导读:本文包含了原生质体瞬间表达论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:菊苣,原生质体,绿色荧光蛋白,瞬时表达
原生质体瞬间表达论文文献综述
周海鹏[1]（2015）在《菊苣原生质体培养及瞬间表达体系的建立》一文中研究指出叶绿体是植物细胞中一种重要的细胞器,是光合作用的反应场所,近些年受到科学研究的重视,对叶绿体进行遗传转化已经形成了研究的一个新方向。和传统的细胞核遗传转化过程相比,叶绿体的遗传过程是母系遗传行为,因此叶绿体转化拥有生物安全的特性,不存在基因漂移的现象,并且外源基因在叶绿体中的表达拥有高水平、无转录沉默现象等优点,日益受到科学研究的重视。本实验以多年生牧草菊苣作为材料,进行了原生质体的初步培养、细胞质及叶绿体转化瞬时表达的相关工作和讨论,为后续的有关工作搭建平台。实验取得了以下结果：(1)优化了以菊苣叶片作为外植体的离体再生体系,研究了不同的激素及浓度的组合对叶片产生的不定芽及生根过程的影响。结果表明：菊苣叶片离体不定芽再生的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA+3%蔗糖,最佳生根培养基为1/2 MS+0.2mg/L NAA+3%蔗糖。(2)尝试进行了菊苣胚性愈伤组织的诱导,在不同的外植体中以子叶的诱导效果较好,最适的胚性愈伤组织诱导培养基为：MS+0.2 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D+2%蔗糖+0.5%水解酪蛋白。(3) 以菊苣叶片为材料,分别对不同酶种类组合、不同的渗透剂浓度、不同的酶解时间叁种条件下有关酶解的因素和原生质体产量和活力的对应关系做了探究,结果表明：最佳的酶解时间为10 h,最适的酶溶液中甘露醇含量为0.5 mol/L,最佳的酶成分组合为1%纤维素酶+0.5%半纤维素酶+1%果胶酶,通过撕下表皮方法可以收获更多的原生质体。(4)进行了菊苣叶肉细胞原生质体的初步培养。在各种培养基上,基本成分为DPD培养基的生长效果较好,能够观察到菊苣原生质体的多次分裂,但未能建立再生体系。相应的培养基为：DPD+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D+2%蔗糖+0.45 mol/L甘露醇。而其他种类的培养基包括MS、B5、1/2MS培养基对菊苣原生质体的生长不利。(5)利用PEG法和基因枪轰击法分别进行了菊苣原生质体和叶绿体的转化与瞬时表达,建立了菊苣原生质体的瞬时表达体系。PEG法可以成功地进行细胞质的瞬时转化,转化效率约为40%。在激光共聚焦显微镜下能够看到35S启动子调控的绿色荧光蛋白基因的稳定表达,能够在菊苣原生质体细胞质中显示出强烈的绿色荧光信号,但通过PEG法和基因枪轰击未能见到绿色荧光在菊苣叶绿体中有表达信号。(本文来源于《西北大学》期刊2015-06-30）
朱道圩,米银法,陈延惠,王静毅,刘中杰[2]（2003）在《GFP基因在软枣猕猴桃愈伤组织原生质体中瞬间表达的初步研究》一文中研究指出用PEG介导法对游离出来的软枣猕猴桃原生质体进行遗传转化,成功地将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入了原生质体,并获得了瞬间表达.结果表明,影响GFP基因转化的因素主要是材料的生理状态,PEG的种类和浓度;适宜的转化条件和方法为,将从白色、较为疏松愈伤组织中游离的原生质体,悬浮到质量分数为13%甘露醇的洗液(CPW13)中,置于45℃水浴中热激5min,再放在冰浴中迅速冷却;加入质粒,轻轻混匀后静止10min;逐滴加入质量分数40%PEG6000介导转化,终浓度为100g·L-1,在室温下放置20min;逐滴加入CPW13稀释转化后的原生质体,以避免PEG浓度剧烈变化造成细胞膜破裂.(本文来源于《河南农业大学学报》期刊2003年02期）
张明菊[3]（2001）在《原生质体瞬间表达系统在基因表达研究中的应用》一文中研究指出外源DNA导入原生质体,通过报告基因检测发现其存在瞬间表这系统,为研究基因表达调控提供了一种方便而有效的实验系统。(本文来源于《黄冈职业技术学院学报》期刊2001年01期）
王锋,朱祯,李向辉,章文才[4]（1998）在《不同调控序列控制下的gus基因在柑桔原生质体中的瞬间表达》一文中研究指出通过ＰＥＧ法及转化脂介导法将不同调控序列控制下的ｇｕｓ基因导入柑桔原生质体中，研究了ｇｕｓ基因在柑桔原生质体中的瞬间表达情况，结果表明，在柑桔原生质体中，控制ｇｕｓ基因表达水平的能力由大至小依次为ＣａＭＶ３５Ｓ启动子、ＡｄｈＩ启动子及ｒｂｃｓ启动子，内含子的存在可以提高ｇｕｓ基因在柑桔原生质体中的表达水平。(本文来源于《福建农业学报》期刊1998年02期）
张满朝,郑国锠[5]（1997）在《人防御素-1(HNP-1)在烟草原生质体中的瞬间表达》一文中研究指出原生质体瞬间表达系统一般用于研究特定基因5′和3′端不同序列在相应基因表达中的作用、不同启动子对于特定基因的转录活性及为外源基因最终导入植株摸索实验条件,而将其用于研究动物基因在植物细胞中的表达情况则少见报道。(本文来源于《实验生物学报》期刊1997年02期）
王钧,柳念祖[6]（1995）在《外源核酸在烟草原生质体中瞬间表达的条件》一文中研究指出ConditionsforTransientExpressionofExogenousNucleicAcidinTobaccoProtoplastsWANGJun,LIUNian－Zu（ShanghaiInstituteofPlantPhysiology(本文来源于《植物生理学通讯》期刊1995年05期）
褚启人,曹华兴,范惠琴,王亦菲,王新华[7]（1995）在《PEG法GUS基因在水稻原生质体及其愈伤组织中的瞬间表达初报》一文中研究指出本文作者构建了ＰＸＭ１，和ＰＧＣＹ６两个质粒．其中质粒ＰＸＭ１，含有高赖氨酸基因和ＧＵＳ报告基因，质粒ｐＧＣＹ６则由裂解多肽ＣｅｃｒｏｐｉｎＢ基因和ＧＵＳ基因组成。这两个基因均以ＣａＭＶ３５Ｓ作为启动子，以ＮＯＳ作为终止子。经纯化的质粒ＤＮＡ以ＰＥＧ法导入４个水稻品种：８９－２、Ｌａｃｃａｓｉｎ、Ｃｙｐｒｅｓｓ、台北３０９细胞悬浮系的原生质体中，组织化学检测结果表明，ＧＵＳ基因在原生质体、愈伤组织及再生小植株中均得以表达。(本文来源于《上海农业学报》期刊1995年03期）
周冀明,卫志明,刘世贵,罗鹏[8]（1995）在《GUS基因在诸葛菜子叶原生质体中的瞬间表达》一文中研究指出本文以诸葛菜无菌苗子叶组织为材料，采用原生质体培养获得成功，建立了原生质体培养高频再生体系，植板率３％，植株再生频率１００％。在此基础上，本文首次研究了ＰＥＧ介导转化诸葛菜原生质体的影响因素，系统地试验了ＰＥＧ法转化子叶原生质体的过程，发现：最适质粒量为２５－３０μｇ；ＰＥＧ终浓度为１５％，ｐＨ８．０；另外，表达效率还与质粒的大小有关，较小的质粒具有相对较高的转化效率；而ＣＴ－ＤＮＡ以及热击处理未见有明显的促进作用。(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊1995年01期）
杨仲南,许智宏,白永延,卫志明[9]（1994）在《外源GUS基因在PEG介导的花椰菜原生质体中的瞬间表达》一文中研究指出为了将外源基因导入花椰菜原生质体获得转基因植株，本文研究了ＰＥＧ介导的外源基因在花椰菜下胚轴原生质体中的瞬间表达。（１）２０％ＰＥＧ将质粒ｐＢＩ２２１导入原生质体后ＧＵＳ表达比１３％ＰＥＧ导入的高，但易造成原生质体损伤。（２）热激处理增强表达，但在随后的培养过程中易造成原生质体降解。（３）原生质体状况对表达有重要影响，５ｄ龄下胚轴原生质体比８ｄ龄的表达强。（４）不同质粒及启动子表达强度不同。质粒ｐＫＩＷＩ１０１比ｐＢＩ２２１表达强３倍左右。(本文来源于《植物生理学报》期刊1994年03期）
王素娟,李晖,李瑶,沈大棱[10]（1994）在《电穿孔法诱导GUS基因在坛紫菜原生质体中的瞬间表达》一文中研究指出基同工程研究已在高等植物中广泛开展，尤其对重要经济作物如水稻、玉米、大豆等的品种改良不断取得可喜成果。在藻类中基因工程起步较晚。Rochaix和VanDillew加于1982年第～次报道广对单细胞衣藻以质粒为载体进行的基因转移［Rochaix等，1982(本文来源于《上海水产大学学报》期刊1994年03期）
原生质体瞬间表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
用PEG介导法对游离出来的软枣猕猴桃原生质体进行遗传转化,成功地将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入了原生质体,并获得了瞬间表达.结果表明,影响GFP基因转化的因素主要是材料的生理状态,PEG的种类和浓度;适宜的转化条件和方法为,将从白色、较为疏松愈伤组织中游离的原生质体,悬浮到质量分数为13%甘露醇的洗液(CPW13)中,置于45℃水浴中热激5min,再放在冰浴中迅速冷却;加入质粒,轻轻混匀后静止10min;逐滴加入质量分数40%PEG6000介导转化,终浓度为100g·L-1,在室温下放置20min;逐滴加入CPW13稀释转化后的原生质体,以避免PEG浓度剧烈变化造成细胞膜破裂.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
原生质体瞬间表达论文参考文献
[1].周海鹏.菊苣原生质体培养及瞬间表达体系的建立[D].西北大学.2015
[2].朱道圩,米银法,陈延惠,王静毅,刘中杰.GFP基因在软枣猕猴桃愈伤组织原生质体中瞬间表达的初步研究[J].河南农业大学学报.2003
[3].张明菊.原生质体瞬间表达系统在基因表达研究中的应用[J].黄冈职业技术学院学报.2001
[4].王锋,朱祯,李向辉,章文才.不同调控序列控制下的gus基因在柑桔原生质体中的瞬间表达[J].福建农业学报.1998
[5].张满朝,郑国锠.人防御素-1(HNP-1)在烟草原生质体中的瞬间表达[J].实验生物学报.1997
[6].王钧,柳念祖.外源核酸在烟草原生质体中瞬间表达的条件[J].植物生理学通讯.1995
[7].褚启人,曹华兴,范惠琴,王亦菲,王新华.PEG法GUS基因在水稻原生质体及其愈伤组织中的瞬间表达初报[J].上海农业学报.1995
[8].周冀明,卫志明,刘世贵,罗鹏.GUS基因在诸葛菜子叶原生质体中的瞬间表达[J].应用与环境生物学报.1995
[9].杨仲南,许智宏,白永延,卫志明.外源GUS基因在PEG介导的花椰菜原生质体中的瞬间表达[J].植物生理学报.1994
[10].王素娟,李晖,李瑶,沈大棱.电穿孔法诱导GUS基因在坛紫菜原生质体中的瞬间表达[J].上海水产大学学报.1994