导读:本文包含了全细胞抽提物论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:乳腺上皮细胞,脂肪来源干细胞,重编程,细胞抽提物
全细胞抽提物论文文献综述
杨艳清,江昌艳,张洁,许其军,王海燕[1]（2017）在《人乳腺上皮细胞抽提物重编程人脂肪来源干细胞的实验研究》一文中研究指出目的观察人乳腺上皮细胞抽提物重编程人脂肪来源干细胞(h ADSCs),使其向上皮细胞转化的可行性。方法采用胶原酶消化法分离并获得脂肪来源干细胞;将超声乳化人乳腺上皮细胞离心后获得抽提物冻存备用;培养第3代h ADSCs,链球菌溶血素O(SLO)处理后,实验组6例加入乳腺上皮细胞抽提液,对照组6例不加乳腺上皮细胞抽提液。细胞培养过程中观察h ADSCs的形态学变化,采用蛋白质印迹法检测卵透明带蛋白1(ZO1)和细胞角蛋白18(CK18)表达的变化。结果流式细胞仪检测结果显示,人脂肪组织分离培养的干细胞表达CD13、CD29、CD44、CD90和CD105呈阳性表达,而不表达CD45。实验组细胞重编程后第16天,细胞形态开始转变为上皮样的圆形;第18天蛋白印迹法检测上皮细胞抗原标志物ZO1和CK18表达增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论人乳腺上皮细胞抽提物可以重编程脂肪来源干细胞,使其向上皮细胞转化。(本文来源于《中国美容整形外科杂志》期刊2017年12期）
杜卫华,范宗兴,王皓宇,郝海生,刘岩[2]（2015）在《爪蟾卵母细胞抽提物可诱导牛胎儿成纤维细胞发生部分重编程》一文中研究指出应用非洲爪蟾卵母细胞抽提物处理和牛胎儿成纤维细胞(Japanese Black cattle fetal fibroblasts,JBCFF),观察处理前后细胞的形态学变化,同时用免疫荧光染色法检测组蛋白的乙酰化状态和OCT4蛋白的表达,并对其多能性标志基因的mRNA表达水平进行定量分析。结果表明,与未处理细胞相比,经抽提物处理和牛胎儿成纤维细胞组蛋白H3K9乙酰化程度与未处理组无显着差异;培养5~6d后细胞聚集形成"克隆簇"中碱性磷酸酶和Oct4蛋白染色阳性;同时也检测到Oct4和Nanog基因在其中的表达,而Sox2基因未见表达;且Oct4、Nanog基因表达量随处理后细胞培养时间的延长(4、5、6d)而呈依次上升趋势。可见,爪蟾卵母细胞抽提物能诱导和牛胎儿成纤维细胞发生部分重编程,恢复其发育全能性,这对牛诱导性干细胞制备方法的探索和体细胞克隆及转基因克隆牛效率的提高具有一定的借鉴意义。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2015年09期）
孙楠,张群[3]（2013）在《表皮干细胞抽提物重编程脂肪干细胞表达表皮细胞表型的实验研究》一文中研究指出目的研究富集的表皮干细胞(Keratinocyte enriched with epidermal stem cells,KSC)抽提物对重编程人脂肪干细胞(Adipose derived stem cells,ASCs)表达表皮细胞表型的影响。方法常规方法收集表皮细胞(Keratinocyte,KC)后,应用Ⅳ型胶原差速贴壁法分别收集KSC与富集后剩余的表皮细胞(Keratinocyte enriched with epidermal stem cellsleft,KCL),鉴定K19和P63的阳性表达率,Gimsa染色法测定KC、KSC、KCL的克隆形成率,分别制备KC、KSC、KCL的细胞抽提物,作用于链球菌溶血素-O(SLO)通透处理过的原代ASCs,分别应用流式细胞仪与Western-blot测定重编程后ASCs中广谱角蛋白(Pan cytokeratin,P-CK)与ASCs的BRG1表达变化。结果 KSC与KC、KCL来源的细胞抽提物重编程ASCs的CK及BRG1表达率,均有明显统计学差异(P<0.01)。结论脂肪干细胞在表皮细胞抽提物的诱导作用下能表达表皮细胞表型,且对表皮细胞优化处理后的KSC有更加显着的重编程作用。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2013年03期）
范宗兴[4]（2013）在《非洲爪蟾卵母细胞抽提物诱导和牛体细胞重编程及其对核移植胚胎生产效率影响》一文中研究指出体细胞核移植已有近20年的发展历史，但其总效率仍然很低。目前认为是高度分化的体细胞在卵母细胞质中重编程不完全，表观遗传修饰异常所致。本研究采用非洲爪蟾卵母细胞抽提物诱导和牛胎儿成纤维细胞重编程，使其恢复到一个较低的分化状态；并以发生重编程的细胞为核供体进行体细胞核移植，研究其对总效率的影响。1.爪蟾卵母细胞抽提物的提取通过超数排卵获得爪蟾卵母细胞，10000rpm离心获得M期爪蟾卵母细胞抽提物，蛋白含量分析显示，叁次提取的抽提物蛋白浓度均为25-35μg/μL。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示，叁次提取抽提物所包含蛋白种类一致，成功建立爪蟾卵母细胞抽提物提取体系。2.抽提物诱导供体细胞的重编程本研究采集40日龄和牛胎儿的皮肤组织，采用组织块贴壁法建立和牛胎儿成纤维细胞系。通过绘制细胞生长曲线和分析染色体核型，结果显示该细胞系在3-6d细胞处于对数生长期，染色体倍型正常（2n=60）说明细胞系具有良好的生长状态。应用细胞膜透化剂digitonin对获得的和牛胎儿成纤维细胞进行通透处理，筛选出透化剂最适浓度为7μg/mL，PI染色显示透化效率为55%。然后将非洲爪蟾卵母细胞抽提物与经过通透处理的和牛胎儿成纤维细胞共孵育1h，孵育完毕后用含Ca2+培养基封闭细胞并继续培养，24h后免疫荧光染色发现，与未处理细胞相比，其组蛋白H3K9乙酰化程度降低；培养6-7d后细胞聚集形成“克隆簇”，且碱性磷酸酶染色呈阳性，免疫荧光染色和western blot分析均检测到“克隆簇”细胞表达Oct4蛋白；同时检测到多能性标志基因Oct4和Nanog基因在其中的表达，但Sox2基因未见表达；qPCR结果显示，抽提物处理后分别培养4、5、6d的细胞中，Oct4、Nanog基因表达量依次呈上升趋势。3.体细胞克隆胚胎的制备采用点击去核法与无透明带融合法相结合制备克隆胚胎。以常规和牛胎儿成纤维细胞为核供体，比较离子霉素+6-DMAP和A23187+6-DMAP两种激活方法对克隆胚胎体外发育率的影响，结果说明，两者在分裂率和囊胚率均无显着差异（92.16%1.76vs92.28%2.14；23.21%1.63vs24.18%4.18）。分别以抽提物处理和非处理细胞作为核供体，比较两种细胞对核移植效率的影响，结果两种细胞在融合率（92.83%1.11vs96.04%1.52）、卵裂率（89.64%7.49vs89.783.65）和囊胚率（24.06%6.91vs23.12%6.80）均无显着差异。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2013-06-01）
范宗兴,朱化彬,杜卫华[5]（2013）在《细胞抽提物诱导的体细胞重编程》一文中研究指出体细胞重编程是指在特定条件下将已分化的体细胞去分化逆转回原始多能状态或转分化为其他类型细胞。目前诱导体细胞重编程的方法主要有:体细胞核移植、细胞融合、特定转录因子转染、细胞抽提物诱导等。近年来抽提物诱导体细胞重编程越来越受到研究者的关注。利用此法,通过重编程不仅可以获得需要类型的细胞,而且方便识别与重编程有关的细胞因子,探求重编程的机制。文章简略概述诱导体细胞重编程的方法,并重点阐述细胞抽提物诱导体细胞重编程的研究进展。(本文来源于《遗传》期刊2013年03期）
郭新娟,权春善,赵朋超,王丽娜,范圣第[6]（2013）在《大肠杆菌细胞抽提物制备方案的简化与优化》一文中研究指出无细胞蛋白表达系统是一种将目的蛋白在体外进行表达的新技术和新方法,已广泛应用到蛋白质组学、蛋白质结构和功能等领域的研究中。在无细胞蛋白表达系统中,细胞抽提物的制备是关键因素之一。通过对大肠杆菌细胞抽提物制备过程中离心速度、预孵化和透析等参数的考察,利用绿色荧光蛋白作为报告蛋白,可以得到一个细胞抽提物制备的简化方案。采用相对低的转速(12 000×g,10 min),简易空孵化即可制备出活性高的细胞抽提物,用于无细胞体系蛋白表达,其表达的绿色荧光蛋白产量为209μg/mL。与传统的大肠杆菌细胞抽提物S30相比较,新方案将使时间与成本节省62%,产量是传统方法的2.6倍,使无细胞蛋白表达技术的操作快速、高通量的优势更加明显。(本文来源于《生物工程学报》期刊2013年04期）
范宗兴,余大为,郝海生,赵学明,王栋[7]（2012）在《爪蟾卵母细胞抽提物诱导体细胞重编程研究》一文中研究指出引言体细胞核移植的成功证实了高度分化的体细胞可以在卵母细胞质中发生重编程,恢复全能性并发育成新个体。但是迄今为止体细胞核移植的总体效率还很低,且克隆动物存在着大量的发育异常。目前主要认为是由于供体细胞在卵母细胞质中重编程不完全,表观遗传修饰异常所致。本实验应用爪蟾卵母细胞抽提物处理体细胞,使其发生重编程,恢复部分全能性。应用此细胞作为核供体,以期在后续的克隆实验中帮助重构胚发育,提高克隆效率。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集》期刊2012-08-01）
唐新杰,谢峰,宋楠,张群[8]（2011）在《人表皮细胞抽提物重编程脂肪干细胞的实验研究》一文中研究指出目的观察人表皮细胞抽提物可否重编程人脂肪干细胞,使其向表皮细胞转化。方法超声乳化人表皮细胞,离心后获得抽提液冻存备用。培养2-3代脂肪干细胞,SLO处理后加入表皮细胞抽提液。7天时观察脂肪干细胞形态学、角蛋白K1/10及K19基因的变化及细胞膜K1/10及K19蛋白表达的变化。结果 SLO处理脂肪干细胞后,可使脂肪干细胞的通透率明显增加,达70%左右。加入表皮细胞抽提液后的脂肪干细胞变为表皮细胞特有的铺路石样形态,并表达表皮细胞特有的K1/10及K19基因及膜蛋白。结论表皮细胞抽提液可以重编程脂肪干细胞使其向表皮细胞转化。(本文来源于《中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集》期刊2011-08-17）
唐新杰,谢峰,宋楠,张群[9]（2011）在《人表皮细胞抽提物重编程脂肪干细胞的实验研究》一文中研究指出目的观察人表皮细胞抽提物重编程人脂肪干细胞(hADSCs),使其向表皮细胞转化。方法超声乳化人表皮细胞,离心后获得抽提液冻存备用。培养2～3代hADSCs,链球菌溶血素O(SLO)处理后加入表皮细胞抽提液。7 d时观察hADSCs形态学、角蛋白K1/10及K19基因的变化及细胞膜K1/10及K19蛋白表达的变化。结果 SLO处理hADSCs后,可使hADSCs的通透率明显增加,达70%左右。加入表皮细胞抽提液后的hADSCs变为表皮细胞特有的铺路石样形态,并表达表皮细胞特有的K1/10及K19基因及膜蛋白。结论表皮细胞抽提液可以重编程hADSCs,使其向表皮细胞转化。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2011年03期）
唐新杰,谢峰,张群[10]（2011）在《细胞抽提物重编程作用的研究进展》一文中研究指出细胞抽提物重编程是近年来发展起来的技术,是将供体细胞抽提物导入受体细胞中,使受体细胞向供体细胞的形态、基因、功能等方面发生改变。目前,此方法已成功应用于体细胞与体细胞之间、体细胞与干细胞之间,成为一种有效的、无伦理学争议的重编程方法。本文就细胞抽提物重编程的研究现状、相关机理及存在的问题进行综述。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2011年01期）
全细胞抽提物论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
应用非洲爪蟾卵母细胞抽提物处理和牛胎儿成纤维细胞(Japanese Black cattle fetal fibroblasts,JBCFF),观察处理前后细胞的形态学变化,同时用免疫荧光染色法检测组蛋白的乙酰化状态和OCT4蛋白的表达,并对其多能性标志基因的mRNA表达水平进行定量分析。结果表明,与未处理细胞相比,经抽提物处理和牛胎儿成纤维细胞组蛋白H3K9乙酰化程度与未处理组无显着差异;培养5~6d后细胞聚集形成"克隆簇"中碱性磷酸酶和Oct4蛋白染色阳性;同时也检测到Oct4和Nanog基因在其中的表达,而Sox2基因未见表达;且Oct4、Nanog基因表达量随处理后细胞培养时间的延长(4、5、6d)而呈依次上升趋势。可见,爪蟾卵母细胞抽提物能诱导和牛胎儿成纤维细胞发生部分重编程,恢复其发育全能性,这对牛诱导性干细胞制备方法的探索和体细胞克隆及转基因克隆牛效率的提高具有一定的借鉴意义。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
全细胞抽提物论文参考文献
[1].杨艳清,江昌艳,张洁,许其军,王海燕.人乳腺上皮细胞抽提物重编程人脂肪来源干细胞的实验研究[J].中国美容整形外科杂志.2017
[2].杜卫华,范宗兴,王皓宇,郝海生,刘岩.爪蟾卵母细胞抽提物可诱导牛胎儿成纤维细胞发生部分重编程[J].畜牧兽医学报.2015
[3].孙楠,张群.表皮干细胞抽提物重编程脂肪干细胞表达表皮细胞表型的实验研究[J].组织工程与重建外科杂志.2013
[4].范宗兴.非洲爪蟾卵母细胞抽提物诱导和牛体细胞重编程及其对核移植胚胎生产效率影响[D].中国农业科学院.2013
[5].范宗兴,朱化彬,杜卫华.细胞抽提物诱导的体细胞重编程[J].遗传.2013
[6].郭新娟,权春善,赵朋超,王丽娜,范圣第.大肠杆菌细胞抽提物制备方案的简化与优化[J].生物工程学报.2013
[7].范宗兴,余大为,郝海生,赵学明,王栋.爪蟾卵母细胞抽提物诱导体细胞重编程研究[C].中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集.2012
[8].唐新杰,谢峰,宋楠,张群.人表皮细胞抽提物重编程脂肪干细胞的实验研究[C].中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集.2011
[9].唐新杰,谢峰,宋楠,张群.人表皮细胞抽提物重编程脂肪干细胞的实验研究[J].组织工程与重建外科杂志.2011
[10].唐新杰,谢峰,张群.细胞抽提物重编程作用的研究进展[J].组织工程与重建外科杂志.2011