化为氨,在自然界氮循环中具有重要作用。尿素酰胺水解酶是一种广泛分布于细菌,真菌,藻类和植物中的双功能酶。在UA进行尿素转化时,需要其C端生物素羧化酶(BC)、羧基转移酶(CT)及N端脲基甲酸盐水解酶(AH)结构域间的紧密协同,以实现底物/产物的顺序传递和与相应酶活的联动,从而依次完成生物素羧化、羧基转移至尿素、脲基甲酸盐水解等步骤。有意思的是,虽然同家族的其他成员均通过寡聚体的形式来完成对底物的羧化,但UA的酶活不依赖于寡聚。UC与AH结构域各自的晶体结构已知,但前者仅捕捉到拟羧基转移状态的构象,由于结晶不成功,酶的全长结构仍未解决,因而其整体构架及工作过程中介导结构域间通讯的长程构象变化还不清楚。在前期工作中,我们已经获得了高度均一的乳酸酵母UA(kluyveromyces lactis,KIUA)全酶。本论文首次通过单颗粒透射电镜技术报道了KIUA可溶性同源二聚体形式的整体结构及构象变化形式。无论KIUA是否与配体和底物一起孵育,所解析的结构都代表了一种中间状态,即生物素-羧基载体蛋白(BCCP)结构域在单个单体的BC或CT结构域上交替锚定,这为两个单体之间的协同机制提供可能,并且解释了单个单体其在同源二聚体形式中更有效的活性。此外,我们可以得出结论,BCCP结构域在BC和CT结构域之间摆动以完成生物素的羧化和羧基转移到尿素是最有可能的一种节能和随机易位模式。

Abstract

niao su xian an shui jie mei (Urea amidolyase,UA)shu yu sheng wu su yi lai de suo hua mei jia zu ,neng gou jiang niao su zhuai hua wei an ,zai zi ran jie dan xun huan zhong ju you chong yao zuo yong 。niao su xian an shui jie mei shi yi chong an fan fen bu yu xi jun ,zhen jun ,zao lei he zhi wu zhong de shuang gong neng mei 。zai UAjin hang niao su zhuai hua shi ,xu yao ji Cduan sheng wu su suo hua mei (BC)、suo ji zhuai yi mei (CT)ji Nduan niao ji jia suan yan shui jie mei (AH)jie gou yu jian de jin mi xie tong ,yi shi xian de wu /chan wu de shun xu chuan di he yu xiang ying mei huo de lian dong ,cong er yi ci wan cheng sheng wu su suo hua 、suo ji zhuai yi zhi niao su 、niao ji jia suan yan shui jie deng bu zhou 。you yi sai de shi ,sui ran tong jia zu de ji ta cheng yuan jun tong guo gua ju ti de xing shi lai wan cheng dui de wu de suo hua ,dan UAde mei huo bu yi lai yu gua ju 。UCyu AHjie gou yu ge zi de jing ti jie gou yi zhi ,dan qian zhe jin bu zhuo dao ni suo ji zhuai yi zhuang tai de gou xiang ,you yu jie jing bu cheng gong ,mei de quan chang jie gou reng wei jie jue ,yin er ji zheng ti gou jia ji gong zuo guo cheng zhong jie dao jie gou yu jian tong xun de chang cheng gou xiang bian hua hai bu qing chu 。zai qian ji gong zuo zhong ,wo men yi jing huo de le gao du jun yi de ru suan jiao mu UA(kluyveromyces lactis,KIUA)quan mei 。ben lun wen shou ci tong guo chan ke li tou she dian jing ji shu bao dao le KIUAke rong xing tong yuan er ju ti xing shi de zheng ti jie gou ji gou xiang bian hua xing shi 。mo lun KIUAshi fou yu pei ti he de wu yi qi fu yo ,suo jie xi de jie gou dou dai biao le yi chong zhong jian zhuang tai ,ji sheng wu su -suo ji zai ti dan bai (BCCP)jie gou yu zai chan ge chan ti de BChuo CTjie gou yu shang jiao ti mao ding ,zhe wei liang ge chan ti zhi jian de xie tong ji zhi di gong ke neng ,bing ju jie shi le chan ge chan ti ji zai tong yuan er ju ti xing shi zhong geng you xiao de huo xing 。ci wai ,wo men ke yi de chu jie lun ,BCCPjie gou yu zai BChe CTjie gou yu zhi jian bai dong yi wan cheng sheng wu su de suo hua he suo ji zhuai yi dao niao su shi zui you ke neng de yi chong jie neng he sui ji yi wei mo shi 。

论文参考文献

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  • 读者推荐
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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自兰州大学的袁斌,发表于刊物兰州大学2019-07-29论文,是一篇关于尿素酰胺水解酶论文,构象变化论文,负染论文,电镜单颗粒技术论文,兰州大学2019-07-29论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自兰州大学2019-07-29论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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